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    微流控技術(shù)在病原學(xué)檢測中的應(yīng)用綜述

    2018-03-23 07:52:58宋波王橋張曉杰
    中國校外教育(下旬) 2017年13期
    關(guān)鍵詞:微珠微流磁珠

    宋波 王橋 張曉杰

    【摘要】微流控芯片,又稱芯片實(shí)驗(yàn)室,是一種以在微米尺度空間對(duì)流體進(jìn)行操控為主要特征的技術(shù)平臺(tái),微流控技術(shù)是一個(gè)由物理、化學(xué)、微加工技術(shù)與生物技術(shù)等學(xué)科組成的交叉領(lǐng)域,微型化、集成化的微流控芯片具有高效、快速、樣品和試劑用量少等優(yōu)點(diǎn),促進(jìn)了其在病原體檢測中的應(yīng)用。對(duì)傳統(tǒng)方法以及微流控芯片在病原體檢測中的應(yīng)用進(jìn)行綜述,并提出了微流控技術(shù)研究的優(yōu)勢。

    【關(guān)鍵詞】微流控芯片 病原體 檢測微流控芯片,也被稱為微全分析系統(tǒng),是將常規(guī)實(shí)驗(yàn)室中的加樣、反應(yīng)、分離檢測等基本操作在一塊幾平方厘米(甚至更?。┑男酒线M(jìn)行的方法,可以取代常規(guī)生物或化學(xué)實(shí)驗(yàn)室各種功能的一種高新技術(shù)平臺(tái)。本文將現(xiàn)有病原微生物檢測方法與微流控芯片方法進(jìn)行對(duì)比,針對(duì)該領(lǐng)域在病原微生物檢測方面的主要研究難點(diǎn)和發(fā)展趨勢進(jìn)行了討論。

    一、現(xiàn)有的微生物檢測技術(shù)

    病原微生物的檢測標(biāo)準(zhǔn)是培養(yǎng)法,此法簡單、直觀、費(fèi)用低,但該法耗時(shí)、操作繁瑣、靈敏性低,對(duì)操作人員要求高。免疫分選技術(shù)是利用抗原-抗體的特異性反應(yīng),在檢測微生物中應(yīng)用非常廣泛,可定量檢測樣本中的微生物,但該法仍存在耗時(shí)、操作繁瑣、試劑耗量大的缺點(diǎn),不能滿足臨床對(duì)感染性疾病快速診斷的需求。

    聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)等分子生物學(xué)檢測法具有高度的特異性和靈敏度,檢測特異性基因片段從而達(dá)到多種病原菌的鑒定的目的,但本法存在過度敏感,假陽性率高,較復(fù)雜的樣本需要預(yù)處理等缺點(diǎn),準(zhǔn)確性和特異性不高。

    二、微流控芯片技術(shù)中常用的病原菌檢測分析技術(shù)

    1.免疫分選技術(shù)

    將免疫分選與微流控芯片技術(shù)結(jié)合是近年來的研究熱點(diǎn),該法反應(yīng)體積在微升級(jí),樣品和試劑耗量減少,提高了分選效率,芯片全程可控,簡化了操作流程,樣品擴(kuò)散距離縮短,節(jié)省了反應(yīng)時(shí)間,其高通量、高集成的特點(diǎn),實(shí)現(xiàn)了對(duì)不同目標(biāo)菌的特異性分選和富集。

    免疫分選技術(shù)主要包括三種方法:微通道免疫分選、免疫微珠分選和免疫磁珠分選。

    微通道免疫分選是在微通道內(nèi)壁表面使用物理吸附或化學(xué)結(jié)合的方法固定抗體或其類似物,再向芯片內(nèi)加入待檢樣品,實(shí)現(xiàn)微生物的特異性捕獲檢測。Boehm等設(shè)計(jì)并制作了了微流控生物傳感器,在芯片上多個(gè)微室表面上修飾不同的特異性抗體,從而達(dá)到了同時(shí)檢測不同種類微生物的目的。該法的缺點(diǎn)是處理步驟較繁瑣,分選效率較低。

    免疫微珠分選技術(shù)使用玻璃微珠進(jìn)行特異性抗體吸附,Varshney等設(shè)計(jì)微通道深度與微珠直徑尺寸相近,使得微珠在微通道中單層排列,將捕獲有大腸桿菌特異性抗體的免疫微珠填充于微通道中,利用化學(xué)發(fā)光法檢測微珠表面的大腸桿菌含量。由于微珠有更大的比表面積,因此能將更多的特異性抗體固定于一定表面上。但本法為了有效防止微珠在腔內(nèi)重疊造成光信號(hào)的阻滯,微珠必須呈單層排列,因此芯片的制備具有一定的難度。

    免疫磁分選技術(shù)利用安裝于微通道附近的電磁場發(fā)生器俘獲磁珠,較微珠分選法更具自動(dòng)化和靈活性。Pivetal等設(shè)計(jì)一個(gè) S型微通道的芯片,在磁珠表面上修飾特異性抗體,對(duì)樣本中目標(biāo)微生物的檢測率達(dá)到了 98.46%。本法的缺點(diǎn)是,磁珠價(jià)格昂貴,實(shí)驗(yàn)需要產(chǎn)生磁場的裝置,因此本研究并不利于批量生產(chǎn),限制了其發(fā)展成為臨床即時(shí)檢測設(shè)備。

    2.基于核酸的熒光檢測

    本法將PCR與微流控芯片結(jié)合,將自動(dòng)變溫的加熱器集成在微型反應(yīng)室上,實(shí)現(xiàn)樣品液在特定反應(yīng)室中變性、退火和延伸,通過對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物熒光標(biāo)記,實(shí)現(xiàn)對(duì)待檢菌特異片段的實(shí)時(shí)定量分析。Lee通過這種方法完成登革熱病毒、腸道病毒71的分選和RNA病毒的檢測,檢測限可達(dá)到10-102PFU/m L。該方法雖然特異性和靈敏度很高,但對(duì)核酸蛋白質(zhì)的直接檢測鑒定更具有說服力。

    三、展望

    微流控芯片集成度高、準(zhǔn)確性好、試劑消耗低、反應(yīng)速度快,其要素涵蓋小型化實(shí)驗(yàn)的基本過程,如樣品分離、純化、試劑混合、探針雜交或合成以及樣品檢測等。隨著新技術(shù)的發(fā)展和信息化水平的提高,微加工技術(shù)的迅速發(fā)展,微流控芯片發(fā)展成為即時(shí)檢測和診斷儀器將成為極大的可能,在臨床病原體的早期診斷及藥敏試驗(yàn)等應(yīng)用中,具有極大的潛力。

    此外,微流控芯片即時(shí)檢測儀器的檢測診斷對(duì)象由現(xiàn)有的血糖、肺結(jié)核、HIV、心臟標(biāo)志物等向外大幅延拓,有望覆蓋體育競技、海關(guān)口岸、應(yīng)急輔助醫(yī)療等諸多領(lǐng)域,這項(xiàng)技術(shù)未來將發(fā)展成為檢驗(yàn)科最重要的研究方法之一。

    參考文獻(xiàn):

    [1]林炳承,秦建華.微流控芯片實(shí)驗(yàn)室[M].色譜,2005,(5):456-463.

    [2]張建華,陸群英,程蘇云,盧亦愚,葉菊蓮,羅蕓.實(shí)時(shí)PCR在大腸桿菌O157:H7快速檢測中的應(yīng)用[J].中國人獸共患病學(xué)報(bào),2007,(08) :839-842.

    [3]Aguilar ZP,Vandaveer IV WR,F(xiàn)ritsch I. Anal. Chem.2002,(74):3321-3329.

    [4]Bange A,Halsall HB,Heineman WR.Biosens. Bioelectron.2005,(20):2488-2503.

    [5]Niwa,O,Xu Y,Halsall HB,Heineman WR.Anal.Chem.1993,(64):1559-1563.

    [6]Boehm D A,Gottlieb P A,Hua S Z.On-chip microfluidic biosensor for bacterial detection and identification. Sensors and Actuators B-Chemical,2007,(02) :508-514.

    [7]Varshney M,Srinivasan B,Tung S,Li Y.Microfluidic Filter Chip Based Chemiluminescence Fiber Optic Biosensing Method for the Detection of E.coli O157:H7.Written for presentation at the 2005 ASAE Annual International Meeting.

    [8]Pivetal J,Toru S,F(xiàn)renea-Robin M,Haddour N,Cecillon S,Dempsey NM,Dumas-Bouchiat F,Simonet P.Selective isolation of bacterial cells within a microfluidic device using magnetic probe-based cell fishing.Sensors and Actuators B,2014,(2014) :581–589.

    [9]Lee WC,Lien KY,Lee GB,Lei HY. An integrated microfluidic system using magnetic beads for virus detection[J].Diagnostic Microbiology and Infectious Disease,2008,(01) :51-58.

    [10]邢志芳,呂攀攀,曹國君.基于微流控技術(shù)的分子診斷[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2017,(16):2254-2255.

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