EDTA依賴性假性血小板減少1例分析

徐浩祥 魏孟廣 張文彬

人體血液中含有大量的Ca2+，它在血液凝固過程中發(fā)揮著重要的作用。使用抗凝劑時，乙二胺四乙酸（ethylenediaminetetraacetic acid，EDTA）可與Ca2+發(fā)生結(jié)合，導致Ca2+在凝血過程中失去作用，從而阻礙血液發(fā)生凝固，而EDTA并未對血細胞形態(tài)和血小板計數(shù)（blood platelet，PLT）產(chǎn)生顯著影響。1993年國際血液學標準化委員會（the International Council for Standardization in Haematology，ICSH）建議使用EDTA作為血常規(guī)分析的抗凝劑［1］，并廣泛應(yīng)用于全自動血細胞分析儀的血常規(guī)自動化檢測中。但有報道顯示，由于患者自身或藥物等因素，EDTA-K2可以引起少數(shù)患者血液中的血小板發(fā)生聚集，從而導致血小板假性減少，此原因約占假性血小板減少的90%以上［2］，容易導致誤診、誤治，臨床應(yīng)予以重視?，F(xiàn)將2017年6月21日我院診治過程中出現(xiàn)的1例EDTA依賴性假性血小板減少癥報告如下。

1 臨床資料

患者女性，83歲，因“頭痛1 d”入院?；颊哂谌朐呵? d無明顯誘因出現(xiàn)頭痛，主要表現(xiàn)為脹痛，伴精神欠佳，反應(yīng)遲鈍，無惡心、嘔吐，無二便失禁，無耳鳴。頭顱CT示：左側(cè)額頂慢性硬膜下血腫，血腫量約115 mL，中線移位約1.2 cm，腦室受壓。查體：意識模糊；雙側(cè)瞳孔等大等圓，直徑約3 mm，直接和間接對光反射均存在；雙上肢肌力Ⅴ級，雙下肢肌力Ⅳ級；巴賓斯基征左側(cè)可疑陽性、右側(cè)陽性。入院時采用EDTA抗凝劑管查血常規(guī)：白細胞計數(shù)（white blood cell count，WBC）為 5.93×109/L，中性粒細胞計數(shù)（neutrophil，NEU）為 3.27×109/L，紅細胞計數(shù)（red blood cell count，RBC）為 4.11×1012/L，PLT為 70×109/L，血紅蛋白（hemoglobin，Hb）為 128 g/L。結(jié)合患者EDTA假性血小板減少病史5年，改用枸櫞酸鈉抗凝劑管復查血常規(guī)，PLT為170×109/L。確認患者PLT正常，無明顯手術(shù)禁忌證。故行左側(cè)額頂硬膜下血腫鉆孔引流術(shù)，術(shù)后患者病情好轉(zhuǎn)出院，恢復生活自理。

2 討論

當身體患有嚴重疾?。ㄈ缑庖咝约膊。?］、肝病、燒傷、癌癥等）時，常伴有假性血小板減少。另外某些抗菌藥物也可誘導血小板減少［4］，其所致血小板減少的機制分為骨髓抑制性血小板減少和免疫性血小板減少。骨髓抑制性血小板減少是指藥物具有抑制巨核細胞生成或?qū)藓思毎兄苯佣拘宰饔?，引起造血功能障礙；免疫性血小板減少則主要與免疫異常有關(guān)［5-6］。

本例患者的血常規(guī)顯示，使用EDTA抗凝劑時的PLT明顯低于使用枸櫞酸鈉抗凝劑時，屬于抗凝劑依賴性的假性血小板減少，此類病例較為少見，文獻報道發(fā)生率約為0.09%～2.10%［7］。目前有研究顯示，EDTA依賴性假性血小板減少的主要原因與采血方式、送檢時間以及EDTA介導誘發(fā)的依賴性聚集有關(guān)［8］，同時血小板表面的某些特殊抗原也可能與這一現(xiàn)象的產(chǎn)生有直接關(guān)系。研究表明，由EDTA介導誘發(fā)的冷抗血小板自身抗體能夠直接作用于血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa，同時其Fc端可與淋巴細胞或單核細胞上的Fc受體結(jié)合，從而發(fā)生衛(wèi)星聚集現(xiàn)象［9］。EDTA還能活化血小板，使血小板表面某些隱匿性抗原的表位構(gòu)象發(fā)生改變，從而與血漿中的自身抗體產(chǎn)生抗原抗體反應(yīng)，激活5-羥色胺、花生四烯酸、腺苷二磷酸、磷脂酶A、磷脂酶C、內(nèi)源性Ca2+和凝血酶原等活性物質(zhì)［10］。這些活性物質(zhì)能夠活化血小板纖維蛋白受體，促使血小板與纖維蛋白原結(jié)合，發(fā)生血小板聚集。另外有文獻顯示，EDTA-K2抗凝的血小板在不同時段的聚集程度不同，2 h時可出現(xiàn)聚集高峰［11］。

同時有研究顯示，將抗凝血標本充分混勻后置于離心管中振蕩，只要平均紅細胞Hb含量（mean corpuscular hemoglobin，MCH）和平均Hb濃度（mean corpuscular hemoglobin concentration，MCHC）的變化≤1.5%，即可避免假性血小板減少的發(fā)生［12］。也有研究發(fā)現(xiàn)，將5 g/L丁胺卡那霉素加入至2 g/L的EDTA抗凝血中，血小板數(shù)量在4 h內(nèi)未見明顯減少，此方法可用于糾正EDTA導致的假性血小板減少［13］。

臨床上EDTA抗凝劑所致假性血小板減少的發(fā)病率較低，為避免誤診誤治，臨床還可采用手工涂片瑞氏染色，在顯微鏡下觀察有無血小板聚集成堆或呈簇的現(xiàn)象來加以鑒別，也可選擇枸櫞酸鈉抗凝劑或者手工方式計數(shù)來進行糾正，以獲得真實準確的檢驗結(jié)果。

1 International Committee for Standardization in Hematology.ICSH recommendations for measurement of erythrocyte sedimentation rate.International Council for Standardization in Haematology （Expert Panel on Blood Rheology）［J］.J Clin Pathol，1993，46（3）：198-203.

2 歐洋華.乙二胺四乙酸依賴性假性血小板減少癥發(fā)病機制的研究進展［J］.醫(yī)學綜述，2014，20（11）：1942-1944.

3 侯文沛，胡琦.原發(fā)免疫性血小板減少癥發(fā)病機制的研究進展［J］.山東醫(yī)藥，2016，56（2）：104-106.

4 趙娟，楊遠榮.抗菌藥物致血小板減少文獻分析［J］.現(xiàn)代藥物與臨床，2017，32（10）：2025-2030.

5 都麗萍，梅丹.藥源性血小板減少癥的發(fā)病機制和臨床表現(xiàn)及防治［J］.藥物不良反應(yīng)雜志，2007，9（6）：414-419.

6 中華醫(yī)學會血液學分會血栓與止血學組.成人原發(fā)免疫性血小板減少癥診斷與治療中國專家共識(2012年版)［J］.中華血液學雜志，2012，33（11）：975-977.

7 Yoshikawa T，Nakanishi K，Maruta T，et al.Anticoagulant-induced pseudothrombocytopenia occurring after transcatheter arterial embolization for hepatocellular carcinoma［J］.Jpn J Clin Oncol，2006，36（8）：527-531.

8 范亞敏，張立紅，李鳳俠，等.應(yīng)用乙二胺四乙酸二鉀抗凝劑引起血小板假性減少 14例分析［J］.河北醫(yī)學，2011，17（9）：1242-1244.

9 周小棉，鄒曉.假性血小板減少癥研究進展［J］.中華檢驗醫(yī)學雜志，2007，30（9）：1065-1068.

10 林建華.EDTA依賴性假性血小板減少研究進展［J］.中華實用診斷與治療雜志，2012，26（1）：6-9.

11 白志瑤，孫繼芹，尹春瓊，等.EDTA-K2、枸櫞酸鈉抗凝劑依賴性假性血小板減少2例分析［J］.實用檢驗醫(yī)師雜志，2015，7（4）：256-259.

12 張建萍.EDTA依賴性假性血小板減少癥及檢測方法分析［J］.重慶醫(yī)學，2010，39（20）：2782-2784.

13 Zhou X，Wu X，Deng W，et al.Amikacin can be added to blood to reduce the fall in platelet count［J］.Am J Clin Pathol， 2011，136（4）：646-652.