小麥分選過程中赤霉病粒與嘔吐毒素含量關(guān)系探討

夏培培

如皋糧食儲備庫 江蘇南通 226500

小麥的不完善粒包括：蟲蝕粒、病斑粒（黑胚粒和赤霉病粒）、破損粒、生芽粒、生霉粒[1]。小麥感染赤霉病后，不僅減產(chǎn)嚴(yán)重，而且品質(zhì)惡化，種用利用價值降低。近年來，由于氣候適宜赤霉病的流行，麥粒中毒素檢出量都很高。嘔吐毒素又稱脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（DON），與雪腐鐮刀菌烯醇均屬于單端孢霉烯族化合物。主要由某些鐮刀菌產(chǎn)生的，常出現(xiàn)在玉米（穗腐?。⑿←満痛篼湥ǔ嗝共。┥稀Ｃ咕ǔＯ埠脻窭錃夂?，菌呈白色或紅色。因它可以引起豬的嘔吐而得名，對人體有一定危害作用，可引起人畜急慢性中毒。急慢性中毒會導(dǎo)致厭食、嘔吐、腹瀉、發(fā)燒、站立不穩(wěn)、反應(yīng)遲鈍等急性中毒癥狀，嚴(yán)重時損害造血系統(tǒng)造成死亡。嘔吐毒素可能對免疫系統(tǒng)有影響，還具有很強(qiáng)的皮膚毒性和細(xì)胞毒性。小麥赤霉病的主要病原菌是禾谷鐮刀菌。相關(guān)研究表明，小麥赤霉病發(fā)病程度和籽粒中嘔吐毒素含量密切相關(guān)，病小麥穗率高則嘔吐毒素含量也高，反之亦然[2]。

相關(guān)研究表示要降低嘔吐毒素含量，對于小麥赤霉病含量高的處理方法有近紅外、比重分離、水漂法等多種方法[3]。在收購過程中對于赤霉病粒高的小麥安全入倉，最好、最快、適合大批量的處理方法是比重分離。比重清選機(jī)原理根據(jù)清選種子中外形尺寸與其相同而比重不同的各類輕雜和重雜，通過分離去除雜質(zhì)和輕質(zhì)嚴(yán)重病粒，將赤霉病粒含量降到近一半，再根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)決定等級是否能入倉。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 小麥

試樣扦取如皋糧食儲備庫收購時節(jié)種糧大戶來糧車、船小麥樣10份。

1.1.2 主要儀器和試劑

酶標(biāo)儀；嘔吐毒素酶聯(lián)免疫法試劑盒（華安麥科）；電熱恒溫培養(yǎng)箱；大型比重清選機(jī)（新鄉(xiāng)博華機(jī)械型號BD700）；移動式環(huán)保清理篩（型號TCQYYIS）；組合式裝卸輸送帶（云龍糧機(jī)型號YL）。

1.2 試驗方法

現(xiàn)行國家標(biāo)準(zhǔn)GB1351—2008《小麥》取消了原標(biāo)準(zhǔn)中赤霉病粒4%的限量要求，赤霉病粒仍歸病斑粒，由不完善粒總量控制。小麥?zhǔn)欠衲馨踩雮}，則根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)GB2761—2017《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中真菌毒素限量》，由嘔吐毒素含量是否超標(biāo)來確定，其限量為≤1000μg/kg[4]。

嘔吐毒素的檢驗方法有同位素稀釋液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法、免疫親和柱層析凈化高效液相色譜法、薄層色譜法、酶聯(lián)免疫法。酶聯(lián)免疫法又分試劑盒法和膠體金快速定量法。由于收購的條件限制，可以用赤霉病粒的多少來間接判斷嘔吐毒素是否超標(biāo)。對于嚴(yán)重感染赤霉病的小麥通過比重分選減少赤霉病粒，控制嘔吐毒素的含量。為了提高判斷的準(zhǔn)確性，我們通過大量的試驗，找到了赤霉病粒與嘔吐毒素含量的關(guān)系，有效地提高小麥?zhǔn)召徦俣?。?jīng)分選處理后的小麥赤霉病?？梢钥刂圃谝欢ǚ秶?，使其達(dá)到安全入倉的標(biāo)準(zhǔn)，避免因誤判導(dǎo)致嘔吐毒素超標(biāo)小麥入庫，給企業(yè)帶來損失。

1.2.1 不完善粒的檢測

按照國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T5494—2008《糧油檢驗 糧食、油料的雜質(zhì)、不完善粒檢驗》[5]進(jìn)行。赤霉病粒單獨計算。

1.2.2 赤霉病小麥比重分選處理方法

經(jīng)檢驗后赤霉病粒高的小麥，經(jīng)過清雜處理后，用輸送帶送入比重分選機(jī)，利用糧食的空氣動力學(xué)特性，將質(zhì)量不同的小麥進(jìn)行分級分層，與篩面接觸的較重小麥赤霉病含量小，從進(jìn)料端至排料端向高處運(yùn)行，而較輕的赤霉病含量高的小麥向低處運(yùn)行，從而達(dá)到分離目的。

1.2.3 嘔吐毒素檢測

按照國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T5009.111—2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇及其乙酰化衍生物的測定》[6]第四法 酶聯(lián)免疫吸附篩查法，先將分選前后小麥試樣粉碎至20目篩，稱取5.0g至100mL具塞三角瓶中，加去離子水25mL，振蕩10min，靜置3min，定量濾紙過濾，取1mL+4mL水稀釋，再取50μL進(jìn)樣。其它步驟按試劑盒說明書：先加標(biāo)準(zhǔn)樣/樣品50μL/孔→加酶標(biāo)物50μL/孔再加抗試劑50μL/孔輕輕振搖→蓋板膜蓋板25℃避光反應(yīng)15min→拿出將孔內(nèi)液體甩出250μL/孔洗液洗板，5次每次間隔10s在吸水紙拍干→顯色：加底物液100μL/孔→蓋板膜蓋板25℃避光反應(yīng)5min→加終止液50μL/孔→上酶標(biāo)儀450nm處測定吸光度。

2 結(jié)果與分析

2.1 比重分選前后赤霉病粒含量的變化

由表1看出，赤霉病嚴(yán)重的小麥通過比重分選處理，去除雜質(zhì)、輕質(zhì)重病小麥后，樣品中赤霉病粒含量變化是呈減少的趨勢，分選后最多的減少52.3%、最少的減少48.1%。所有樣品經(jīng)過比重分選處理，赤霉病粒平均含量減少了近一半，嘔吐毒素的含量也相應(yīng)降低，降低幅度接近。

表1 面條評分標(biāo)準(zhǔn)

2.2 赤霉病粒含量與嘔吐毒素含量的關(guān)系

本檢測數(shù)據(jù)統(tǒng)計表明，可以得出小麥的嘔吐毒素含量基本是隨赤霉病粒含量的增加而增加，二者呈正相關(guān)線性關(guān)系，擬合出直線方程 y=201.5x+537.6，其 R2=0.909，小麥赤霉病粒含量與嘔吐毒素含量呈顯著正相關(guān)，其相關(guān)性曲線見圖1。根據(jù)擬合所得的直線方程，可以推算得出嘔吐毒素含量滿足國標(biāo)限量要求時（小麥嘔吐毒素含量≤1000μg/kg），赤霉病粒含量應(yīng)≤2.3%。即，當(dāng)小麥赤霉病粒含量低于2.3%時，其嘔吐毒素含量不超過食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的限量要求。

圖1 赤霉病含量與DON含量相關(guān)性曲線

蘇憲慶[2]等研究的結(jié)果也認(rèn)為隨著小麥赤霉病粒含量的增加，嘔吐毒素含量也逐漸增加，二者呈正相關(guān)線性關(guān)系，擬合出直線方程 y=297.6x+135.96，其 R2=0.9821，相關(guān)性較為顯著，從而推得嘔吐毒素含量滿足國標(biāo)限量要求時，赤霉病粒含量應(yīng)≤2.9%。另外，艾蘭虹[7]的研究也認(rèn)為，控制小麥赤霉病含量≤3%，可確保小麥嘔吐毒素含量符合國家糧食衛(wèi)生指標(biāo)規(guī)定（≤1000μg/kg）。

為此，從嚴(yán)把質(zhì)量安全關(guān)來考慮，將赤霉病粒含量輔助標(biāo)準(zhǔn)調(diào)整為≤2%，或在收購過程中，糧庫結(jié)合當(dāng)時當(dāng)?shù)貙嶋H情況對赤霉病粒含量確定一個限量。對赤霉病超過限量的小麥，通過比重分選處理后，檢測能達(dá)到要求的方可入庫，而檢測不合格的小麥，則作為飼料糧另行存放或由售糧人自行處理，確保入庫小麥嘔吐毒素含量不超標(biāo)。

除收購過程中把好關(guān)外，每天收購結(jié)束對倉房內(nèi)小麥扦取綜合樣，用膠體金快速定量法進(jìn)行檢測非常必要，可及時了解倉房內(nèi)整個小麥嘔吐毒素含量，并根據(jù)檢測結(jié)果在接下來的收購過程中及時調(diào)整赤霉病粒的控制量。另外，在整倉收購?fù)瓿珊?，可用酶?lián)免疫法或高效液相色譜法準(zhǔn)確測定嘔吐毒素含量，作為以后相關(guān)驗收及銷售的憑證。

3 結(jié)論與探討

糧食企業(yè)在糧食收購過程中既要保證收到符合國家標(biāo)準(zhǔn)的小麥，又要切實解決農(nóng)民賣糧難的問題。對赤霉病粒超標(biāo)嚴(yán)重的小麥通過風(fēng)選加比重分選的工藝去除雜質(zhì)和輕質(zhì)病重小麥，從而將赤霉病粒含量減少，以期達(dá)到收購標(biāo)準(zhǔn)。再通過赤霉病含量的檢測來輔助判斷嘔吐毒素是否超標(biāo)，這樣操作簡便、快速，對收購小麥入倉很有幫助，并可降低檢測成本。

鑒于小麥赤霉病粒的檢測主要依靠感官判定，存在一定的人為誤差風(fēng)險。為有效確保儲備小麥嘔吐毒素符合國標(biāo)限量要求，在實際工作中不能只依靠檢測赤霉病粒含量來判斷嘔吐毒素是否超標(biāo)。仍然必須及時了解倉房內(nèi)整個小麥嘔吐毒素含量，并根據(jù)檢測結(jié)果及時調(diào)整赤霉病粒的控制量。

為了減少小麥赤霉病的發(fā)生，在本區(qū)域種植范圍內(nèi)應(yīng)杜絕使用易感病品種（揚(yáng)麥13、揚(yáng)麥20、鎮(zhèn)麥9），選擇適宜的播種期追足基肥減少生育進(jìn)程的差異，減少秸稈還田稻麥連作降低田間菌源量等。

[1]GB1351—2008小麥[S]

[2]蘇憲慶，顧偉，王曉波，等.小麥嘔吐毒素含量與赤霉病粒含量的相關(guān)性研究[J]，糧食與油脂，2015（12）：22-24

[3]卞科，關(guān)二旗，李萌萌，等.赤霉病小麥中嘔吐毒素消減去除方法研究[C].中國糧油學(xué)會儲藏分會成立30周年學(xué)術(shù)交流會，2015

[4]GB2761—2017食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中真菌毒素限量[S]

[5]GB/T5494—2008糧油檢驗 糧食、油料的雜質(zhì)、不完善粒檢驗[S]

[6]GB/T5009.111—2016食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇及其乙?；苌锏臏y定[S]

[7]艾蘭虹.小麥赤霉病及嘔吐毒素的分析檢測[J].糧油食品科技，2011（5）：46-47