參附注射液抗休克的物質(zhì)基礎(chǔ)及作用機(jī)制研究進(jìn)展＊

熊艷玲，陳 雨，徐國(guó)良,2，嚴(yán)小軍,2，聶 鵬,2，姜 麗,2＊＊

（1.江西中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)基礎(chǔ)理論分化發(fā)展研究中心 南昌 330004；2.江西省中醫(yī)病因生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 南昌 330004）

參附注射液源自《校注婦人良方·卷九》之參附湯，由紅參、附子的提取物制成的中藥復(fù)方制劑。藥理研究表明[1-3]，參附注射液具有強(qiáng)心、升壓、增強(qiáng)心肌收縮力、降低外周阻力、增加組織器官的血供、改善組織器官缺血狀態(tài)等功能，同時(shí)可改善血液流變性及微循環(huán)，臨床用于休克療效確切[4-6]。

為了更全面地理清參附注射液抗休克的有效成分并闡明其藥效機(jī)制，本文對(duì)參附注射液抗休克的物質(zhì)基礎(chǔ)及作用機(jī)制進(jìn)行了綜述，以期為參附注射液在心血管方面的臨床應(yīng)用提供參考。

1 物質(zhì)基礎(chǔ)

1.1 生物堿

附子生塊根含多種生物堿，如烏頭堿、次烏頭堿以及新烏頭堿等。目前從附子提取物中分離鑒定出來(lái)的生物堿已有90多個(gè)，根據(jù)生物堿所含酯基的不同，可分為雙酯類(lèi)生物堿、單酯類(lèi)生物堿、胺基醇類(lèi)生物堿和脂型生物堿等[7,8]。雙酯類(lèi)生物堿又分為烏頭堿、次烏頭堿和新烏頭堿等；單酯類(lèi)生物堿可分為苯甲酰烏頭胺、苯甲酰次烏頭胺和苯甲酰新烏頭胺等；氨基醇類(lèi)生物堿又分為烏頭胺、次烏頭胺和新烏頭胺等[9]。作為參附注射液的有效成分之一，生物堿能通過(guò)強(qiáng)心，增加心輸出量等機(jī)制有效地改善休克癥狀。

1.2 人參皂苷

Yang等[10]采用HPLC-QTOF-MS法鑒定出了參附注射液中的44個(gè)成分，并用HPLC-Q-MS對(duì)其中19個(gè)人參皂苷進(jìn)行了定量，為參附注射液質(zhì)量控制提供了依據(jù)。楊瑞杰[11,12]按照參附注射液的制備工藝，在紅參提取物中分離鑒定出12種常見(jiàn)皂苷和10種稀有皂苷。前者分別為人參皂苷 Rg1、Re、Rf、Rg、Rb1、Rc、Rb2、Rb3、Rd、F1、F3、F5；后者分別為人參皂苷Rk1、Rg5、Rk3、Rh4、Rg6、F4、Rg3、20(R)-Rg3、Rh1和20(R)-Rh1。紅參是人參經(jīng)蒸制后得到的藥材，但其所含的人參皂苷類(lèi)成分含量與其他人參類(lèi)藥材相比存在著顯著差異，紅參中主要含有Rg1、Ro、Rb1和Rc等4種人參皂苷[13]。此外，周琪樂(lè)等[14]通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂、硅膠等柱色譜以及反相高效液相色譜等方法，進(jìn)行系統(tǒng)性分離、純化得到了52個(gè)三萜類(lèi)皂苷成分，其中人參皂苷Ro-甲酯、人參皂苷Re2和人參皂苷Rg4都為首次從紅參中分離得到。有文獻(xiàn)表明[15]，人參皂苷能通過(guò)對(duì)離子通道的調(diào)節(jié)來(lái)控制心律失常，同時(shí)抑制心肌肥厚和心肌細(xì)胞的凋亡從而改善心肌缺血達(dá)到抗休克的目的。

1.3 氨基酸

參附注射液有效成分除人參皂苷和生物堿外，還含有氨基酸類(lèi)。研究表明[16]，新開(kāi)河紅參和高麗紅參均含17種以上的氨基酸，其中精氨酸含量最高，甲硫氨基酸最低。崔云秀等[17]研究發(fā)現(xiàn)，紅參中含有丙氨酸單糖苷，該物質(zhì)能抑制麥芽糖酶活性，使其水解能力下降，進(jìn)而減少了血中葡萄糖的含量。黃寶亮等[18]以紅參為實(shí)驗(yàn)材料，經(jīng)過(guò)粉碎、超聲提取等一系列操作得到了一種非皂苷小分子類(lèi)物質(zhì)—精氨酸雙糖苷(AFG)，其為鮮參在蒸制成紅參的過(guò)程中發(fā)生美拉德反應(yīng)生成，具有促進(jìn)微循環(huán)、改善休克癥狀等功效。

1.4 其他成分

此外，參附注射液中還含有少量的揮發(fā)油（如β-欖香烯和人參炔醇）、糖類(lèi)物質(zhì)（如果糖、蔗糖、人參果膠等）、核酸、有機(jī)酸（如檸檬酸、延胡索酸等）、多肽、蛋白質(zhì)、酶類(lèi)（如L-天冬氨酸轉(zhuǎn)移酶、腺苷轉(zhuǎn)化酶等）、維生素（如維生素B1、B2、B12和維生素C等）、無(wú)機(jī)元素、木質(zhì)類(lèi)（如戈米辛N等）、甾醇及黃酮類(lèi)等。張金秋等[19]利用RP-HPLC法從紅參中檢驗(yàn)出了蘋(píng)果酸、丙二酸、乳酸、乙酸、檸檬酸和琥珀酸等6種物質(zhì)。王蘊(yùn)馨等[20]研究發(fā)現(xiàn)，人參中一般含有豐富的多肽，且各地區(qū)的人參多肽含量差異不明顯。張娜等[13]研究表明，參附注射液中含有4種糖（果糖、葡萄糖、蔗糖和麥芽糖），總量占參附注射液總固體量的60.23-85.53%，且含有鈉、鉀、鈣、鎂、鐵、鋁及鋅等無(wú)機(jī)金屬元素。上述物質(zhì)作為基礎(chǔ)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，對(duì)休克可起到一定的輔助治療作用。

2 對(duì)休克的作用機(jī)制

2.1 改善血流動(dòng)力學(xué)

臨床研究表明，人參皂苷能減慢心率，降低外周血管阻力，增加心肌收縮力和心輸出量。殷文朋等[21]研究發(fā)現(xiàn)，心源性休克大鼠在注射參附注射液后，通過(guò)增加CO，減少外周阻力，降低肺動(dòng)脈嵌頓壓(PAWP)和心率(HR)來(lái)維持動(dòng)脈壓“正常”水平，且不減少組織灌注，其機(jī)制可能與去甲烏藥堿是β-受體激動(dòng)劑有關(guān)。樊文惠等[22]通過(guò)臨床研究發(fā)現(xiàn)參附注射液具有正性肌力的作用，能調(diào)節(jié)血流動(dòng)力學(xué)狀態(tài)，提高左心室射血分?jǐn)?shù)，改善心功能不全的臨床癥狀和體征；還能增加心肌收縮力和心輸出量，降低冠脈、腦和外周血管阻力，降低心肌耗氧量，減少缺血時(shí)乳酸的產(chǎn)生及磷酸激酶釋放，起到保護(hù)心臟功能的作用。

2.2 保護(hù)心肌細(xì)胞

參附注射液能顯著降低血漿脂質(zhì)過(guò)氧化物的含量，從而提高紅細(xì)胞膜超氧化物歧化酶的活性，對(duì)急性心肌梗死(AMI)患者的缺血心肌有保護(hù)作用。其作用機(jī)制除了參附的活血作用外，還可能與其抗脂質(zhì)過(guò)氧化及改善血管內(nèi)皮細(xì)胞功能有關(guān)[23]。董艷紅等[24]研究發(fā)現(xiàn)，人參皂苷Rg1與附子配伍后對(duì)大鼠的心肌細(xì)胞具有一定的保護(hù)作用，其機(jī)制可能與改善細(xì)胞膜的通透性，增強(qiáng)三磷酸腺苷(ATP)酶活性以及調(diào)節(jié)大鼠腦鈉肽(BNP)的分泌功能有關(guān)，從而對(duì)心源性休克起到一定治療作用。

2.3 改善微循環(huán)

微循環(huán)是指微動(dòng)脈與微靜脈之間的微細(xì)循環(huán)，分布于全身各臟器和組織，在調(diào)節(jié)局部的血液供應(yīng)方面發(fā)揮著重要作用[25]。休克的中心環(huán)節(jié)為微循環(huán)障礙，而參附注射液可以改善休克患者的微循環(huán)狀態(tài)從而達(dá)到治療作用[4-6,26]。有研究表明，10 mL·kg-1以上劑量的參附注射液可使早期心源性休克大鼠微血管管徑變寬，白細(xì)胞黏附數(shù)減少；可使中期心源性休克大鼠紅細(xì)胞流速加快、白細(xì)胞黏附數(shù)減少，從而改善微循環(huán)的缺血、缺氧現(xiàn)象[27]。楊芳炬等[28]研究發(fā)現(xiàn)，參附注射液不僅可擴(kuò)大正常動(dòng)物微動(dòng)脈管徑，增加毛細(xì)血管交叉網(wǎng)點(diǎn)數(shù)，加快血流速度，且能改善休克動(dòng)物微血管病理狀態(tài)，并通過(guò)強(qiáng)心作用使有效血液循環(huán)增加，從而改善休克癥狀。

2.4 改善血液流變學(xué)

參附注射液還可通過(guò)降低血液黏稠度和紅細(xì)胞聚集率來(lái)改善血液流變性，包括血管的流變性、血液的流動(dòng)性、粘滯性、變形性及凝固性。沙恩麗等[29]研究發(fā)現(xiàn)，給心肌缺血血瘀證大鼠給予高劑量參附藥后，大鼠全血黏度高切、中切、低切值均有降低趨勢(shì)，血細(xì)胞參數(shù)MCV和PDW降低明顯，血沉也顯著升高。因此，參附配伍可通過(guò)降低全血粘度、血細(xì)胞參數(shù)的值、減少血沉?xí)r間來(lái)改善模型動(dòng)物血液“濃、粘、聚、凝”狀態(tài)。丁宇棟等[30]通過(guò)臨床研究發(fā)現(xiàn)，將參附注射液應(yīng)用于休克患者，其療效與西藥多巴胺相同。但在血液流變學(xué)方面，參附組血液流變學(xué)指標(biāo)改善明顯，且優(yōu)于多巴胺組。劉智等[31]研究發(fā)現(xiàn)，參附藥對(duì)降低血液高切、中切、低切的血液黏度有明顯效果，并能顯著降低血沉和血細(xì)胞參數(shù)?？邓貗沟萚32]通過(guò)給予86例血瘀型心衰患者給予基礎(chǔ)藥物和參附注射液聯(lián)用治療后，患者低切變率血黏度、血漿黏度及血小板黏附率較對(duì)照組和治療前降低，治療效果明顯。因此，參附注射液可通過(guò)改善血液流變學(xué)達(dá)到改善休克癥狀的目的。

2.5 抑制炎癥反應(yīng)

炎癥細(xì)胞因子級(jí)聯(lián)反應(yīng)對(duì)于休克的發(fā)生、發(fā)展具有重要作用。比如持續(xù)表達(dá)的腫瘤壞死因子（TNF-α）能抑制肌漿網(wǎng)Ca2+泵，使細(xì)胞內(nèi)Ca2+失調(diào)。多種細(xì)胞因子介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)還可能與急性心肌梗塞并發(fā)心源性休克有關(guān)?？麓笾堑萚33]用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RTPCR)研究心源性休克犬的炎癥因子參數(shù)，發(fā)現(xiàn)血漿中TNF-α、IL-1βmRNA表達(dá)均異常升高，在給予參附注射液后，血漿TNF-α、IL-1β含量顯著下降。張昆等[34]將參附注射液用于治療失血性休克，結(jié)果表明，通過(guò)降低IL-1β和TNF-α，增加IL-10，進(jìn)而阻斷了SIRS(全身炎癥反應(yīng)綜合癥Systemic Inflammatory Reaction Syndrome)的發(fā)生，從而達(dá)到抗休克的目的。張茜等[35]通過(guò)對(duì)豬的心肺復(fù)蘇模型給予參附注射液和腎上腺素進(jìn)行治療，發(fā)現(xiàn)參附組中IL-6、IL-8和TNF-α的值與腎上腺素組相比顯著下降。付蓉[36]等研究發(fā)現(xiàn)，參附注射液還能降低慢性心力衰竭大鼠血漿TNF-α和IL-6的含量，其機(jī)制可能通過(guò)平衡免疫系統(tǒng)的失衡狀態(tài)，增強(qiáng)心肌的收縮力，改善血流動(dòng)力學(xué)的紊亂狀態(tài)，并逆轉(zhuǎn)心室重塑，從而改善心臟功能。由此可見(jiàn)，參附注射液能通過(guò)降低炎癥因子的表達(dá)從而達(dá)到抗休克作用。

2.6 抗心律失常作用

心源性休克的癥狀常伴隨有心律失常。趙立志等[37]研究驗(yàn)證了參附注射液加常規(guī)藥物治療慢性心力衰竭的有效性，特別針對(duì)合并緩慢性心律失常的患者。參附注射液可抑制左心室重構(gòu)，改善心臟功能和房室傳導(dǎo)，延緩慢性心力衰竭進(jìn)程，其機(jī)制可能與降低N-末端腦鈉肽前體水平有關(guān)。另有研究[15]證實(shí)，參附注射液中的人參皂苷Rh可限制大鼠心肌細(xì)胞L、T型鈣通道的活動(dòng)，減少其開(kāi)放概率與開(kāi)放時(shí)間。由此可見(jiàn)，人參皂苷可通過(guò)控制離子通道的開(kāi)合來(lái)有效地調(diào)節(jié)心率，從而對(duì)心律失常等癥狀進(jìn)行控制。

3 展望

參附注射液作用廣泛，可通過(guò)調(diào)節(jié)血壓、調(diào)節(jié)心律、保護(hù)心肌細(xì)胞、改善微循環(huán)及血液流變學(xué)、降低炎癥因子的表達(dá)等方面達(dá)到抗休克效果，臨床上應(yīng)用于心血管疾病方面的治療已近三十年，療效顯著，且安全性較好[38]。

參附注射液主要由紅參和附子兩味藥組成，但其有效成分極其復(fù)雜，還受添加劑與環(huán)境變化的影響，因此明確其有效成分及含量從而有效控制其質(zhì)量至關(guān)重要。

資料檢索表明，目前的研究多關(guān)注參附注射液臨床療效，尚缺乏對(duì)參附注射液全方在分子水平的機(jī)制研究。因此，亟待對(duì)其藥理作用機(jī)制進(jìn)行深入研究，以探尋其各種作用靶點(diǎn)與作用途徑。明確其作用機(jī)制將有助于其臨床更加合理、有效地應(yīng)用，進(jìn)而發(fā)揮中成藥制劑的獨(dú)特優(yōu)勢(shì)。

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