鱖和金色鱖仔魚(yú)早期發(fā)育與不可逆生長(zhǎng)點(diǎn)確定

段國(guó)慶 ，江河 ，胡玉婷 ，凌俊 ，錢(qián)克林 ，侯冠軍

鱖（Siniperca scherzeri），又名翹嘴鱖，隸屬于鱸形目（Perciformes），鱸亞目（Percoidei），鱖屬（Siniperca），俗稱(chēng)花桂、黑桂、桂魚(yú)等，廣泛分布于我國(guó)中北部各大水系及其附屬湖泊水庫(kù)，屬于完全淡水生活的魚(yú)類(lèi)，尤以長(zhǎng)江流域最為常見(jiàn)。鱖肉質(zhì)細(xì)嫩、鮮美，無(wú)肌間刺，是深受消費(fèi)者喜愛(ài)的河鮮，是我國(guó)名貴的淡水養(yǎng)殖品種之一。金色鱖是安徽滁州長(zhǎng)江水產(chǎn)良種場(chǎng)從鱖繁殖過(guò)程中發(fā)現(xiàn)的體色變異個(gè)體中選育而來(lái)的，其體色金黃，味道鮮美，具有觀賞和食用價(jià)值。鱖的繁殖生物學(xué)和人工繁養(yǎng)技術(shù)已有大量報(bào)道[1-3]，本研究擬對(duì)鱖和金色鱖仔魚(yú)早期發(fā)育進(jìn)行詳細(xì)觀察和描述，比較其在饑餓耐受性方面差異，以期為該魚(yú)的基礎(chǔ)生物學(xué)研究積累一些參考資料。

1 材料與方法

1.1 親魚(yú)來(lái)源

試驗(yàn)于2016年5月6日—16日在滁州市長(zhǎng)江水產(chǎn)良種場(chǎng)進(jìn)行，鱖和金色鱖的父母本均為該場(chǎng)塘口培育的3齡親魚(yú)，其中鱖父本平均規(guī)格為2.2 kg/尾，母本平均規(guī)格為2 kg/尾；金色鱖父本規(guī)格為2.1 kg/尾，母本平均規(guī)格為2 kg/尾。

1.2 人工催產(chǎn)與授精

在水溫為18~22℃的條件下，分別對(duì)鱖和金色鱖親魚(yú)進(jìn)行人工催產(chǎn)，催產(chǎn)激素和注射方式為雌魚(yú)每尾注射促黃體素釋放激素（LRH-A2）15μg/kg+魚(yú)用絨毛膜促性腺激素（HCG）1 500IU/kg+多潘立酮（DOM）5 mg/kg，雄魚(yú)注射劑量減半。響應(yīng)時(shí)間約為24 h，待親魚(yú)出現(xiàn)發(fā)情行為時(shí)即進(jìn)行人工擠卵和排精，人工授精采用干法授精，待其充分接觸后加水漂洗，受精卵吸水膨脹后放入孵化桶中孵化。

1.3 仔魚(yú)觀察

鱖和金色鱖仔魚(yú)出膜后，取鱖和金色鱖初孵仔魚(yú)各1 000尾置于不同的水族箱進(jìn)行饑餓試驗(yàn)，試驗(yàn)期間不投喂直至全部死亡。試驗(yàn)用水為經(jīng)過(guò)充分曝氣的自來(lái)水，并用氧氣泵充氧，同時(shí)各設(shè)置1個(gè)正常投喂組。每天檢查記錄仔魚(yú)死亡情況，并等溫?fù)Q水1/2。實(shí)驗(yàn)時(shí)，取鱖和金色鱖各20尾，置于Olympus SM61型體視顯微鏡下觀察仔魚(yú)發(fā)育情況，用Moticam 1300攝像系統(tǒng)測(cè)量仔魚(yú)全長(zhǎng)、卵黃囊長(zhǎng)徑和短徑及油球直徑，并計(jì)算卵黃囊和油球體積。計(jì)算公式如下[4]：

卵黃囊容量=4/3π×(r/2)2×R/2，式中 r為卵黃囊短徑，R為卵黃囊長(zhǎng)徑。

油球體積=4/3π×(R/2)3，式中R為油球直徑。

1.4 初次攝食率

仔魚(yú)出膜后，每天從饑餓組取出20尾仔魚(yú)放入1L燒杯中，并投喂草魚(yú)仔魚(yú)，密度為2ind/mL，期間用增氧泵進(jìn)行充氧，4 h后將仔魚(yú)取出，逐條解剖觀察攝食情況，計(jì)算初次攝食率。計(jì)算公式為：

式中，x為胃腸內(nèi)含有餌料魚(yú)的仔魚(yú)數(shù)，z為總測(cè)定仔魚(yú)數(shù)。

1.5 PNR的確定

鱖和金色鱖仔魚(yú)的PNR參照按照殷名稱(chēng)[5]的方法確定，用日齡表示。每日測(cè)定饑餓組鱖和金色鱖仔魚(yú)的初次攝食率，當(dāng)所測(cè)定的饑餓組仔魚(yú)的初次攝食率開(kāi)始下降并低于最高初次攝食率的一半時(shí)，即為PNR時(shí)間。

1.6 特定生長(zhǎng)率

全長(zhǎng)特殊增長(zhǎng)率（SGR）[6]計(jì)算公式為：

式中：y2和y1分別為發(fā)育到時(shí)間t2和t1時(shí)的全長(zhǎng)。

2 結(jié)果

2.1 仔魚(yú)早期發(fā)育

0日齡仔魚(yú)：初孵鱖仔魚(yú)平均全長(zhǎng)3.51 mm，卵黃囊較大，位于軀干前半部分，卵黃囊上有斑點(diǎn)，軀干透明無(wú)色；金色鱖仔魚(yú)平均全長(zhǎng)3.50 mm，其他形態(tài)特征與鱖基本一致。

1日齡仔魚(yú)：鱖和金色鱖仔魚(yú)平均全長(zhǎng)均為4.03 mm。兩者眼睛、卵黃囊都有黑色素沉淀，眼睛后方和胸部有少量橘黃色，卵黃囊體積明顯減小，身體較為舒展，具備一定的游泳能力。

2日齡仔魚(yú)：鱖和金色鱖仔魚(yú)平均全長(zhǎng)分別為4.46 mm和4.53 mm。兩者眼睛、卵黃囊黑色素沉淀更加明顯，眼睛后方、胸部橘黃色有所增多，卵黃囊進(jìn)一步縮小，體液循環(huán)清晰可見(jiàn)，油球緊貼于卵黃囊前部，不易觀察得到，鰭膜透明，環(huán)繞身軀中后部。

3日齡仔魚(yú)：鱖和金色鱖仔魚(yú)平均全長(zhǎng)分別為4.63 mm和4.78 mm。鱖眼睛輪廓明顯，卵黃囊色素減少，能見(jiàn)到上下顎張合和心跳，骨骼清晰可見(jiàn)，鰭膜有所減少；金色鱖鰭膜較鱖更寬，胸鰭可見(jiàn)，其他體征與鱖相似。

4日齡仔魚(yú)：饑餓組鱖和金色鱖仔魚(yú)平均全長(zhǎng)分別為4.85 mm和5.03 mm。兩者胸鰭均頻繁煽動(dòng)，口和鰓張合明顯，軀干上有少量色素沉淀，鰭膜開(kāi)始減少，游泳能力增強(qiáng)，可在水體中快速游動(dòng)一段距離，有少量仔魚(yú)開(kāi)口攝食。對(duì)照組鱖和金色鱖仔魚(yú)平均全長(zhǎng)分別為4.98 mm和5.13 mm。

表1鱖仔魚(yú)饑餓組測(cè)量結(jié)果

表2金色鱖仔魚(yú)饑餓組測(cè)量結(jié)果

5日齡仔魚(yú)：饑餓組鱖和金色鱖仔魚(yú)平均全長(zhǎng)分別為5.00 mm和5.10 mm。兩者卵黃囊色素沉淀更多，口裂不斷張合，能長(zhǎng)時(shí)間平游，發(fā)現(xiàn)鱖有吞噬餌料魚(yú)的現(xiàn)象。對(duì)照組鱖和金色鱖仔魚(yú)平均全長(zhǎng)分別為5.05 mm和5.24 mm。

6日齡仔魚(yú)：饑餓組鱖和金色鱖仔魚(yú)平均全長(zhǎng)均為5.10 mm，卵黃囊消失殆盡。鱖初次攝食率達(dá)最大值66%，此后開(kāi)始下降。金色鱖初次攝食率也達(dá)到66%。對(duì)照組鱖和金色鱖仔魚(yú)平均全長(zhǎng)分別為5.43 mm和5.50 mm。

7日齡仔魚(yú)：饑餓組鱖和金色鱖仔魚(yú)平均全長(zhǎng)分別為5.00 mm和5.08 mm。鱖初次攝食率依然為66%，金色鱖初次攝食率達(dá)到最大值85%。對(duì)照組鱖和金色鱖仔魚(yú)平均全長(zhǎng)分別為5.88 mm和5.92 mm。

圖1饑餓組鱖仔魚(yú)特殊增長(zhǎng)率

8日齡仔魚(yú)：鱖初次攝食率低于最高初次攝食率一半，進(jìn)入PNR；金色鱖攝食率有所下降至55%。對(duì)照組鱖和金色鱖仔魚(yú)平均全長(zhǎng)分別為6.27 mm和6.35 mm。

9日齡仔魚(yú)：金色鱖初次攝食率低于最高初次攝食率一半，進(jìn)入PNR，仔魚(yú)活動(dòng)能力顯著降低，身體出現(xiàn)扭曲、畸形。

2.2 卵黃囊吸收與生長(zhǎng)

從表1可以看出，鱖和金色鱖仔魚(yú)的卵黃囊和油球在0—1日齡消耗最快，鱖卵黃囊消耗量達(dá)0.46446 mm3，日消耗率為59.17%，金色鱖卵黃囊消耗量達(dá)0.69558 mm3，日消耗率為73.23%，初孵鱖和金色鱖油球均為 0.0543 3mm3，0—1日齡吸收掉76.43%，遠(yuǎn)高于其他時(shí)間段的吸收量，說(shuō)明0—1日齡是鱖和金色鱖仔魚(yú)代謝最為旺盛的時(shí)期。

圖2饑餓組金色鱖仔魚(yú)特殊增長(zhǎng)率

圖3對(duì)照組鱖仔魚(yú)特殊增長(zhǎng)率

圖4對(duì)照組金色鱖仔魚(yú)特殊增長(zhǎng)率

鱖和金色鱖4日齡開(kāi)口攝食，進(jìn)入混合營(yíng)養(yǎng)期。6日齡卵黃囊全部消失，進(jìn)入完全外源營(yíng)養(yǎng)期。由圖1、圖2可知，0—6日齡饑餓鱖和金色鱖仔魚(yú)的全長(zhǎng)一直處于正增長(zhǎng)，且在0—1日齡增長(zhǎng)最快，日增長(zhǎng)率分別達(dá)13.82%和14.10%，6日齡之后，饑餓仔魚(yú)全長(zhǎng)出現(xiàn)負(fù)增長(zhǎng)。與此同時(shí)，進(jìn)入外源營(yíng)養(yǎng)期的對(duì)照組鱖仔魚(yú)生長(zhǎng)速度趨于緩和穩(wěn)定。

由圖3可知，對(duì)照組鱖全長(zhǎng)一直處于正增長(zhǎng)，且在3-5日齡階段，出現(xiàn)增長(zhǎng)率波動(dòng)的情況，可能與食性轉(zhuǎn)化有關(guān)。0-8日齡對(duì)照組鱖仔魚(yú)全長(zhǎng)的平均日增長(zhǎng)量為0.345 mm，平均特定增長(zhǎng)率為7.25%，鱖仔魚(yú)全長(zhǎng)與日齡呈極顯著的直線(xiàn)相關(guān)關(guān)系，其回歸方程為：

式中：y為全長(zhǎng)（mm），x為日齡（d）；

由圖4可知，對(duì)照組金色鱖生長(zhǎng)與鱖表現(xiàn)出相似的規(guī)律，0—8日齡仔魚(yú)全長(zhǎng)的平均日增長(zhǎng)量為0.356 mm，平均特殊增長(zhǎng)率為7.45%，金色鱖仔魚(yú)全長(zhǎng)與日齡的相關(guān)關(guān)系如方程所示：

y=-0.0084x2+0.4082x+3.2219，R2=0.9823式中：y為全長(zhǎng)（mm），x為日齡（d）。

3 討論

3.1 仔魚(yú)發(fā)育與生長(zhǎng)

有關(guān)鱖發(fā)育與生長(zhǎng)的研究已有一些報(bào)道，鄭生順等[7]研究了鱖仔稚魚(yú)的發(fā)育與生長(zhǎng)，唐宇平等[8]研究了鱖魚(yú)從仔魚(yú)到成魚(yú)期的消化器官發(fā)育，羅仙池等[9]觀察了鱖魚(yú)的胚胎、仔稚魚(yú)發(fā)育。以上文獻(xiàn)對(duì)初孵鱖仔魚(yú)規(guī)格的描述略有差異，鄭生順等[7]報(bào)道的仔魚(yú)全長(zhǎng)為3.29~3.87 mm，平均3.45 mm，羅仙池等[9]觀察到的仔魚(yú)全長(zhǎng)為3.6~3.9 mm，唐宇平等[8]觀察到的仔魚(yú)全長(zhǎng)為3.9~4.0 mm，而本研究測(cè)得的初孵仔魚(yú)全長(zhǎng)平均值為3.51 mm，略小于前人的觀測(cè)結(jié)果，這可能與親本培育和選擇有關(guān)。除此之外，本研究觀察到的仔魚(yú)其他形態(tài)與前人研究結(jié)果基本一致。

3.2 初次攝食時(shí)間與PNR

鄭生順等[7]研究認(rèn)為鱖魚(yú)仔魚(yú)開(kāi)口期為3—5日齡，6日齡時(shí)卵黃囊消失殆盡。唐宇平等[8]報(bào)道了鱖魚(yú)3日齡仔魚(yú)開(kāi)口攝食，7日齡卵黃囊消失，混合營(yíng)養(yǎng)期持續(xù)3~4 d，若無(wú)適口餌料，6—7日齡仔魚(yú)全部死亡。本研究發(fā)現(xiàn)鱖魚(yú)初次攝食時(shí)間為4日齡，6日齡時(shí)卵黃囊消失殆盡，與前人研究結(jié)果的差異可能是溫度等環(huán)境因素的不同造成的[10]。本研究中，鱖在6日齡達(dá)到最高初次攝食率66%，這與練青平等觀察到的雜交鱖最高初次攝食率較為接近，金色鱖在7日齡達(dá)到最高初次攝食率，鱖于8日齡抵達(dá)PNR期，金色鱖于9日齡抵達(dá)PNR期。

3.3 鱖屬魚(yú)類(lèi)的饑餓耐受力

為獲得經(jīng)濟(jì)性狀優(yōu)良的養(yǎng)殖品種，生產(chǎn)中往往通過(guò)雜交、選育等方式獲得優(yōu)良品種。練青平等[11]通過(guò)鱖與斑鱖雜交，期望于獲得生長(zhǎng)速度快、抗逆性強(qiáng)的雜交鱖，并對(duì)獲得的仔魚(yú)進(jìn)行早期發(fā)育研究和PNR確定，結(jié)果顯示，雜交鱖于7-8日齡抵達(dá)PNR期，與王茂元等[12]研究的斑鱖抵達(dá)PNR時(shí)期一致，本研究中的金色鱖是從鱖群體中選育而來(lái)的，早期生長(zhǎng)與鱖基本一致，在饑餓耐受試驗(yàn)中，金色鱖抵達(dá)PNR期比鱖稍晚一些，意味著金色鱖具有更加充裕的時(shí)間尋找適合的開(kāi)口餌料，從而提高攝食率和成活率，對(duì)實(shí)際生產(chǎn)具有一定意義。

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