探究右美托咪定對(duì)內(nèi)毒素血癥大鼠海馬神經(jīng)元凋亡的影響

張艷琴 汪世高

所謂內(nèi)毒素血癥是由大部分的內(nèi)毒素侵入內(nèi)環(huán)境，致使炎癥細(xì)胞的生長(zhǎng)，從而出現(xiàn)全身炎癥反應(yīng)綜合征，嚴(yán)重時(shí)會(huì)使器官功能衰竭[1]。大腦極易受到內(nèi)毒素血癥的影響，而腦部神經(jīng)元凋亡與認(rèn)知功能息息相關(guān)。右美托咪定是一種選擇性α2腎上腺素能受體激動(dòng)劑，臨床實(shí)驗(yàn)顯示該藥物對(duì)神經(jīng)元凋亡有良好的改善效果[2]。當(dāng)前主要探究右美托咪定對(duì)內(nèi)毒素血癥大鼠海馬神經(jīng)元凋亡的影響，報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 基本資料

2017年5—12月，選取30只6周齡體質(zhì)量為200～250 g的SD雄性大鼠進(jìn)行清潔，將其隨機(jī)分成三組，A組、B組、C組。每組各10只。

1.2 檢測(cè)方法

將B組與C組大鼠采用LPS 5 mg/kg行尾靜脈勻速滴注，1 min后注射完畢；A組大鼠則采用2 ml生理鹽水行尾靜脈滴注[3]。C組大鼠在注射LPS前，30 min應(yīng)使用50 μg/kg右美托咪定行腹腔注射；A組與B組大鼠采用2 ml生理鹽水行腹腔注射[4]。同時(shí)，采用50 ml/kg等張生理鹽水進(jìn)行皮下注射，確保血流動(dòng)力學(xué)的平穩(wěn)。

制備內(nèi)毒素血癥模型前6天需實(shí)施水迷宮實(shí)驗(yàn)?？蛇x擇一個(gè)固定位置將大鼠放置水中并面向池壁，大鼠在水中找到平臺(tái)的時(shí)間可記錄為逃避潛伏期；例如大鼠在兩分鐘內(nèi)未能找到平臺(tái)則記錄逃避潛伏期是2 min。計(jì)算大鼠的游泳速度，需進(jìn)行4次測(cè)試，測(cè)試完畢取平均值。制備內(nèi)毒素血癥模型12 h后需再次進(jìn)行水迷宮實(shí)驗(yàn)。在水迷宮實(shí)驗(yàn)完畢后將大鼠殺死，取出海馬組織并將其固定24～48 h，進(jìn)行常規(guī)脫水，打上石蠟準(zhǔn)備切片。對(duì)大鼠神經(jīng)元的凋亡情況可采用TUNEL法進(jìn)行檢測(cè)[5]。采用免疫化療法檢測(cè)海馬葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78以及CAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白同源蛋白的水平[6]。

1.3 評(píng)價(jià)指標(biāo)

計(jì)算神經(jīng)元的凋指數(shù)并檢測(cè)海馬葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78、CAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白同源蛋白的水平。神經(jīng)元凋亡指數(shù)=（凋亡神經(jīng)元數(shù)/總神經(jīng)元數(shù)）×100%，計(jì)算其平均數(shù)[7]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 17.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理，計(jì)量資料以（均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差）表示，兩個(gè)樣本均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)，多于兩組樣本均數(shù)的比較，采用方差分析（ANOVA），以P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組大鼠水迷宮實(shí)驗(yàn)相關(guān)指標(biāo)對(duì)比

三組大鼠在游泳速度對(duì)比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；B組與C組大鼠的游泳距離與逃避潛伏期時(shí)間較長(zhǎng)于A組大鼠，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。具體結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 三組大鼠水迷宮實(shí)驗(yàn)相關(guān)指標(biāo)對(duì)比（±s）

表1 三組大鼠水迷宮實(shí)驗(yàn)相關(guān)指標(biāo)對(duì)比（±s）

注：與C組相比，＊P＜0.05

A 組 21±9＊ 401±69＊ 17.1±3.0 B 組 56±16＊ 906±131＊ 18.3±2.9 C組 36±14 540±120 17.6±2.8 F值 6.02 10.7 -P值 ＜0.05 ＜0.05 -

2.2 三組大鼠海馬葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78與CAAT指標(biāo)對(duì)比

A組的海馬葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78指標(biāo)為（7.9±1.8）%，CAAT指標(biāo)為（8.0±1.4）%；B組和C組分別為（16.1±2.9）%、（14.6±2.3）%；CAAT指標(biāo)分別為（13.2±2.7）%、（11.1±2.0）%。三組數(shù)據(jù)對(duì)比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

3 討論

上述研究中，主要采用TUNEL法對(duì)神經(jīng)元凋亡情況進(jìn)行檢測(cè)，通過(guò)實(shí)驗(yàn)對(duì)比，B組與C組大鼠的各項(xiàng)指標(biāo)均較優(yōu)于A組大鼠，其數(shù)據(jù)對(duì)比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。且從水迷宮實(shí)驗(yàn)中可以看出，B組和C組大鼠的逃避潛伏期與游泳距離時(shí)間較長(zhǎng)于A組大鼠，可看出內(nèi)毒素血癥模型制備成功。B組與C組注射的右美托咪定可有效降低海馬神經(jīng)元的凋亡，使內(nèi)毒素血癥的認(rèn)知功能障礙得以減輕[8]。

綜上所述，對(duì)內(nèi)毒素血癥大鼠海馬神經(jīng)元凋亡可采用右美托咪定實(shí)施注射，其臨床效果較為理想。

[1]高偉，張碩，梁佐迪，等. 右美托咪定對(duì)內(nèi)毒素血癥大鼠海馬神經(jīng)元凋亡的影響[J]. 中華麻醉學(xué)雜志，2016，36（3）：369-371.

[2]高偉. 右美托咪定預(yù)處理對(duì)內(nèi)毒素血癥大鼠海馬區(qū)Bcl--2、Bax表達(dá)及認(rèn)知功能的影響[D]. 沈陽(yáng)：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)，2016：48.

[3]劉佳. 右美托咪定對(duì)大鼠海馬神經(jīng)元缺氧復(fù)氧損傷的作用及其機(jī)制[D]. 青島：青島大學(xué)，2017：59.

[4]曹惠鵑，于冬梅，張鐵錚，等. 右美托咪定對(duì)內(nèi)毒素血癥大鼠急性腎損傷的影響[J]. 中華麻醉學(xué)雜志，2015，35（4）：496-498.

[5]陳欣，王偉，張建芳，等. 右美托咪定對(duì)氯胺酮麻醉致幼齡大鼠海馬神經(jīng)元凋亡的影響[J]. 中華麻醉學(xué)雜志，2015，35（7）：794-797.

[6]楊劍，劉婷婷，熊興龍，等. 右美托咪定對(duì)異丙酚誘導(dǎo)新生大鼠離體海馬神經(jīng)元凋亡的影響[J]. 實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志，2016，32（14）：2306-2309.

[7]吳新海，趙中保，莫麗賢. 右美托咪定混合氯胺酮對(duì)新生大鼠離體海馬細(xì)胞凋亡的影響[J]. 中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥，2016，11（14）：283-284.

[8]朱絲雨，郭明炎，曹銘輝. 右美托咪啶對(duì)大鼠缺氧缺糖海馬神經(jīng)元凋亡的影響[J]. 嶺南急診醫(yī)學(xué)雜志，2014，19（1）：48-50.