微生物送檢標(biāo)本在培養(yǎng)前進(jìn)行涂片鏡檢的意義探析

史治國

【摘 要】目的：探索微生物送檢標(biāo)本培養(yǎng)前進(jìn)行涂片鏡檢的意義。方法：回顧性收集本院檢驗(yàn)科2017 年5 月-2018 年10 月收取的不同類型微生物送檢標(biāo)本中選出218 份，均先進(jìn)行涂片鏡檢，再接種培養(yǎng)，整理培養(yǎng)與鏡檢的結(jié)果符合率。結(jié)果：218 份標(biāo)本經(jīng)涂片鏡檢有18 份標(biāo)本不合格，200份合格標(biāo)本中培養(yǎng)出致病菌69 株，其中痰液標(biāo)本45 株，尿液標(biāo)本5 株，分泌物標(biāo)本19 株；痰液標(biāo)本的培養(yǎng)與鏡檢結(jié)果符合率為85.94%，尿液標(biāo)本符合率為81.48%，分泌物標(biāo)本符合率為84.44%，三種標(biāo)本的符合率對比差異不明顯，P>0.05。微生物種類符合率：痰液標(biāo)本的陽性球菌、陰性桿菌、真菌符合率分別為66.67%、83.33%、94.12%，尿液標(biāo)本分別為50.0%、50.0%、100.0%，分泌物標(biāo)本分別為50.0%、93.33%、100.0%。結(jié)論：微生物標(biāo)本在培養(yǎng)前先進(jìn)行涂片鏡檢能有效明確檢驗(yàn)標(biāo)本的質(zhì)量，避免培養(yǎng)結(jié)果的過大誤差，并指導(dǎo)培養(yǎng)的方向，縮短培養(yǎng)時(shí)間，值得推廣。

【關(guān)鍵詞】微生物標(biāo)本；培養(yǎng)；涂片鏡檢；符合率；合格標(biāo)本

【中圖分類號】R47 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A 【文章編號】1672-3783（2018）08-0190-01

醫(yī)院檢驗(yàn)科承擔(dān)著病原微生物檢驗(yàn)的重要工作，檢驗(yàn)結(jié)果是臨床診斷和治療的重要依據(jù)，因此檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確可靠直接關(guān)系到臨床診療[1]。微生物標(biāo)本培養(yǎng)前先進(jìn)行涂片鏡檢能明確標(biāo)本的質(zhì)量，并且提前為臨床醫(yī)生的診療指明大致方向。本研究選取218 份微生物送檢標(biāo)本為例，探究涂片鏡檢的應(yīng)用意義，匯報(bào)如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院檢驗(yàn)科2017 年5 月-2018 年10 月收取的微生物送檢標(biāo)本218 份為研究對象，其中痰液標(biāo)本（均來自下呼吸道）135 份，尿液標(biāo)本33 份，分泌物標(biāo)本50 份。

1.2 方法（1）涂片鏡檢：痰液標(biāo)本和分泌物標(biāo)本：使用無菌棉簽挑取標(biāo)本中膿性、黏性或血性的部分放在兩個(gè)玻片中間，以加壓方式展開標(biāo)本，以反向方式交錯(cuò)拉動(dòng)兩個(gè)玻片，得到均勻的涂片，待自然干燥后用革蘭染色，鏡檢。對于尿液標(biāo)本，取標(biāo)本5～8ml 置于無菌試管中，離心后取沉渣涂片，待干燥后革蘭染色、鏡檢。（2）分離培養(yǎng)。在痰液標(biāo)本中加入等量1%胰酶溶液，使其均質(zhì)化，將處理好的痰液標(biāo)本接種在血平板、巧克力平板、麥康凱平板和沙保羅平板，置于5%～10%CO2 環(huán)境中，35℃培養(yǎng)24～48h。分泌物標(biāo)本、尿液標(biāo)本經(jīng)處理后接種在血平板、麥康凱平板，然后在35℃下培養(yǎng)24～48h。

1.3 儀器與耗材 主要儀器法國梅里埃的VITEK 2 Compact 自動(dòng)細(xì)菌鑒定及藥敏分析系統(tǒng)，革蘭氏染液購自珠海貝索生物技術(shù)有限公司。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 使用SPSS18.0 軟件檢驗(yàn)數(shù)據(jù)資料，計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)的對比采用x2 檢驗(yàn)，P<0.05 有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩種方法的符合率 218 份標(biāo)本首先經(jīng)涂片鏡檢有18 份標(biāo)本不合格，剔除后對200 份合格標(biāo)本進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)，合格的標(biāo)本中：痰液標(biāo)本128 份，尿液標(biāo)本27 份，分泌物標(biāo)本45 份。200 份合格標(biāo)本共培養(yǎng)出致病菌69 株，其中痰液標(biāo)本45 株，尿液標(biāo)本5 株，分泌物標(biāo)本19 株。見表1 所示，痰液標(biāo)本、尿液標(biāo)本、分泌物標(biāo)本的培養(yǎng)結(jié)果與涂片鏡檢結(jié)果的符合率分別為85.94%、81.48%、84.44%，不同類型標(biāo)本的符合率對比差異不明顯，x2=0.361，P=0.835>0.05。

2.2 兩組方法檢出微生物類型的符合率 見表1 所示，痰液標(biāo)本的陽性球菌符合率為66.67%，陰性桿菌符合率為83.33%，真菌符合率為94.12%；尿液標(biāo)本的陽性球菌、陰性球菌、真菌符合率分別為50.0%、50.0%、100.0%；分泌物標(biāo)本的陽性球菌、陰性球菌、真菌符合率分別為50.0%、93.33%、100.0%。

3 討論

近年來，呼吸系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)的疾病發(fā)病率逐漸提高，患者在就醫(yī)中需進(jìn)行體液等的檢測，檢驗(yàn)結(jié)果指導(dǎo)臨床治療[2]。伴隨著醫(yī)療技術(shù)的進(jìn)步，醫(yī)療檢驗(yàn)技術(shù)不斷進(jìn)步，微生物室作為檢驗(yàn)科的重要科室之一，其承擔(dān)著細(xì)菌培養(yǎng)鑒定任務(wù)。雖然當(dāng)前大多數(shù)醫(yī)院的微生物室采用了自動(dòng)細(xì)菌培養(yǎng)儀進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)，但是卻并不能提高檢驗(yàn)效率和準(zhǔn)確率。對于疑似細(xì)菌感染的標(biāo)本，檢驗(yàn)人員往往直接進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)，忽略了涂片鏡檢。微生物送檢標(biāo)本的質(zhì)量直接關(guān)系到細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果的準(zhǔn)確性，只有合格的標(biāo)本才能進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)鑒定，得出準(zhǔn)確的結(jié)果，指導(dǎo)臨床治療[3-4]。因此，在細(xì)菌培養(yǎng)前，對標(biāo)本進(jìn)行涂片鏡檢是重要措施之一。本研究結(jié)果顯示：218 份標(biāo)本經(jīng)涂片鏡檢顯示有18 份標(biāo)本不合格，在細(xì)菌培養(yǎng)前進(jìn)行涂片鏡檢有助于及時(shí)排除不合格的標(biāo)本，重新采集標(biāo)本，保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和及時(shí)性，也避免不合格標(biāo)本檢驗(yàn)帶來的誤診、誤治。

200 份合格標(biāo)本共培養(yǎng)出69 株致病菌，經(jīng)涂片鏡檢陽性81 例，鏡檢與培養(yǎng)的結(jié)果符合率較高，其中痰液標(biāo)本、分泌物標(biāo)本、尿液標(biāo)本的符合率差異不明顯，P>0.05；在微生物種類的符合率方面：陽性球菌、陰性桿菌、真菌的符合率均較高，但是依然存在兩者不符合的情況，鏡檢陰性而培養(yǎng)陽性的原因可能是：涂片取材不當(dāng)無法如實(shí)反應(yīng)標(biāo)本的真實(shí)性；涂片經(jīng)革蘭染色后，背景為紅色，革蘭陰性桿菌也是紅色，可能出現(xiàn)漏檢的情況[5]；部分不動(dòng)桿菌屬在鏡下形態(tài)為革蘭陰性球桿菌，易混淆；另外在接種培養(yǎng)的過程中也可能出現(xiàn)標(biāo)本污染情況。而鏡檢為陽性但培養(yǎng)為陰性的原因可能是：標(biāo)本中有厭氧菌，而常規(guī)需氧條件下培養(yǎng)厭氧菌不會(huì)生長；采集標(biāo)本前患者未停用抗菌藥物，殘留的抗菌藥物影響了細(xì)菌的繁殖；鏡檢顯示細(xì)菌被膿細(xì)胞吞噬后，白細(xì)胞以及死亡的尸體釋放某些物質(zhì)抑制了細(xì)菌的繁殖。

通過對比鏡檢與培養(yǎng)的結(jié)果發(fā)現(xiàn)，二者之間存在較高的符合率，培養(yǎng)前先進(jìn)行涂片鏡檢觀察致病菌的形態(tài)染色特點(diǎn)，并結(jié)合標(biāo)本的種類以及臨床初步診斷，初步確認(rèn)是哪一類細(xì)菌，為細(xì)菌培養(yǎng)和鑒定指導(dǎo)方向，使檢驗(yàn)人員可直接選用鑒別培養(yǎng)基和專用分離分離培養(yǎng)基接種分離培養(yǎng)，縮短培養(yǎng)時(shí)間，避免培養(yǎng)的盲目性。

參考文獻(xiàn)

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