尿碘測定的注意事項及質(zhì)量控制

(雅安市疾病預(yù)防控制中心，四川 雅安 625000)

1 采樣要求

1.1 采樣器具的準備 器具：可用玻璃瓶或聚乙烯塑料瓶，必須能夠用塞或蓋緊密密封，用前無碘化處理：10%鹽酸浸泡(必要時還可用硫代硫酸鈉溶液泡)，然后用自來水和去離子水沖洗，晾干備用。

1.2 采樣量 推薦50～100mL

1.3 樣品的采集與保存

1.3.1 依據(jù)GB/T5750.5～2006

1.3.2 采樣后應(yīng)盡快送實驗室檢測，不能盡快檢測可4℃冰箱保存，若超過一周需低溫冷凍保存。

2 實驗前準備

2.1 實驗環(huán)境 防止碘污染，實驗室環(huán)境嚴格避免碘污染，實驗室內(nèi)不允許常量碘測定或用存放其他碘試劑，實驗室與采血室間也要保持足夠距離，避免碘消毒劑影響。為防止碘污染，實驗前用1%硫代硫酸鈉溶液擦拭桌面。

2.2 儀器試劑

2.2.1 玻璃器皿的清洗 初次使用或長時間不用的玻璃器皿經(jīng)1+1硝酸 浸泡24h后，先用去離子水沖洗2～3遍，再將這些玻璃器皿用1%硫代酸鈉溶液浸泡12h以上，然后用去離子沖洗干凈，在溫室下晾干備用。所有的玻璃皿不能用鉻酸洗液浸泡，同時還要慎用消毒劑和清洗劑。

2.2.1.1 器皿注意切不可與測定碘鹽的玻璃器皿混用；另外水質(zhì)衛(wèi)生檢驗的氨氮納氏比色法、砷的銀鹽比色法使用的試劑含高濃度的碘離子，這些檢驗工作所用的器皿不可與尿碘檢驗的混用，對此還須注意避免這些試劑對光度計比色皿的污染

2.2.1.2 配制試劑所用的氫氧化鈉、氯化鈉較可能碘雜質(zhì)較高，所以宜選用合適的并留用(專用)；亦有發(fā)現(xiàn)某一過硫酸銨固體、三氧化二砷試劑中含較高碘雜質(zhì)。

2.2.1.3 過硫酸銨的性質(zhì)不是太穩(wěn)定，見光容易分解，應(yīng)該存放在4℃冰箱內(nèi)；硫酸鈰試劑較易受潮，會影響配制濃度，將試劑放于干燥內(nèi)或經(jīng)100℃干燥后配制使用；三氧化二砷有劇毒，剩余的試劑不要隨便廢棄，溶液污染環(huán)境；碘標準使用液最好在臨用前配制，以防止低濃度的碘被存放容器吸附引起偏差，存放盡量不要與其他試劑一起存放。

2.2.1.4 試劑的純度要符合測定方法的要求，同批樣品的測定所用試劑必須是同一批號，且最好嚴格按要求一次性配好，而每一次試劑的配制做好由專人負責(zé)，盡可能避免配制條件的差異帶來的誤差。

2.2.2 實驗用水：建議使用電阻高于100萬歐姆的去離子水，而蒸餾水需要進行無碘化處理。

2.2.3 器皿校準 刻度吸管、移液管、加樣槍使用前要校準，才能保證結(jié)果準確。

3 分析過程的控制

3.1 水浴溫度 30℃，波動范圍正負1℃。

3.2 排管 因為砷鈰反應(yīng)時褪色反應(yīng)，碘濃度越高，褪色越快，因此將標準系列溶液按碘濃度由高到低排列，各試劑均按此順序加入。

3.3 取樣 取250ul尿樣最好用刻度吸管吸取，用加樣槍取樣尿液有可能打不干凈，塑料吸頭有時會吸附少許尿液，導(dǎo)致測定結(jié)果不準確。

3.4 消化 盡可能使用消解儀中部消化樣品，最好對全部消解儀孔進行溫度檢測，溫度相差大于1℃時應(yīng)標出不用。

3.4.1 樣品消化時的消化管孔徑大小、管壁薄厚盡可能一致；以減輕少因受熱不均勻而產(chǎn)生的誤差；消解儀消化溫度適中，過高消化樣液損失過多，過低消化不完全；條件不允許時刻采用電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱進行消化，因為箱體內(nèi)裝有鼓風(fēng)系統(tǒng)，樣品消化后消化液的最終體積也非常接近。

3.4.2 因消化過程無終點指示以及消化時間、溫度又批間差異，每批樣品消化要與標準系列及空白試驗同時進行，以減少誤差，提高試驗的標準性。如果兩臺恒溫消解儀同時消化，每臺消解儀應(yīng)分別設(shè)置一套空白盒標準系列。

3.5 (1)加入硫酸鈰銨溶液時，要求準確、快速，加樣槍要求校準。由于硫酸鈰溶液容易附壁，所以加入時不能使硫酸鈰試劑接觸反應(yīng)管內(nèi)壁，加后必須立即充分搖勻放回水浴中，在吸取該溶液的時候要防止產(chǎn)生氣泡，以免影響加入量。(2)加入硫酸鈰銨溶液后的砷鈰反應(yīng)還可在20～35℃之間的某一穩(wěn)定的室溫(或控溫)條件中可進行；每管加入硫酸鈰銨的時間間隔不需要固定為30s,亦可以是1min，只要時間間隔保持一致即可，如果人手少，每次做樣不要超過80份，加入硫酸鈰銨溶液時間間隔大于30s,不超過1min，因為后面的管子在加硫酸鈰銨溶液時，前面的標準已經(jīng)到比色時間。

3.6 終點判斷 反應(yīng)時間以監(jiān)控碘標準濃度300ug/L管的吸光度達到0.15～0.20時，依順序進行廣度測定[3]。實際操作時過早比色碘標準濃度300ug/L管的吸光度大于0.20，標準曲線相關(guān)系數(shù)r有可能達不到0.999，過遲比色碘標準濃度300ug/L管的顏色有可能退完，標準曲線做不出來，整個試驗得重做。

3.6.1 建議標準曲線碘標準濃度300ug/L做平行樣，筆者發(fā)現(xiàn)25分鐘時要密切注意300ug/L管顏色深淺，過深繼續(xù)在水浴反應(yīng)，當300ug/L管淡黃色拿出來比色，如果吸光度在0.15～0.20時，開始比色；如果300ug/L管的吸光度大于0.20，重新把它放到水浴中繼續(xù)反應(yīng)；如果300ug/L管的吸光度小于0.15，將這管舍去馬上將另一管300ug/L作為第一管開始比色。

3.7 比色 比色時，每管檢測的時間間隔應(yīng)與加硫酸鈰銨溶液的時間間隔一致。

3.8 當按照尿碘測定方法操作結(jié)果出現(xiàn)工作曲線碘空白管的吸光值很小時(例如30℃條件下砷鈰反應(yīng)30min時碘空白管的測定吸光度<0.7)。先檢查光度計波長是否準確；是否使用了已風(fēng)化或潮解的過硫酸銨固體試劑；是否配制得的Ce4+溶液濃度偏低；再檢查檢測體系是否存在碘污染，并予以消除。這里的檢測體系包括：所用試劑、水、所用器皿、實驗室環(huán)境。

3.9 重視利用國家凍干尿碘標準物進行檢測質(zhì)量控制，以便發(fā)現(xiàn)誤差，采取措施消除誤差。

4 總結(jié)

尿碘砷鈰催化分光光度法測定干擾因素很多，實驗前一定要保證環(huán)境無碘，所用的器具要進行無碘化處理，所用的試劑和水不得含碘，保持消化溫度100℃，過高過低測得的碘含量都會偏低，每管比色的時間間隔應(yīng)與加硫酸鈰銨溶液的時間間隔一致，碘標準濃度300ug/L做平行樣，終點判斷在加入硫酸鈰銨25分鐘時密切觀察300ug/L管顏色深淺，以它的吸光度達到0.15～0.20時開始比色，每次實驗要帶內(nèi)部質(zhì)控[4]，這樣才能保證檢測結(jié)果準確可靠。

[1]李紅梅. 尿碘測定的質(zhì)量控制— 過硫酸銨消化砷鈰催化分光光度法[J].基層醫(yī)學(xué)論壇，2009, 13(17) : 1672-1673.

[2] 孫亞維,陳科杰,等. 尿碘檢測實驗室的質(zhì)量控制分析[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志，2011(4):1016-1016.

[3]中國疾病預(yù)防控制中心地方病控制中心 WS/T107-2006尿中碘的砷鈰催化分光光度測定方法[R].地方病學(xué)，2008.6.102-104.

[4] 顧儀, 郭威. 尿碘實驗室檢測質(zhì)量保證的現(xiàn)狀及對策[J].中國公共衛(wèi)生2001.17(3)：268-268.