慢阻肺患者HDAC2、IL-8、TNF-α水平及其臨床意義分析

馬原，田玉恒

(鄭州大學(xué)附屬洛陽中心醫(yī)院呼吸內(nèi)科，河南 洛陽 471000)

慢性阻塞性肺疾?。–OPD）是以氣道氣流受限為特征的常見呼吸系統(tǒng)疾病，病情加重時(shí)可發(fā)展為呼吸衰竭或肺心病。其發(fā)病機(jī)制可能與氣道中的炎癥因子、抗炎物質(zhì)平衡被打破有關(guān)，也可能是抗炎機(jī)制出現(xiàn)了缺陷[1]。COPD的組織學(xué)特征之一是肺氣腫，主要病理學(xué)表現(xiàn)為彈性纖維缺失，導(dǎo)致肺泡彈性降低。肺氣腫是肺組織破壞的結(jié)果，吸煙、大氣污染、感染等均可引起炎癥反應(yīng)，影響肺基質(zhì)的合成[2]；慢性炎癥反應(yīng)還可通過蛋白酶活性亢進(jìn)、氧自由基等降解基質(zhì)成分。另外，肺泡壁及周圍基質(zhì)結(jié)構(gòu)破壞、修復(fù)功能受損也可導(dǎo)致肺氣腫的形成。正常人能夠通過有效及時(shí)的組織修復(fù)對(duì)抗肺組織的破壞。但如果修復(fù)能力退化，彈性蛋白的合成不能代償，肺組織支持結(jié)構(gòu)將遭到破壞，進(jìn)而出現(xiàn)小氣道塌陷和氣道阻塞。肺部維持細(xì)胞外基質(zhì)主要依賴成纖維細(xì)胞[3]，其修復(fù)過程不同程度地存在于組織損傷中，主要表現(xiàn)為細(xì)胞增殖加快以及細(xì)胞外基質(zhì)合成增多。研究發(fā)現(xiàn)[4]，COPD患者的腫瘤壞死因子TNF水平增高明顯，但引起患者全身炎癥反應(yīng)的因素尚不清楚。本研究旨在觀察慢阻肺患者HDAC2、IL-8、TNF-α水平的變化，探討HDAC2與外周血炎癥因子、肺功能指標(biāo)、血?dú)庵笜?biāo)的相關(guān)性，以期為該病的臨床診療提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年8月-2016年12月在我院接受治療的慢阻肺患者為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：⑴年齡≥50周歲；⑵符合COPD的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)；⑶無其他呼吸系統(tǒng)疾病。排除標(biāo)準(zhǔn)：⑴臨床資料不全者；⑵不愿參與本項(xiàng)研究者；⑶合并免疫系統(tǒng)等其他嚴(yán)重疾病者。根據(jù)納入排除標(biāo)準(zhǔn)共納入病例數(shù)80例，男48例，女32例，年齡52~70歲，平均 65.88±4.13歲，病程 5~10年，平均 7.38±1.02年。對(duì)照組納入排除標(biāo)準(zhǔn)：年齡≥50周歲，無其他系統(tǒng)嚴(yán)重疾病者，共納入80例，男40例，女40例，年齡50~70歲，平均65.85±3.92歲。兩組研究對(duì)象的年齡、性別等一般資料比較無明顯差別，具有可比性。本項(xiàng)研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)評(píng)審?fù)ㄟ^，且所有研究對(duì)象均知情同意。

1.2方法 觀察組患者入院后給予吸氧、化痰、平喘等對(duì)癥治療，同時(shí)應(yīng)用左氧氟沙星注射液靜脈滴注，每日一次抗感染治療。分別于入院第1d和治療第7d抽取靜脈血5ml（空腹?fàn)顟B(tài)下），置于EDTA的干燥試管中。立刻混勻離心（3000r/min），分離血漿后取上層血清檢測炎癥因子。HDAC2、IL-8、TNF-α的檢測均選用ELESA法，用普天洗板機(jī) (PT-3000G)洗板，用普天自動(dòng)酶標(biāo)儀 (PT-3500)檢測，所用試劑均購自北京生物醫(yī)學(xué)工程股份有限公司。然后對(duì)兩組的滲透壓CAIY Grant-Kubo公式進(jìn)行計(jì)算。比較兩組炎癥因子和血漿滲透壓，采用酶聯(lián)免疫吸附法 (購自R＆D公司)，以Logistic分析檢測指標(biāo)與慢阻肺的關(guān)系。用肺功能儀(產(chǎn)自 JAEGER公司)檢測肺功能，包括：FVC、FEV1/FVC、MMEF和PEF。用肝素化的注射器抽取患者橈動(dòng)脈血0.5ml進(jìn)行血?dú)夥治?，用血液氣體分析儀（美國康寧278型）進(jìn)行檢測。

1.3 評(píng)價(jià)指標(biāo) 觀察兩組研究對(duì)象外周單核細(xì)胞HDAC2 mRNA表達(dá)情況，比較兩組研究對(duì)象IL-8、TNF-α等炎癥因子、血?dú)夂头喂δ苤笜?biāo)的差異，分析慢阻肺患者外周單核細(xì)胞HDAC2 mRNA表達(dá)與IL-8、TNF-α水平、血?dú)狻⒎喂δ苤笜?biāo)的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 數(shù)據(jù)錄入后，采用SPSS 11.5軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)和計(jì)量資料分別采用例和均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，兩組研究對(duì)象外周單核細(xì)胞HDAC2 mRNA 表達(dá)、IL-8、TNF-α 等炎癥因子、血?dú)夂头喂δ苤笜?biāo)的比較采用t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，采用Pearson相關(guān)分析法分析慢阻肺患者外周單核細(xì)胞HDAC2 mRNA表達(dá)與IL-8、TNF-α、血?dú)狻⒎喂δ苤笜?biāo)的相關(guān)性。P<0.05：差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組外周單核細(xì)胞HDAC2 mRNA表達(dá)和IL-8、TNF-α水平的比較 表1顯示，慢阻肺患者的外周單核細(xì)胞HDAC2 mRNA相對(duì)表達(dá)量低于對(duì)照組（t=4.863，P<0.001），IL-8、TNF-α 水平高于對(duì)照組（t=-225.888、-67.620，P<0.001）。

表1 兩組外周單核細(xì)胞HDAC2 mRNA表達(dá)和IL-8、TNF-α水平的比較

2.2 兩組肺功能指標(biāo)的比較 表2顯示，慢阻肺患者 FVC、FEV1/FVC、MMEF和PEF水平低于對(duì)照組（t=12.106、29.139、35.426、33.291，P<0.001）。

表2 兩組肺功能指標(biāo)的比較

2.3 兩組血?dú)庵笜?biāo)的比較 表3顯示，慢阻肺患者PH 和 PaO2低于對(duì)照組 （t=2.971、9.120，P<0.05），PaCO2高于對(duì)照組（t=-27.752，P<0.001）。

表3 兩組血?dú)庵笜?biāo)的比較

2.4 慢阻肺患者HDAC2 mRNA表達(dá)與IL-8、TNF-α、血?dú)?、肺功能的相關(guān)性 表4顯示，慢阻肺患者外周單核細(xì)胞HDAC2 mRNA相對(duì)表達(dá)量與IL-8、TNF-α、PaCO2負(fù)相關(guān)， 與 PH、PaO2、FVC、FEV1/FVC、MMEF和PEF正相關(guān)。

表4 慢阻肺患者HDAC2 mRNA表達(dá)與IL-8、TNF-α、血?dú)?、肺功能的相關(guān)分析

3 討論

近年來慢性阻塞性肺疾病患者數(shù)量不斷增多，普遍有呼吸困難、咳嗽咳痰等臨床癥狀[5]。其基本病理改變?yōu)楹粑婪翘禺愋匝装Y反應(yīng)，導(dǎo)致終末小氣道重塑，影響呼吸功能。病情的發(fā)展與肺臟的炎癥反應(yīng)關(guān)系密切[6]，免疫力低下或易感者均有不同程度的氣流受限。晚期還可并發(fā)肺源性心臟病、呼吸衰竭。患者機(jī)體的相關(guān)指標(biāo)也出現(xiàn)一定程度的異常，其中炎性狀態(tài)表現(xiàn)明顯。HDAC2、IL-8均是具有代表性的指標(biāo)[7]，且對(duì)機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)也有較高的臨床價(jià)值。另外，TNF-α作為臨床中反應(yīng)機(jī)體炎性應(yīng)激的指標(biāo)，敏感度極高，在機(jī)體的波動(dòng)幅度也較高[8]。

HDAC2屬于組蛋白去乙?；傅囊粋€(gè)亞型，在有害顆粒的應(yīng)激作用下活性明顯降低[9]，可促使炎癥因子如IL-8、TNF-α等表達(dá)增強(qiáng)，在炎癥反應(yīng)調(diào)控中發(fā)揮重要的作用。TNF-α是由巨噬細(xì)胞、單核細(xì)胞產(chǎn)生的一種生物活性物質(zhì)，具有促炎性因子釋放的功能。TNF-α能刺激氣道的平滑肌細(xì)胞，使細(xì)胞分泌大量內(nèi)皮素，后者可有效的收縮氣道平滑肌，使氣道細(xì)胞增殖，最終完成氣道重建。白細(xì)胞介素-8(IL-8)，是巨噬細(xì)胞和上皮細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子[10]。通過對(duì)中性粒細(xì)胞趨化作用來實(shí)現(xiàn)其對(duì)炎癥反應(yīng)的調(diào)節(jié)。白細(xì)胞介素-8有很強(qiáng)的促血管生成作用，IL-8的過度表達(dá)可加速腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移。

有觀點(diǎn)認(rèn)為[11]，患者的呼吸功能可能會(huì)受到血清炎癥因子的影響，這同時(shí)也提示血清炎癥因子可能參與了疾病的發(fā)展。評(píng)價(jià)呼吸功能的指標(biāo)有FVC（用力肺活量）、FEV1/FVC（第一秒用力呼氣量占用力肺活量比值）、MMEF（用力呼氣中期流速）和PEF（呼氣峰值流速）等。FVC也稱時(shí)間肺活量，是指將測定肺活量的氣體用最快速度呼出的能力[12]。FEV1/FVC是判斷氣道阻塞的常用指標(biāo)，可反映通氣障礙的類型和程度[13]。FEV1占預(yù)計(jì)值的百分比是中、重度氣流受限的良好指標(biāo)，為COPD肺功能檢查的基本項(xiàng)目[14]。吸入支氣管舒張劑后FEV1＜80%預(yù)計(jì)值且FEV1/FVC＜70%者，可確定為不能完全可逆的氣流受限。肺功能檢查的指標(biāo)還有PaO2和PaCO2等。氧分壓是表示溶解在血中的氧分子所產(chǎn)生的壓力[15]。PaO2減低見于各種肺部疾病。血液中氧分壓低于55mmHg即有呼吸衰竭；低于30mmHg即有生命危險(xiǎn)[16]。

臨床上采用HDAC2等因子進(jìn)行檢測，能增加監(jiān)測COPD病情的指標(biāo)，有助于早期評(píng)估和治療，防止延誤病情[17]。當(dāng)然實(shí)驗(yàn)中也有一些不足之處，比如樣本量比較少，若想要更準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，則有待更多大樣本研究加以探討。

綜上所述，慢阻肺的患者炎癥反應(yīng)可能與HDAC2表達(dá)下調(diào)有關(guān)?；颊逫L-8、TNF-α表達(dá)明顯增強(qiáng)，說明血清炎癥因子與患者肺功能密切相關(guān)，同時(shí)表明上述指標(biāo)均參與了炎癥過程，可用以輔助臨床診療，但其具體機(jī)制還有待進(jìn)一步研究深入探討。

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