云南省部分地區(qū)豬群豬瘟血清抗體監(jiān)測(cè)及分析

王世玉，高 洪，嚴(yán)玉霖，趙 汝，劉 嫦，苗淑淑，劉超英

(云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院，云南昆明 650201)

豬瘟(Classical swine fever,CSF)是由豬瘟病毒(Classical swine fever virus，CSFV)引起的危害豬業(yè)發(fā)展的主要傳染病之一，被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)列為必須報(bào)告的傳染病[1]。豬瘟病毒(CSFV)屬于黃病毒科中的瘟病毒屬[2]。在全球范圍內(nèi)，多年來最流行的是CSFV基因型2。病毒顆粒的4種結(jié)構(gòu)蛋白中最有研究?jī)r(jià)值的是E0和E2。豬瘟病毒蛋白的結(jié)構(gòu)組成和功能決定了豬瘟的散發(fā)性，E2糖蛋白和3′非翻譯區(qū)協(xié)同調(diào)節(jié)病毒的感染。E2糖蛋白介導(dǎo)病毒的擴(kuò)散和釋放，3′非翻譯區(qū)調(diào)控病毒RNA的復(fù)制[3]。此外，結(jié)構(gòu)蛋白的糖基化和核糖核酸酶的活性及二聚化作用也決定CSFV的毒力。CSFV感染細(xì)胞后可重建細(xì)胞代謝程序，有助于自身的復(fù)制[4]。CSFV RNA在PK-15細(xì)胞細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)中隨時(shí)間呈不同的動(dòng)態(tài)分布[5]。

豬瘟典型的病理學(xué)變化特征是脾臟邊緣梗死和腎皮質(zhì)出血點(diǎn)，淋巴結(jié)切面呈大理石樣出血。感染高毒性CSFV毒株的豬病死率為100%[6]。易感宿主是豬科家族的不同成員，特別是家豬(Susscrofadomesticus)和歐洲野豬(Susscrofascrofa)[7-8]，疣豬(Phacochoerusafricanus)和假面野豬(Potamochoeruslarvatus)也易感[9]。豬瘟病毒既可水平傳播，也可垂直傳播。豬瘟兔化弱毒疫苗等的使用，已在世界上幾個(gè)國家和地區(qū)根除了CSF[10]。此外，該疫苗可作誘餌劑對(duì)野豬進(jìn)行免疫接種[11]。

據(jù)臨床癥狀、流行病學(xué)和剖檢可進(jìn)行診斷分析，應(yīng)用RT-PCR測(cè)定豬瘟病毒，用雙抗原、具有篩選和確定性的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)作為診斷測(cè)試[12]。目前常采用ELISA對(duì)生產(chǎn)中豬群豬瘟免疫情況進(jìn)行跟蹤監(jiān)測(cè)[13]。

我國將豬瘟列入一類動(dòng)物疫病病種，并提出凈化豬瘟的考核標(biāo)準(zhǔn)[14]。自強(qiáng)制免疫以來，豬瘟疫情控制取得了明顯的成效。2017年3月15日，豬瘟退出了國家強(qiáng)制免疫計(jì)劃[15]。盡管我國豬瘟防控取得了歷史性的進(jìn)步，但因豬瘟流行的復(fù)雜性特點(diǎn)，加之多樣性的養(yǎng)殖模式及野生帶毒野豬的威脅，CSF的凈化根除依然面對(duì)著諸多巨大的挑戰(zhàn)，所以對(duì)豬瘟的監(jiān)控仍不能松懈。此外，對(duì)云南省而言，由于獨(dú)特的地域特征以及外貿(mào)發(fā)展，給豬瘟等疫病的檢疫、診斷和控制帶來了極大的困難。因此，在我國豬瘟退出強(qiáng)制免疫后，特別應(yīng)加強(qiáng)對(duì)邊境地區(qū)家豬及野豬的監(jiān)測(cè)。為明確目前云南部分地區(qū)豬群豬瘟免疫狀況，隨機(jī)采血351份，進(jìn)行抗體檢測(cè)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 血清 在云南省紅河州、楚雄州5個(gè)地方的規(guī)模化豬場(chǎng)和散養(yǎng)戶的豬群中前腔靜脈采血351份，分離血清，冷藏備用。

1.1.2 豬瘟病毒阻斷ELISA抗體檢測(cè)試劑盒 購于武漢科前動(dòng)物生物制品有限責(zé)任公司。

1.2 方法

1.2.1 檢測(cè) 采用豬瘟病毒阻斷ELISA抗體檢測(cè)試劑盒和酶標(biāo)儀，按試劑盒中說明書步驟對(duì)血清抗體進(jìn)行檢測(cè)。

1.2.2 結(jié)果判定 樣品的阻斷率≥于40%，該樣品判為CSFV抗體陽性，反之則判為陰性。

2 結(jié)果

2.1 兩州各地區(qū)豬瘟病毒抗體檢測(cè)結(jié)果

由表1可見，元陽縣、建水縣豬瘟病毒抗體陽性率分別為92.50%和97.73%，紅河州總的陽性率為95.25%。楚雄市、南華縣、祿豐縣的抗體陽性率分別為100%、98.91%、100%，楚雄州總的血清抗體陽性率為99.63%，2州總的為98.58%。

表1 豬瘟病毒抗體陽性率

2.2 紅河州豬瘟病毒抗體檢測(cè)結(jié)果

2.2.1 元陽縣豬群豬瘟病毒抗體檢測(cè)結(jié)果 由表2可知，育肥豬和斷奶仔豬豬瘟病毒抗體阻斷率的離散度較大，育肥豬中最小的豬瘟病毒抗體阻斷率為-3%，遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于平均阻斷率70.61%。育肥豬的豬瘟病毒抗體阻斷率主要集中在40%～70.61%之間。在斷奶仔豬中最小豬瘟病毒抗體阻斷率為35%，遠(yuǎn)低于平均阻斷率60.17%。未斷奶仔豬和母豬豬瘟病毒抗體阻斷率全都大于40%，均為陽性，且豬瘟病毒抗體阻斷率的離散度小，阻斷率均集中在均值附近，抗體水平的整齊度高。

表2 元陽豬瘟病毒抗體阻斷率平均值與離散度

2.2.2 建水縣豬群豬瘟病毒抗體檢測(cè)結(jié)果 種公豬豬瘟病毒抗體阻斷率的離散度大于種母豬的，種公豬中最小的豬瘟病毒抗體阻斷率為38.02%，遠(yuǎn)低于平均阻斷率63.50%。種公豬的豬瘟病毒抗體阻斷率主要集中在40%～63.50%之間。種母豬的豬瘟病毒抗體阻斷率主要集中在均值66.76%以下(表3)。

表3 建水豬瘟病毒抗體阻斷率平均值與離散度

2.3 楚雄州豬瘟病毒抗體檢測(cè)結(jié)果

2.3.1 楚雄州不同養(yǎng)殖方式豬群豬瘟病毒抗體檢測(cè)結(jié)果 散養(yǎng)的豬瘟病毒抗體阻斷率的離散度大于規(guī)?；瘓?chǎng)的，其最小的豬瘟病毒抗體阻斷率為-21.83 %，遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于平均阻斷率81.20%。散養(yǎng)戶豬的豬瘟病毒抗體阻斷率主要集中在均值81.20%之下。規(guī)?；瘓?chǎng)的豬瘟病毒抗體阻斷率的離散度較小，其抗體阻斷率主要集中分布于其均值88.66%之下，但都大于40%，均為陽性(表4)。

表4 不同養(yǎng)殖方式豬瘟病毒抗體阻斷率平均值與離散度

2.3.2 楚雄州各生長(zhǎng)階段豬群豬瘟病毒抗體檢測(cè)結(jié)果 育肥豬豬瘟病毒抗體阻斷率的離散度較大，育肥豬中最小的豬瘟病毒抗體阻斷率為-21.83 %，遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于平均阻斷率89.87%。育肥豬的豬瘟病毒抗體阻斷率主要集中在均值89.87%之下。其余組別豬瘟病毒抗體阻斷率的離散度較小，且各組抗體阻斷率主要集中在其均值之下，但都大于40%，均為陽性(表5)。

表5 各生長(zhǎng)階段豬瘟病毒抗體阻斷率平均值與離散度

3 討論

與2012年邵志勇[16]進(jìn)行的云南省楚雄州部分地區(qū)豬瘟血清學(xué)調(diào)查結(jié)果相比，祿豐縣豬瘟病毒抗體陽性率仍舊保持在100%。楚雄市和南華縣的豬瘟病毒抗體陽性率分別上升了17.33、4.05個(gè)百分點(diǎn)；總陽性率上升了8.54個(gè)百分點(diǎn)；散養(yǎng)戶的陽性率上升了16.87個(gè)百分點(diǎn)，免疫效果明顯好于2012年，這些地區(qū)的豬瘟防控取得了顯著的進(jìn)步。這次被檢地區(qū)豬群豬瘟病毒抗體陽性率均在92.00%以上，5個(gè)地區(qū)中元陽縣抗體陽性率最低，但已達(dá)92.50%，免疫效果好。所有豬只均打過疫苗，豬瘟病毒抗體阻斷率極低的豬只應(yīng)進(jìn)行必要的病原診斷。楚雄州豬瘟病毒抗體總體的陽性率和單個(gè)地方的陽性率均高于紅河州。紅河州地處低緯度亞熱帶高原型濕潤(rùn)季風(fēng)氣候區(qū)，溫度高于滇中的楚雄，與越南毗鄰，地形錯(cuò)綜復(fù)雜。這提示，錯(cuò)綜復(fù)雜的地形、氣候和地域環(huán)境可能是豬瘟流行的因素。該病的流行也受貿(mào)易流通的影響，注意規(guī)范的異地引種和市場(chǎng)交易，避免豬瘟病毒的引入。在豬瘟的防控與監(jiān)測(cè)上，紅河州今后應(yīng)采取綜合性防治措施。

不同生長(zhǎng)階段的豬群中育肥豬和斷奶仔豬豬瘟病毒抗體阻斷率的離散度較大，且有陰性。提示豬瘟病毒抗體阻斷率的離散度偏高的這幾個(gè)階段的豬群對(duì)CSFV可能更易感，這可能與母源抗體的干擾、免疫時(shí)間、免疫接種的應(yīng)激反應(yīng)等有關(guān)。不同性別豬群間，公豬的豬瘟病毒抗體阻斷率的離散度高于母豬，這可能是由于公豬疫苗免疫失效、接種方法不當(dāng)或豬只感染了如豬繁殖與呼吸綜合癥病毒等免疫抑制性疾病而抑制了豬瘟的免疫應(yīng)答。應(yīng)密切關(guān)注免疫了疫苗但抗體仍為陰性的豬只，及時(shí)做好疫苗補(bǔ)免工作，觀察其臨床癥狀，若發(fā)病則應(yīng)及時(shí)隔離治療或淘汰。散養(yǎng)的豬瘟病毒抗體阻斷率的離散度大于規(guī)?；瘓?chǎng)的，且檢測(cè)出陰性豬只，這主要是因?yàn)樯B(yǎng)戶在養(yǎng)殖管理水平等方面與規(guī)?；瘓?chǎng)之間還存在著差異。為提高散養(yǎng)戶豬群的免疫成效，建議加強(qiáng)散養(yǎng)戶在飼養(yǎng)、免疫管理上的力度。

綜上所述，這幾個(gè)地方目前的豬群豬瘟免疫效果較好。為徹底地消除豬瘟，云南省今后應(yīng)采取綜合性防治措施，尤其注意野豬和放養(yǎng)及半圈養(yǎng)的家豬，特別加強(qiáng)對(duì)像紅河州這樣的邊境地區(qū)的豬瘟的監(jiān)測(cè)工作。

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