內(nèi)蒙古紫草化學(xué)成分研究

廖矛川，姚　遠(yuǎn)，陳　鳳，張雨馨

(中南民族大學(xué) 藥學(xué)院，武漢 430074)

中國(guó)藥典所載紫草為紫草科紫草屬植物紫草(LithospermumerythorhizonSieb.etZucc.)、新疆紫草[Arnebiaeuchroma(Royle)Johnst]和內(nèi)蒙古紫草(ArnebiaguttataBunge)的干燥根[1], 傳統(tǒng)中醫(yī)認(rèn)為其性甘、咸、寒,歸心、肝經(jīng),具有涼血活血,解毒透疹的功效[3].紫草的化學(xué)成分主要為萘醌類(lèi)、單萜苯酚及苯醌類(lèi)、酚酸及其鹽類(lèi)、生物堿類(lèi)、脂肪族及脂類(lèi)化合物[4].現(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)紫草具有很好的抗炎、抗病毒、抗腫瘤、避孕及止血免疫調(diào)節(jié)等功能，對(duì)治療艾滋病、癌癥等具有積極療效[5]. 目前已有學(xué)者對(duì)新疆紫草做了大量研究，但對(duì)內(nèi)蒙古紫草的化學(xué)成分及生藥學(xué)方面的研究很少，至今未見(jiàn)詳細(xì)報(bào)道. 本實(shí)驗(yàn)中采用系統(tǒng)溶劑提取分離法，運(yùn)用硅膠柱色譜，高效液相色譜等技術(shù)，從氯仿和乙酸乙酯萃取部位共分離得到6個(gè)化合物，通過(guò)現(xiàn)代波譜技術(shù)鑒定其結(jié)構(gòu)分別為：3-乙酰齊墩果酸(1)、Jockinolide E(2)、Clavilactone A(3)、5,8-O-二甲基-11-脫氧阿卡寧(4)、5, 4′-二羥基-7-甲氧基-二氫黃酮(5)、Glabridin(6)(圖1).

1　實(shí)驗(yàn)部分

1.1　材料與儀器

內(nèi)蒙古紫草購(gòu)于內(nèi)蒙古自治區(qū)烏蘭察布市，由中南民族大學(xué)藥學(xué)院萬(wàn)定榮教授鑒定為ArnebiaguttataBunge的干燥根.

核磁共振波譜儀(TMS內(nèi)標(biāo),德國(guó)BrukerAM-600)，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(RE-52型)，高效液相色譜儀(UItimate-3000半制備型，美國(guó)Dionex公司)，色譜柱(YMC-Packed ODS-A,250×10 mm,日本YMC公司)，實(shí)驗(yàn)試劑(分析純：國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；色譜純：美國(guó)Tedia試劑公司)，硅膠(柱層析用，青島海洋化工廠分廠).

1.2　提取分離

內(nèi)蒙古紫草干燥根約20 kg，粉碎，甲醇冷浸滲漏提取，得提取液，減壓濃縮回收甲醇，得到干浸膏400 g左右. 浸膏用等質(zhì)量超純水溶解分散得混懸液，分別用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯和正丁醇萃取. 將二氯甲烷部分萃取物過(guò)正相硅膠(200～300目)，環(huán)己烷-乙酸乙酯梯度洗脫(體積比分別為100∶0，50∶1，20∶1，15∶1，10∶1，8∶2，7∶3，6∶4，5∶5，1∶2，0∶100)，硅膠TLC檢查，合并相同餾分，過(guò)中壓ODS柱進(jìn)一步分離，甲醇-水梯度洗脫，合并相同餾分，提取物經(jīng)過(guò)半制備高效液相色譜儀，V(乙腈)∶V(水)=90∶10，純化得到化合物1(5 mg)、2(20 mg)、5(12 mg). 將乙酸乙酯部分萃取物過(guò)正相硅膠，石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫(體積比分別為100∶0，50∶1，30∶1，20∶1，9∶1，8∶2，7∶3，6∶4，5∶5，4∶6，3∶7，0∶100)，合并相同餾分，過(guò)中壓ODS柱，甲醇-水梯度洗脫，合并相同餾分，提取物經(jīng)過(guò)半制備高效液相色譜儀，V(甲醇)∶V(水)=80∶20，純化得到化合物3(6 mg)、4(200 mg)、6(2.5 mg).

圖1　化合物 1～6化學(xué)結(jié)構(gòu)Fig.1　Structure of the compound 1-6

2　結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1白色粉末(丙酮),分子式C32H50O4，分子量為498.1HNMR (600 MHz, Acetone)δ5.24 (t,J= 3.6 Hz, 1H，12- H), 4.45 (dd,J= 11.5, 4.8 Hz, 1H，3- H), 1.19 (s, 3H，COCH3), 0.97 (s, 3H), 0.94(s, 3H), 0.91 (s, 3H), 0.87(s, 3H), 0.80(s, 3H).13CNMR(151 MHz, Acetone)δ178.83(C-28),170.75(COCH3), 144.94(C-13), 122.89(C-12), 81.00(C-3), 55.98(C-5), 48.30(C-9), 46.82(C-17), 46.74(C-19),42.50(C-14), 42.19(C-18), 40.12(C-8), 38.78(C-1), 38.31(C-4), 37.68(C-10), 34.41(C-21), 33.46(C-29), 33.33(C-22,7), 31.30(C-20), 28.41(C-15), 28.35(C-23), 26.22(C-17), 24.24(C-16), 24.08(C-11), 23.85(C-2), 23.71(C-30), 21.08(COCH3), 18.93(C-6), 17.55(C-26), 17.09(C-24), 15.74(C-25)，以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[6]報(bào)道數(shù)據(jù)基本一致，鑒定為3-Acetyl oleanolic acid.

化合物2白色針晶(丙酮)，分子式C20H28O2，分子量為300.1HNMR(600 MHz, Acetone)δ6.40(s, 1H, H-14), 4.86(m, 1H，H-12ax), 2.00(d, J = 12.7 Hz, 1H), 1.77(d,J= 1.5 Hz, 3H, H-20),0.98(s, 3H, H-19), 0.92(s, 3H，H-17), 0.87(s, 3H，H-18).13CNMR(151 MHz, Acetone) δ 174.96(C-16), 156.83(C-13), 152.94(C-8), 116.56(C-15), 114.62(C-14), 76.21(C-12), 55.72(C-5), 52.50(C-9), 42.71(C-3), 42.13(C-10), 40.15(C-1), 37.55(C-7), 34.17(C-17), 34.10(C-4), 28.32(C-11), 24.58(C-6), 22.07(C-18), 19.78(C-2), 17.07(C-19)，8.28(C-20). 以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[7-8]報(bào)道數(shù)據(jù)基本一致，鑒定為Jolkinolide E.

化合物3黃色固體(甲醇)，分子式C16H16O5，分子量為288.1HNMR(600 MHz, MeOD)δ6.77(d,J= 8.7 Hz, 1H, H-2), 6.66(d,J= 8.7 Hz, 1H, H-3), 6.28(d,J= 0.6 Hz, 1H, H-6), 5.26(t,J= 8.1 Hz, 1H,H-11),4.09(s, 1H, H-7), 3.66(d,J= 15.3 Hz, 1H, H-13β), 2.95(d,J= 15.3 Hz, 1H, H-13α), 2.60(m, 1H, H-9β), 2.43(m, 1H,H-10β), 1.57(s, 3H), 1.28(m, 1H,H-9α).13CNMR(151 MHz, MeOD)δ174.74(C-15), 150.86(C-1,4), 150.79(C-1,4), 139.75(C-12), 128.20(C-14), 122.55(C-11), 120.87(C-5), 118.61(C-2), 115.38(C-3), 77.04(C-6), 65.00(C-7), 62.70(C-8), 28.24(C-13), 26.08(C-9), 23.43(C-10), 21.66(C-16). 以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[9]報(bào)道數(shù)據(jù)基本一致，鑒定為Clavilactone A.

化合物4橘紅色粉末(丙酮)，分子式C18H20O4，分子量為300.1HNMR(600 MHz, Acetone) δ 7.50(s, 1H, H-6,7), 6.56(s, 1H, H-3), 5.16(t,J= 7.2 Hz, 1H, H-13), 3.90(s, 3H), 3.88(s, 3H), 2.49(t,J= 7.5 Hz, 1H, H-11), 2.25(q,J= 7.3 Hz, 1H, H-12), 1.66(s, 3H, H-15), 1.58(s, 3H, H-16).13CNMR(151 MHz, Acetone)δ185.02(C-1), 184.57(C-4), 154.52(C-8), 154.15(C-5), 150.67(C-2), 135.38(C-3), 133.20(C-14), 124.07(C-13), 122.45(C-9), 121.95(C-10), 121.58(C-6,7), 121.52(C-6,7), 57.08(C-OCH3), 57.02(C-OCH3), 27.26(C-12), 25.77(C-16), 17.78(C-15)以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[10]報(bào)道數(shù)據(jù)基本一致，鑒定為5,8-O-dimethyl-11-deoxyalkannin.

化合物5白色粉末(甲醇)，分子式C16H14O5，分子量為286.1HNMR(600 MHz, MeOD) δ 7.32(d,J= 8.4 Hz, 2H, H-2′,6′), 6.82(d,J= 8.5 Hz, 2H, H-3′,5′), 6.05(dd,J= 8.2, 2.2 Hz, 2H, H-6,8), 5.37(dd,J= 13.0, 2.9 Hz, 1H, H-2), 3.81(s, 3H,OCH3), 3.15(dd,J= 17.1, 13.0 Hz, 1H, H-3α), 2.73(dd,J= 17.1, 2.9 Hz, 1H, H-3β).13CNMR(151 MHz, MeOD)δ198.25(C-4), 169.52(C-7), 165.26(C-5), 164.73(C-9), 159.11(C-4′), 130.93(C-1′), 129.09(C-2′), 129.09(C-6′), 116.32(C-3′), 116.32(C-5′), 104.04(C-10), 95.71(C-6′), 94.91(C-8), 80.63(C-2), 56.26(C-OCH3), 44.06(C-3).以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[11]報(bào)道數(shù)據(jù)基本一致，鑒定為Sakuranetin(5, 4′-dihydroxy-7-methyoxy flavanone).

化合物6無(wú)色顆粒(氯仿)，分子式C20H20O4，分子量為324.1HNMR(600 MHz, CDCl3) δ 6.93(d,J= 8.2 Hz, 1H, H-6′), 6.80(d,J= 8.2 Hz, 1H, H-5), 6.62(d,J= 9.9 Hz, 1H, H-4″), 6.36(m, 2H,H-3′,5′), 6.29(d, 1H,H-6), 5.54(d,J= 9.9 Hz, 1H,H-3″), 4.35(m, 1H,H-2eq), 3.99(t,J= 10.2 Hz, 1H,H-2ax), 3.46(m, 1H,H-3ax), 2.95(dd,J= 15.6, 11.0 Hz, 1H,H-4ax), 2.83(dd,J= 15.7, 3.7 Hz, 1H,H-4eq), 1.41(s, 3H), 1.39(s, 3H).13CNMR(151 MHz, CDCl3)δ155.41(C-4′), 154.64(C-2′), 152.05(C-7), 149.91(C-9), 129.39(C-5), 129.18(C-3″), 128.58(C-6′), 120.13(C-1′), 117.13(C-4″), 114.54(C-10), 110.11(C-8), 108.90(C-6), 108.10(C-5′), 103.25(C-3′), 75.82(C-2″), 70.18(C-2), 31.80(C-3), 30.75(C-4), 27.96(C-6″), 27.72(C-5″). 以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[12]報(bào)道數(shù)據(jù)基本一致，鑒定為Glabridin.

3　結(jié)語(yǔ)

通過(guò)對(duì)內(nèi)蒙古紫草的系統(tǒng)分離，已初步得到了6個(gè)化合物，其中化合物1，2，4，6都是首次從該植物中分離得到，這些化合物的發(fā)現(xiàn)豐富了內(nèi)蒙古紫草化學(xué)，為進(jìn)一步研究該藥奠定了一定的基礎(chǔ).

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