長(zhǎng)鏈非編碼RNA在胃癌發(fā)生發(fā)展中的作用

蔣 葵

(大連醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院 腫瘤科，遼寧 大連 116027)

胃癌是全世界范圍內(nèi)常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，我國(guó)胃癌的發(fā)病率和死亡率均高居第二位[1]，胃癌患者的總體預(yù)后較差，臨床缺乏有效的生物標(biāo)記物。長(zhǎng)鏈非編碼RNA(lncRNA)是一類長(zhǎng)度大于200 nt非編碼RNA[2]，一度被認(rèn)為是基因轉(zhuǎn)錄的噪音，但近年來(lái)的研究顯示其作為重要的基因表達(dá)調(diào)控元件，在表觀遺傳學(xué)、轉(zhuǎn)錄及轉(zhuǎn)錄后水平等環(huán)節(jié)發(fā)揮調(diào)控作用，對(duì)細(xì)胞增殖、凋亡、血管生成、促進(jìn)轉(zhuǎn)移等方面具有重要影響[3]。越來(lái)越多的研究顯示，lncRNA可能成為腫瘤診斷及預(yù)后的生物標(biāo)記物。

1 LncRNA的分類及功能

根據(jù)lncRNA與所在位置相鄰基因的關(guān)系，lncRNA常分為7類[3]：(1)反向lncRNA(divergent lncRNA，pancRNA)：它與互補(bǔ)編碼蛋白的基因具有相同的啟動(dòng)子，但是與轉(zhuǎn)錄方向相反；(2)同向lncRNA(convergent lncRNA)：其轉(zhuǎn)錄方向與互補(bǔ)鏈編碼蛋白的基因轉(zhuǎn)錄方向相對(duì)；(3)基因間lncRNA(intergenic lncRNA,lincRNA)：位于距其他基因較遠(yuǎn)的位置，長(zhǎng)度常大于10 kb，如果來(lái)源于具有高H3K4me3/H3K4me1比值的啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，稱plncRNA；(4)重疊lncRNA(overlapping lncRNA)：與其他基因重疊，在同一條鏈或者互補(bǔ)鏈上；(5)單向-雙向增強(qiáng)子RNA(unidtrectinal-bidirectional enhancer RNAs)，來(lái)源于增強(qiáng)子轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物稱eRNAs，具有雙向轉(zhuǎn)錄，而來(lái)自低H3K4me3/H3K4me1比值的啟動(dòng)子單向轉(zhuǎn)錄稱elncRNA；(6)內(nèi)含子lncRNA(intronic lncRNA)：來(lái)自另一基因內(nèi)含子轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物；(7)miRNA宿主基因(miRNA host gene)。

目前大量研究顯示，lncRNA的作用主要集中于以下方面[4]：(1)激活基因；(2)抑制基因表達(dá)；(3)促進(jìn)染色體修飾；(4)介導(dǎo)染色體重塑；(5)調(diào)節(jié)mRNA剪接；(6)miRNA海綿；(7)調(diào)節(jié)翻譯，降解；(8)改變蛋白質(zhì)定位，調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)活性，蛋白質(zhì)復(fù)合物的結(jié)構(gòu)之一；(9)產(chǎn)生小RNA前體。

2 LncRNA與胃癌

近年來(lái)運(yùn)用RNA-seq等技術(shù)對(duì)胃癌組織標(biāo)本和胃癌細(xì)胞做了大量研究，發(fā)現(xiàn)許多l(xiāng)ncRNA對(duì)胃癌的生物學(xué)行為有著重要作用，對(duì)胃癌的診治有重要的臨床意義。

2.1 H19

H19是位于染色體11p15.5上H19/IGF2基因印跡簇的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，擁有35個(gè)開(kāi)放閱讀框卻沒(méi)有對(duì)應(yīng)的蛋白，故被認(rèn)為是lncRNA。

H19可促進(jìn)細(xì)胞增殖。在胃癌組織和多個(gè)胃癌細(xì)胞系中顯著上調(diào)[5]，Yang等[6]發(fā)現(xiàn)在AGS細(xì)胞系中上調(diào)H19后細(xì)胞增殖增加，沉默H19后可誘導(dǎo)凋亡。其生物學(xué)功能可通過(guò)H19/miR-65軸進(jìn)行調(diào)節(jié)：在胃癌細(xì)胞系中H19可通過(guò)miR-675靶向調(diào)節(jié)RUNX1(runt domain transcription factor 1)基因調(diào)節(jié)胃癌細(xì)胞的生長(zhǎng)[7]。在MKN45細(xì)胞系敲除H19/miR-675和SGC7901過(guò)表達(dá)H19/miR-675模型中，發(fā)現(xiàn)H19通過(guò)結(jié)合ISM1使其上調(diào)，通過(guò)miR-675間接抑制CALN1(calneuron 1)，從而促進(jìn)腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移[8]。此外在胃癌中H19除靶向調(diào)節(jié)RUNX1和CALN1，H19/miR675軸通過(guò)RUNX1還可以激活A(yù)kt/mTOR通路[9]。

H19與胃癌患者預(yù)后及早期診斷有關(guān)。Zhang等[10]研究顯示胃癌患者中H19高表達(dá)與生存期短相關(guān)，是總生存的獨(dú)立預(yù)后因子，可能與c-Myc誘導(dǎo)有關(guān)。有研究通過(guò)ROC分析胃癌患者外周血中H19發(fā)現(xiàn)，患者術(shù)后外周血中的H19明顯下降，提示H19可作為胃癌診斷和早期胃癌篩選的潛在指標(biāo)[11]。

在中國(guó)胃癌患者中，與H19相關(guān)的SNP檢測(cè)提示CT+TT rs217727和CT+TT rs2839698者胃癌風(fēng)險(xiǎn)明顯增加，提示H19還與胃癌易感性可能有關(guān)[12]。

2.2 HOTAIR(HOX antisense intergenic RNA)

HOTAIR是由Rinn等[13-14]于2007年發(fā)現(xiàn)長(zhǎng)度為2158nt受HOX基因控制的lncRNA，HOTAIR不受HOXC基因簇影響，但是可作用于HOXD基因簇一段40 kb區(qū)域。

HOTAIR增高水平與胃癌臨床病理特征有關(guān)。其在胃癌組織和胃癌細(xì)胞中較癌旁組織表達(dá)明顯升高，與TNM分期，脈管癌栓，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，是預(yù)后不佳的指標(biāo)[15]。Endo等[15]根據(jù)HOTAIR在胃癌組織中的表達(dá)水平分為高表達(dá)組(HOTAIR/GAP-DH>1)和低表達(dá)組(HOTAIR/GAPDH<1)，高表達(dá)組較低表達(dá)組靜脈受侵高，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移高，生存率低，進(jìn)一步對(duì)KATO-III胃癌細(xì)胞進(jìn)行HOTAIR siRNAs轉(zhuǎn)染，發(fā)現(xiàn)克隆形成減少，將過(guò)表達(dá)HOTAIR的MKN74和低表達(dá)HOTAIR的KATO-III細(xì)胞分別注入裸鼠體內(nèi)，發(fā)現(xiàn)對(duì)應(yīng)的肝轉(zhuǎn)移增加而腹膜轉(zhuǎn)移減少。Liu等[16]還發(fā)現(xiàn)HOTAIR作為ceRNA下調(diào)miR-331-3p，從而解除HER2抑制，轉(zhuǎn)錄后水平明顯升高，HOTAIR/HER2陽(yáng)性表達(dá)與進(jìn)展期胃癌相關(guān)。

HOTAIR還與胃癌細(xì)胞侵襲、凋亡及轉(zhuǎn)移能力有關(guān)。應(yīng)用siRNA技術(shù)將AGS細(xì)胞HOTAIR下調(diào)，發(fā)現(xiàn)腫瘤侵襲能力降低，與侵襲有關(guān)的MMP1、MMP3降低，間質(zhì)指標(biāo)vimentin和N-cadherin下降，而誘發(fā)上皮性指標(biāo)E-cadherin增加。沉默HOTAIR可調(diào)節(jié)Snail和EMT相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子使上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-to-mesenchymal transition,EMT)減少[17]。Lee等[18]發(fā)現(xiàn)在MKN28、MKN74和KATO-III細(xì)胞中沉默HOTAIR后可以誘導(dǎo)凋亡，降低癌細(xì)胞增殖。HOTAIR高表達(dá)的BGC-823細(xì)胞經(jīng)shRNA沉默HOTAIR后，發(fā)現(xiàn)PCBP1(Poly r(C)-binding protein)下調(diào)幅度最大，提示HOTAIR可能通過(guò)結(jié)合PCBP1從而促進(jìn)胃癌生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移[19]。

此外，Pan等[20]研究了SNP對(duì)HOTAIR表達(dá)/功能和胃癌風(fēng)險(xiǎn)的影響，通過(guò)分析中國(guó)800例胃癌患者和1600例對(duì)照患者基因，篩選出易感性SNP rs920778，rs920778 TT 攜帶者比CC攜帶者患胃癌風(fēng)險(xiǎn)高1.66-1.87倍，在胃癌細(xì)胞和組織中也發(fā)現(xiàn)T等位基因攜帶者的HOTAIR表達(dá)水平更高，而Du等[21]在中國(guó)人中發(fā)現(xiàn)，HOTAIR另一SNP rs4759314與胃癌風(fēng)險(xiǎn)增加有關(guān)，其AG基因型HOTAIR表達(dá)較AA型更高，可作為預(yù)測(cè)胃癌的指標(biāo)。

HOTAIR還與胃癌化療耐藥有關(guān)，Yan等[22]發(fā)現(xiàn)HOTAIR在順鉑耐藥的胃癌細(xì)胞中高表達(dá)?？赡軝C(jī)制是其作為ceRNA抑制miR-126表達(dá)，促進(jìn)VEGFA和PIK3R2表達(dá)，激活PI3K/AKT/MRP1，從而促使胃癌順鉑耐藥，這一機(jī)制提示HOTAIR可作為治療靶點(diǎn)之一以克服胃癌鉑耐藥。

2.3 CCAT1(colon cancer-associated transcript-1)

CCAT1是近年新發(fā)現(xiàn)的lncRNA，被發(fā)現(xiàn)在結(jié)腸癌中上調(diào)。CCAT1位于8q24.21，長(zhǎng)度2628 nt，含有3個(gè)ORFs但不能翻譯成蛋白質(zhì)。

CCAT1在多種腫瘤組織中高表達(dá)，與腫瘤發(fā)生發(fā)展有關(guān)，提示其具有癌基因功能。有研究通過(guò)檢測(cè)19例胃癌患者的CCAT1水平，發(fā)現(xiàn)胃癌組織中CCAT1表達(dá)比對(duì)照組高10.8倍，復(fù)發(fā)性胃癌表達(dá)最高，同時(shí)也檢測(cè)到AGS細(xì)胞中CCAT1高表達(dá)，提示CCAT1可作為胃癌早期診斷及隨訪的指標(biāo)[23]。

CCAT1可以促進(jìn)胃癌細(xì)胞增殖及遷移，而相關(guān)的作用機(jī)制探索甚少。在胃癌及多種腫瘤中發(fā)現(xiàn)cMyc能夠直接與CCAT1啟動(dòng)子的E-box結(jié)合[24]；另一機(jī)制與miR490/ hnRNPA1zhou軸有關(guān)，CCAT1在胃癌細(xì)胞中可以調(diào)節(jié)miR490，兩者呈負(fù)相關(guān)，推測(cè)CCAT1具有miR490結(jié)合位點(diǎn)，而抑制miR490可解除沉默CCAT1導(dǎo)致的胃癌細(xì)胞遷移受抑制，miR490可與hnRNPA1 mRNA 3’-UTR結(jié)合，兩者之間存在負(fù)相關(guān)，CCAT1表達(dá)與hnRNPA1表達(dá)正相關(guān)，說(shuō)明通過(guò)CCAT1/miR490/hnRNPA1軸可以促進(jìn)胃癌細(xì)胞的遷移[25]。

2.4 MALAT-1(metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1)

MALAT-1最初在肺癌被發(fā)現(xiàn)，是位于11q13、長(zhǎng)度8700nt的lncRNA，可預(yù)測(cè)早期非小細(xì)胞肺癌轉(zhuǎn)移和生存。

研究顯示MALAT1在細(xì)胞增殖、遷移和轉(zhuǎn)移有重要作用，在轉(zhuǎn)錄水平上對(duì)多種基因有調(diào)節(jié)作用[26]。MALAT1在多種胃癌細(xì)胞系中呈高表達(dá)，可促進(jìn)癌細(xì)胞增殖，作用機(jī)制多種多樣。MALAT1可誘導(dǎo)核內(nèi)SF2/ASF過(guò)表達(dá)，敲除MALAT1可使SF2/ASF(pre-mRNA-splicing factor 2/alternative splicing factor，即serine/arginine splicing factors)表達(dá)明顯下降，而SF2/ASF過(guò)表達(dá)卻不會(huì)影響細(xì)胞增殖，提示MALAT1對(duì)胃癌增殖的機(jī)制一部分是通過(guò)調(diào)節(jié)SF2/ASF實(shí)現(xiàn)[27]。通過(guò)RIP-seq技術(shù)發(fā)現(xiàn)MALAT1可以與EZH2(enhancer of zeste homolog 2，polycomb repressive complex 2催化亞基)結(jié)合，抑制腫瘤抑制因子PCDH10，從而促進(jìn)胃癌細(xì)胞的遷移、侵襲和轉(zhuǎn)移[28]。沉默MALAT1后，MALAT1對(duì)胃癌的侵襲和遷移作用均減弱，而同時(shí)沉默EGFL7(epidermal growth factor-like domain-containing protein 7)后，上述作用可被反轉(zhuǎn)，進(jìn)一步行ChIP檢測(cè)顯示MALAT1調(diào)節(jié)EGFL3表達(dá)是通過(guò)改變EGFL7啟動(dòng)子的H3組蛋白乙?；綄?shí)現(xiàn)的[29]。

MALAT1除了在胃癌組織和細(xì)胞中高表達(dá)，還在轉(zhuǎn)移性胃癌的組織及外周血中高表達(dá)，與預(yù)后差相關(guān)。MALAT1與miRNA互相作用是調(diào)節(jié)胃癌生物學(xué)的常見(jiàn)機(jī)制，胃癌細(xì)胞中MALAT1的異常與miR-122/IGF-1R(insulin-like growth factor 1 receptor)通路有關(guān)，其中miR-122與MALAT1負(fù)相關(guān)，而IGF-1R則正相關(guān)[30]，除了miR-122，參與調(diào)節(jié)的其他通路包括miR-202/Gli2(一種鋅指蛋白)、miR-1297/HMGB2(high-mobility group protein B2)[31-32]。沉默MALAT1可降低snail、N-cadherin以及升高E-cadherin，這些Wnt/β-catenin通路的改變，提示MALAT1可能參與EMT的調(diào)節(jié)[33]。MALAT1還參與VE-cadherin/β-catenin復(fù)合物、ERK/MMP和FAK/paxillin等信號(hào)通路調(diào)節(jié)血管生成擬態(tài)(VM)和血管生成從而促進(jìn)胃癌發(fā)生和發(fā)展[34]。

2.5 GAPLINC(gastric adenocarcinoma predictive long intergenic noncoding)

GAPLINC于2014年首次報(bào)道，通過(guò)分析胃癌和對(duì)照組lncRNA微芯片結(jié)果，發(fā)現(xiàn)uc002kmd.1上調(diào)最明顯，根據(jù)預(yù)測(cè)分析，命名為GAPLINC。GAPLINC與胃癌患者預(yù)后差有關(guān)系，可促使胃癌細(xì)胞增殖、侵襲。機(jī)制一是由于其“分子海綿”的功能，可以競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合miR-211-3p形成RNA誘導(dǎo)沉默復(fù)合物(RISC)，由于miR-211-3p可靶向降解CD44，故miR-211-3p減少導(dǎo)致CD44表達(dá)上調(diào)[35]。另一機(jī)制與缺氧有關(guān)，GAPLINC在常氧狀態(tài)下即可促進(jìn)細(xì)胞生存及抑制細(xì)胞死亡，同時(shí)伴有HIF-1α上調(diào)。在缺氧條件下，GAPLINC表達(dá)上調(diào)，促進(jìn)癌細(xì)胞增殖更加明顯，而敲除GAPLINC后，缺氧下的改變比常氧更加明顯。沉默GAPLINC后通過(guò)miR-211下調(diào)Bcl-2、上調(diào)Bax、Bcl-2/Bax比值下降等凋亡相關(guān)指標(biāo)，在缺氧下消除HIF-1α或者HIF-2α后GAPLINC可被下調(diào)(常氧下無(wú)明顯改變)，其中HIF-1α作用更明顯，HIF-1α可以與GAPLINC啟動(dòng)子區(qū)域結(jié)合，從而GAPLINC通過(guò)缺氧途徑調(diào)節(jié)胃癌細(xì)胞的增殖[36]。

2.6 HULC(highly upregulated in liver cancer)

HULC最初于2007年在肝細(xì)胞癌中發(fā)現(xiàn)有特異性上調(diào)，長(zhǎng)約1600 nt，包含2個(gè)外顯子，可作為miR372的分子海綿，調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄后的基因表達(dá)。在胃癌組織及胃癌細(xì)胞系中，HULC促進(jìn)胃癌細(xì)胞增殖、侵襲的機(jī)制可能與EMT和凋亡有關(guān)，HULC過(guò)表達(dá)后LC3-II/LC3-I比值升高(microtubule-associated protein 1 light chain 3)，說(shuō)明其通過(guò)激活自噬抑制凋亡，而HULC被沉默后E-cadherin上調(diào)、vimentin下調(diào)，EMT相關(guān)指標(biāo)出現(xiàn)變化，提示HULC參與調(diào)節(jié)EMT[37]。

胃癌患者外周血中可檢測(cè)到穩(wěn)定的循環(huán)HULC，高表達(dá)水平與腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、TNM分期以及幽門螺桿菌感染有關(guān)，診斷的AUC高達(dá)0.888，高于CEA和CA72-4診斷價(jià)值，高表達(dá)HULC組生存期較短，說(shuō)明HULC可作為胃癌診斷及預(yù)后的指標(biāo)之一[38]。

2.7 PVT1(plasmacytoma variant translocation 1)

PVT1最初發(fā)現(xiàn)于1984年，位于8q24，長(zhǎng)度超過(guò)300 kb，在8號(hào)染色體上PVT1基因座產(chǎn)生的嵌合轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，可能通過(guò)距離上游57 kb的MYC介導(dǎo)其癌基因效應(yīng)[39]，PVT1在多種腫瘤中有癌基因作用，其機(jī)制與PVT1-p53-MYC等基因網(wǎng)絡(luò)可能有關(guān)，近年發(fā)現(xiàn)在胃癌中有重要作用。

PVT1在胃癌組織中高表達(dá)與化療耐藥顯著相關(guān)，通過(guò)分析 lncRNA芯片數(shù)據(jù)，發(fā)現(xiàn)PVT1在紫杉醇耐藥的SGC7901中比SGC7901更高，提示PVT1可能與胃癌紫杉醇耐藥有關(guān)[40]。與順鉑未耐藥的胃癌組織和細(xì)胞相比，PVT1在耐藥的胃癌組織和細(xì)胞中均較高表達(dá)，進(jìn)而導(dǎo)致MDR1、MRP、mTOR和HIF-1α表達(dá)增加，提示PVT1可以促進(jìn)胃癌多藥耐藥，也是潛在逆轉(zhuǎn)耐藥的靶點(diǎn)[41]。

PVT1發(fā)揮癌基因功能還與FOXM1(forkhead box protein M1)相關(guān)，PVT1可以直接與FOXM1蛋白結(jié)合并增加其轉(zhuǎn)錄后表達(dá)，同時(shí)FOXM1也能直接與PVT1啟動(dòng)子結(jié)合并激活其轉(zhuǎn)錄，形成正反饋環(huán)路，最終導(dǎo)致胃癌細(xì)胞的增殖和侵襲[41]。

對(duì)80例胃癌患者進(jìn)行多因素分析后，發(fā)現(xiàn)PVT1還是總生存的獨(dú)立預(yù)后因子，進(jìn)一步行RIP證實(shí)PVT1與EZH2相關(guān)，PVT可使胃癌細(xì)胞停滯于G1/S，而沉默PVT后p15和p16表達(dá)增加，提示PVT可能通過(guò)抑制p15、p16作用于細(xì)胞周期[42]。

2.8 ANRIL(CDKN2B antisense RNA 1)

ANRIL是INK4B-ARF-INK4A基因座重疊的長(zhǎng)鏈非編碼反義RNA，轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物可以促進(jìn)/維持CDKN2B(INK4b)基因的表觀遺傳狀態(tài)，是INK4b的反義轉(zhuǎn)錄物，其長(zhǎng)度約3.8 kb，可與PRC2結(jié)合發(fā)揮生物學(xué)作用，對(duì)癌細(xì)胞增殖，侵襲及遷移有重要作用，在不同腫瘤中有抑癌基因或者癌基因作用，目前在胃癌中認(rèn)為發(fā)揮癌基因作用。

通過(guò)檢測(cè)120例胃癌患者的ANRIL表達(dá)，發(fā)現(xiàn)ANRIL高表達(dá)與TNM和腫瘤大小有關(guān)，是生存期的獨(dú)立預(yù)后因子。ANRIL促進(jìn)胃癌細(xì)胞增殖，機(jī)制可能是ANRIL結(jié)合PRC2抑制miR-99a/miR-449a，從而調(diào)節(jié)mTOR和CDK6/E2F1路徑，相互間形成正反饋循環(huán)[43]。ANRIL的啟動(dòng)子區(qū)域可被TET2(ten-eleven translocation)結(jié)合，調(diào)節(jié)胃癌細(xì)胞的增殖克隆[44]。

ANRIL還與胃癌化療多藥耐藥相關(guān)，在分別對(duì)順鉑和氟尿嘧啶耐藥的胃癌患者與胃癌細(xì)胞中，ANRIL均高表達(dá)，當(dāng)沉默ANRIL后，發(fā)現(xiàn)耐藥細(xì)胞分別恢復(fù)了對(duì)順鉑和氟尿嘧啶的敏感性，進(jìn)一步檢測(cè)發(fā)現(xiàn)MDR1和MRP1在mRNA及蛋白水平均下調(diào)，提示ANRIL可通過(guò)MDR1和MRP1增加胃癌細(xì)胞的耐藥性，提示ANRIL是潛在逆轉(zhuǎn)胃癌耐藥的靶點(diǎn)之一[45]。

2.9 TINCR(terminal differentiation-inducing non-protein coding RNA，PLAC2)

TINCR位于染色體19號(hào)，產(chǎn)生3.7 kbp轉(zhuǎn)錄物，與上皮分化有關(guān)。TINCR與STAU1(staufen1)相結(jié)合后，可介導(dǎo)分化相關(guān)mRNA(如KRT80)的穩(wěn)定性，因而在體細(xì)胞組織分化中有重要的作用[46]。在胃癌中，TINCR表達(dá)被核轉(zhuǎn)錄因子SP1誘導(dǎo)，沉默TINCR后可抑制細(xì)胞的增殖，克隆，促進(jìn)凋亡等，進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)TINCR可以結(jié)合STAU1蛋白，影響KLF2 mRNA表達(dá)，進(jìn)而調(diào)節(jié)CDKN1A/P21和CDKN2B/P15轉(zhuǎn)錄，最終影響胃癌細(xì)胞的增殖和凋亡[47]。在中國(guó)漢族602例胃癌患者中分析TINCR的SNP rs8113645 GA/AA和rs2288947 AG/GG和胃癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)降低相關(guān)[48]。

2.10 GAS5(growth arrest-specific transcript)

GAS5長(zhǎng)度約650bp，含有12個(gè)外顯子，在乳腺癌和頭頸部腫瘤等多種腫瘤中表達(dá)缺失，提示具有抑癌基因的功能。分析89例胃癌組織和5種胃癌細(xì)胞系，發(fā)現(xiàn)GAS5均明顯下調(diào)，而較低的GAS5表達(dá)水平與較差的DFS和OS有關(guān)，過(guò)表達(dá)GAS5可抑制胃癌細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖，誘導(dǎo)凋亡，相反抑制GAS5則可促使胃癌細(xì)胞增殖，這種抑癌基因作用可能部分地通過(guò)調(diào)節(jié)E2F1和P21實(shí)現(xiàn)[49]。GAS5下調(diào)后可導(dǎo)致YBX1(Y-box binding protein 1)以及p21表達(dá)下降，解除G1停滯，提示GAS5可以通過(guò)YBX1/p21通路抑制胃癌細(xì)胞的增殖[50]。

2.11 MEG3(maternally expressed gene 3)

MEG3是位于14q32.3上DLK1-MEG3基因座地印跡基因，含有10個(gè)外顯子，長(zhǎng)度1600nt，在許多類型腫瘤組織和癌細(xì)胞系中缺失表達(dá)，是具有抑癌基因作用的lncRNA，明顯增加p53表達(dá)。MEG主要通過(guò)與miRNA相互作用，調(diào)節(jié)胃癌細(xì)胞生物學(xué)行為。

MEG3表達(dá)在胃癌組織較癌旁組織顯著下降，MEG3表達(dá)水平與TNM分期，浸潤(rùn)深度，腫瘤大小相關(guān)，MEG表達(dá)水平越低，預(yù)后越差，敲除MEG3后可促進(jìn)胃癌細(xì)胞的增殖，抑制凋亡，下調(diào)p53表達(dá)[51]。MEG在胃癌細(xì)胞中可被miR148a，miR-141抑制而下調(diào)，其中涉及的機(jī)制可能分別是miR148a調(diào)節(jié)其靶基因DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶1和miR-141下調(diào)E2F2表達(dá)，最終MEG受到抑制，促進(jìn)胃癌增殖[52-53]。MEG可作為競(jìng)爭(zhēng)性內(nèi)源RNA(ceRNA)結(jié)合miR-181，進(jìn)而調(diào)節(jié)miR-181靶基因Bcl-2，從而影響細(xì)胞凋亡，最終調(diào)節(jié)胃癌細(xì)胞的增殖，遷移，侵襲和凋亡[54]。MEG作為miR-770的宿主基因，兩者在胃癌組織和細(xì)胞系表達(dá)下調(diào)，它們的表達(dá)水平與TNM分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，過(guò)表達(dá)的MEG和miR-770抑制胃癌細(xì)胞的增殖和侵襲，推測(cè)兩者可能發(fā)揮抑癌基因的作用，進(jìn)一步研究表明近端啟動(dòng)子和增強(qiáng)子的過(guò)甲基化可能是導(dǎo)致兩者失活的關(guān)鍵機(jī)制[55]。

2.12 ZFAS1(zinc finger antisense 1)

ZFAS1是近年新發(fā)現(xiàn)的lncRNA，可調(diào)節(jié)齒齦發(fā)展和乳腺上皮細(xì)胞分化。目前在胃癌中研究較少。ZFAS1在胃癌組織和細(xì)胞中均高表達(dá)，ZFAS1敲除后可胃癌細(xì)胞增殖抑制，誘導(dǎo)凋亡，抑制EMT，ZFAS1可被外泌體運(yùn)輸增強(qiáng)胃癌細(xì)胞的增殖和遷移[56]。ZFAS1在胃癌患者的循環(huán)腫瘤細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)與EMT有關(guān)，ZFAS1還通過(guò)與EZH2和LSD1/CoREST作用，抑制KLF2和NKD2的轉(zhuǎn)錄，促進(jìn)胃癌細(xì)胞增殖[57-58]。

3 小結(jié)與展望

近年來(lái)，lncRNA在胃癌中的研究與日俱增，對(duì)了解胃癌的分子生物學(xué)越來(lái)越重要。本文回顧了近年來(lái)重要的、與胃癌相關(guān)的lncRNA，發(fā)現(xiàn)lncRNA對(duì)胃癌細(xì)胞機(jī)制的影響非常復(fù)雜，包括lncRNA作為“分子海綿”與miRNA互相作用，直接或間接調(diào)節(jié)靶基因，與蛋白質(zhì)結(jié)合形成復(fù)合物，表現(xiàn)內(nèi)源競(jìng)爭(zhēng)性RNA特征，介導(dǎo)凋亡和EMT，參與胃癌的多藥耐藥等，但目前很多l(xiāng)ncRNA在胃癌中的作用機(jī)制仍不明確，亟待深入研究。另外，大量的研究表明lncRNA在胃癌組織異常表達(dá)，與胃癌患者的診斷和預(yù)后明顯有關(guān)，可作為胃癌診斷和預(yù)后的潛在有效指標(biāo)，有著重要的臨床意義。隨著lncRNA信息學(xué)在胃癌上的逐步完善豐富，今后對(duì)胃癌的診治將會(huì)產(chǎn)生重大影響，可能改寫目前胃癌的診治模式，甚至指導(dǎo)胃癌的診療。