sB7-H3、IL-17和IL-8對原發(fā)性肝癌的診斷效果

趙和平，于燕

（西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬紅會醫(yī)院 檢驗科，陜西 西安 710054）

機(jī)體抗腫瘤免疫應(yīng)答過程涉及到多種免疫分子和免疫細(xì)胞的變化[1]。機(jī)體抗腫瘤免疫應(yīng)答過程中發(fā)揮重要作用的免疫分子之一為協(xié)同共刺激分子，分為可溶性協(xié)同共刺激分子和膜型協(xié)同共刺激分子[2]。已有研究[3]證實B7-H3除能夠在B細(xì)胞、活化的T細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞和單核細(xì)胞內(nèi)表達(dá)外，還能夠在多種實體瘤組織內(nèi)表達(dá)，已經(jīng)成為腫瘤臨床診斷的新靶點，且其參與炎癥性疾病的發(fā)生和發(fā)展過程。本研究對sB7-H3、IL-17和IL-8對原發(fā)性肝癌的診斷效果進(jìn)行了探究，以期能為后期臨床治療提供參考，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2014年1月-2015年1月西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬紅會醫(yī)院收治的45例原發(fā)性肝癌患者為觀察組，并選取同期該院健康檢查的45名健康志愿者作為對照組。觀察組男性35例，女性10例。年齡34～74歲，平均（58.39±11.23）歲。臨床分期：Ⅰ、Ⅱ期27例，Ⅲ期18例。10例患者發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。對照組男性32例，女性13例。年齡32～75歲，平均（59.75±11.36）歲。該研究已經(jīng)獲得醫(yī)院倫理學(xué)委員會的批準(zhǔn)。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)臨床診斷為原發(fā)性肝癌的患者[4]；②研究前6個月內(nèi)沒有發(fā)生感染的患者；③自愿參加本項研究并已經(jīng)簽署知情書的患者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他自身免疫系統(tǒng)疾病的患者；②存在過敏性疾病史的患者；③嚴(yán)重的精神疾病患者。

1.2 方法

采集兩組研究對象5 ml空腹靜脈血，1 800 r/min的速率離心5 min，取血清保存在-80℃的冰箱中待測。對sB7-H3表達(dá)的檢測采用ELISA試劑盒（蘇州大學(xué)生物技術(shù)研究所）進(jìn)行檢測，操作步驟根據(jù)試劑盒說明書進(jìn)行。對IL-17和IL-8的檢測采用ELISA試劑盒（美國R＆D公司）進(jìn)行檢測，操作步驟根據(jù)試劑盒說明書進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，采用t檢驗，并進(jìn)行Logistic逐步回歸分析，采用Pearson相關(guān)系數(shù)進(jìn)行相關(guān)性分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血清中sB7-H3、IL-17和IL-8水平比較

觀察組患者血清中sB7-H3、IL-17和IL-8水平與對照組相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），觀察組高于對照組。見表1。

2.2 原發(fā)性肝癌患者血清中sB7-H3、IL-17和IL-8水平與臨床病理的關(guān)系

sB7-H3、IL-17和IL-8水平在患者的性別和年齡之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。臨床分期Ⅰ和Ⅱ的患者IL-17水平高于臨床分期Ⅲ的患者，sB7-H3和IL-8水平低于臨床分期Ⅲ的患者，有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的患者sB7-H3和IL-8水平高于無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的患者，IL-17水平低于無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

2.3 血清中sB7-H3、IL-17和IL-8的相關(guān)性分析

原發(fā)性肝癌患者血清中sB7-H3與IL-8水平無相關(guān)，sB7-H3與IL-17呈正相關(guān)，IL-17與IL-8水平呈負(fù)相關(guān)。見圖1～3。

2.4 逐步Logistic回歸模型預(yù)測肝癌

血清內(nèi)sB7-H3、IL-8和IL-17水平高的患者肝癌轉(zhuǎn)移的風(fēng)險分別為血清內(nèi)sB7-H3、IL-8、IL-17水平低患者的1.001倍、1.030倍和1.003倍。Logistic回歸預(yù)測模型的χ2=64.267，P=0.000，說明血清內(nèi)sB7-H3、IL-8、IL-17水平能夠診斷肝癌。見表3。

表1 血清中sB7-H3、IL-17和IL-8水平比較 （n=45，pg/ml，±s）

表1 血清中sB7-H3、IL-17和IL-8水平比較 （n=45，pg/ml，±s）

組別 sB7-H3 IL-17 IL-8觀察組 4 143.47±976.27 356.62±78.51 337.86±95.26對照組 2 076.18±605.42 317.34±59.62 167.54±68.73 t值 2.561 2.492 2.377 P值 0.013 0.024 0.033

表2 原發(fā)性肝癌患者血清中sB7-H3、IL-17和IL-8水平與臨床病理的關(guān)系 （pg/ml，±s）

表2 原發(fā)性肝癌患者血清中sB7-H3、IL-17和IL-8水平與臨床病理的關(guān)系 （pg/ml，±s）

項目 IL-17 IL-8 sB7-H3性別男（n=35） 354.79±67.33 319.17±81.59 3 940.95±891.73女（n=10） 350.69±86.77 385.82±97.45 3 650.26±819.65 t值 1.687 1.861 1.939 P值 0.089 0.072 0.059年齡＜60歲（n=16）349.93±76.55 337.34±94.01 3 873.36±622.36≥60歲（n=29）360.08±63.32 334.07±83.78 3 850.68±829.61 t值 1.956 1.627 1.652 P值 0.052 0.150 0.098臨床分期Ⅰ、Ⅱ（n=27）361.38±63.41 326.11±87.64 3 620.95±688.28Ⅲ（n=18） 340.56±83.38 345.97±91.67 4 353.53±556.42 t值 2.580 2.465 2.279 P值 0.010 0.028 0.037遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有（n=10） 333.03±76.05 361.41±98.94 4 205.61±707.84無（n=35） 360.29±69.32 325.02±84.59 3 719.36±726.95 t值 2.569 2.147 1.975 P值 0.012 0.040 0.049

表3 逐步Logistic回歸分析的相關(guān)參數(shù)

圖1 sB7-H3與IL-8

圖2 sB7-H3與IL-17

圖3 IL-8與IL-17

3 討論

肝癌患者生存質(zhì)量和生存率的提高極大程度取決于早期診斷，臨床上目前用于對肝癌輔助診斷的指標(biāo)主要為癌胚抗原（CEA）、甲胎蛋白（AFP）和CA199等，但上述指標(biāo)的敏感性和特異性并不理想，漏診率較高[5]。B7-H3是一種Ⅰ型跨膜蛋白，人體多種組織內(nèi)B7-H3的mRNA均能廣泛表達(dá)，B7-H3的蛋白分子能夠在B細(xì)胞、活化的T細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞和單核細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，并參與自身免疫性疾病的發(fā)生過程與機(jī)體免疫應(yīng)答的調(diào)節(jié)過程[6]。已有研究指出[7]，B7-H3在原發(fā)性肝癌患者的組織中水平升高，且B7-H3與腎癌、乳腺癌、胃癌、胰腺癌、骨肉瘤、結(jié)直腸癌、肺癌等多種腫瘤組織的發(fā)生和發(fā)展均有密切的相關(guān)性。因而本研究對sB7-H3、IL-17和IL-8對原發(fā)性肝癌的診斷效果進(jìn)行了探究，以期能為后期臨床治療提供參考。

IL-17是一種能夠通過誘導(dǎo)趨化因子和TNF-α、IL-6等炎癥因子的表達(dá)來促進(jìn)中性粒細(xì)胞向炎癥部位移動的新型炎癥因子，幫助機(jī)體提高抗腫瘤效應(yīng)，因而IL-17在對原發(fā)性肝癌的早期診斷中具有一定的作用[8-9]。IL-8是一種能夠?qū)谏亓龅倪w移進(jìn)行調(diào)節(jié)的炎性趨化因子，IL-8在機(jī)體對化療藥物產(chǎn)生的抵抗作用中和機(jī)體腫瘤細(xì)胞自我更新的維持中均有重要作用[10-11]，且已有研究指出[12]抗癌藥物能夠促進(jìn)IL-8的分泌，且IL-8水平的高低與腫瘤的大小呈正相關(guān)。本文研究結(jié)果顯示，觀察組患者血清中sB7-H3、IL-17和IL-8水平與對照組相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，觀察組均高于對照組。這一結(jié)果與上述論述相似，說明sB7-H3、IL-17和IL-8可以作為一種腫瘤標(biāo)志物用于對原發(fā)性肝癌的早期診斷中。其次，本文研究結(jié)果顯示，原發(fā)性肝癌患者血清中sB7-H3水平與IL-8水平無相關(guān)性，sB7-H3水平與IL-17呈正相關(guān)，IL-17水平與IL-8水平呈負(fù)相關(guān)。這說明細(xì)胞因子對于原發(fā)性肝癌的免疫調(diào)節(jié)作用存在一定的網(wǎng)絡(luò)性，而對于這一特性的詳細(xì)機(jī)制需要通過擴(kuò)大研究群體，進(jìn)一步研究和分析。而血清內(nèi)sB7-H3、IL-8和IL-17水平高的患者肝癌轉(zhuǎn)移的風(fēng)險分別是血清內(nèi)sB7-H3、IL-8和IL-17水平低患者的1.001、1.030和1.003倍。這可能是由于肝癌細(xì)胞株上的B7-H3表達(dá)能夠?qū)D8+T細(xì)胞的增值產(chǎn)生影響，抑制IL-17的分泌，進(jìn)而幫助腫瘤細(xì)胞逃逸。本研究還通過Logistic回歸預(yù)測模型對sB7-H3、IL-8和IL-17水平的診斷作用進(jìn)行驗證，結(jié)果顯示血清內(nèi)sB7-H3、IL-8和IL-17水平能夠診斷肝癌。因此，對血清內(nèi)sB7-H3、IL-8和IL-17進(jìn)行聯(lián)合檢測，可能會提高肝癌早期診斷率，此類研究未見報道，但是考慮本研究中所選研究對象較少，因此需要擴(kuò)大研究群體，對此猜想進(jìn)行進(jìn)一步驗證。

綜上所述，原發(fā)性肝癌患者外周血血清中sB7-H3與IL-17水平呈正相關(guān)，IL-17與IL-8水平呈負(fù)相關(guān)。且血清內(nèi)sB7-H3、IL-8和IL-17水平能夠診斷肝癌。

[1]林璐,葉輝.細(xì)胞因子拮抗肽的制備、作用機(jī)制及應(yīng)用研究進(jìn)展[J].山東醫(yī)藥,2014,54(31): 98-101.

[2]王遠(yuǎn),吳昌平,盧斌峰,等.調(diào)節(jié)性T細(xì)胞在腫瘤免疫逃逸中的機(jī)制[J].中華實驗外科雜志,2013,30(11): 2466-2469.

[3]許文,李豐衣,余靈祥,等.血漿可溶型B7-H3可作為乙型肝炎病毒相關(guān)性肝癌輔助診斷標(biāo)志物[J].細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志,2014,30(7): 744-747.

[4]中國抗癌協(xié)會肝癌專業(yè)委員會.原發(fā)性肝癌診斷標(biāo)準(zhǔn)[J].中華肝臟病雜志,2000,8(3): 135.

[5]ZHENG L,GONG W,LIANG P.et al.Effects of AFP-activated PI3K/Akt signaling pathway on cell proliferation of liver cancer[J].Tumour Biology: the Journal of the International Society for Oncodevelopmental Biology and Medicine,2014,35(5): 4095-4099.

[6]BIN Z,GUANGBO Z,YAN G,et al.Overexpression of B7-H3 in CD133+colorectal cancer cells is associated with cancer progression and survival in human patients[J].Journal of Surgical Research: Clinical and Laboratory Investigation,2014,188(2):396-403.

[7]康富標(biāo).共刺激分子B7-H3在肝細(xì)胞癌的表達(dá)及相關(guān)機(jī)制研究[D].北京: 中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院,2015.

[8]崔芳芳,龔作炯.慢性丙型肝炎、肝硬化、肝癌患者血清IL-17、IL-6和維生素D水平變化及其臨床意義[J].胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志,2014,23(12): 1448-1450.

[9]范莎莎,李愛民,李榮,等.IL-17在肝癌患者血清中表達(dá)增高對肝癌診斷的研究[J].湖南師范大學(xué)自然科學(xué)學(xué)報,2014,37(3): 19-23.

[10]張嶸.血清IL-8與DCP聯(lián)合檢測診斷原發(fā)性肝癌及評價TACE預(yù)后的價值[D].江西: 南昌大學(xué),2015.

[11]徐建春.肝硬化患者血清IGF-I和IL-6、IL-8檢測的臨床意義[J].標(biāo)記免疫分析與臨床,2014,21(3): 232-233.

[12]楊明德,李冬梅,于慧玲,等.化療前后乳腺癌患者血清中IL-6、IL-8及TNF-α的變化及意義[J].中國婦幼保健,2015,30(1): 136-138.