ADVIA XPT全自動生化分析儀的性能驗證

張長軍

按照《醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量和能力認可準則》和《醫(yī)療機構(gòu)臨床試驗室管理方法》的規(guī)定［1-2］，對臨床實驗室的全自動生化分析儀進行安裝后，因其對安裝和使用環(huán)境有特殊的要求，故應(yīng)對所開展項目的性能進行分析評價，以保證檢驗結(jié)果的可靠性［3］。同時，生化項目性能評價也是實驗室認可的重要內(nèi)容及要求［4］。結(jié)合本實驗室的情況，選取天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶（aspartate aminotransferase，AST）、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（alanine aminotransferase，ALT）、堿性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶（gamma-glutamyl transpetidase，GGT）、載脂蛋白A1（apolipoprotein A1，ApoA1）、載脂蛋白 B（ApoB）、血鈣（calcium，Ca）、總膽固醇（total cholestero，TC）、甘油三酯（triglyceride，TG）、尿酸（uric acid，UA）、低密度脂蛋白（low densith lipoprotein，LDL）、高密度脂蛋白（high densith lipoprotein，HDL）、總膽紅素（total bilirubin，TBil）、直接膽紅素（direct bilirubin，DBil）、肌酐（creatinine，Cr）、尿素（urea，Ure）、葡萄糖（glucose，Glu）、血磷（P）、脂蛋白 a（lipoprotein a，LPa）、前白蛋白（prealbumin，PA）共20個生化檢驗項目，對上述項目的精密度、準確性、參考范圍和線性范圍的性能進行評價，現(xiàn)報告如下。

1 材料

1.1 儀器與試劑 采用德國西門子公司生產(chǎn)的ADVIA XPT全自動生化分析儀及其配套試劑，試劑均在有效期內(nèi)。

1.2 標本 選取本院健康體檢者當(dāng)天新鮮血清標本作為正常血清標本，要求血樣采集后盡快離心處理，且標本溶血指數(shù)、黃疸指數(shù)和脂血指數(shù)均符合要求。收集各項目的異常高值及低值標本，以2017年衛(wèi)生部臨床檢驗中心第1次發(fā)放的室間質(zhì)評標本的數(shù)據(jù)作為評價依據(jù)。健康體檢者的納入條件：經(jīng)健康體檢，發(fā)育、精神均正常，無任何器質(zhì)性疾?。?個月內(nèi)無輸血史和手術(shù)史；無不良嗜好；近期無用藥或特殊飲食治療史；女性不在經(jīng)期、妊娠期或哺乳期；近1個月內(nèi)無任何疾?。?］。

1.3 校準品和質(zhì)控品 采用西門子原裝試劑的配套校準物檢測 AST、ALT、GGT、ALP、ApoA1、ApoB、Ca、TC、TG、UA、LDL、HDL、TBil、DBil、Cr、Ure、Glu、P、LPa、PA共20個生化項目，質(zhì)控采用美國伯樂生化質(zhì)控水平1、質(zhì)控水平2和質(zhì)控水平3共3種質(zhì)控血清。

2 方法

2.1 精密度驗證 根據(jù)美國臨床和實驗室標準協(xié)會（Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）EP5-A2文件［6］要求，對全自動生化分析儀進行安裝調(diào)試，于每天的室內(nèi)質(zhì)控符合要求后進行驗證試驗。使用高、中、低3個水平的室內(nèi)質(zhì)控，每個水平各分裝5管，每天各解凍其中的1管進行上機檢測，連續(xù)檢測4次，共檢測5 d。利用生化儀中的軟件計算批內(nèi)不精密度和總精密度值，判斷標準為批內(nèi)變異系數(shù)（coefficient of variation，CV）不超過臨床實驗室管理要求的最大允許誤差（total error，TE%）的1/4。CV總不超過臨床實驗室管理要求的1/3TE%。

2.2 正確度驗證 根據(jù)CLSI EP15-A2文件［7］，精密度符合評價標準要求后，本實驗室以2017年第1次衛(wèi)生部臨床檢驗中心回報的生化室間質(zhì)評結(jié)果作為評價指標，以每個項目的5個標本中結(jié)果最大偏倚作為該生化項目的正確度，判斷依據(jù)為不超過衛(wèi)生部臨床檢驗中心室間質(zhì)量評價標準（National Center Clinical Laboratories，NCCL）允許最大誤差的1/3。

2.3 線性范圍驗證 參考CLSI EP6-A2文件［8］，至少檢測6個濃度水平。選擇高值濃度標本（H，高值標本濃度盡量接近線性范圍的上限）和低值濃度標本（L）各1份，濃度范圍要覆蓋儀器說明書給出的線性范圍。將高值濃度標本與低值濃度標本分別按L、1H+4L、2H+3L、3H+2L、4H+1L、H 的比例混合，配成6份不同濃度的標本，隨機排列，每份混合血清標本測定2次，記錄結(jié)果。將實測值與預(yù)期值進行回歸分析。若所有實驗點在坐標紙上呈明顯直線趨勢，用直線回歸對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計，得直線回歸方程Y＝aX+b，同時計算相關(guān)系數(shù) r。若 r2≥0.95，a為0.97～1.03，b與0無顯著差異，則可判斷其呈線性，同時需滿足測定值與理論值偏差＜1/2TE%。

2.4 參考區(qū)間驗證 參考CLSI C28-A2文件［9］，從本院體檢人群標本中選取20份體檢合格的健康人標本，其中男性、女性各10例。在ADVIA XPT全自動生化分析儀上測定所選取的項目（默認稀釋倍數(shù)），并對結(jié)果進行統(tǒng)計分析。針對西門子廠家提供的參考范圍進行驗證，要求20份參考標本中，觀測值在引用廠家的參考區(qū)間以外的標本≤2份（10%的結(jié)果）。計算比率R，計算公式為R＝檢測值在引用廠家的參考區(qū)間之內(nèi)的個數(shù)/20。R≥90%表示可以接受，驗證通過；否則，為驗證未通過。

2.5 統(tǒng)計學(xué)處理 采用Excel 2010表格軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計，計算相關(guān)系數(shù)和回歸方程等。

3 結(jié)果

3.1 精密度驗證結(jié)果 20個生化項目中，各項目的批內(nèi)精密度值均＜1/4TE%；各項目總精密度≤1/3TE%。表明上述20個生化項目在ADVIA XPT全自動生化分析儀上的精密度良好，可滿足性能評價要求。見表1。

3.2 正確度驗證結(jié)果 20個生化項目檢測結(jié)果的平均偏差為0.05～5.36，小于該項目1/3NCCL的要求，各項正確度性能符合要求，評價均通過。見表1。

3.3 線性范圍驗證結(jié)果 相關(guān)系數(shù)r2為0.994 1～1.000 7，r2≥0.95，評價結(jié)果均通過。見表2。

3.4 參考區(qū)間驗證結(jié)果 20個生化項目中，各項目的觀測值在引用廠家的參考區(qū)間之外的個數(shù)均≤2個（10%的結(jié)果），評價結(jié)果均通過。見表3。

表2 ADVIA XPT全自動生化分析儀線性范圍驗證結(jié)果

表3 ADVIA XPT全自動生化分析儀參考區(qū)間驗證結(jié)果

4 討論

設(shè)備的硬件及測量系統(tǒng)的良好分析性能是保證檢驗結(jié)果準確可靠的前提，而檢測系統(tǒng)的性能驗證是評價檢測系統(tǒng)能否用于臨床檢驗工作的前提［10-11］。CNAS-CL02《醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量和能力認可準則》（ISO 15189：2012）中也規(guī)定，實驗室在設(shè)備安裝和使用前應(yīng)驗證其性能，對制造商提供的相關(guān)方法學(xué)分析性能等信息資料要予以驗證確認［12］。本研究對20個生化檢驗項目（包括AST、ALT、GGT、ALP、ApoA1、ApoB、Ca、TC、TG、UA、LDL、HDL、TBil、DBil、Cr、Ure、Glu、P、LPa、PA）進 行 了 精密度、準確性、參考范圍和線性范圍的性能驗證，結(jié)果均可靠。

精密度即多次重復(fù)測定同一量時各檢測結(jié)果的一致性，包括批內(nèi)精密度和批間精密度［13］，是檢測系統(tǒng)分析性能的重要指標之一［14］。對檢測的20個生化項目的實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn)，各項目的批內(nèi)精密度均不超過臨床實驗室管理要求的1/4TE%的質(zhì)量要求，各項目總精密度不超過臨床實驗室管理要求的1/3TE%的質(zhì)量要求，表明20個生化項目在ADVIA XPT全自動生化分析儀上的精密度良好，符合性能評價要求。

正確度是指大量測定的均值與真值的接近程度［15］，參照 EP15-A2 文件［7］，對 2017 年衛(wèi)生部臨床檢驗中心第1次提供的生化室間質(zhì)評的樣本進行檢測，以回報的生化室間質(zhì)評結(jié)果作為評價指標。本研究在ADVIA XPT全自動生化分析儀上檢測的20個生化項目結(jié)果的平均偏差均小于該項目1/3NCCL的要求，表明其正確度性能符合要求。

線性范圍是評價試劑檢測性能的重要指標之一［16］，可報告范圍即檢測線性范圍。本研究中各項結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計分析顯示，相關(guān)系數(shù)r2均≥0.95，表明20個生化項目的線性范圍驗證結(jié)果良好。

臨床檢驗項目參考區(qū)間的制訂是實驗室開展的前提［17-18］。臨床實驗室應(yīng)建立符合中國人群特點的參考范圍，在應(yīng)用該參考范圍之前先對其進行必要的驗證［19］。本研究通過檢測20例健康體檢者的20個生化項目，每個生化項目觀測值在引用廠家的參考區(qū)間以外的個數(shù)均≤2個（10%的結(jié)果），說明本實驗室擬開展的20個生化項目所引用的的參考區(qū)間滿足臨床需求。

綜上所述，本院使用ADVIA XPT全自動生化分析儀及其配套試劑開展檢測的20個生化檢驗項目（包括AST、ALT、GGT、ALP、ApoA1、ApoB、Ca、TC、TG、UA、LDL、HDL、TBil、DBil、Cr、Ure、Glu、P、LPa、PA）的精密度、正確度、線性范圍和參考區(qū)間均驗證合格，達到質(zhì)量標準的要求，可以用于臨床標本的檢測。

1 中國國家標準化管理委員會.GB/T 22576—2008 醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量和能力的專用要求［S］.北京：中國標準出版社，2008.

2 中華人民共和國國家衛(wèi)生和計劃生育委員會.衛(wèi)醫(yī)發(fā)［2006］73醫(yī)療機構(gòu)臨床實驗室管理辦法.北京，2006.

3 劉衛(wèi)兵.如何保證分析前的檢驗質(zhì)量探討［J］.實用檢驗醫(yī)師雜志，2017，9（2）：71-72.

4 中國合格評定國家認可委員會.CNAS-CL02.醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量和能力認可準則（ISO15189：2007）［S］.北京：中國計量出版社，2008：22-25.

5 陳海明，王前明，趙元勛.日立7600全自動生化分析儀的分析性能驗證［J］.國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2015，（20）：2983-2986.

6 Clinical and Laboraytory Standards Institute.EP5-A2.Evaluation of precision of performance of quantitative measurement meth-ods［S］.Wayne，PA：CLSI，2004.

7 Clinical and Laboratory Standards Institute.EP15-A2.User demonstra－ tion of performance for precision and accuracy［S］.Wayne，PA：CLSI，2004.

8 Clinical and Laboratory Standards Institute.EP6-A2.Evaluation of thelinearity of quantitative measurement procedures［S］.Wayne，PA：CLSI，2003.

9 Clinical and Laboratory Standards Institute.C28-A2.How to defineand determine reference intervals in the clinical laboratory［S］.Wayne，PA：CLSI，2000.

10 吳宗勇，賈德強，李佳，等.自動生化分析儀的能力驗證［J］.臨床和實驗醫(yī)學(xué)雜志，2011，10（7）：524-525.

11 陳文祥.臨床檢驗參考測量系統(tǒng)與臨床檢驗分析質(zhì)量保證［J］.中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2007，30（4）：478-480.

12 中國合格評定國家認可委員會.CNAS-CL02 醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量和能力認可準則（ISO15189：2012）［S］.北京：中國計量出版社，2012.

13 徐江霞，龔淑琪，萬振華，等.新型乙肝定量PCR試劑檢測性能驗證［J］.實驗與檢驗醫(yī)學(xué)，2016，34（2）：149-151.

14 王麗馨，楊沛，殷勤，等.強生Vitros 5.1 FS生化分析儀上乳酸脫氫酶的性能驗證［J］.國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2016，37（17）：2382-2383，2386.

15 王治國.臨床檢驗方法確認與性能驗證［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2009：164.

16 盧旭.貝克曼庫爾特AU5800全自動生化分析儀性能驗證［J］.醫(yī)療衛(wèi)生裝備，2016，37（5）：107-110.

17 徐傳華.AU640檢測系統(tǒng)測定胱抑素C的分析測量范圍和臨床可報告范圍的驗證［J］.檢驗醫(yī)學(xué)與臨床，2010，7（22）：2501-2502.

18 趙建忠.生化分析儀精密度、準確性以及線性范圍性能驗證［J］.國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2011，32（10）：1111-1112.

19 張路，王薇，王治國.全國血氣和酸堿分析檢測項目參考區(qū)間現(xiàn)狀調(diào)查［J］.中華危重病急救醫(yī)學(xué)，2015，27（10）：816-820.