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    法醫(yī)常用STR基因座三帶型模式的分析

    2018-05-05 02:33:52劉振平童繼軍翟仙敦
    刑事技術(shù) 2018年2期
    關(guān)鍵詞:峰高合子基因座

    劉振平,楊 揚(yáng),童繼軍,翟仙敦

    (1.金華市公安局物證鑒定中心,浙江 金華 321000;2.河南科技大學(xué)法醫(yī)學(xué)院,河南 洛陽 471003)

    STR基因座三帶型模式(Triallelic patterns or threebanded pattern)[1-2]與off - ladder和引物結(jié)合位點(diǎn)突變造成的沉默(silent)等位基因是法醫(yī)STR分型中遇到的三大類問題[3],本研究通過對37 737例無關(guān)個(gè)體進(jìn)行STR檢驗(yàn),對其中的三帶型頻率、類型、易發(fā)基因座、峰高比例等作分析,以期有所發(fā)現(xiàn)。

    1 材料與方法

    1.1 樣本

    收集健康無關(guān)個(gè)體血斑樣本37 737例,均為本物證鑒定室受理的人員樣本。

    1.2 主要儀器和試劑

    9700型擴(kuò)增儀,ABI3130XL基因分析儀,GeneMapper?ID-X軟件,Globlefiler試劑盒(均為美國AB公司產(chǎn)品);STRtyper -21G試劑盒(寧波海爾施基因科技有限公司);PowerPlex21試劑盒(美國普洛麥格公司)。

    1.3 方法

    37 737例血斑經(jīng)STRtyper-21G試劑盒直接擴(kuò)增,查找出疑似三帶型樣本。驗(yàn)證樣本采用5% chelex-100法提取,PowerPlex21(與STRtyper -21G試劑盒基因座完全相同)和Globlefiler試劑盒擴(kuò)增。擴(kuò)增體系和熱循環(huán)反應(yīng)按試劑盒說明書進(jìn)行。擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)ABI3130XL基因分析儀電泳,GeneMapper?ID-X軟件分析結(jié)果。

    2 結(jié)果

    2.1 24例三帶型STR分型結(jié)果

    STRtyper -21G直擴(kuò)試劑盒檢驗(yàn)37 737例檢材,共檢出疑似三帶型26例,未出現(xiàn)單一樣本有2個(gè)或2個(gè)以上基因座3條帶的情況,經(jīng)PowerPlex21、Globlefiler試劑盒驗(yàn)證,21例確證為三帶型(表1),分型結(jié)果相同,且峰高比例也一致,2例排除,多出的一條帶為相鄰基因座的稀有等位基因,3例不能定論。

    表1 檢出三帶型的基因座Table 1 Loci harboring three-banded patterns

    2.2 檢出三帶型的特征

    本研究共檢測20個(gè)STR基因座,有10個(gè)基因座檢出21例三帶型(表1),檢出總頻率為0.0556%(21/37737),其中FGA、TPOX基因座檢出率最高,二者均為0.0106%(4/37737),其次為PentaE基因座,為 0.0079%(3/37737);D5S818、vWA、D6S1043分別為2例;CSF1PO、D13S317、D12S391和D1S1656分別為1例。CSF1PO、D13S317和D6S1043各1例不能定論。21例三帶型共有6種峰高比(圖1),分別為 3∶2∶1(42.86%,9/21),1∶1∶1(28.57%,6/21),2∶1∶1(14.29%,3/21),2∶1∶3(4.76%,1/21),3∶1∶2(4.46%,1/21),1∶2∶3(4.767%,1/21)。不能定論的 3 例樣本峰高比為 4∶1∶4(圖 1)。

    圖1 7種不同類型峰高比分型圖譜Fig.1 Seven-type STR profiles of three-banded pattern with various peak height ratios

    3 討論

    正常人是二倍體,常染色體單個(gè)STR基因座的等位基因分型表現(xiàn)為純合子或雜合子,純合子個(gè)體圖譜表現(xiàn)為只有1條帶或者1個(gè)峰,雜合子個(gè)體圖譜表現(xiàn)為2條帶或者2個(gè)峰。個(gè)別情況下,單個(gè)STR分型圖譜會出現(xiàn)3條帶或3個(gè)峰,且檢測結(jié)果可重復(fù),此種情況就是所謂的三帶型。對三帶型的判讀,應(yīng)首先排除污染、混合樣本、基因嵌合體或移植嵌合體等因素。若單個(gè)基因座出現(xiàn)三帶,還要注意排除熒光染料污染峰、pull-up峰、非特異性帶、相鄰基因座出現(xiàn)過大或過小的稀有等位基因恰好位于疑似“三帶型”基因座ladder范圍內(nèi)等因素[1-3]。而后,再通過不同試劑盒對照驗(yàn)證,最終才可確認(rèn)為三帶型等位基因[4]。

    本研究通過對37 737例健康無關(guān)個(gè)體進(jìn)行20個(gè)STR基因座的分型分析,獲得26例疑似三帶型樣本,用相同的試劑盒復(fù)核,排除了污染、混合樣本等原因,再用PowerPlex21、Globlefiler兩種不同的試劑盒進(jìn)行驗(yàn)證確認(rèn),所有分型結(jié)果均相同,且峰高比例一致(圖2、3),最終確認(rèn)檢出的21例個(gè)體確實(shí)存在三帶型等位基因,2例為跨基因座稀有等位基因(圖4)。共有10個(gè)基因座檢出三帶型,檢出總頻率為0.0556%,主要分布在FGA、TPOX、PentaE和D6S1043基因座,這與國內(nèi)研究的出現(xiàn)三帶型的基因座分布有出入[5-8],其原因可能為群體樣本來源及統(tǒng)計(jì)數(shù)量差異造成。試驗(yàn)采用的STRtyper -21G試劑盒包含有以蛋白質(zhì)編碼鏈命名的基因座6個(gè),非蛋白質(zhì)編碼鏈命名的基因座14個(gè)和1個(gè)性別基因座。21例三帶型分布于10個(gè)基因座,其中存在于蛋白質(zhì)編碼鏈命名的基因座14例、非蛋白質(zhì)編碼鏈命名的基因座7例,兩者比率為4.67/1,推測位于蛋白質(zhì)編碼鏈區(qū)的基因座更易發(fā)生三帶型,這可能涉及到蛋白質(zhì)功能,或者與某種疾病相關(guān)[2,9]。

    圖2 峰高比為4∶1∶4時(shí)不同試劑盒驗(yàn)證圖譜Fig.2 STR profiles validated with different kits for the allele showing peak ratio of 4∶1∶4

    圖3 峰高比為3∶2∶1時(shí)不同試劑盒驗(yàn)證圖譜Fig.3 STR profiles validated with different kits for the allele showing peak ratio of 3∶2∶1

    Clayton把三帶型分為2類[3]:最常見的是Type1型,表現(xiàn)為三個(gè)峰高不均衡,典型代表特征是其中兩個(gè)峰的峰高之和約等于另一個(gè)峰,其發(fā)生原因可能與雜合子基因座體細(xì)胞突變有關(guān);其次是Type2型,表現(xiàn)為三個(gè)峰的峰高接近,其發(fā)生原因可能與雜合子基因座染色體重排有關(guān)。按照這一原則,本次研究觀察到的 3∶2∶1、2∶1∶1、2∶1∶3、3∶1∶2 和 1∶2∶3 屬于 Type1 型(15/21),1∶1∶1 屬于 Type2 三帶型 (6/21)。相比其他學(xué)者報(bào)道的 2∶1∶1 或者 1∶1∶1[5-7,10-11]的三帶型峰高比值,本文檢測到的類型更多,推測與群體樣本更大有關(guān)。

    圖4 D21S11基因座稀有等位基因不同試劑盒驗(yàn)證圖譜Fig.4 STR profiles validated with different kits for the rare alleles in D21S11 locus

    值得注意的是,本次試驗(yàn)中有3例樣本均有一個(gè)基因座峰高比為4∶1∶4,其特點(diǎn)是兩個(gè)峰較高且相對均衡,低峰約為高峰的1/4,高于stutter峰范圍(如圖1、2中PowerPlex21檢測圖譜),為排除可能存在污染或者其它非特異峰情況,作者又對檢材重新提取,使用相同試劑盒、不同試劑盒、單基因座擴(kuò)增進(jìn)行了驗(yàn)證,發(fā)現(xiàn)該低峰始終存在,且同一樣本中其它基因座、同批次試劑擴(kuò)增的其它樣本stutter均在正常范圍,故推測出現(xiàn)這種現(xiàn)象可能與樣本來源有關(guān)??紤]到三帶型、stutter峰產(chǎn)生的機(jī)理比較復(fù)雜,確認(rèn)該低峰類型還需進(jìn)行測序或者其它方法予以證實(shí),在此,作者僅對觀察到的該現(xiàn)象予以報(bào)道,以供研究者參考。

    截止目前,查詢STR數(shù)據(jù)庫(http://www.cstl.nist.gov/biotech/strbase/),共收錄三帶型等位基因388例,本研究的21例三帶型中有8例三帶型未被收錄(見表1);D21S11共收錄等位基因45個(gè),本試驗(yàn)經(jīng)不同試劑盒驗(yàn)證確認(rèn)的稀有等位基因10、47均未被收錄(圖4),檢驗(yàn)結(jié)果同時(shí)提示,D21S11出現(xiàn)跨基因座稀有等位基因的可能性較大,數(shù)據(jù)分析時(shí),應(yīng)當(dāng)引起重視。當(dāng)數(shù)據(jù)整體較為平衡、雜合子純合子峰高比例也合理,D21S11基因座表現(xiàn)為一條帶,而相鄰基因座等位基因?yàn)槿龡l帶或者為兩條帶但峰高比例嚴(yán)重不均衡時(shí),應(yīng)考慮到其中的一條帶可能為D21S11基因座的跨基因座等位基因。

    綜上,典型峰高比為 2∶1∶1 或 1∶1∶1 的三帶型應(yīng)該不難判定。峰高差異大的三帶型,如3∶2∶1,判讀需慎重,因極易出現(xiàn)漏判或者錯(cuò)斷,數(shù)據(jù)分析時(shí)應(yīng)首先要保證儀器處于最佳狀態(tài),靈敏度高;其次,擴(kuò)增時(shí)加入的模板純度要好,濃度適當(dāng),嚴(yán)格按試劑盒說明設(shè)置循環(huán)參數(shù);再是擴(kuò)增產(chǎn)物電泳結(jié)果基線平,圖譜均衡,stutter峰處于正常范圍,無雙肩峰、pullup峰干擾以及不存在非特異性帶。在此基礎(chǔ)上,若單個(gè)基因座出現(xiàn)三帶,應(yīng)使用不同試劑盒驗(yàn)證,必要時(shí)進(jìn)行單基因座擴(kuò)增和測序確定。

    [1] CROUSE C A, ROGERS S, AMIOTT E, et al. Analysis and interpretation of short tandem repeat microvariants and threebanded allele patterns using multiple allele detection systems[J].Journal of Forensic Sciences, 1999,44(1):87-94.

    [2] LUKKA M, TASA G, ELLONEN P, et al. Triallelic patterns in STR loci used for paternity analysis: evidence for a duplication in chromosome 2 containing the TPOX STR locus[J]. Forensic Science International, 2006, 164(1):3-9.

    [3] CLAYTON T M, GUEST J L, URQUHART A J, et al. A genetic basis for anomalous band patterns encountered during DNA STR profiling[J]. Journal of Forensic Sciences,2004,49(6):1207-1214.

    [4] LANE A B. The nature of tri-allelic TPOX genotypes in African populations[J]. Forensic Science International Genetics, 2008,2(2):134-137.

    [5] 陳玲,劉超,邱平明,等. 常染色體STR基因座三帶型的觀察與分析[J]. 中國法醫(yī)學(xué)雜志,2014, 29(4):316-318.

    [6] 劉瑩,任賀. STR基因座三帶型等位基因的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析[J].法醫(yī)學(xué)雜志,2013, 29(6): 444-446.

    [7] 宋曉麗,趙奇,劉曉云,等. D16S539基因座中檢出三帶型等位基因及遺傳分析[J]. 暨南大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)與醫(yī)學(xué)版,2015, 36(2):143-145.

    [8] 韓莉莉,潘棱,沈曉麗,等. STR基因座中檢出三帶型等位基因三例及遺傳分析[J]. 海南醫(yī)學(xué),2011, 22(15):1-3.

    [9] VRANEKOVIC J, BOZOVIC I B, GRUBIC Z, et al. Down syndrome: parental origin, recombination, and maternal age[J].Genetic Testing and Molecular Biomarkers, 2012, 16(1):70-73.

    [10] 張玉紅,黃洪武. TPOX基因座三帶型的檢出及初步分析[J].南通大學(xué)學(xué)報(bào):醫(yī)學(xué)版,2013, 33(6):503-505.

    [11] 曾艷紅,孫宏鈺,伍新堯,等. STR基因座中檢出三帶型等位基因5例[J]. 中國法醫(yī)學(xué)雜志,2003, 18(2): 112-113.

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