河南地區(qū)禽白血病病原學(xué)和血清學(xué)調(diào)查＊

王華俊，閆若潛，趙雪麗，班付國(guó)，謝彩華，馬震原，王淑娟

（河南省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 鄭州 450008）

禽白血病（Avian Leucosis，AL）是由反轉(zhuǎn)錄病毒科甲型反轉(zhuǎn)錄病毒屬禽反轉(zhuǎn)錄病毒引起的禽類多種腫瘤性疾病。臨床上多以禽器官組織出現(xiàn)良性和惡性腫瘤、免疫抑制、生長(zhǎng)遲緩等為主要特征。根據(jù)不同劃分標(biāo)準(zhǔn)將禽白血病病毒（ALV）分為A～J 共計(jì)10 個(gè)亞群，其中從雞群中分離的有6 個(gè)亞群，分別是A、B、C、D、E、J 亞群，除E 亞群為內(nèi)源性病毒外，其它亞型均為外源性病毒。核衣殼蛋白p27 是禽白血病病毒亞群所共同擁有的，且高度保守。禽白血病病毒（ALV）可引起不同的腫瘤性疾病，包括淋巴細(xì)胞性白血病、成髓細(xì)胞性白血病、成紅細(xì)胞性白血病等。ALV 既能水平傳播，也能垂直傳播，不僅導(dǎo)致雞群病死率上升、免疫抑制、生產(chǎn)性能降低，而且嚴(yán)重影響食品安全和對(duì)外貿(mào)易。該病在世界各國(guó)有不同程度流行，近年來(lái)，隨著禽白血病在我國(guó)流行，該病已成為嚴(yán)重威脅國(guó)內(nèi)養(yǎng)禽業(yè)的傳染病之一。在我國(guó)動(dòng)物防疫法的動(dòng)物疫病分類中，將其列為二類動(dòng)物疫病，也是《國(guó)家中長(zhǎng)期動(dòng)物疫病防治規(guī)劃（2012—2020）》要求優(yōu)先凈化的疫病。

目前，國(guó)內(nèi)外對(duì)該病尚無(wú)有效的防治措施，主要是通過(guò)淘汰陽(yáng)性雞的凈化方法來(lái)控制該病的流行。監(jiān)測(cè)是禽白血病凈化的重要手段，及時(shí)淘汰陽(yáng)性雞，切斷傳染源。其中檢測(cè)方法主要依靠禽白血病病毒J 亞型（ALV-J）、AB 亞群抗體（ALV-AB）ELISA 檢測(cè)試劑盒和P27 抗原ELISA 檢測(cè)試劑盒，因ELISA 檢測(cè)試劑盒快速、敏感、特異性強(qiáng)的特點(diǎn)而得以在ALV 檢測(cè)中被推廣應(yīng)用。本次調(diào)查檢測(cè)從河南省不同雞場(chǎng)、不同品種（系）的雞群中采集不同代次的血清樣品和蛋清樣品，分析其ALV 感染J 亞型、AB 亞群不同陽(yáng)性率，對(duì)河南省禽白血病感染進(jìn)行初步調(diào)查，為河南省禽白血病的凈化工作提供一定的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 樣本的采集

2016 年6 月—2018 年2 月，從豫東、豫西、豫南、豫北和豫中地區(qū)的不同雞場(chǎng)、不同品種（系）的產(chǎn)蛋雞群中采集不同代次的血清樣品360 份和蛋清樣品300 份（其中2 個(gè)場(chǎng)無(wú)蛋清），蛋清樣本來(lái)自采集血清樣品同一棟雞舍，被調(diào)查雞群為125～355 日齡。

1.2 試驗(yàn)方法

本次調(diào)查將河南省劃分為5 個(gè)區(qū)域：豫中、豫南、豫北、豫東和豫西。采用ELISA 法檢測(cè)采集的360 份血清樣品的禽白血病病毒J亞型、AB 亞群血清抗體和300 份蛋清中的P27 抗原。禽白血病病毒J 亞型、AB 亞群抗體檢測(cè)試劑盒和P27 抗原檢測(cè)試劑盒均購(gòu)自北京愛(ài)德士（IDEXX）元亨生物科技有限公司，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行操作。

2 結(jié)果

2.1 不同地區(qū)不同雞場(chǎng)ALV-J、ALV-AB抗體檢測(cè)和P27抗原檢測(cè)

ALV-J 和ALV-AB 血 清 抗 體的平均個(gè)體陽(yáng)性率分別為14.72%（53/360）和7.22%（26/360），P27 抗原的平均個(gè)體陽(yáng)性率為15.00%（45/300）；在不同雞場(chǎng)中，ALV-J、ALV-AB 血清抗體和P27 抗原的最高個(gè)體陽(yáng)性率分別為33.33%、26.67% 和40%，最低的均為0。

不同區(qū)域的ALV-J、ALVAB 抗體陽(yáng)性率和P27 抗原區(qū)域個(gè)體陽(yáng)性率分別為10%～24.17%、3.33%～13.33%和0～24.17%，豫南地區(qū)ALV-J 抗體陽(yáng)性率和P27抗原陽(yáng)性率最高，均為24.17%，豫東地區(qū)ALV-AB 抗體陽(yáng)性率最高，為13.33%，其中共感染的雞場(chǎng)3 個(gè)，共感染場(chǎng)群陽(yáng)性率為30%（3/10）（表1）。

2.2 不同品種雞群ALV-J、ALVAB抗體水平和P27抗原水平

本次調(diào)查涉及6 個(gè)品種（系）、不同規(guī)模的雞群，通過(guò)對(duì)不同品種雞群血清中ALV-J、ALV-AB抗體檢測(cè)和蛋清中P27 抗原檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，ALV-J 抗體個(gè)體陽(yáng)性率為0～33.33%，固始三高1 號(hào)個(gè)體陽(yáng)性率最高，為33.33%，三黃雞次之，為30%；ALV-AB 抗體個(gè)體陽(yáng)性率為0～13.33%，烏骨雞個(gè)體陽(yáng)性率最高，為13.33%，羅曼次之，為7.5%，三黃雞和愛(ài)拔益加2 個(gè)品種（系）為0；P27 抗原個(gè)體陽(yáng)性率為0～40%，固始三高1 號(hào)個(gè)體陽(yáng)性率最高，為40%，烏骨雞次之，為33.33%；6 個(gè)品種（系）中僅有愛(ài)拔益加ALV-J、ALV-AB 抗體檢測(cè)和P27 抗原檢測(cè)均為0（表2）。

2.3 祖代、父母代與商品代雞群A LV-J、A LV-A B抗體檢測(cè)和P27抗原檢測(cè)結(jié)果比較

本次調(diào)查共抽檢了12 個(gè)不同代次的雞群，其中ALV-J、ALVAB 血清抗體和P27 抗原陽(yáng)性雞場(chǎng)數(shù)分別為9、7 和7 個(gè)，被調(diào)查場(chǎng)群陽(yáng)性率分別為75%、58.33%和58.33%；通過(guò)對(duì)祖代、父母代與商品代雞群的檢測(cè)結(jié)果比較發(fā)現(xiàn)，商品代ALV-J 血清抗體場(chǎng)群陽(yáng)性率最高，為80%（4/5），平均個(gè)體陽(yáng)性率最低，為12.67%（19/150）；祖代場(chǎng)ALV-AB血清抗體場(chǎng)群陽(yáng)性率最低，為50%（2/4），父母代平均個(gè)體陽(yáng)性率最低2.2%（2/90）；祖代和父母代場(chǎng)P27 抗原場(chǎng)群陽(yáng)性率均為50%（2/4，1/2），商品代為100%（4/4），商品代個(gè)體陽(yáng)性率最低，為13.33%（16/120）（表3）。

3 討論

通過(guò)對(duì)河南地區(qū)禽白血病初步調(diào)查，尤其側(cè)重了對(duì)河南地區(qū)祖代禽場(chǎng)、父母代場(chǎng)以及地方優(yōu)良品種（系）禽白血病感染調(diào)查，初步了解了河南省不同地區(qū)、代次和品種（系）禽白血病的感染情況，調(diào)查結(jié)果為河南省開(kāi)展禽白血病凈化制定實(shí)施方案提供一定的理論依據(jù)，推進(jìn)了河南省禽白血病凈化進(jìn)程。目前，對(duì)祖代禽場(chǎng)禽白血病調(diào)查報(bào)道較少，調(diào)查結(jié)果也為科研工作提供參考。

本次調(diào)查采用禽白血病病毒J亞型、AB 亞群抗體檢測(cè)試劑盒和P27 抗原檢測(cè)試劑盒對(duì)河南省不同區(qū)域、品種和代次雞場(chǎng)進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示ALV-J 和ALV-AB 抗體場(chǎng)群陽(yáng)性率達(dá)75%和58.33%，平均個(gè)體陽(yáng)性率為14.72% 和7.22%；P27 抗原場(chǎng)群陽(yáng)性率達(dá)58.33%，平均個(gè)體陽(yáng)性率達(dá)15%，在抽檢的12 個(gè)場(chǎng)中，僅有1個(gè)場(chǎng)禽白血病感染為陰性，比崔治中等對(duì)我國(guó)禽白血病感染情況調(diào)查檢出率還高，這表明河南省雞場(chǎng)禽白血病感染有上升趨勢(shì)。

通 過(guò) 對(duì)12 個(gè) 場(chǎng)ALV-J、ALV-AB 抗體和P27 抗原抽檢，分析其共感染發(fā)現(xiàn)，三者沒(méi)有線性關(guān)系，即ALV-J 抗體高，P27 抗原不一定高。由于P27 抗原檢測(cè)蛋清、喉頭/泄殖腔拭子不代表ALV-J 內(nèi)源性感染，因此，本次調(diào)查采用3 種不同的試劑盒檢測(cè)抗體和抗原，分析評(píng)估雞群禽白血病共感染狀況，同時(shí)淘汰陽(yáng)性雞，對(duì)該病凈化有重要臨床指導(dǎo)意義。

對(duì)不同品種（系）雞群禽白血病感染情況進(jìn)行對(duì)比分析，結(jié)果表明我國(guó)一些地方優(yōu)良品種（系）在選育和養(yǎng)殖中感染禽白血病，且個(gè)體陽(yáng)性率較高，這不僅影響我國(guó)地方品種的雞群免疫力和生產(chǎn)性能，造成雞群發(fā)病率、病死率升高，而且嚴(yán)重影響食品安全、對(duì)外貿(mào)易和公共衛(wèi)生安全，為發(fā)揮我國(guó)地方優(yōu)良品種優(yōu)勢(shì)，有必要開(kāi)展禽白血病凈化工作，同時(shí)加強(qiáng)選育抗禽白血病地方品種。

據(jù)報(bào)道，從同一個(gè)禽白血病感染群中不同器官分離毒株的ALV-J基因序列不完全相同，基因變異導(dǎo)致禽白血病防控難度大大增加，對(duì)河南省祖代禽場(chǎng)禽白血病調(diào)查結(jié)果表明，禽白血病感染較為普遍，且地方優(yōu)良品種（系）感染率較高，這與病毒基因變異和祖代雞群的感染息息相關(guān)。該病主要傳播方式是垂直傳播，因此對(duì)禽白血病的防控必須從源頭控制，相關(guān)政府部門積極引導(dǎo)祖代雞場(chǎng)開(kāi)展凈化，加強(qiáng)對(duì)外引種管理，才能有效防控禽白血病的發(fā)生和流行。

4 結(jié)論

本次調(diào)查采用商品化ELISA 試劑盒對(duì)河南省不同地區(qū)、品種（系）和代次的祖代禽場(chǎng)、父母代場(chǎng)、商品代場(chǎng)的血清和蛋清樣品進(jìn)行了ALV-J、ALV-AB 血清抗體和P27抗原的個(gè)體陽(yáng)性率、場(chǎng)群陽(yáng)性率及共感染數(shù)據(jù)分析，結(jié)果表明不同區(qū)域雞群ALV 感染普遍存在，各個(gè)品種（系）感染的亞群及其陽(yáng)性率各不相同，調(diào)查結(jié)果為河南省開(kāi)展禽白血病防控、凈化提供一定的理論依據(jù)，也為科研工作提供參考。■

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