黏蛋白在肺腺癌中的表達與鑒別診斷意義

楊 磊，王秋蘋，王 也，楊 強，王 蓓，笪冀平

（中日友好醫(yī)院 病理科，北京 100029）

黏蛋白（mucins，MUC）是一種廣泛分布于機體各粘膜表面的高分子糖蛋白[1]，它的合成與分泌是腺上皮組織的特征之一。本文采用回顧性研究的方法，總結在發(fā)病于肺部的惡性腫瘤中，MUC-1、MUC-2和MUC-5AC的蛋白表達特點。并通過統(tǒng)計學分析，來初步評價MUC家族成員的免疫組織化學（immunohistochemistry，IHC）染色在此類疾病中的病理診斷價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

中日友好醫(yī)院病理科2015年3月～2017年8月共送檢肺癌標本1719例，其中黏液腺癌41例，約占2.39%。為了便于統(tǒng)計分析，本研究選取這些病例中同時進行了 MUC-1、MUC-2、MUC-5AC抗體染色的病例72例。其中包括手術標本49例，活檢標本23例。病理診斷和免疫組化閱片皆由兩名病理醫(yī)師完成。72例中男48例、女24例；年齡27～81歲，平均60.1歲，中位年齡61歲。原發(fā)于肺的腫瘤59例、消化道轉移性癌13例。肺癌病理組織分型中，非黏液性腺癌29例、黏液性腺癌22例、神經(jīng)內(nèi)分泌癌3例、鱗癌、肉瘤樣癌、癌肉瘤、大細胞癌、小細胞癌各1例。手術標本中，有吸煙史（包括既往吸煙史）19例（38.8%），有淋巴結轉移13例（26.5%）。

1.2 MUC-1、MUC-2、MUC-5AC 的 IHC 染色及判讀標準

采用 EnVision 兩步法，抗體（MUC-1、MUC-2、MUC-5AC）和二抗由中杉金橋生物技術有限公司提供，DAB顯色試劑盒由DAKO公司提供。MUC-1蛋白的陽性信號定位于細胞膜和細胞漿，其它2種抗體均表達于細胞漿。陽性信號呈棕黃色至棕褐色。

1.3 統(tǒng)計學方法

應用SAS 9.1軟件進行統(tǒng)計學分析。相關性分析采用χ2檢驗或Fisher精確檢驗。3種抗體的表達與臨床病理參數(shù)的進一步分析采用多重Logistic回歸分析。

2 結果

2.1 免疫組化染色結果

表1 MUC-1、MUC-2、MUC-5AC在肺腺癌細胞中的表達（n=72）

表2 手術標本MUC-1、MUC-2、MUC-5AC表達與臨床參數(shù)的關系（n=49）

MUC MUC-1、MUC-2、MUC-5AC 均表達于細胞漿中（圖1～3見封三），但表達特點各不相同（見表1）。MUC-1在非黏液性腺癌中的表達明顯高于黏液性腺癌。而MUC-2的表達則集中在消化道轉移性癌中。MUC-5AC在黏液性腺癌中表達率最高，在消化道轉移癌中也有部分表達，但表達率較低。

2.2 MUC-1、MUC-2、MUC-5AC 與臨床病理參數(shù)的相關性

根據(jù)手術標本的臨床資料單獨對49例手術標本進行分析，表2示，MUC MUC-2、MUC-5AC與患者的腫瘤來源存在相關性（P＜0.01，P＜0.05）。MUC-1、MUC-2、MUC-5AC 表達與年齡、性別、吸煙史、有無淋巴結轉移的相關性不具有統(tǒng)計學意義（均P＞0.05）。多重Logistic回歸分析也顯示這些蛋白的表達與臨床病理參數(shù)不存在關聯(lián)。因為腫瘤的來源不同，不具有可比性，因此在分析時沒有考慮腫瘤的臨床分期。

3 討論

在正常機體內(nèi)，MUC是構成黏液的主要成分，存在于多種上皮組織（如呼吸道、胃腸道等）中，對細胞起著保護和潤滑的作用。病理條件下，某些MUC會發(fā)生異常表達。研究證明，MUC家族與疾病的診斷及患者的預后存在一定的相關性，可以作為一種生物標志物。MUC家族約有13名成員，表達部位和特點各不相同[2～7]，其中一些成員的異常表達與患者的預后存在相關性[8～10]。MUC家族中，MUC-1在許多良性漿液性腫瘤中表達，在惡性腫瘤中，通常表達于腺癌或漿液性和黏液性腫瘤交界處[8]。MUC-2為主要的腸道MUC，在正常腸上皮和結腸癌、胃癌等腫瘤中廣泛分布。MUC-1與MUC-2同時表達與卵巢黏液性腫瘤的惡性程度相關。MUC-5AC的表達及異常常見于消化道腫瘤或非小細胞肺癌[10]。

3.1 MUC在肺癌組織學分型中的意義

肺腺癌是非小細胞肺癌中常見的類型[11]。黏液性腺癌是肺腺癌中的一員，其本質(zhì)是一種肺原發(fā)性黏液上皮源性腫瘤，以富含細胞內(nèi)黏液為特征。常常為伏壁型生長，亦可見其它生長方式，腫瘤細胞形態(tài)為杯狀細胞及柱狀上皮。肺黏液性腺癌往往表達MUC-1及MUC-5AC；而與膠樣腺癌不同，MUC-2表達常為陰性[12]。MUC-5AC和（或）MUC-5B 陽性的黏液性腺癌預后較差[9，10，13]。 一種獲得越來越多病理醫(yī)師認同的肺腺癌分類方法，將肺腺癌分類為末端呼吸單位 （terminal respiratory unit，TRU）和非末端呼吸單位型（non-terminal respiratory unit，non-TRU）肺腺癌。而后者不一定表達TTF-1[14]，此時可以通過MUC-1和MUC-5AC進行肺腺癌的輔助診斷。

3.2 MUC在確定肺部惡性腫瘤來源方面的意義

不同組織來源的黏液性腺癌雖然有一些共同的免疫組化表達特點，如CDX2高表達及KRAS基因突變[12]等，但仍可以通過形態(tài)學和其它免疫組化指標將其區(qū)分開來。如：肺來源的腫瘤表達甲狀腺核轉錄因子1（thyroid nuclear transcription factor 1，TTF-1）、和 Napsin A，而女性生殖系統(tǒng)來源的腫瘤可能表達PAX8等。胃腸道來源的轉移性黏液腺癌中，MUC-1、MUC-2、MUC-5AC 均呈陽性表達，但胰腺導管腺癌不表達MUC-2。此外，在診斷與鑒別診斷的過程中，對患者病史的查詢及與臨床影像學資料的對比仍是非常重要的環(huán)節(jié)，不可忽略[15]。

圖1 非黏液性肺腺癌表達MUC-1（EnVision法×100）。

圖3 肺黏液性腺癌表達MUC-5AC（EnVision法×100）。

[1]Raina D，AgarwalP，Lee J，etal.Characterization ofthe MUC1-C cytoplasmic domain as a cancer target[J].PLoS One，2015，10（8）：e0135156.

[2]Xu M，Wang X.Critical roles of mucin-1 in sensitivity of lung cancer cells to tumor necrosis factor-alpha and dexamethasone[J].Cell Biol Toxicol，2017，33（4）：361-371.

[3]Bouillez A，Rajabi H，Pitroda S，et al.Inhibition of MUC1-C suppresses MYC expression and attenuates malignant growth in KRAS mutantlungadenocarcinomas[J].CancerRes，2016，76（6）：1538-1548.

[4]Horimasu Y，Ishikawa N，Tanaka S，et al.MUC1 in lung adenocarcinoma cross-sectional genetic and serological study[J].BMC Cancer，2017，17（1）：263.

[5]David JM，Hamilton DH，Palena C.MUC1 upregulation promotes immune resistance in tumor cells undergoing brachyury-mediated epithelial-mesenchymal transition[J].Onco Immunology，2016，5（4）：e1117738.

[6]Ham SY，Kwon T，Bak Y，et al.Mucin 1-mediated chemo-resistance in lung cancer cells[J].Onco Genesis，2016，5：e185.

[7]Bouillez A，Rajabi H，Jin C，et al.MUC1-C integrates PD-L1 induction with repression of immune effectors in non-smallcell lung cancer[J].Onco gene，2017，36（28）：4037-4046.

[8]Lappi-Blanco E，Mkinen JM，Lehtonen S，et al.Mucin-1 correlates with survival，smoking status，and growth patterns in lung adenocarcinoma[J].Tumour Biol，2016，37 （10）：13811-13820.

[9]Wakata K，Tsuchiya T，Tomoshige K，etal.A favourable prognostic marker for EGFR mutant non-small cell lung cancer：immunohistochemical analysis of MUC5B[J].BMJ Open，2015，5（7）：e008366.

[10]Kim YK，Shin DH，Kim KB，et al.MUC5AC and MUC5B enhance the characterization of mucinous adenocarcinomas of the lung and predict poor prognosis[J].Histopathology，2015， 67（4）：520-528.

[11]Trais WD，Brambilla E，Noguchi M，et al.International association for the study of lung cancer/American thoracic society/European respiratory society international multidisciplinary classification of lung adenocarcinoma[J].J Thorac Oncol，2011，6（2）：244-285.

[12]王征，王恩華，劉東戈.肺原發(fā)性黏液性上皮源性腫瘤的病理診斷與鑒別診斷[J].中華腫瘤雜志，2017，39（1）：1-6.

[13]Kang JH，Lee EH，Park SW，etal.MUC5AC expression through bidirectional communication of Notch and epidermal growth factor receptor pathways[J].J Immunol，2011，187（1）：222-229.

[14]Yatabe Y，Mitsudomi T，Takahashi T，et al.TTF-1 expression in pulmonary adenocarcinomas[J].Am J Surg Pathol，2002，26（6）：767-773.

[15]支修益，石遠凱，于金明.中國原發(fā)性肺癌診療規(guī)范（2015年版）[J].中華腫瘤雜志，2015，37（1）：67-78.