朱榮生 王懷中* 齊 波 黃保華 孫守禮 王建才 位 賓 呼紅梅**
(1.山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所,濟(jì)南 250100;2.山東省畜禽疫病防治與繁育重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,濟(jì)南 250100;3.青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院,青島 266109;4.濟(jì)南海華生物科技有限公司,濟(jì)南 250108)
仔豬斷奶應(yīng)是一個(gè)平緩的、循序漸進(jìn)的過程,一般應(yīng)超過17周[1]。隨著生豬養(yǎng)殖集約化、規(guī)?;膶?shí)施,大多數(shù)豬場為了提高母豬繁殖效率,將仔豬斷奶時(shí)間提至7~28日齡。斷奶使仔豬的生活環(huán)境、攝入飼糧等瞬間發(fā)生變化,由此引起的應(yīng)激使仔豬腸屏障功能受損,采食量降低[2],腸絨毛萎縮[3-5],對傳染性疾病的易感率增加[3]。
三丁酸甘油酯作為一種良好的丁酸來源,能夠直達(dá)腸道,為腸道發(fā)育提供能量和養(yǎng)分,促進(jìn)腸上皮細(xì)胞增殖,促進(jìn)養(yǎng)分吸收利用[6-8]。研究表明,飼糧添加0.08%~0.30%三丁酸甘油酯可使斷奶仔豬平均日增重增加5.79%~11.75%,料重比降低11.75%,空腸絨毛高度顯著增加15.9%,隱窩深度顯著降低8.9%,腸道中尸胺、腐胺、精胺、組胺含量增加1.5~10.0倍,而且三丁酸甘油酯的添加可顯著緩解由乙酸刺激直腸引起的肌酸酐、前列腺素E2含量的升高[8-12]。飼糧添加0.1%~0.3%三丁酸甘油酯效果最優(yōu)[8,10,12-13]。核苷酸是一種具有生物活性的物質(zhì),一般情況下機(jī)體內(nèi)的核苷酸通過從頭合成途徑進(jìn)行合成,但在快速生長和應(yīng)激期間由飼糧中補(bǔ)充核苷酸對仔豬生長性能和健康有益[14]。仔豬斷奶前采食富含核苷酸的母豬乳汁,但是斷奶后飼糧中的核苷酸含量極少,因此斷奶豬飼糧添加核苷酸可緩解斷奶應(yīng)激,增加采食量[15-16]。斷奶仔豬飼糧添加0.5~2.0 g/kg核苷酸可使仔豬平均日增重、平均日采食量分別顯著增加3.14%~11.07%和5.58%~15.50%,料重比顯著降低3.16%~4.24%[17],腹瀉率由15.63%降至1.53%,死亡率由4.69%降至1.56%[16],而且在免疫系統(tǒng)功能維持和降低氧化應(yīng)激方面也發(fā)揮著重要作用[18-19]?;谌∷岣视王ψ胸i腸道發(fā)育和養(yǎng)分吸收的促進(jìn)作用[8,10],以及核苷酸對仔豬采食量和生長性能的改善作用[14-17],但是目前二者同時(shí)在斷奶仔豬上的應(yīng)用研究未見報(bào)道,多數(shù)研究集中在單一物質(zhì)的應(yīng)用效果研究,因此,本試驗(yàn)旨在研究飼糧添加三丁酸甘油酯和核苷酸對斷奶仔豬生長性能、血清生化指標(biāo)和腸組織形態(tài)的影響,為二者在斷奶仔豬上的應(yīng)用提供支撐。
試驗(yàn)在菏澤宏興原種豬繁育有限公司進(jìn)行。選擇21日齡、體重為8.4 kg左右的健康杜洛克×長白×大約克(DLY)三元斷奶仔豬160頭,隨機(jī)分為2組,每組10個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)8頭。對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧,試驗(yàn)組在基礎(chǔ)飼糧中添加0.20%三丁酸甘油酯和0.15%核苷酸。試驗(yàn)期38 d,期間豬只自由采食、飲水,按照豬場常規(guī)管理規(guī)程和正常免疫程序進(jìn)行。基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。
表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))
1)預(yù)混料為每千克飼糧提供The premix provided the following per kg of the diet:VA 8 200 IU,VD32 100 IU,VE 30.5 mg,VK32.8 mg,VB25.2 mg,VB62.1 mg,VB120.11 mg,生物素 biotin 0.10 mg,葉酸 folic acid 0.96 mg,D-泛酸D-pantothenic acid 17.2 mg,煙酸 nicotinic acid 20.1 mg,氯化膽堿 choline chloride 702 mg,抗氧化劑 antioxidant 100 mg,F(xiàn)e (as ferrous sulfate) 820 mg,I (as potassium iodide) 0.85 mg,Ca 8.6 g,P 3.5 g,賴氨酸 Lys 0.7 g。
2)代謝能為計(jì)算值,其余為實(shí)測值。ME was a calculated value, while the others were measured values.
三丁酸甘油酯和核苷酸均由濟(jì)南海華生物科技有限公司提供。三丁酸甘油酯純度在45%以上,核苷酸純度為50%,其余部分均為載體。
1.3.1 生長性能指標(biāo)
試驗(yàn)第1天和第38天晨飼前對仔豬逐頭稱重。在試驗(yàn)期間,每天09:00—10:00、17:00—18:00觀察仔豬排糞情況,記錄腹瀉個(gè)體。以個(gè)體為單位記錄豬只死亡和淘汰情況,發(fā)現(xiàn)死淘豬及時(shí)結(jié)料并稱重。根據(jù)每日記錄的給料量、剩余料量和損耗料量,以重復(fù)為單位計(jì)算平均日采食量、料重比,同時(shí)計(jì)算個(gè)體平均日增重和腹瀉率。
1.3.2 血清生化指標(biāo)
于試驗(yàn)第38天晨飼前試驗(yàn)豬空腹稱重后,逐頭前腔靜脈采血10 mL,放入非抗凝離心管中靜置15 min,3 000 r/min離心10 min分離血清,至于-80 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>
使用日立7180生化分析儀測定血清中尿素氮、尿酸、葡萄糖、總膽固醇、總蛋白、球蛋白、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)含量及二胺氧化酶活性。試劑盒購自四川邁克生物科技股份有限公司,操作步驟按照試劑盒說明書進(jìn)行。
1.3.3 腸組織形態(tài)學(xué)檢測及黏膜相關(guān)免疫細(xì)胞統(tǒng)計(jì)
試驗(yàn)第38天晨飼前試驗(yàn)豬空腹稱重后,每組隨機(jī)選擇3頭進(jìn)行屠宰,取十二指腸、空腸、回腸制作石蠟切片,經(jīng)蘇木精-伊紅(HE)染色、阿利新藍(lán)-高碘酸雪夫氏(AB-PAS)染色、甲苯胺藍(lán)染色后,于10×20倍顯微鏡下拍照,應(yīng)用Image-Pro Plus 6.0軟件測量腸絨毛高度、隱窩深度、黏膜厚度和腸壁厚度,統(tǒng)計(jì)杯狀細(xì)胞、柱狀細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和肥大細(xì)胞數(shù)量。具體檢測方法是:1)取每根腸管橫斷面,統(tǒng)計(jì)觀察5根最長且排列整齊的絨毛,統(tǒng)計(jì)單位面積柱狀細(xì)胞數(shù)量和分布;2)取每根腸管橫斷面,統(tǒng)計(jì)觀察5根最長且排列整齊的絨毛,計(jì)數(shù)每100個(gè)腸黏膜上皮柱狀細(xì)胞間淋巴細(xì)胞、杯狀細(xì)胞數(shù)量和分布;3)統(tǒng)計(jì)觀察每根腸管橫斷面的腸壁全層,包括黏膜及黏膜下層、肌層及漿膜層中每100個(gè)柱狀細(xì)胞間的肥大細(xì)胞、淋巴細(xì)胞數(shù)量和分布。
1.3.4 空腸內(nèi)容物消化酶活性檢測
試驗(yàn)第38天晨飼前試驗(yàn)豬空腹稱重后,每組隨機(jī)選擇3頭進(jìn)行屠宰,取空腸內(nèi)容物,采用比色法測定脂肪酶、胰蛋白酶、淀粉酶、麥芽糖酶、乳糖酶和蔗糖酶活性。試劑盒購自南京建成生物工程研究所,操作步驟按照說明書進(jìn)行。
數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 19.0軟件的單因素方差(one-way ANOVA)程序進(jìn)行分析,差異顯著時(shí)采用LSD法進(jìn)行多重比較。P<0.05為差異顯著,P<0.01為差異極顯著,結(jié)果均以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。
由表2可見,組間試驗(yàn)豬初始體重相近,無顯著差異(P>0.05);飼養(yǎng)38 d后試驗(yàn)組仔豬平均體重在數(shù)值上略高于對照組,提高了4.86%,但差異不顯著(P>0.05)。與對照組相比,試驗(yàn)組平均日采食量和平均日增重分別提高了5.83%(P>0.05)和7.76%(P<0.05),腹瀉率極顯著降低了61.90%(P<0.01),料重比差異不顯著(P>0.05)。由此可見,飼糧添加三丁酸甘油酯和核苷酸可增加斷奶仔豬平均日采食量,顯著提高斷奶仔豬的平均日增重,極顯著降低腹瀉率。
表2 飼糧添加三丁酸甘油酯和核苷酸對斷奶仔豬生長性能的影響
同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05),不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)。下表同。
In the same row, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), and with different capital letter superscripts mean extremely significant difference (P<0.01). The same as below.
由表3可見,與對照組相比,試驗(yàn)組血清葡萄糖含量顯著降低了10.34%(P<0.05),血清IgA、IgG、IgM含量分別顯著或極顯著增加了82.03%(P<0.01)、15.65%(P<0.05)和15.69%(P<0.05),血清球蛋白含量顯著增加了15.82%(P<0.05),血清二胺氧化酶活性極顯著降低了34.04%(P<0.01)。試驗(yàn)組與對照組間血清尿素氮、尿酸、總膽固醇和總蛋白含量差異不顯著(P>0.05)。由此可見,飼糧添加甘油三酯和核苷酸可顯著增加仔豬血清球蛋白及IgA、IgG、IgM含量,顯著降低血清葡萄糖含量和二胺氧化酶活性。
由表4可見,十二指腸、空腸、回腸絨毛高度依次降低,空腸和回腸的隱窩深度大于十二指腸,絨毛高度/隱窩深度(V/C)值的變化趨勢與絨毛高度一致。與對照組相比,試驗(yàn)組仔豬十二指腸、空腸、回腸絨毛高度不同程度增加,隱窩深度不同程度減小,V/C值不同程度增加。其中,十二指腸和空腸絨毛高度分別顯著增加了25.58%和26.98%(P<0.05);十二指腸和空腸V/C值分別顯著或極顯著增加了45.55%(P<0.01)和32.51%(P<0.05);十二指腸、空腸和回腸隱窩深度均減小,但差異不顯著(P>0.05);回腸絨毛高度、V/C值雖然分別增加了10.39%和8.44%,但差異不顯著(P>0.05)。
表3 飼糧添加三丁酸甘油酯和核苷酸對斷奶仔豬血清生化指標(biāo)的影響
十二指腸、空腸、回腸腸壁厚度、黏膜厚度呈遞減趨勢。與對照組相比,試驗(yàn)組仔豬十二指腸、空腸、回腸腸壁厚度分別增加了5.16%、4.88%、9.02%(P>0.05),黏膜厚度分別增加了3.30%(P>0.05)、10.91%(P>0.05)和35.89%(P<0.01)。
試驗(yàn)組仔豬十二指腸、空腸、回腸杯狀細(xì)胞、柱狀細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、肥大細(xì)胞數(shù)量均與對照組間差異不顯著(P>0.05)。與對照組相比,試驗(yàn)組仔豬十二指腸杯狀細(xì)胞、淋巴細(xì)胞數(shù)量在數(shù)值上分別增加了32.82%、22.69%,空腸杯狀細(xì)胞、柱狀細(xì)胞、肥大細(xì)胞數(shù)量在數(shù)值上分別增加了25.37%、10.10%、22.66%,回腸杯狀細(xì)胞、柱狀細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和肥大細(xì)胞數(shù)量在數(shù)值上分別增加了28.09%、19.21%、11.28%和25.35%。
由此可見,飼糧添加三丁酸甘油酯和核苷酸可增加斷奶仔豬十二指腸、空腸、回腸絨毛高度、V/C值、腸壁厚度和黏膜厚度,降低隱窩深度。
表4 飼糧添加三丁酸甘油酯和核苷酸對斷奶仔豬腸組織形態(tài)的影響
續(xù)表4項(xiàng)目Items對照組Controlgroup試驗(yàn)組ExperimentalgroupP值P?value空腸Jejunum絨毛高度Villusheight/μm352.42±12.84b447.49±17.41a0.048隱窩深度Cryptdepth/μm144.95±4.35140.41±8.260.685絨毛高度/隱窩深度V/C2.43±0.17b3.22±0.37a0.047黏膜厚度Mucosathickness/μm744.70±34.19825.96±15.370.059腸壁厚度Intestinalwallthickness/mm2.87±0.083.01±0.140.493杯狀細(xì)胞Globletcell/個(gè)6.15±1.287.71±0.930.302柱狀細(xì)胞Columnarcell/(個(gè)/mm2)18854.82±1534.5420759.13±733.420.322淋巴細(xì)胞Lymphocyte/個(gè)7.21±0.757.00±0.410.858肥大細(xì)胞Mastocyte/個(gè)3.53±0.414.33±0.400.381回腸Ileum絨毛高度Villusheight/μm310.74±29.68343.03±20.140.363隱窩深度Cryptdepth/μm144.15±7.27137.10±4.370.585絨毛高度/隱窩深度V/C2.25±0.232.44±0.190.598黏膜厚度Mucosathickness/μm491.03±57.96B667.24±20.66A0.005腸壁厚度Intestinalwallthickness/mm2.55±0.322.78±0.410.625杯狀細(xì)胞Globletcell/個(gè)8.33±1.1610.67±1.090.289柱狀細(xì)胞Columnarcell/(個(gè)/mm2)18185.99±1102.0821679.54±1133.930.213淋巴細(xì)胞Lymphocyte/個(gè)8.33±0.989.27±1.370.557肥大細(xì)胞Mastocyte/個(gè)4.93±0.076.18±0.090.227
杯狀細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和肥大細(xì)胞數(shù)量為每100個(gè)柱狀細(xì)胞間的數(shù)量。
The number of globlet cell, lymphocyte and mastocyte was the number of cells in every 100 epithelial cells.
由表5可見,試驗(yàn)豬仔豬腸內(nèi)容物脂肪酶、胰蛋白酶、淀粉酶、麥芽糖酶、乳糖酶和蔗糖酶活性均高于對照組,分別提高了18.08%、75.00%、9.69%、78.21%、8.66%和17.16%,其中胰蛋白酶和麥芽糖酶活性提高顯著(P<0.05),其他酶活性提高均不顯著(P>0.05)。
表5 飼糧添加三丁酸甘油酯和核苷酸對斷奶仔豬腸內(nèi)容物酶活性的影響
研究表明,飼糧添加0.1%三丁酸甘油酯對仔豬平均日增重、平均日采食量、料重比的影響不顯著,但腹瀉率顯著降低了6.83%,死亡率由18.75%降至6.25%[10,12]。飼糧添加0.15%~0.20%三丁酸甘油酯可使仔豬平均日增重顯著增加10.24%~11.79%,料重比顯著降低4.14%~6.62%,腹瀉率顯著降低49.35%~66.67%,平均日采食量增加3.10%~7.02%,而且飼糧中粗脂肪、粗蛋白質(zhì)和能量的表觀消化率顯著提高4.09%~12.38%[11,13]。但是飼糧同時(shí)添加三丁酸甘油酯和乳糖醇、三丁酸甘油酯和牛至油對仔豬生長性能的影響顯著高于單獨(dú)添加三丁酸甘油酯或牛至油、乳糖醇[5,10,12]。飼糧添加0.5%~2.0%核苷酸可使仔豬平均日增重、平均日采食量分別顯著增加3.14%~11.07%和5.58%~15.50%,料重比顯著降低3.16%~4.24%[17],腹瀉率由15.63%降低至1.53%,死亡率由4.69%降至1.56%[16]。三丁酸甘油酯能夠通過胃到達(dá)腸道后段,被脂肪酶迅速降解為甘油和丁酸,吸收后進(jìn)入腸上皮細(xì)胞,為腸細(xì)胞發(fā)育提供能量[20]。丁酸不僅能夠?yàn)槟c細(xì)胞提供所需的碳水化合物和能量,還能預(yù)防滲透性腹瀉的發(fā)生[21]。丁酸在腸道中吸收的同時(shí)還可促進(jìn)腸道中鈉離子、鉀離子和水的吸收,從而起到止瀉的作用[20]。飼糧添加丁酸鹽可使仔豬血漿中縮膽囊素增加4倍,縮膽囊素具有促生長作用[22]。而具有生物活性的核苷酸在代謝、結(jié)構(gòu)、監(jiān)測、免疫系統(tǒng)功能維持和降低氧化應(yīng)激方面發(fā)揮重要作用[18-19],在快速生長和應(yīng)激期間可增加仔豬采食量[14]。三丁酸甘油酯與乳糖醇同時(shí)添加時(shí),三丁酸甘油酯的添加量為3 000 mg/kg[8,10],三丁酸甘油酯與牛至油同時(shí)添加時(shí),三丁酸甘油酯的添加量為1 000 mg/kg[12],而且三丁酸甘油酯單獨(dú)添加的效果顯著低于分別與乳糖醇、牛至油同時(shí)添加[8,10,12]。Piva等[10]研究發(fā)現(xiàn),飼糧中同時(shí)添加三丁酸甘油酯和乳糖醇比單獨(dú)添加三丁酸甘油酯或乳糖醇可使仔豬平均日增重增加78.99%或5.97%,同時(shí)添加三丁酸甘油酯和乳糖醇仔豬死亡率為0,單獨(dú)添加三丁酸甘油酯或乳糖醇仔豬死亡率均為6.25%,而對照組死亡率達(dá)18.75%。張勇等[12]發(fā)現(xiàn),飼糧同時(shí)添加三丁酸甘油酯和牛至油比單獨(dú)添加三丁酸甘油酯或牛至油可使仔豬腹瀉率分別減少0.54、0.12百分點(diǎn),腹瀉發(fā)生率降至3.96%,仔豬平均日增重分別增加8.86%、6.65%。與對照組相比,飼糧中同時(shí)添加三丁酸甘油酯和乳糖醇或三丁酸甘油酯和牛至油可使仔豬平均日增重分別增加18.33%和13.11%,死亡率減少18.75百分點(diǎn),腹瀉率降低0.87百分點(diǎn),降至3.96%[10,12]。本試驗(yàn)結(jié)果表明,飼糧添加0.20%三丁酸甘油酯和0.15%核苷酸可增加仔豬平均日采食量,顯著增加平均日增重,極顯著降低腹瀉率,其中平均日增重提高了7.76%,腹瀉率由4.96%降至1.89%,降低61.90%。與Piva等[10]和張勇等[12]的研究結(jié)果相比,本試驗(yàn)添加三丁酸甘油酯和核苷酸對仔豬平均日增重的改善效果較小,但是對腹瀉率的改善效果較好。這有可能是因?yàn)楸驹囼?yàn)中三丁酸甘油酯和核苷酸的添加量或添加比例不適宜。
仔豬斷奶后采食量降低會使小腸絨毛萎縮[3-5],小腸屏障功能紊亂,機(jī)體易感傳染性疾病,這嚴(yán)重影響仔豬生長性能和健康水平[3],從而使組織器官的細(xì)胞膜受損,相應(yīng)酶活性改變。血清總蛋白是動物體內(nèi)蛋白質(zhì)的一種重要來源,可用來修補(bǔ)組織、提供能量。血清總蛋白含量反映了飼糧中的粗蛋白質(zhì)水平及動物對蛋白質(zhì)的吸收代謝程度,總蛋白含量高說明蛋白質(zhì)合成代謝速度快。球蛋白是由漿細(xì)胞分泌的,其在血清中的含量可反映出機(jī)體的抗應(yīng)激能力。IgA、IgG、IgM是3種免疫球蛋白,由骨髓來源的淋巴細(xì)胞分泌,可參與體液免疫,它們在血清中含量可反映機(jī)體免疫力的強(qiáng)弱[23]。三丁酸甘油酯主要是通過控制炎癥反應(yīng)和調(diào)節(jié)抗炎因子表達(dá)來改善機(jī)體的免疫功能[24],而核苷酸可促進(jìn)T淋巴細(xì)胞依賴性抗原的體液免疫應(yīng)答,從而增加IgG、IgM的產(chǎn)生[17,25]。二胺氧化酶是哺乳動物小腸黏膜上層絨毛中具有高度活性的細(xì)胞內(nèi)酶,在組胺和多胺代謝中起作用,腸黏膜受損時(shí)二胺氧化酶進(jìn)入血液。血液中二胺氧化酶活性可反映腸道機(jī)械屏障的完整性和損傷程度[26]。研究表明,飼糧添加0.1%三丁酸甘油酯可使血清中IgA、IgG、IgM含量分別增加24.42%、13.68%、15.00%,同時(shí)添加三丁酸甘油酯和牛至油時(shí)血清中IgA、IgG、IgM含量分別增加24.42%、17.31%、8.75%,飼糧添加三丁酸甘油酯或牛至油或同時(shí)添加均不影響血清中總蛋白和球蛋白含量[12]。飼糧添加0.10%~0.15%三丁酸甘油酯可使仔豬血清中總蛋白和球蛋白含量均有不同程度提高,而且與三丁酸甘油酯添加量正相關(guān)[11]。本試驗(yàn)結(jié)果表明,仔豬飼糧添加三丁酸甘油酯和核苷酸顯著提高血清球蛋白和IgA、IgG、IgM含量,血清二胺氧化酶含量極顯著降低34.04%,但對血清總蛋白含量影響不顯著。這與楊玲[11]和張勇等[12]的研究結(jié)果一致,說明飼糧添加三丁酸甘油酯和核苷酸具有提高仔豬免疫功能的作用,而且對腸道發(fā)育具有顯著改善作用,能夠減緩仔豬斷奶應(yīng)激。
楊玲[11]研究表明,飼糧添加三丁酸甘油酯使得仔豬血清尿素氮和總蛋白提高,而張勇等[12]發(fā)現(xiàn)添加三丁酸甘油酯后仔豬血清尿素氮含量增加,血清總蛋白含量降低,但均差異不顯著。本試驗(yàn)研究結(jié)果表明,添加三丁酸甘油酯和核苷酸可使仔豬血清中尿素氮含量降低2.31%,葡萄糖含量顯著降低10.34%。血清尿素氮是蛋白質(zhì)代謝的主要終末產(chǎn)物,能夠準(zhǔn)確反映動物機(jī)體蛋白質(zhì)代謝或者氨基酸間的平衡狀況[27],血清尿素氮含量降低則說明動物機(jī)體蛋白質(zhì)的利用率提高。這可能是因?yàn)轱暭Z添加三丁酸甘油酯為腸組織發(fā)育提供能量,而核苷酸的添加為腸組織細(xì)胞增殖、分化提供充足的必須核苷,為此促進(jìn)了腸組織發(fā)育,提高了腸組織消化吸收能力,促進(jìn)了蛋白質(zhì)代謝,提高了養(yǎng)分吸收率;血清葡萄糖含量顯著降低在一定程度上說明三丁酸甘油酯和核苷酸促進(jìn)了糖的合成代謝,提高了飼糧中碳水化合物的利用率。
本試驗(yàn)研究結(jié)果表明,斷奶仔豬飼糧添加0.20%三丁酸甘油酯和0.15%核苷酸使得十二指腸、空腸、回腸絨毛高度增加了10.39%~26.98%,隱窩深度減少了3.13%~9.44%。這與Piva等[8]的研究結(jié)果一致,他們發(fā)現(xiàn)飼糧添加0.3%三丁酸甘油酯和乳糖醇使得黏膜厚度和空腸絨毛高度增加,空腸隱窩深度減小。這表明飼糧添加三丁酸甘油酯和核苷酸可增加腸組織吸收面積,這可能是由于腸上皮細(xì)胞有絲分裂增加,或細(xì)胞凋亡降低,抑或是二者共同作用造成的[22,28-29]。本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn),仔豬十二指腸、空腸、回腸腸壁厚度、黏膜厚度呈遞減趨勢,試驗(yàn)組分別比對照組增加4.88%~9.02%和3.30%~35.89%,這與Piva等[8]的研究結(jié)果一致。這主要是由于腸上皮細(xì)胞、黏膜細(xì)胞和免疫細(xì)胞的快速增生,使得腸壁和黏膜厚度增加,同時(shí)還可增強(qiáng)腸絨毛的活力,促進(jìn)營養(yǎng)成分消化吸收[30]。
腸上皮細(xì)胞是仔豬抵抗飼料毒素和外來致病菌的第一道防線,其表面含有毒素和細(xì)菌的受體,并且包含具有免疫功能的淋巴細(xì)胞和杯狀細(xì)胞[31-34]。杯狀細(xì)胞通過特異性和非特異性免疫機(jī)制參與調(diào)節(jié)腸道免疫功能,通過分泌的酸性物質(zhì)到達(dá)黏膜表面,從而形成屏障保護(hù)層[35]。肥大細(xì)胞具有抗感染免疫功能,通過自身分泌的細(xì)胞因子參與獲得性免疫[30,36-37],因此淋巴細(xì)胞、杯狀細(xì)胞、肥大細(xì)胞在仔豬腸道免疫的調(diào)節(jié)中起重要作用。本試驗(yàn)研究結(jié)果表明,飼糧添加三丁酸甘油酯和核苷酸增加了仔豬十二指腸、空腸和回腸杯狀細(xì)胞、柱狀細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、肥大細(xì)胞數(shù)量,這說明飼糧添加三丁酸甘油酯和核苷酸可增強(qiáng)仔豬腸道免疫功能。這有可能是因?yàn)槿∷岣视王ズ秃塑账岬奶砑右种屏肆馨图?xì)胞、杯狀細(xì)胞和肥大細(xì)胞的凋亡,促進(jìn)其增殖,從而提升免疫性能。
Dong等[38]發(fā)現(xiàn),三丁酸甘油酯可使宮內(nèi)發(fā)育遲緩仔豬腸道消化酶活性顯著增加,十二指腸、空腸、回腸內(nèi)容物乳糖酶活性分別顯著提高了3.66倍、1.35倍和2.63倍,回腸內(nèi)容物蔗糖酶、麥芽糖酶、脂肪酶活性分別顯著提高了2.30倍、2.43倍和4.15倍,空腸和回腸內(nèi)容物胰蛋白酶活性分別顯著提高了2.82倍和10.52倍。這與本試驗(yàn)的研究結(jié)果一致,飼糧添加三丁酸甘油酯可增加空腸內(nèi)容物脂肪酶、胰蛋白酶、淀粉酶、麥芽糖酶、乳糖酶、蔗糖酶活性,其中胰蛋白酶和麥芽糖酶活性顯著增加75.00%和78.21%。這可能是由于三丁酸甘油酯和核苷酸的添加為腸組織發(fā)育提供了能量和核苷,促進(jìn)了腸組織發(fā)育,提高了腸絨毛高度,增加了養(yǎng)分吸收面積,促進(jìn)了消化酶分泌。由此可見,飼糧添加三丁酸甘油酯可提高仔豬腸道的消化吸收能力[39],而且腸道酶活性增加可增強(qiáng)腸道的防御功能,防止細(xì)菌入侵[38]。
飼糧添加0.20%三丁酸甘油酯和0.15%核苷酸可使斷奶仔豬平均日增重顯著提高7.76%,腹瀉率極顯著降低61.90%,腸絨毛高度、V/C值、腸壁厚度和黏膜厚度在數(shù)值上增加,回腸內(nèi)容物中胰蛋白酶和麥芽糖酶活性顯著增加,同時(shí)可使血清中免疫球蛋白含量顯著增加15.65%~82.03%,血清二胺氧化酶活性極顯著降低34.04%。
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