2017年河北省致病性大腸桿菌的耐藥性檢測與分析

馮書風(fēng) ，馬 晨 ，杜靜靜 ，張 誠 ，崔 歡 ，高文媛

（1.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院，河北保定071001；2.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，河北保定071001；3.保定市疾病預(yù)防控制中心，河北保定071000）

致病性大腸桿菌病是由廣泛存在于自然界的致病性大腸桿菌引起的一種細(xì)菌性疾病，主要引起豬的腹瀉，表現(xiàn)腸毒血癥等癥狀[1]；引起禽大腸桿菌敗血癥、肉芽腫、氣囊炎等[4]。大腸桿菌病一直是獸醫(yī)臨床上的多發(fā)病，被我國的獸醫(yī)以及養(yǎng)殖戶高度重視，并且隨著我國養(yǎng)殖業(yè)集約化的迅速發(fā)展，該病愈加多發(fā)。又因?yàn)樵摬⊥推渌』旌细腥?，增加了發(fā)病率和死亡率，對養(yǎng)殖業(yè)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失[2]。目前大腸桿菌的防治主要是依靠抗菌藥物，但是由于對抗生素的盲目且大量的使用，大腸桿菌對臨床上常用的抗菌藥物產(chǎn)生了不同程度的耐藥性[3]。為了了解和檢測大腸桿菌耐藥性的不同程度和發(fā)展趨勢，我們整理了2017年河北省200例中分離出來的致病性大腸桿菌用紙片擴(kuò)散法進(jìn)行的9種抗菌藥物的情況，希望為預(yù)防以及調(diào)控該疾病的流行和指導(dǎo)臨床合理用藥提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)菌株

來源于河北省地區(qū)內(nèi)各雞場和豬場發(fā)病之后分離到的致病性大腸桿菌。

1.2 培養(yǎng)基

麥康凱瓊脂培養(yǎng)基 （購自北京奧博星生物技術(shù)有限責(zé)任公司）按常規(guī)方法制備。

1.3 試驗(yàn)藥物

阿莫西林 （AMX）、 桿菌肽 （B）、 紅霉素 （E）、 多西環(huán)素（DOX）、氟苯尼考（FFC）、環(huán)丙沙星（CIP）、新霉素（N）、壯觀霉素（SH）、頭孢噻肟（CTX）。

1.4 藥敏片

直接購于溫州市康泰生物科技有限公司，干燥、密封、4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.5 抗菌藥物敏感性測定法

1.5.1 藥敏試驗(yàn)方法

在無菌條件下分別自肺臟、脾臟、淋巴結(jié)等病料中取樣，劃線接種于麥康凱瓊脂平板，37℃ 培養(yǎng) 20～24h。觀察細(xì)菌的菌落形態(tài)，多次劃線純化培養(yǎng)，保存。從同一病檢動物不同部位樣品分離的細(xì)菌計(jì)為同一個菌株。勾取純化培養(yǎng)的菌之后均勻細(xì)密的涂布在麥康凱瓊脂培養(yǎng)基上，在培養(yǎng)基上放置這9種藥敏片，做好標(biāo)記，在37℃倒置培養(yǎng)18～24h。利用儀器自動菌落分析儀（杭州迅數(shù)科技有限公司）測定數(shù)據(jù)，記錄結(jié)果。

1.5.2 結(jié)果判定

判定敏感性的標(biāo)準(zhǔn)為抑菌圈直徑的大?。?0mm以上判為極敏；15.1～20.0mm 判為高敏；10.1～15.0mm 判為低敏；10mm 以下判為耐藥。

2 結(jié)果與分析

這200例致病性大腸桿菌對9種抗菌藥物的耐藥性表現(xiàn)出差異。大腸桿菌耐藥性從低到高依次是頭孢噻肟、壯觀霉素、新霉素、環(huán)丙沙星、氟苯尼考、多西環(huán)素、阿莫西林、桿菌肽、紅霉素。其中壯觀霉素、新霉素、環(huán)丙沙星、氟苯尼考、多西環(huán)素、阿莫西林、桿菌肽、紅霉素等8種耐藥率大于50%，僅頭孢噻肟小于20%。具體數(shù)據(jù)見下表1、表2、表3。

表1 致病性大腸桿菌對9種抗菌藥物的耐藥率

表2 致病性大腸桿菌多重耐藥的百分比

表3 9種藥物耐藥譜的具體分布百分比

本次的藥敏實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示∶在這200例中，分離出的致病性大腸桿菌對頭孢噻肟和壯觀霉素這兩種藥物比較敏感，有可能是因?yàn)檫@兩種藥使用的較少，但同時(shí)也顯示出這兩種藥治療大腸桿菌的良好潛力[5]；但是對于阿莫西林、桿菌肽、紅霉素來說，耐藥率達(dá)到了100%，所以無論是預(yù)防還是治療，不建議使用這三種藥物 ；由于地區(qū)的不同，使得新霉素、環(huán)丙沙星、氟苯尼考、多西環(huán)素這四種藥物具有不同程度的治療效果，可根據(jù)具體情況、具體病理動物的藥敏實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行臨床合理用藥。

從上述的試驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)可以看出，抗菌藥物的耐藥率很高，并且7重、8重、9重的耐藥率百分比達(dá)到了72.5%，已經(jīng)顯示出了盲目使用抗生素的嚴(yán)重后果。

接下來，對于養(yǎng)殖戶來說，可以從以下方面減少畜禽患病的機(jī)率，同時(shí)也減少抗生素藥物的使用∶

（1）加強(qiáng)平時(shí)的飼養(yǎng)管理，同時(shí)嚴(yán)格控制外來人員以及外來車輛的進(jìn)出。

（2）對于規(guī)?；酿B(yǎng)殖場來說，要完善消毒制度，要定期定量的進(jìn)行消毒，消毒藥可交叉使用，減少耐藥性的產(chǎn)生。

（3）制定合理的免疫程序，直接從源頭上遏制畜禽患病。

（4）保證畜舍、禽舍的衛(wèi)生情況，定時(shí)清理糞便，保證通風(fēng)、干燥的環(huán)境。

（5）對于養(yǎng)殖戶來說，在進(jìn)行免疫接種和注射治療藥物時(shí)，嚴(yán)禁針頭重復(fù)利用，避免交叉感染。