不同濃度辣椒素對缺氧復(fù)氧后A549細(xì)胞凋亡的影響*

曾結(jié)婷 王儒蓉 李雪寒 徐弋 成燕

(1.四川大學(xué)華西醫(yī)院麻醉科，四川 成都610041；2.重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院麻醉科，重慶 400016)

辣椒素(capsaicin，cap)是辣椒植物屬的主要刺鼻成分，是紅辣椒的主要活性成分，可以對包括人類在內(nèi)的哺乳類動物產(chǎn)生刺激性，而且在口腔中產(chǎn)生灼燒感[1]。它是一種香草素受體激動劑，可以激活瞬時受體電位香草酸亞型1(transient receptor potential vanilloid 1,TRPV1)。辣椒素具有緩解疼痛[2]、抗氧化、抗炎和抗癌作用等特性[3]，而且辣椒素還在調(diào)節(jié)肥胖方面也起著重要作用[4]。近年研究發(fā)現(xiàn)辣椒素對內(nèi)臟器官的缺血再灌注損傷具有保護(hù)作用，包括心臟[5]、腎臟[6]、腦[7]等。我們以前的研究發(fā)現(xiàn)，辣椒素可以減輕大鼠的肺缺血再灌注損傷，其機(jī)制與增加肺內(nèi)神經(jīng)肽類物質(zhì)的釋放以及上調(diào)肺和腦干的TRPV1和神經(jīng)肽類物質(zhì)受體，從而緩解氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)有關(guān)[8]。肺缺血再灌注損傷可發(fā)生于心肺復(fù)蘇術(shù)、肺移植、體外循環(huán)、肺動脈栓塞、肺的袖式切除、創(chuàng)傷等情況[9-10]，其主要損傷機(jī)制并不完全清楚，主要包括氧化應(yīng)激，炎癥反應(yīng)，細(xì)胞凋亡，細(xì)胞內(nèi)鈣超載和神經(jīng)源性炎癥等途徑[11-12]。細(xì)胞凋亡是缺血再灌注損傷的機(jī)制之一；肺缺血再灌注損傷會引起肺泡上皮細(xì)胞、肺血管內(nèi)皮細(xì)胞以及支氣上皮細(xì)胞等發(fā)生凋亡。然而，目前仍然不清楚辣椒素如何影響肺缺血再灌注引起的肺內(nèi)細(xì)胞凋亡。

肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞被認(rèn)為是肺泡上皮的干細(xì)胞，肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞的增殖和分化不僅可以修復(fù)肺泡的正常結(jié)構(gòu)，更能有效地進(jìn)行功能上的恢復(fù)[13]。有文獻(xiàn)報道稱，辣椒素的使用可以降低大鼠海馬角質(zhì)層神經(jīng)元缺氧復(fù)氧后的細(xì)胞凋亡[14]；25～75μM辣椒素可以明顯減少谷氨酸誘導(dǎo)的皮質(zhì)神經(jīng)元凋亡，拮抗谷氨酸鹽對皮層神經(jīng)元細(xì)胞的損傷作用[15]。本實驗擬建立離體A549細(xì)胞缺氧復(fù)氧模型，模擬在體肺缺血缺氧過程，探討不同濃度辣椒素對A549細(xì)胞缺氧復(fù)氧后增殖活力和細(xì)胞凋亡的影響。

1 材料及方法

1.1 主要試劑及細(xì)胞 天然辣椒素及合成辣椒素標(biāo)準(zhǔn)品均購自美國sigma公司，CCK8試劑盒、Annexin-V-FITC/PI(熒光探針FITC標(biāo)記的膜聯(lián)蛋白-5/碘化丙啶)雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒均購自Keygen公司。A549細(xì)胞由四川大學(xué)生物治療國家重點實驗室惠贈，于37℃、5%CO2的普通培養(yǎng)箱中在含10% FBS的 DMEM培養(yǎng)基中培養(yǎng)，取對數(shù)生長期的細(xì)胞用于實驗。

1.2 辣椒素的配制 用DMSO(Sigma公司)分別溶解天然辣椒素粉末和合成辣椒素標(biāo)準(zhǔn)品粉末，配成溶液，置于-20℃冰箱保存。臨用時，以DMEM稀釋天然辣椒素和合成辣椒素標(biāo)準(zhǔn)品成各種所需濃度(0.25μM，2.5μM，25μM，250μM，2500μM)。

1.3 A549細(xì)胞的培養(yǎng)與鑒定 A549細(xì)胞在含10% FBS的DMEM培養(yǎng)基中培養(yǎng)。取長滿培養(yǎng)瓶瓶底、生長狀態(tài)良好的A549細(xì)胞，棄掉培養(yǎng)基，加入適量PBS洗滌3遍，加入適量胰酶至細(xì)胞變圓，加入含胎牛血清培養(yǎng)基終止胰酶消化，吹打成細(xì)胞懸液，收集于EP管中，后1500r/min離心10分鐘，棄掉上清液，用4℃預(yù)冷PBS洗滌細(xì)胞3次，離心，去上清；用0.5%戊二醛固定，置于4℃冰箱中靜置10min；再10000r/min離心15分鐘，棄掉上清液，用3%戊二醛固定后送透射電子顯微鏡觀察(四川大學(xué)電鏡室)。

1.4 實驗分組 將培養(yǎng)的A549細(xì)胞隨機(jī)分為7組：正常培養(yǎng)細(xì)胞組(control組)、缺氧36小時復(fù)氧24小時組(HR組)、在缺氧前用5個不同濃度：0.25μMcap，2.5μMcap，25μMcap，250μMcap，2500μMcap處理，分別為cap0.25+HR組、cap2.5+HR組、cap25+HR組、cap250+HR組、cap2500+HR組。

Control組是正常培養(yǎng)的細(xì)胞，未經(jīng)任何處理；HR 組是用含100U/mL青霉素-鏈霉素混合液的無糖Hank’s緩沖液，于37℃、1%O2、94%N2、5%CO2三氣培養(yǎng)箱中缺氧培養(yǎng)36小時后，然后放置于不含F(xiàn)BS的DMEM在37℃、5%CO2普通培養(yǎng)箱中復(fù)氧培養(yǎng)24小時；5個不同濃度辣椒素處理的cap+HR組在缺氧前加入0.25μM，2.5μM，25μM，250μM，2500μM辣椒素，其他處理與HR組相同。

各組細(xì)胞在培養(yǎng)后用倒置顯微鏡進(jìn)行細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察。HR組、cap0.25+HR組、cap2.5+HR組、cap25+HR組、cap250+HR組、cap2500+HR組用CCK-8試劑盒檢測細(xì)胞增殖活力。Control組、HR組、cap25+HR組和cap250+HR組用Annexin-V-FITC/PI雙染色法后用流式細(xì)胞儀技術(shù)檢測細(xì)胞凋亡情況。

1.5 CCK8試劑盒檢測細(xì)胞增殖活力 本實驗采用CCK-8試劑盒(Keygen)進(jìn)行定量測定評估A549缺氧復(fù)氧細(xì)胞增殖活力。以(1～5)×105/孔接種于96孔板中，將培養(yǎng)板放在37℃、5%CO2普通培養(yǎng)箱預(yù)培養(yǎng)24小時；在缺氧前加入0.25μM，2.5μM，25μM，250μM，2500μM辣椒素，其他處理與HR組相同；復(fù)氧結(jié)束后向每孔加入10μL 10%CCK8溶液，在37℃下孵育2小時；使用酶標(biāo)儀(EPOCH2，Bio Tek)測定450nm處的吸光度。每個六個平行實驗樣品用于評估細(xì)胞活力。

1.6 流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡 本實驗采用Annexin-V-FITC/PI雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒檢測細(xì)胞凋亡情況。將control組、HR組、cap25+HR組、cap250+HR組A549細(xì)胞按照Annexin-V-FITC/PI雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒說明書處理，收集上清液，用無EDTA-胰蛋白酶消化液消化收集貼壁細(xì)胞，加入上述上清液中，2000r/min離心3分鐘，棄掉上清液，PBS洗滌2次，1200r/min離心3分鐘，棄掉上清，加入300μL結(jié)合緩沖液，懸浮細(xì)胞，加入3μL Annexin-V-FITC混勻后，再加入3μL PI(Propidum Iodide，碘化丙啶)混勻，室溫避光反應(yīng)5分鐘，在1小時內(nèi)采用流式細(xì)胞儀(Navios)檢測細(xì)胞凋亡的百分率。

2 結(jié)果

2.1 A549細(xì)胞的鑒定 在透射電鏡下觀察，A549細(xì)胞表面有短小微絨毛，細(xì)胞核較大，核形不規(guī)則，核膜皺褶較多，核仁肥大，胞漿內(nèi)含有多個吞飲小泡，見圖1A。另外，在胞漿內(nèi)可見多個大小不一的圓形或卵圓形的年輪狀板層小體，其內(nèi)容物呈螺紋狀排列，見圖1B。這是肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞的特征性結(jié)構(gòu)，可以認(rèn)為A549細(xì)胞具有肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞特性。

圖1 電子顯微鏡下A549細(xì)胞形態(tài)

Figure1ThemorphologyofA549cellsunderelectronmicroscope

注：A.A549細(xì)胞表面有短小微絨毛，細(xì)胞核明顯，胞漿內(nèi)含多個吞飲小泡；B.胞漿內(nèi)多個內(nèi)呈螺紋狀排列的板層小體

2.2 辣椒素對缺氧復(fù)氧A549細(xì)胞形態(tài)學(xué)的影響 倒置顯微鏡下見control組細(xì)胞貼壁連接成片，平展呈多邊形，上清液干凈，見圖2A；HR 組細(xì)胞形態(tài)變圓，貼壁細(xì)胞數(shù)量減少，上清液中有較多的白色顆粒狀脫落細(xì)胞，見圖2B；cap25+HR組細(xì)胞貼壁成小片狀，細(xì)胞呈多邊形，貼壁細(xì)胞多于HR組，白色顆粒狀脫落細(xì)胞少于HR組，見圖2C；cap250+HR組細(xì)胞貼壁成小片狀，呈多邊形，貼壁細(xì)胞較HR組明顯增多，白色顆粒狀脫落細(xì)胞較HR組明顯減少，見圖2D。

圖2 倒置顯微鏡下各組的細(xì)胞形態(tài) (×40)

Figure2Cellmorphologyofeachgroupunderinvertedmicroscope

注：A.control組細(xì)胞貼壁成片，上清液干凈；B.HR組細(xì)胞呈近圓形，貼壁細(xì)胞較少，有較多白色顆粒狀脫落細(xì)胞；C、D.cap25+HR組及cap250+HR組細(xì)胞貼壁成小片狀，白色顆粒狀脫落細(xì)胞較少

2.3 辣椒素對A549細(xì)胞缺氧復(fù)氧后增殖活力的影響 缺氧前加入0.25μM，2.5μM，25μM，250μM，2500μM天然辣椒素或者合成辣椒素標(biāo)準(zhǔn)品后，缺氧36小時復(fù)氧24小時，用CCK8試劑盒檢測A549細(xì)胞增殖活力。使用天然辣椒素處理A549細(xì)胞后，與HR組(細(xì)胞活力為1)比較，使用不同濃度天然辣椒素的各組的細(xì)胞增殖活力結(jié)果見表1。低濃度(2.5μM，25μM，250μM)天然辣椒素可一定程度促進(jìn)缺氧復(fù)氧A549細(xì)胞增殖,但是高濃度(2500μM)天然辣椒素抑制細(xì)胞增殖。

使用合成辣椒素標(biāo)準(zhǔn)品處理A549細(xì)胞后，與HR組(細(xì)胞活力為1)比較，使用不同濃度合成辣椒素標(biāo)準(zhǔn)品的各組的細(xì)胞增殖活力結(jié)果如表1所示。合成辣椒素標(biāo)準(zhǔn)品對于A549細(xì)胞增殖活力的影響與天然辣椒素呈現(xiàn)相同的結(jié)果，低濃度(2.5μM，25μM，250μM)合成辣椒素標(biāo)準(zhǔn)品可一定程度促進(jìn)缺氧復(fù)氧A549細(xì)胞增殖，高濃度(2500μM)合成辣椒素標(biāo)準(zhǔn)品抑制細(xì)胞增殖。

在cap0.25+HR組、cap2.5+HR組、cap25+HR組、cap250+HR組、cap2500+HR組，天然辣椒素和合成辣椒素標(biāo)準(zhǔn)品對A549細(xì)胞增殖活力影響比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

2.4 辣椒素對A549缺氧復(fù)氧后凋亡率的影響 缺氧前加入25μM、250μM天然辣椒素，缺氧復(fù)氧后流式細(xì)胞儀檢測A549細(xì)胞凋亡示意圖見圖3，表2。與control組比較，HR組、cap25+HR組、cap250+HR組缺氧復(fù)氧后細(xì)胞凋亡率明顯升高(P<0.05)。與HR組比較，cap25+HR組和cap250+HR組細(xì)胞凋亡率明顯下降(P<0.05)，分別減少約7.8%(25μM)和13.53%(250μM)，即缺氧前使用25μM和250μM辣椒素處理A549細(xì)胞均可降低缺氧復(fù)氧引起的凋亡，且高濃度(250μM)保護(hù)作用更明顯。

3 討論

細(xì)胞凋亡又稱為細(xì)胞程序性死亡，在形態(tài)學(xué)上表現(xiàn)為核固縮、染色體濃集和 DNA片段化至寡核苷酸化片段，但是細(xì)胞膜及細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞器保持相對完整[16]。

Table1Theviabilityofhypoxia-reoxygenationA549cellstreatedwithdifferentconcentrationsofnaturalandsyntheticcapsaicin

組別組別細(xì)胞活力細(xì)胞活力HR組11cap025+HR組112±017124±017cap25+HR組167±007①146±009①cap25+HR組186±013①172±025①cap250+HR組226±035①212±018①cap2500+HR組001±001①?004±001①

注：與HR 組，①P<0.05

圖3 流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果示意圖Figure 3 Schematic diagram of results from flow cytometry

注：C1象限：Annexin-V-/PI+表示壞死細(xì)胞；C2象限. Annexin-V+/PI+表示中晚期凋亡細(xì)胞; C3象限：Annexin-V-/PI-表示存活細(xì)胞; C4象限. Annexin-V+/PI-表示早期凋亡細(xì)胞

表2 各組A549細(xì)胞的凋亡率Table 2 Cell apoptosis rate of each group

注：與control組比較，①P<0.05；與HR組比較，②P<0.05；與cap25+HR組比較，③P<0.05

肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞具有增殖功能，被認(rèn)為是肺泡上皮的干細(xì)胞，其增殖和分化不僅可以修復(fù)肺泡的正常結(jié)構(gòu)，更可以有效地進(jìn)行功能上的恢復(fù)[13]。另外，肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞還具有合成和分泌肺泡表面活性物質(zhì)及其相關(guān)蛋白以及免疫調(diào)節(jié)的作用[13]。因此，肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞的正常結(jié)構(gòu)與功能對維持肺泡結(jié)構(gòu)和功能及局部環(huán)境穩(wěn)態(tài)具有重要作用。肺組織在缺血再灌注過程中會引起肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞發(fā)生凋亡，從而引起肺損傷[17]。A549細(xì)胞是來源于人肺腺癌的肺泡基底上皮細(xì)胞株，它可以在體外無限分裂而且具有肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞特性[18]。本實驗電鏡結(jié)果證實，A549細(xì)胞核明顯，胞漿內(nèi)含有吞飲小泡，有大小不一的年輪狀板層小體，其內(nèi)容物近似同心圓狀排列，此為肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞的特征性結(jié)構(gòu)。因此，本實驗建立A549細(xì)胞缺氧復(fù)氧模型用于模擬體內(nèi)肺缺血缺氧過程，觀察辣椒素對A549細(xì)胞缺氧復(fù)氧后細(xì)胞增殖及凋亡的作用，探討辣椒素對肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞凋亡的影響。

缺氧復(fù)氧可以使得腫瘤細(xì)胞[19]、心肌細(xì)胞[20]、神經(jīng)細(xì)胞[21]、上皮細(xì)胞等不同組織細(xì)胞發(fā)生凋亡，而且肺組織在缺血再灌注過程中會引起肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞發(fā)生凋亡[17]。為建立A549細(xì)胞缺氧復(fù)氧模型，本實驗參考Wang 等[22]的方法，當(dāng)A549細(xì)胞生長達(dá)70%～80%培養(yǎng)板底時，更換培養(yǎng)液為含100U/mL青霉素-鏈霉素混合液的無糖Hank’s緩沖液，置于37℃、1%O2、94%N2、5%CO2三氣培養(yǎng)箱中缺氧培養(yǎng)不同時間(3～36h)；缺氧培養(yǎng)結(jié)束后，更換培養(yǎng)液為不含F(xiàn)BS的DMEM，置于37℃、5%CO2普通培養(yǎng)箱中復(fù)氧培養(yǎng)24h。預(yù)實驗結(jié)果示，經(jīng)過缺氧36h復(fù)氧24h處理后，A549細(xì)胞發(fā)生凋亡的細(xì)胞為50%左右。與正常對照組比較，倒置顯微鏡下見貼壁細(xì)胞數(shù)量明顯減少，上清液中見呈白色顆粒狀脫落的細(xì)胞，貼壁細(xì)胞形態(tài)發(fā)生改變，細(xì)胞變圓或長出分支，有些細(xì)胞呈顆粒狀，細(xì)胞膜完整，但胞核脆裂。其他缺氧時間A549細(xì)胞的凋亡率與control組差異不如缺氧36h明顯。因此，本實驗選擇缺氧36h復(fù)氧24h建立A549細(xì)胞缺氧復(fù)氧模型。

研究顯示，不同濃度辣椒素對細(xì)胞凋亡的影響是不同的[23-24]。因此，本實驗參考Lin等[24]的方法選擇多個濃度的辣椒素(0.25μM、2.5μM、25μM、250μM、2500μM)進(jìn)行細(xì)胞增殖活力的實驗，結(jié)果顯示低濃度(0.25μM)對缺氧復(fù)氧A549細(xì)胞活力無明顯影響，2.5μM、25μM、250μM辣椒素可增加缺氧復(fù)氧A549細(xì)胞的增殖活力，250μM最為顯著，高濃度(2500μM)不僅不能增加A549細(xì)胞活力反而起抑制作用。為了闡明辣椒素增加缺氧復(fù)氧A549細(xì)胞的增殖活力是否與減少缺氧復(fù)氧誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡相關(guān)，用Annexin-V-FITC染色并評估細(xì)胞凋亡率。基于CCK8檢測細(xì)胞增殖活力的結(jié)果，我們選擇用25μM和250μM辣椒素處理以檢測缺氧復(fù)氧A549細(xì)胞的凋亡。

本實驗所用的兩種辣椒素分別是從紅辣椒提取純化辣椒素純度達(dá)95%以上的天然辣椒素和用化學(xué)合成的方法得到的純度達(dá)99.99%的合成辣椒素標(biāo)準(zhǔn)品。從紅辣椒提取的辣椒素類物質(zhì)，除了天然辣椒素，還有二氫辣椒素、降二氫辣椒素、高二氫辣椒素和高辣椒素等系列同類物[25]。本實驗選擇合成辣椒素標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行細(xì)胞增殖活力檢測的平行實驗，比較天然辣椒素與合成辣椒素標(biāo)準(zhǔn)品對缺氧復(fù)氧A549細(xì)胞的作用，從而排除二氫辣椒素等辣椒素類物質(zhì)對缺氧復(fù)氧A549細(xì)胞的作用。本實驗結(jié)果顯示，在0.25～2500μM各個濃度組別中天然辣椒素和合成辣椒素標(biāo)準(zhǔn)品對A549細(xì)胞增殖活力的影響無差異。故后續(xù)檢測辣椒素對缺氧復(fù)氧A549細(xì)胞凋亡的影響選用了天然辣椒素。

有研究表明，25～75μM辣椒素可濃度依賴性地拮抗谷氨酸鹽對皮層神經(jīng)元細(xì)胞的損傷作用，增加細(xì)胞活力且降低細(xì)胞凋亡率，60μM辣椒素處理后的皮層神經(jīng)元細(xì)胞活力最高[15]；辣椒素可以濃度依賴性地顯著減少大鼠海馬角質(zhì)層神經(jīng)元缺氧復(fù)氧后的細(xì)胞凋亡，可能與細(xì)胞內(nèi)ROS產(chǎn)生減少及抑制caspase-3活化有關(guān)[14]；還有研究表明，在體外小鼠紅藻氨酸誘導(dǎo)的癲癇模型實驗中發(fā)現(xiàn)，辣椒素可明顯減少細(xì)胞凋亡[26]。我們的結(jié)果與上述研究一致。不同的是，大量關(guān)于辣椒素對腫瘤細(xì)胞作用的研究中表明，辣椒素在體外和體內(nèi)可抑制癌癥生長和進(jìn)展，并誘導(dǎo)各種類型的癌細(xì)胞凋亡，從而產(chǎn)生抑制腫瘤的作用；如：辣椒素通過誘導(dǎo)細(xì)胞周期G0/G1停滯和細(xì)胞凋亡對人結(jié)腸癌細(xì)胞具有抗增殖作用，而且辣椒素抗腫瘤效能與p53的穩(wěn)定和活化有關(guān)[27]；辣椒素可以抑制AGS人胃癌細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡和自噬[28]；辣椒素可以介導(dǎo)人膀胱癌細(xì)胞凋亡，而且通過CD91激活樹突細(xì)胞從而獲得有效和持久的抗癌T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫作用[29]；辣椒素對SUM149PT乳腺癌細(xì)胞有抗腫瘤活性[30]。這種辣椒素對細(xì)胞凋亡作用的不同可能與細(xì)胞類型、細(xì)胞損傷程度、辣椒素濃度等有關(guān)。

TRPV1又稱辣椒素受體，在1997年由Caterina等人第一次從大鼠背根神經(jīng)節(jié)和三叉細(xì)胞中克隆出來，是一種配體門控的陽離子通道，辣椒素是TRPV1的天然配體[31]；辣椒平是辣椒素的競爭性拮抗劑[32]。另外，TRPV1受體在器官缺血再灌注損傷中起著重要作用[33]。本課題組在以前的研究發(fā)現(xiàn)，缺血前給予辣椒素顯著改善了大鼠心臟缺血再灌注后大鼠心臟功能和減少了心肌梗死面積，其機(jī)制可能與激活辣椒素受體, 引起P物質(zhì)釋放，進(jìn)一步激活NK1型P物質(zhì)受體有關(guān)；在辣椒素前給予辣椒平消除了辣椒素的心臟保護(hù)作用[5]。缺血前給予辣椒素降低了大鼠的肺缺血再灌注誘導(dǎo)的肺部炎癥和氧化應(yīng)激，減弱了肺功能障礙，其機(jī)制可能是通過激活TRPV1受體和釋放降鈣素基因相關(guān)肽(calcitonin gene-related peptide，CGRP)；而在辣椒平預(yù)處理組其保護(hù)作用消失[8]。這些研究表明，辣椒素是通過作用于TRPV1而減輕肺缺血再灌注損傷。既往研究表明，TRPV1不僅表達(dá)在感覺傳入神經(jīng)元以及神經(jīng)末梢，而且在血管內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等非神經(jīng)細(xì)胞上也有表達(dá)[34-35]，TRPV1在呼吸道也表達(dá)，包括鼻粘膜細(xì)胞、C纖維神經(jīng)元、氣道平滑肌細(xì)胞、肺泡上皮細(xì)胞和支氣管上皮細(xì)胞[36]。因此，我們推測辣椒素可能是通過作用于細(xì)胞上的TRPV1受體而發(fā)揮抗凋亡作用，其具體機(jī)制有待進(jìn)一步的研究。

4 結(jié)論

缺氧前給予一定濃度的辣椒素可促進(jìn)缺氧復(fù)氧A549細(xì)胞增殖，并抑制其凋亡，對缺氧復(fù)氧細(xì)胞有保護(hù)作用，但是高濃度(2500μM)辣椒素可抑制缺氧復(fù)氧A549細(xì)胞增殖活力，對缺氧復(fù)氧細(xì)胞有損傷作用。

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