輸血檢驗中卡式微柱凝膠試驗的應(yīng)用探討

劉颯爽 陳宇鋒 王小偉

【摘要】 目的 探討卡式微柱凝膠試驗應(yīng)用于輸血檢驗中的臨床效果。方法 244例輸血患者， 隨機(jī)分為對照組和觀察組， 每組122例。對照組開展鹽水試管法， 觀察組進(jìn)行卡式微柱凝膠試驗， 以測定患者血型并開展正向、反向定型試驗， 比較兩組檢測符合率。結(jié)果 兩組正定型與反定型符合率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=3.037、2.734， P>0.05）， 共9例不符合者， 再用生理鹽水清洗后鑒定， 發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞數(shù)量異常者2例， 血清蛋白中有纖維蛋白者3例， 血液樣本保存時間過久無法使用者1例;進(jìn)一步檢查剩余

3例血液標(biāo)本后發(fā)現(xiàn)1例存在自身凝集， 1例自行凝集障礙， 1例存在腫瘤因子。結(jié)論 卡式微柱凝膠試驗在輸血檢驗中使用可確保輸血安全， 且其能快速的完成血液配對， 已達(dá)到檢驗的目的， 值得推廣。

【關(guān)鍵詞】 輸血檢驗;卡式微柱凝膠試驗;應(yīng)用

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2018.07.117

輸血為臨床搶救與治療患者的重要措施， 因此一定要確保用血及時且安全， 正確配血才能確保用血安全。血型鑒定為輸血必要過程， 其正確性直接影響患者生命安全輸血。以往臨床主要采用手工鹽水試管法開展血型鑒定， 且一般情況下僅開展正向或反向定型法， 難以標(biāo)準(zhǔn)化， 有較多干擾因素， 時常發(fā)生血型錯檢現(xiàn)象[1]。因此， 傳統(tǒng)的血液配對方法已不能滿足目前的醫(yī)學(xué)治療要求。眾多醫(yī)學(xué)學(xué)者在臨床輸血的檢驗中不斷展開實驗探索， 最終發(fā)現(xiàn)了卡式微柱凝膠試驗在臨床輸血的檢驗中完全滿足了現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的臨床輸血檢驗的需求。近年來， 臨床廣泛應(yīng)用卡式微柱凝膠試驗開展血型鑒定也證明了其基于抗人球蛋白， 可對不規(guī)則抗體予以有效篩查， 與臨床輸血要求完全相符。同時， 卡式微柱凝膠還是一種免疫的血型血清檢測方法， 其可快速、精確地完成血液配對， 且其產(chǎn)生的醫(yī)藥污染率小， 檢測所需的樣品劑量也小。如此一來， 臨床輸血檢驗中的檢驗環(huán)節(jié)里， 卡式微柱膠試驗就逐漸取代了傳統(tǒng)的血型血清檢測方法。現(xiàn)選取患者244例， 探討卡式微柱凝膠試驗的應(yīng)用效果?，F(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取本院2016年8月～2017年8月收治的輸血患者244例， 隨機(jī)分為對照組和觀察組， 每組122例。

對照組中男59例， 女63例;年齡1～89歲， 平均年齡（46.2± 11.8）歲。觀察組中男54例， 女68例;年齡2～87歲， 平均年齡（47.5±12.4）歲。兩組性別、年齡等一般資料比較， 差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）， 具有均衡性。

1. 2 方法 對照組使用鹽水試管法：根據(jù)規(guī)范的要求， 使用傳統(tǒng)的鹽水檢測方法在試管內(nèi)對正向定型與反向定型進(jìn)行檢驗。觀察組開展卡式微柱凝膠試驗：取出卡式凝膠管做好標(biāo)記， 將微柱凝膠試劑卡的六支凝膠微管標(biāo)號， 將待檢者0.5%～0.8%紅細(xì)胞懸液分別加入第1～4支微管中， 每管50 μl， 將待檢查血清分別加入第5支和第6支微管中， 每管50 μl。將已知A型和B型紅細(xì)胞0.5%～0.8%濃度懸液分別加入第5支和第6支微管中， 每管50 μl， 即可使用專用離心機(jī)離心5 min， 900 r/min 2 min， 1500 r/min 3 min， 取出肉眼判定結(jié)果。觀察兩組檢驗符合情況。

1. 3 檢驗標(biāo)準(zhǔn) 陽性標(biāo)準(zhǔn)：紅細(xì)胞抗原與相應(yīng)抗體在微柱凝膠中形成的特異性抗原抗體復(fù)合物浮在凝膠表面或膠中， 為陽性反應(yīng)。反應(yīng)強(qiáng)度：特異性紅細(xì)胞抗原抗體復(fù)合物位于膠表面為強(qiáng)陽性反應(yīng)：復(fù)合物在膠中為弱陽性反應(yīng)：愈靠近膠底部顆粒愈小， 反應(yīng)愈弱。陰性標(biāo)準(zhǔn)：被檢紅細(xì)胞抗原無相應(yīng)的抗體結(jié)合， 不出現(xiàn)特異性抗原抗體復(fù)合物， 紅細(xì)胞沉于微柱凝膠的底部。

1. 4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS20.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗;計數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗。P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

兩組正定型與反定型符合率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=3.037、2.734， P>0.05）。見表1。共9例不符合者， 再用生理鹽水清洗后鑒定， 發(fā)現(xiàn)紅細(xì)胞數(shù)量異常者2例， 血清蛋白中有纖維蛋白者3例， 血液樣本保存時間過久無法使用者1例;進(jìn)一步檢查剩余3例血液標(biāo)本后發(fā)現(xiàn)1例存在自身凝集， 1例自行凝集障礙， 1例存在腫瘤因子。

3 討論

臨床輸血地位無法替代， 為確保其安全性。安全輸血是醫(yī)療救治系統(tǒng)的一個基本組成部分， 能夠起到拯救生命， 治療生命的作用。安全輸血牽涉到眾多環(huán)節(jié)， 其中輸血前血型和輸血前相容性檢測的環(huán)節(jié)， 作為醫(yī)院輸血科尤為重要。因此輸血前一定要準(zhǔn)確、快速開展血型鑒定。《全國臨床檢驗操作規(guī)程》要求血型鑒定時通過正向與反向定型對ABO血型予以準(zhǔn)確鑒定， 并對紅細(xì)胞懸液濃度、實際用量、加樣順序及離心時間與速度均作出明確要求[2， 3]。然而當(dāng)前國內(nèi)諸多基層醫(yī)院鑒定血型時僅開展正向定型， 反向定型被忽視， 且隨意操作， 標(biāo)準(zhǔn)化難度高， 易導(dǎo)致血型錯檢事件， 因此臨床近年來使用卡式微柱凝膠試驗， 可快速配對血清血型。

法國學(xué)者首次于1986年研發(fā)出卡式微柱凝膠試驗， 此為免疫學(xué)檢測新技術(shù)， 為微柱凝膠技術(shù)結(jié)合于所有血型鑒定技術(shù)的產(chǎn)物， 美國食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）于1994年認(rèn)可該技術(shù)[4]， 經(jīng)過持續(xù)改進(jìn)與應(yīng)用后多數(shù)發(fā)達(dá)國家已經(jīng)該技術(shù)作為常規(guī)檢測紅細(xì)胞血型、血清的技術(shù)。卡式微柱凝膠試驗主要通過對葡聚糖凝膠濃度予以調(diào)節(jié)后對分子篩孔徑大小予以控制， 使分子篩只允許游離分子通過后將凝集與游離紅細(xì)胞分離;在凝膠上部反應(yīng)添加紅細(xì)胞與血清并行離心處理后凝膠阻礙凝集紅細(xì)胞而在凝膠內(nèi)部或上部停留， 提示凝集反應(yīng)發(fā)生， 可判定為陽性;反之所有紅細(xì)胞在凝膠底部停留提示無凝集反應(yīng)， 判定為陰性[5]。部分老年人、新生兒、部分惡性腫瘤、白血病患者紅細(xì)胞（RBC）抗原較弱， 手工操作難以判別血型， 但卡式檢測法只允許未凝集的RBC通過， 已凝集的則在分離柱外， 故而靈敏度較高， 特別是檢測意義重大的抗-E等紅細(xì)胞抗體時敏感度更高[6]。此外新生兒溶血性疾病或自身免疫性疾病患者RBC也會自發(fā)凝集， RBC膜獲得性或遺傳性異常也會導(dǎo)致凝集， 正定型檢測時假凝集會導(dǎo)致錯檢， 而卡式法中添加抗人球蛋白， 有利于特異性凝集紅細(xì)胞， 故而特異性更高。正反定型結(jié)合可對單純正定型檢測不足予以彌補(bǔ)。

本組結(jié)果表明， 觀察組正定型與反定型符合率分別為100.0%、99.2%， 對照組分別為97.5%、96.9%， 說明卡式微柱凝膠試驗具備推廣價值。該試驗中應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)化定量操作， 可將人員操作隨意性最大限度減少， 且有較好的重復(fù)性， 應(yīng)用凝膠分子篩技術(shù)亦可提高結(jié)果的客觀性， 且標(biāo)本量需求較少， 特別適用于大面積燒傷或新生兒等難以抽取標(biāo)本的患者[7]。同時操作期間無需洗滌， 抗單球蛋白抗體不會被中和導(dǎo)致假陰性?？ㄊ綑z測法假陽性或假陰性的原因為紅細(xì)胞濃度過高或過低致使離心不徹底， 纖維蛋白血清、細(xì)胞污染或細(xì)胞凝塊等， 因此一定要確保細(xì)胞濃度準(zhǔn)確， 資料稱2%最佳[8-12]。在實驗前還需離心處理有氣泡新卡， 避免撕膜時微柱內(nèi)容物發(fā)生交叉污染現(xiàn)象。但該檢測法成本較高， 因此使用國產(chǎn)試劑以降低成本， 可進(jìn)一步推廣該方法。

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[收稿日期：2017-09-28]