TCT聯(lián)合HPV-DNA檢測在宮頸病變篩查中的應(yīng)用

宮頸癌是最常見的婦科惡性腫瘤之一，在全球婦女惡性腫瘤發(fā)病率中居第二位，僅次于乳腺癌。據(jù)世界衛(wèi)生組織報(bào)道，全世界每年約新發(fā)50萬宮頸癌病例，其中80%發(fā)生在發(fā)展中國家[1]。中國每年新發(fā)病例約13.15萬，占世界宮頸癌新發(fā)病例的28.8%，而且近年來宮頸癌的發(fā)病趨于年輕化[2]。宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展需要經(jīng)歷一個(gè)較長的癌前病變期，其發(fā)生、發(fā)展是由量變到質(zhì)變，由漸變到突變的過程[3]。一般來說，從宮頸上皮內(nèi)瘤變（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）發(fā)展為宮頸侵襲癌需10～15年[3]。鑒于宮頸癌的發(fā)病特征及現(xiàn)狀，必須做到早發(fā)現(xiàn)、早治療，因此及時(shí)而規(guī)范的篩查成為早期發(fā)現(xiàn)宮頸病變，降低宮頸癌發(fā)生的重要環(huán)節(jié)[4]。本研究采用TCT聯(lián)合二代雜交捕獲技術(shù)（HC-2）檢測高危型人乳頭瘤病毒（human papillomavirus，HPV）感染以及病理學(xué)檢查的方法，探討TCT和HC-2檢測技術(shù)在宮頸病變篩查中的價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 研究對象

以2016年1—12月在我院門診因慢性宮頸炎、接觸性出血、血性白帶等原因就診的患者481名為研究對象，年齡22～50歲，平均年齡為（35.00±2.33）歲，有性生活2年以上，受檢者無盆腔手術(shù)史，3天內(nèi)未行性生活，24小時(shí)未行陰道沖洗，目前未妊娠。對以上患者行TCT及HPV-DNA檢查，對TCT檢測出現(xiàn)不典型鱗狀上皮細(xì)胞（atypical squamous cells of undetermined significance，ASCUS）及以上病變或HC-2檢測出現(xiàn)HPV陽性的患者進(jìn)行陰道鏡下取活組織行病理學(xué)檢查，根據(jù)病理學(xué)檢查的結(jié)果分為正常組，宮頸癌前病變（CIN組）及宮頸癌組。

1.2 檢測方法

1.2.1 細(xì)胞學(xué)檢查 采用宮頸細(xì)胞學(xué)TBS分級系統(tǒng)進(jìn)行細(xì)胞學(xué)的診斷[5]：保存完好的上皮細(xì)胞覆蓋率＞10%為滿意涂片；診斷包括：正?；蛄夹苑磻?yīng)改變（WNL）；未明確診斷意義的不典型鱗狀上皮細(xì)胞（ASCUS）；低度鱗狀上皮內(nèi)病變（LSIL）；高度鱗狀上皮內(nèi)病變（HSIL）；鱗狀細(xì)胞癌（SCC）；腺癌（AC）。TBS報(bào)告正?；蜓装Y為細(xì)胞學(xué)陰性，ASCUS及以上病變?yōu)榧?xì)胞學(xué)陽性。

1.2.2 HPV-DNA檢測 采用HC-2檢測方法，首先將宮頸口的分泌物擦拭干凈，然后采用配套的宮頸采樣器在宮頸口沿同一方向旋轉(zhuǎn)3～5圈，立即放入保存液中保存。之后的操作步驟嚴(yán)格按照美國Digene公司的HC-2檢測技術(shù)進(jìn)行，主要步驟有細(xì)胞裂解、雜交、捕獲、信號放大及檢測。HC-2可一次性檢測13種型別的高危型HPV（16，18，31，33，35，39，45，51，52，56，58，59，68）。

1.2.3 陰道鏡及病理學(xué)檢查 在陰道鏡下使用碘染色的方法取宮頸病變部位的組織，若宮頸光滑，取3、6、9、12點(diǎn)檢查，用4%多聚甲醛固定，石蠟包埋后切片，切片的厚度為3 μm。病理診斷由至少兩位病理科的醫(yī)生鏡下觀察確定，結(jié)果為正常、宮頸癌前病變（CIN）、宮頸癌。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 13.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料以“%”表示，采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

481名患者行TCT檢查，結(jié)果異常者有81例（16.84%），行HPA-DNA檢查陽性例數(shù)為139例（28.9%），病理學(xué)檢查結(jié)果異常者有63例（13.09%）。見表1。

表1 TCT、HPA-DNA及病理學(xué)結(jié)果

63例病理學(xué)異常者中，行TCT檢查陽性例數(shù)為42例，檢出率為66.67%；HPV-DNA檢查陽性例數(shù)為49例，檢出率為75.34%；TCT聯(lián)合HPV-DNA檢測陽性例數(shù)為57例，檢出率為90.47%。TCT和HPV-DNA分別與TCT+HPV-DNA的檢測率相比，檢出率的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 TCT、HPA-DNA單獨(dú)及聯(lián)合檢出率的結(jié)果（n，%）

以組織學(xué)結(jié)果作為金標(biāo)準(zhǔn)，單獨(dú)應(yīng)用TCT檢測敏感度、特異度、陽性預(yù)測值及陰性預(yù)測值分別為66.67%、90.67%、51.85%及93.5%；單獨(dú)應(yīng)用HPV-DNA檢測，四項(xiàng)值分別為77.78%、78.49%、35.25%及96.13%；TCT聯(lián)合HPV-DNA檢測，四項(xiàng)值分別為90.47%、82.74%、90.47%及95.78%。見表3。

表3 TCT、HPA-DNA單獨(dú)及聯(lián)合檢測結(jié)果（%）

3 討論

目前國內(nèi)外均認(rèn)為持續(xù)的高危型人乳頭瘤病毒（human papilloma virus，HPV）感染是宮頸癌及宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）的必要條件[6]。HPV感染后一般在12～18個(gè)月會自行消除，但這個(gè)時(shí)候病毒可能只是處在一個(gè)靜息期，另外之前感染過HPV者有再次感染的可能性，所以HPVDNA檢測作為宮頸病變篩查的一種重要手段受到腫瘤工作者的重視而應(yīng)用于臨床。該技術(shù)采用雜交捕獲信號放大的原理，可一次檢測13種高危型HPV，其是導(dǎo)致宮頸病變的主要類型[7]。具有操作簡便、穩(wěn)定可靠、靈敏度高、干擾因素少等優(yōu)點(diǎn)，適用于大范圍人群的篩查[8]。

TCT是目前被認(rèn)為是一種較好且實(shí)用的宮頸病變的篩查的方法。取材部位在宮頸癌高發(fā)的移行帶區(qū)，收集該部位的宮頸脫落細(xì)胞，保存在特定的固定液中，并采用全自動(dòng)制片機(jī)進(jìn)行制片，彌補(bǔ)了常規(guī)方法取材時(shí)可能出現(xiàn)細(xì)胞丟失和涂片質(zhì)量差的問題，該方法是國內(nèi)外公認(rèn)的漏診率低，細(xì)胞涂片質(zhì)量好，病變成分保存完全的方法，從而提高了對宮頸癌前病變及宮頸癌的診斷。

本研究的結(jié)果表明，TCT和HPV-DNA二種檢測方法在臨床上均是常用的宮頸病變早期篩查方法，但是TCT只能發(fā)現(xiàn)細(xì)胞學(xué)的變化，不能預(yù)測可能出現(xiàn)宮頸病變的病例，HPV-DNA雖然可以明確與宮頸病變密切相關(guān)的高危型HPV感染的類型，但是不能判斷宮頸病變的程度。聯(lián)合采用TCT和HPV-DNA檢測的檢出率高于單獨(dú)應(yīng)用其中一種方法，比較其差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。而且聯(lián)合采用TCT和HPV-DNA檢測其敏感度、特異度、陽性預(yù)測值及陰性預(yù)測值均較高，由此我們推測，TCT和HPV-DNA聯(lián)合檢測適用于臨床上宮頸病變的篩查，二者同時(shí)使用可提高宮頸病變的診斷率，減少漏診，并指導(dǎo)臨床治療，此外對宮頸病變的預(yù)后判斷也有非常重要的意義。但是HPV-DNA檢測費(fèi)用相對較高，對于經(jīng)濟(jì)狀況較好的女性，可以選擇聯(lián)合TCT和HPV-DNA進(jìn)行宮頸病變的篩查。

[1]Parkin DM，Bray F，F(xiàn)erlay J，et al．Estimating the world cancer burden ：Globocan 2000[J]．Int J Cancer，2001，94（2）：153-156．

[2]Kim K，Ryu SY．Major clinical research advances in gynecologic cancer 2009[J]．J Gynecol Oncol，2009，20（4）：203-209．

[3]豐有吉，沈鏗．婦產(chǎn)科學(xué)[M]．北京：人民衛(wèi)生出版社，2006：317．

[4]楊亞軍，楊明珠，秦文芝．不同級別宮頸病變中HPV感染狀態(tài)的臨床分析 [J]．中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)，2015，19（1）：71-74．

[5]Solomon D，Nayar R．The Bethesda System for Reporting Cervical Cytology[M]．2nd ed．New York ：Springer，2004 ：77-90．

[6]梁慧，付敏，任玲，等．高危型HPVDNA聯(lián)合TCT在子宮頸癌前病變篩查中的診斷價(jià)值[J]．中國婦幼保健，2011，26（36）：5829-5830．

[7]de Sanjose S，Wheeler CM，Quint W，et al．Age-specific occurrence of HPV16 and HPV18 related cervical cancer[J]．Cancer Epidemiol Biomarkers Prev，2013，22（7）：1313-1318．

[8]Schlecht NF，Trerium A， Duroc-France E，et al．Viral load as a predictor of risk of cervical intraepithelial neoplasia[J]．Int J Cancer，2003，103（4）：519-524．