• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    菜籽粕蛋白提取及其氨基酸分析

    2018-03-06 05:20:58周天駒丁之恩
    食品研究與開發(fā) 2018年5期
    關(guān)鍵詞:酸法堿法菜籽

    周天駒,丁之恩

    (安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)茶與食品科技學(xué)院,安徽合肥230036)

    在我國,油菜籽作為油料作物具有重要地位,年產(chǎn)量在1×106萬噸以上[1],油菜籽榨油后的副產(chǎn)品為菜籽粕,其含有35%~45%的蛋白質(zhì)[2],而菜籽粕只是少量加入飼料作為使用,造成了這一資源嚴(yán)重浪費(fèi),因此菜籽粕是一種潛在的植物蛋白來源,研究開發(fā)價值很高。

    菜籽蛋白中谷氨酸豐富,并且必需氨基酸組成比較平衡[3],幾乎不存在限制性氨基酸,其營養(yǎng)符合世界衛(wèi)生組織(WHO)與聯(lián)合國糧農(nóng)組織(FAO)的推薦模式[4]。植物蛋白的主要提取主要有沉淀法、膜分離和離子交換等方法[5-6]。本文以菜籽粕為原料依次采用堿法提取和酸法提取分步提取蛋白質(zhì),并采用正交組合試驗,優(yōu)化提取菜籽粕蛋白質(zhì)的工藝,以期獲得較好的蛋白質(zhì)提取率和較高的蛋白質(zhì)純度,同時對所得菜籽粕蛋白質(zhì)進(jìn)行氨基酸組成分析。

    1 材料與方法

    1.1 材料與試劑

    菜籽粕:安徽省合肥市肥西縣小苗鎮(zhèn)雷麻加工廠。

    五水合硫酸銅、氫氧化鈉、鹽酸等試劑均為國產(chǎn)分析純。

    1.2 主要儀器與設(shè)備

    T6新世紀(jì)紫外可見分光光度計:北京普析通用儀器有限責(zé)任公司;S200-k梅特勒-托利多多參數(shù)測試儀、梅特勒-托利多ML204/02電子天平:梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司;EYELA冷凍干燥機(jī):上海愛郎儀器有限公司;HH-6數(shù)顯恒溫水浴鍋:金壇市杰瑞爾電器有限公司;海能K9840自動凱氏定氮儀:濟(jì)南海能儀器有限公司;日本Hitachi L-8900全自動氨基酸分析儀:日本日立公司。

    1.3 方法

    1.3.1 主要成分分析及蛋白含量的測定

    灰分:GB 5009.4-2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中灰分的測定》;粗纖維:GB/T 5009.10-2003《植物類食品中粗纖維的測定》;還原糖:GB 5009.7-2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中還原糖的測定》;總糖:GB/T 15672-2009《食用菌中總糖含量的測定》;總蛋白:GB 5009.5-2010《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中蛋白質(zhì)的測定》。

    提取蛋白:雙縮脲法。具體步驟如下:以牛血清蛋白為對照,建立回歸方程,得出回歸方程為A=3.873 0C+0.033 6(R2=0.997 2),式中:C 為吸光度,A為蛋白質(zhì)的濃度(g/L)。

    菜籽粕中蛋白質(zhì)的提取率/%=(提取液中蛋白質(zhì)含量/菜籽粕總蛋白質(zhì)含量)×100

    1.3.2 菜籽粕蛋白質(zhì)最佳析出pH值的測定

    取適量的菜籽粕與水按1∶15(g/mL)混合,用1 mol/L NaoH調(diào) pH至 12,50℃水浴振蕩 1 h,在5 000 r/min離心5 min,取等量上清液,調(diào)至不同pH值沉淀蛋白質(zhì),離心后,用雙縮脲法測定沉淀后上清液中蛋白質(zhì)的殘留含量,上清液中蛋白質(zhì)殘留最低的pH值為菜籽粕蛋白質(zhì)的最佳沉淀pH值[7]。

    上清液蛋白質(zhì)殘留率/%=(不同pH沉淀后上清液中蛋白質(zhì)含量/菜籽粕總蛋白質(zhì)含量)×100

    1.3.3 菜籽粕蛋白質(zhì)分步提取工藝

    1.3.3.1 第一步堿法提取菜籽粕蛋白質(zhì)

    稱取樣品1g→加水調(diào)料液比、調(diào)pH值(NaOH)→水浴(控制溫度和時間)→離心5 min(5 000 r/min)→上清液雙縮脲測蛋白質(zhì)→沉淀烘箱烘干

    1.3.3.2 第二步酸法提取菜籽粕蛋白質(zhì)

    稱取烘干后菜籽粕樣品1 g→加水調(diào)料液比、調(diào)pH(NaOH)→水?。刂茰囟群蜁r間)→離心5 min(5 000 r/min)→上清液雙縮脲測蛋白質(zhì)

    1.3.4 菜籽粕蛋白質(zhì)提取最適條件的確定

    考察pH值、時間、料液比、溫度對提取菜籽粕蛋白率的影響。把溫度45℃,時間3 h,料液比1∶30(g/mL),設(shè)為初始條件,堿法在 9.0、10.0、11.0、12.0、13.0改變pH值,考察pH值對提取菜籽粕蛋白質(zhì)的影響;確定適宜的pH值后,在料液比1∶10、1∶15、1∶20、1 ∶25、1 ∶30(g/mL)范圍內(nèi),考察底物濃度的影響;確定適宜的pH值和料液比后,不改變其他因素的情況下,在提取時間 1、2、3、4、5 h,考察時間的影響;以上3因素確定后,在提取溫度在35、40、45、50、55℃之間,確定適宜的溫度。第二步酸法在0.5~2.5改變pH值,其余條件與堿法相同。1.3.5 菜籽粕蛋白質(zhì)提取的正交試驗

    根據(jù)堿法、酸法單因素的試驗結(jié)果,分別選取L9(34)正交表進(jìn)行優(yōu)化菜籽粕提取蛋白質(zhì)的正交試驗。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 菜籽粕原料的主要成分分析

    菜籽粕原料的主要成分結(jié)果見表1。

    表1 菜籽粕主要成分Table 1 The main components of rapeseed dregs

    由表1可知,菜籽粕中的粗蛋白和總糖含量比較高,具有很好的潛在利用價值。

    2.2 菜籽粕蛋白等電點(diǎn)分析

    菜籽粕蛋白的等電點(diǎn)結(jié)果如圖1所示。

    由圖1可看出,菜籽粕蛋白在不同pH值的條件下,上清液中的蛋白含量隨著pH值的增加呈現(xiàn)先降低后升高的趨勢,在pH=5時最低,暗示了菜籽粕蛋白在pH為5時析出的最多,即為菜籽粕蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)。

    2.3 菜籽粕蛋白堿法提取的單因素試驗

    2.3.1 堿法pH值對蛋白提取率的影響

    堿法pH值對菜籽粕蛋白提取率的影響如圖2所示。

    圖1 菜籽粕蛋白的等電點(diǎn)分析Fig.1 The isoelectric point analysis of rapeseed dreg protein

    圖2 堿法pH值對菜籽粕蛋白提取率的影響Fig.2 The effect of pH on the rapeseed dreg protein extraction efficiency in alkali method

    由圖2可知,隨著pH值的上升,蛋白質(zhì)的提取率也隨之上升,當(dāng)pH值為12時,提取率為50.41%;pH值為13時最大為54.81%,但當(dāng)pH超過13時可能會引起蛋白理化性質(zhì)的改變,降低其營養(yǎng)價值[8],因此初步確定最佳pH值為12。

    2.3.2 堿法料液比對蛋白質(zhì)提取率的影響

    堿法料液比對菜籽粕蛋白提取率的影響如圖3所示。

    圖3 堿法料液比對菜籽粕蛋白提取率的影響Fig.3 The effect of solid-liquid ratio on the rapeseed dreg protein extraction efficiency in alkali method

    由圖3可知,料液比對蛋白質(zhì)提取率的先升高后趨于平緩,料液比過高,蛋白質(zhì)的提取率并沒有顯著增加,反而增加了后續(xù)的處理負(fù)擔(dān),初步確定料液比為 1 ∶15(g/mL)。

    2.3.3 堿法提取時間對蛋白質(zhì)提取率的影響

    堿法提取時間對菜籽粕蛋白提取率的影響如圖4所示。

    圖4 堿法提取時間對菜籽粕蛋白提取率的影響Fig.4 The effect of extraction time on the rapeseed dreg protein extraction efficiency in alkali method

    由圖4可知,當(dāng)提取率時間為2 h時,蛋白質(zhì)提取率基本達(dá)到最高為45.69%,再增加提取時間,蛋白質(zhì)提取率并沒有明顯提高。為了縮短生產(chǎn)周期,初步確定提取時間2 h。

    2.3.4 堿法提取溫度對蛋白質(zhì)提取率的影響

    堿法提取溫度對菜籽粕蛋白提取率的影響如圖5所示。

    法國心理學(xué)家勒龐認(rèn)為,人一到群體中就變得低智商、非理性、易盲從,于是他把人群稱為“烏合之眾”,著有著名的暢銷書《烏合之眾:大眾心理研究》,這本書在國內(nèi)也備受推崇。勒龐的看法只是一家之言,未見得便是真理,譬如與他同時代的另一位法國心理學(xué)家塔爾德便提出了幾乎相反的觀點(diǎn)。但個體受群體影響,卻是沒有疑義的。

    圖5 堿法提取溫度對菜籽粕蛋白提取率的影響Fig.5 The effect of extraction temperature on the rapeseed dreg protein extraction efficiency in alkali method

    由圖5可知,隨著溫度的升高,提取率緩慢增加。當(dāng)提取溫度為45℃時,蛋白質(zhì)提取最高為52.25%,初步確定提取溫度為45℃。

    2.3.5 堿法正交試驗

    以 pH 值(A)、料液比(B)、溫度(C)、時間(D)4個單因素設(shè)計正交試驗,因素水平表、試驗設(shè)計及結(jié)果見表2和表3,方差分析見表4。

    由表3中R值可知,4個影響菜籽粕蛋白提取率因素的順序是A>B>D>C,即pH值>料液比>時間>溫度。在表3中,當(dāng)pH值13,料液比1∶20(g/mL),溫度45℃和時間1 h時,菜籽粕蛋白的提取率最高,為67.93%。而從k值分析得知,堿法提取菜籽粕蛋白的最佳組合為A3B2C2D1,即pH值13,料液比1∶15(g/mL),溫度 45 ℃和時間 1 h,此時的提取率為67.86%,與表3中的最高提取率無顯著性差異。因此,出于節(jié)約原料和成本的考慮[8],堿法提取菜籽粕蛋白的最佳條件:pH 13,料液比 1 ∶15(g/mL),溫度45℃和時間1 h,此時的菜籽粕蛋白的提取率為67.86%。并按最佳工藝進(jìn)行驗證試驗,測得的菜籽粕蛋白提取率為67.90%,與之前的結(jié)果一致,說明該工藝具有重復(fù)性。

    表2 因素水平表Table 2 Factors and levels table

    表3 堿法正交試驗設(shè)計及結(jié)果Table 3 The orthogonal experimental design and results of alkali method

    表4 堿法方差分析Table 4 The variance analysis of alkali method

    由表4的方差分析可知,pH值對堿法蛋白質(zhì)提取有顯著性影響,而料液比、時間和溫度對其提取率影響不顯著。

    2.4 菜籽粕蛋白酸法提取的單因素試驗

    2.4.1 酸法pH值對蛋白提取率的影響

    酸法pH值對菜籽粕蛋白提取率的影響如圖6所示。

    圖6 酸法pH值對菜籽粕蛋白提取率的影響Fig.6 The effect of pH on the rapeseed dreg protein extraction efficiency in acid method

    由圖6可知,當(dāng)pH值為1時,提取率為33.16%;pH值為0.5時,提取率為最大35.07%,初步確定最佳pH值為0.5。

    2.4.2 酸法料液比對蛋白質(zhì)提取率的影響

    酸法料液比對菜籽粕蛋白提取率的影響如圖7所示。

    圖7 酸法料液比對菜籽粕蛋白提取率的影響Fig.7 The effect of solid-liquid ratio on the rapeseed dreg protein extraction efficiency in acid method

    2.4.3 酸法提取時間對蛋白質(zhì)提取率的影響

    酸法提取時間對菜籽粕蛋白提取率的影響如圖8所示。

    圖8 酸法提取時間對菜籽粕蛋白提取率的影響Fig.8 The effect of extraction time on the rapeseed dreg protein extraction efficiency in acid method

    由圖8可知,當(dāng)提取率時間為2 h時,蛋白質(zhì)提取率基本達(dá)到最高為32.13%,再增加提取時間,蛋白質(zhì)提取率并沒有明顯提高,因此初步確定提取時間2 h。

    2.4.4 酸法提取溫度對蛋白質(zhì)提取率的影響

    酸法提取溫度對菜籽粕蛋白提取率的影響如圖9所示。

    圖9 酸法提取溫度對菜籽粕蛋白提取率的影響Fig.9 The effect of extraction temperature on the rapeseed dreg protein extraction efficiency in acid method

    由圖9可知,蛋白質(zhì)的提取率先升后降。當(dāng)提取溫度為45℃時,蛋白質(zhì)提取最高為35.67%,初步確定提取溫度為45℃。

    2.4.5 酸法正交試驗

    以 pH(E)、料液比(F)、溫度(G)、時間(H)4個單因素設(shè)計正交試驗,因素水平表和試驗設(shè)計及結(jié)果見表5和表6,方差分析見表7。

    表5 因素水平表Table 5 Factors and levels table

    表6 酸法正交試驗設(shè)計及結(jié)果Table 6 The orthogonal experimental design and results of acid method

    表7 酸法方差分析Table 7 The variance analysis of acid method

    由表6中R值可知,4個影響菜籽粕蛋白提取率因素的順序是F>E>G>H,即料液比>pH值>溫度>時間。在表 6中,當(dāng) pH 值 0.5,料液比 1∶15(g/mL),溫度45℃和時間2 h時,菜籽粕蛋白的提取率最高,為36.10%。

    而從k值分析得知,酸法提取菜籽粕蛋白的最佳組合為 E1F2G3H2,即 pH0.5,料液比 1 ∶15(g/mL),溫度50℃和時間2 h,此時的提取率為35.32%,低于表3中的最高提取率。因此,酸法提取菜籽粕蛋白的最佳條件:pH 0.5,料液比 1 ∶15(g/mL),溫度 45 ℃和時間2 h,菜籽粕蛋白的提取率為36.10%。并按最佳工藝進(jìn)行驗證試驗,測得的菜籽粕蛋白提取率為36.25%,略高于表6中的最高提取率。

    由表7的方差分析可知,料液比對酸法蛋白質(zhì)提取有顯著性影響,而pH值、時間和溫度對其提取率影響不顯著。

    2.5 菜籽粕蛋白的氨基酸分析

    2.5.1 菜籽粕蛋白質(zhì)的氨基酸分析

    菜籽粕蛋白的氨基酸組成與含量如表8所示。

    表8 菜籽粕蛋白的氨基酸組成與含量Table 8 Amino acid composition and content of the rapeseed dreg protein g/100 g

    從表8可以看出,菜籽粕蛋白質(zhì)的氨基酸含有7種必需氨基酸,占總氨基酸的29.41%。全部氨基酸中谷氨酸的含量最高為25.96%,其中精氨酸的含量明顯高于FAO/WHO/UNU 1985年的推薦值[9],亮氨酸與蘇氨酸也推薦值相近。

    2.5.2 菜籽粕蛋白質(zhì)必需氨基酸組成

    菜籽粕蛋白的必需氨基酸組成如表9所示。

    表9 菜籽粕蛋白質(zhì)必需氨基酸組成Table 9 Essential amino acid composition of the rapeseed dreg protein%

    由表9可以看出,菜籽粕蛋白必需氨基酸組成。菜籽粕粗蛋白的必需氨基酸占氨基酸總量的35.6%,高于淮山藥[10],與FAO/WHO模式標(biāo)準(zhǔn)蛋白[11]相當(dāng)。

    3 討論

    以堿法和酸法分步提取菜籽粕蛋白,通過正交試驗優(yōu)化了菜籽粕蛋白提取的工藝流程。在試驗過程中發(fā)現(xiàn),在堿法提取的菜籽粕蛋白的提取率可達(dá)67.86%,堿法提取菜籽粕蛋白更加適合工業(yè)生產(chǎn)。同時通過對提取的菜籽粕蛋白氨基酸分析可知,菜籽粕的氨基酸組成豐富,與FAO/WHO模式標(biāo)準(zhǔn)蛋白相當(dāng)。

    [1]黃輝龍,鄒曉庭.菜籽餅(粕)中抗?fàn)I養(yǎng)因子檢測方法的研究進(jìn)展[J].中國飼料,2010(17):3-7

    [2]王曉凡,熊光權(quán),汪蘭,等.菜籽蛋白提取及應(yīng)用研究進(jìn)展[J].糧食與油脂,2010(12):5-9

    [3]姜紹通,蔣連平.菜籽餅粕中分離蛋白的制備[J].食品科學(xué),2007,28(12):161-165

    [4]王曉凡,熊光權(quán),汪蘭,等.菜籽蛋白提取及應(yīng)用研究進(jìn)展[J].糧食與油脂,2010(12):5-9

    [5]李明姝,姚開,賈冬英,等.堿提酸沉法制取花生分離蛋白的優(yōu)化條件[J].中國油脂,2004,29(11):21-23

    [6]汪勇,唐書澤,張志森,等.無機(jī)陶瓷膜超濾法制備大豆分離蛋白的研究[J].中國油脂,2003,28(12):19-22

    [7]袁建,劉勝,鞠興榮,等.復(fù)合法提取高溫菜籽粕中蛋白質(zhì)的研究[J].中國油脂,2010,35(1):19-23

    [8]Ansharullah,Hourigan J A,Chesterman C F.Application of Carbohydrases in Extracting Protein from Rice Bran[J].Journal of the Science of Food&Agriculture,2015,74(2):141-146

    [9]Fao W,University U N.Energy and protein requirements.Report of a Joint FAO/WHO/UNU Expert Consultation.[J].World Health Organization Technical Report,1985,724:1

    [10]陳艷,姚成.淮山藥中氨基酸含量的測定[J].氨基酸和生物資源,2004,26(2):47-48

    [11]張澤生,劉素穩(wěn),郭寶芹,等.馬鈴薯蛋白質(zhì)的營養(yǎng)評價[J].食品科技,2007,32(11):219-221

    猜你喜歡
    酸法堿法菜籽
    The 2022 Report on the Work of the Government
    CHINA TODAY(2022年4期)2022-11-22 12:43:48
    春天時蔬菜籽頭
    花卉(2021年17期)2021-09-15 08:51:16
    酸法提取火龍果果皮中果膠
    堿法提取黍米粉膳食纖維的研究
    粉煤灰酸法提取氧化鋁的工藝分析及研究
    超聲波輔助酶堿法提取西番蓮果皮水不溶性膳食纖維的工藝研究
    高蛋白菜籽粕對成長豬只有益
    隱晶質(zhì)石墨提純試驗對比
    血柚皮多糖的堿法提取及其抗氧化活性研究
    粉煤灰的污染與應(yīng)用
    女人久久www免费人成看片| 99久久中文字幕三级久久日本| 亚洲欧洲国产日韩| 黑人猛操日本美女一级片| 国模一区二区三区四区视频| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 久久av网站| 成人毛片a级毛片在线播放| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 欧美日韩视频精品一区| 观看美女的网站| 最近2019中文字幕mv第一页| 久久亚洲国产成人精品v| 欧美精品一区二区大全| 亚洲国产欧美在线一区| 亚洲欧美清纯卡通| 日本欧美视频一区| 欧美精品一区二区大全| 噜噜噜噜噜久久久久久91| av女优亚洲男人天堂| videos熟女内射| 五月开心婷婷网| 国产一区二区三区av在线| 亚洲精品国产色婷婷电影| 亚洲va在线va天堂va国产| 亚洲美女搞黄在线观看| 老司机影院毛片| 一区二区av电影网| 最近手机中文字幕大全| 久久久久久久亚洲中文字幕| 国产免费福利视频在线观看| 亚洲自偷自拍三级| 亚洲国产色片| 另类亚洲欧美激情| 日本与韩国留学比较| 成人特级av手机在线观看| 亚洲国产色片| 97超碰精品成人国产| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 五月玫瑰六月丁香| a 毛片基地| 国产色婷婷99| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 亚洲综合色惰| 亚洲四区av| 91成人精品电影| 黑丝袜美女国产一区| 成人国产麻豆网| 一区二区三区四区激情视频| 免费看日本二区| 高清视频免费观看一区二区| av播播在线观看一区| 成人影院久久| 男人狂女人下面高潮的视频| 女人久久www免费人成看片| 少妇丰满av| 亚洲,一卡二卡三卡| 免费看日本二区| 国产在线视频一区二区| 草草在线视频免费看| 午夜福利视频精品| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 欧美最新免费一区二区三区| 国产成人精品婷婷| 免费黄色在线免费观看| 国产精品99久久久久久久久| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 午夜福利视频精品| 日本欧美视频一区| 这个男人来自地球电影免费观看 | 天美传媒精品一区二区| 熟妇人妻不卡中文字幕| 高清午夜精品一区二区三区| 九色成人免费人妻av| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 熟女电影av网| 啦啦啦在线观看免费高清www| 国产精品熟女久久久久浪| 男人添女人高潮全过程视频| 久久热精品热| 综合色丁香网| 一级av片app| 伊人久久精品亚洲午夜| 日本vs欧美在线观看视频 | 亚洲av欧美aⅴ国产| 日韩av免费高清视频| 精品一区二区三区视频在线| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 欧美日韩在线观看h| 天美传媒精品一区二区| 乱码一卡2卡4卡精品| 国产av精品麻豆| av免费在线看不卡| 日韩 亚洲 欧美在线| 久久毛片免费看一区二区三区| freevideosex欧美| 亚洲成人手机| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 欧美精品一区二区大全| 久久精品久久精品一区二区三区| 在线亚洲精品国产二区图片欧美 | 一区二区av电影网| a 毛片基地| 91精品一卡2卡3卡4卡| 亚洲欧美精品专区久久| 国产免费一区二区三区四区乱码| 国产伦精品一区二区三区四那| 日韩av不卡免费在线播放| 久久ye,这里只有精品| 性色av一级| 伊人久久精品亚洲午夜| 国产一区亚洲一区在线观看| 日本黄色片子视频| 亚洲成色77777| 99热网站在线观看| 日韩 亚洲 欧美在线| 麻豆成人av视频| 国产一区二区在线观看日韩| 春色校园在线视频观看| 97超碰精品成人国产| 国产熟女午夜一区二区三区 | 蜜桃久久精品国产亚洲av| 成人亚洲精品一区在线观看| 大片电影免费在线观看免费| 嘟嘟电影网在线观看| 女性生殖器流出的白浆| 一级片'在线观看视频| 亚洲人与动物交配视频| 国产成人一区二区在线| 亚洲精品亚洲一区二区| 久久久久视频综合| 蜜臀久久99精品久久宅男| a级一级毛片免费在线观看| 成人毛片60女人毛片免费| 久久久国产一区二区| 2021少妇久久久久久久久久久| 久久久a久久爽久久v久久| 亚洲欧美日韩东京热| 日韩人妻高清精品专区| 色吧在线观看| 中文字幕精品免费在线观看视频 | 我要看日韩黄色一级片| 久久人人爽人人片av| av在线app专区| 久久久久久久久久成人| 一级,二级,三级黄色视频| 国产成人91sexporn| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 国产亚洲精品久久久com| 极品教师在线视频| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 在线看a的网站| 日韩中字成人| 成人漫画全彩无遮挡| 国产淫片久久久久久久久| 亚洲精品一区蜜桃| 色94色欧美一区二区| 欧美日韩在线观看h| 嫩草影院新地址| 嘟嘟电影网在线观看| 内射极品少妇av片p| 亚洲av日韩在线播放| xxx大片免费视频| 一二三四中文在线观看免费高清| 天堂俺去俺来也www色官网| videos熟女内射| 国产精品99久久久久久久久| 男人舔奶头视频| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 一区二区三区四区激情视频| 国产精品一二三区在线看| 99热这里只有是精品50| 成人亚洲欧美一区二区av| 26uuu在线亚洲综合色| 在线观看美女被高潮喷水网站| 51国产日韩欧美| 国产伦精品一区二区三区四那| 国产免费福利视频在线观看| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 国产精品久久久久成人av| 熟妇人妻不卡中文字幕| 不卡视频在线观看欧美| 午夜久久久在线观看| 成人二区视频| 91久久精品电影网| av卡一久久| 国产淫语在线视频| 日本色播在线视频| 亚洲国产精品成人久久小说| 国产探花极品一区二区| 一本色道久久久久久精品综合| 国产黄色视频一区二区在线观看| 大陆偷拍与自拍| 多毛熟女@视频| 久久久久久久国产电影| 这个男人来自地球电影免费观看 | 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 伊人亚洲综合成人网| 日本爱情动作片www.在线观看| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 免费人妻精品一区二区三区视频| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 国产成人一区二区在线| 亚洲欧洲日产国产| 十八禁高潮呻吟视频 | 中文字幕亚洲精品专区| 三级国产精品欧美在线观看| 一区二区三区免费毛片| 欧美人与善性xxx| 中国三级夫妇交换| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 美女大奶头黄色视频| av国产精品久久久久影院| 午夜影院在线不卡| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 国产亚洲一区二区精品| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 成人影院久久| 内地一区二区视频在线| 婷婷色麻豆天堂久久| 精品久久国产蜜桃| 香蕉精品网在线| 在线看a的网站| 黄色毛片三级朝国网站 | 嫩草影院新地址| 美女中出高潮动态图| 精品久久久久久久久亚洲| 国产精品熟女久久久久浪| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 亚洲自偷自拍三级| 高清在线视频一区二区三区| 26uuu在线亚洲综合色| 国产成人aa在线观看| 老司机影院毛片| 一级二级三级毛片免费看| 久久久a久久爽久久v久久| 亚洲熟女精品中文字幕| 狂野欧美激情性bbbbbb| 亚洲欧美精品自产自拍| 嫩草影院入口| www.av在线官网国产| 日韩av免费高清视频| 老熟女久久久| av免费观看日本| av女优亚洲男人天堂| 色94色欧美一区二区| 久久影院123| 观看免费一级毛片| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 国产成人aa在线观看| 大陆偷拍与自拍| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 丁香六月天网| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 国产精品99久久99久久久不卡 | 久久久久视频综合| 美女视频免费永久观看网站| 不卡视频在线观看欧美| 三上悠亚av全集在线观看 | 亚洲天堂av无毛| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 欧美3d第一页| 亚洲av二区三区四区| 日韩精品有码人妻一区| 国精品久久久久久国模美| 日韩电影二区| 十分钟在线观看高清视频www | av黄色大香蕉| 免费观看a级毛片全部| 老司机影院成人| 性高湖久久久久久久久免费观看| 校园人妻丝袜中文字幕| 麻豆成人av视频| 九色成人免费人妻av| 新久久久久国产一级毛片| 观看av在线不卡| 久久人人爽人人片av| 男女免费视频国产| 一本久久精品| 人体艺术视频欧美日本| av国产久精品久网站免费入址| 十八禁网站网址无遮挡 | 色94色欧美一区二区| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 久久婷婷青草| 国产男女内射视频| 欧美精品高潮呻吟av久久| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 男的添女的下面高潮视频| 最近手机中文字幕大全| 在线天堂最新版资源| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 免费大片黄手机在线观看| 欧美另类一区| 在线观看免费视频网站a站| 一本色道久久久久久精品综合| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 日本av免费视频播放| 国产精品99久久99久久久不卡 | 国国产精品蜜臀av免费| 日韩电影二区| 2018国产大陆天天弄谢| 免费人成在线观看视频色| 最近最新中文字幕免费大全7| 久久久久久久大尺度免费视频| 亚洲av国产av综合av卡| 国产成人aa在线观看| 亚洲av日韩在线播放| 一级毛片我不卡| 岛国毛片在线播放| 国产成人免费无遮挡视频| 亚洲无线观看免费| 亚洲情色 制服丝袜| 久久这里有精品视频免费| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 亚洲不卡免费看| 午夜av观看不卡| 免费黄色在线免费观看| 日日啪夜夜撸| 麻豆乱淫一区二区| 2022亚洲国产成人精品| 午夜激情福利司机影院| 男人舔奶头视频| 丝袜脚勾引网站| 欧美xxⅹ黑人| 成年人午夜在线观看视频| 欧美三级亚洲精品| 亚洲精品国产av成人精品| 成人亚洲欧美一区二区av| 国产精品久久久久久av不卡| 五月开心婷婷网| 国产av国产精品国产| 久久精品国产亚洲av涩爱| 我要看日韩黄色一级片| 人妻一区二区av| 成人影院久久| 亚洲无线观看免费| 观看美女的网站| 亚洲无线观看免费| 黄色怎么调成土黄色| 日韩在线高清观看一区二区三区| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 亚洲精品一二三| 国产精品欧美亚洲77777| 国产免费又黄又爽又色| 欧美精品国产亚洲| 午夜免费观看性视频| 国产精品人妻久久久影院| videos熟女内射| 久久久久久伊人网av| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃 | 国产 一区精品| 日韩一区二区三区影片| 亚洲精品,欧美精品| 国产视频内射| 国产精品无大码| 免费看av在线观看网站| 深夜a级毛片| 亚洲精品456在线播放app| 国产精品成人在线| 特大巨黑吊av在线直播| 日韩精品有码人妻一区| 97在线人人人人妻| 日韩大片免费观看网站| 日韩视频在线欧美| 欧美另类一区| 97超碰精品成人国产| 中国国产av一级| kizo精华| 久久综合国产亚洲精品| 十八禁网站网址无遮挡 | 国产成人精品久久久久久| 美女cb高潮喷水在线观看| 九九在线视频观看精品| 国产老妇伦熟女老妇高清| 全区人妻精品视频| 亚洲精品国产av成人精品| av福利片在线观看| 人妻人人澡人人爽人人| 国产有黄有色有爽视频| av女优亚洲男人天堂| 亚洲av欧美aⅴ国产| 亚洲欧美一区二区三区国产| 久久免费观看电影| 久久精品国产亚洲网站| 亚洲美女黄色视频免费看| 免费在线观看成人毛片| 男女边摸边吃奶| 嫩草影院入口| 精品一区二区三卡| 一级av片app| av有码第一页| 国产亚洲欧美精品永久| 好男人视频免费观看在线| 久久久久久久久久成人| 日韩av免费高清视频| 欧美 日韩 精品 国产| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 综合色丁香网| 国产在线男女| 大码成人一级视频| 又爽又黄a免费视频| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 黑人猛操日本美女一级片| 欧美精品高潮呻吟av久久| 亚洲精品,欧美精品| 日本欧美国产在线视频| 精品少妇黑人巨大在线播放| 一级毛片 在线播放| 成人二区视频| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 91久久精品国产一区二区成人| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 国产极品粉嫩免费观看在线 | 91久久精品国产一区二区三区| 免费少妇av软件| 最近最新中文字幕免费大全7| 老熟女久久久| 五月伊人婷婷丁香| 久久精品国产亚洲网站| 成人毛片60女人毛片免费| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 日韩在线高清观看一区二区三区| 97超视频在线观看视频| 亚洲精品国产av蜜桃| 久久免费观看电影| 简卡轻食公司| 欧美日韩综合久久久久久| 久久久久久久精品精品| 国产伦精品一区二区三区四那| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 久久99一区二区三区| 中文字幕精品免费在线观看视频 | 久久久久久人妻| 我的老师免费观看完整版| 午夜免费鲁丝| 黄色欧美视频在线观看| 国产黄色免费在线视频| 青青草视频在线视频观看| 91精品一卡2卡3卡4卡| 我的女老师完整版在线观看| 香蕉精品网在线| 欧美精品一区二区大全| 男男h啪啪无遮挡| a级片在线免费高清观看视频| 日本午夜av视频| 一本一本综合久久| 伦精品一区二区三区| 精品久久国产蜜桃| 新久久久久国产一级毛片| 2022亚洲国产成人精品| 91久久精品国产一区二区成人| 日韩欧美一区视频在线观看 | 国产精品一二三区在线看| 男女免费视频国产| 色视频在线一区二区三区| 成人午夜精彩视频在线观看| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 色视频在线一区二区三区| 色视频在线一区二区三区| 午夜激情福利司机影院| 在线看a的网站| 99久久综合免费| 亚洲久久久国产精品| 日本av手机在线免费观看| 日韩一区二区视频免费看| 亚洲精品乱久久久久久| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 国产成人91sexporn| 内地一区二区视频在线| 黄片无遮挡物在线观看| 狂野欧美激情性bbbbbb| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 五月天丁香电影| 人体艺术视频欧美日本| 我要看黄色一级片免费的| 国产熟女欧美一区二区| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 熟女av电影| 一级a做视频免费观看| 中文在线观看免费www的网站| 国产精品秋霞免费鲁丝片| av线在线观看网站| 深夜a级毛片| 99热全是精品| 国产亚洲5aaaaa淫片| 韩国高清视频一区二区三区| 国产精品偷伦视频观看了| 免费在线观看成人毛片| 在线看a的网站| 一本久久精品| av福利片在线观看| 免费大片18禁| 亚洲无线观看免费| 91久久精品国产一区二区三区| 久久婷婷青草| 99热国产这里只有精品6| 欧美 日韩 精品 国产| 91aial.com中文字幕在线观看| 欧美精品亚洲一区二区| 国产熟女欧美一区二区| 在线观看免费高清a一片| 亚洲久久久国产精品| 偷拍熟女少妇极品色| 久热这里只有精品99| 九色成人免费人妻av| av专区在线播放| 夫妻午夜视频| a级片在线免费高清观看视频| 色视频在线一区二区三区| 十八禁网站网址无遮挡 | 久久亚洲国产成人精品v| 我要看日韩黄色一级片| 伦精品一区二区三区| av卡一久久| 寂寞人妻少妇视频99o| 女性被躁到高潮视频| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 午夜福利影视在线免费观看| 两个人的视频大全免费| 午夜福利影视在线免费观看| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| videossex国产| 大陆偷拍与自拍| 国产精品久久久久成人av| 日本-黄色视频高清免费观看| 久久国内精品自在自线图片| 永久免费av网站大全| a级毛色黄片| 日韩伦理黄色片| 精品人妻一区二区三区麻豆| 女人精品久久久久毛片| 国产深夜福利视频在线观看| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 亚洲美女黄色视频免费看| 国产一级毛片在线| 3wmmmm亚洲av在线观看| 中文字幕免费在线视频6| 国产精品成人在线| 少妇熟女欧美另类| 91aial.com中文字幕在线观看| 亚洲人成网站在线播| 精品一区二区免费观看| 亚洲第一av免费看| av一本久久久久| 内射极品少妇av片p| 国产精品久久久久久av不卡| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 黄色视频在线播放观看不卡| av播播在线观看一区| 免费黄网站久久成人精品| 国产成人91sexporn| 亚洲三级黄色毛片| 久久影院123| 亚洲在久久综合| 国产黄片视频在线免费观看| 在线精品无人区一区二区三| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图 | 日韩免费高清中文字幕av| www.av在线官网国产| 热re99久久国产66热| 国产高清不卡午夜福利| 午夜老司机福利剧场| 欧美三级亚洲精品| 久久精品国产亚洲网站| 人人妻人人澡人人看| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 国产亚洲欧美精品永久| 午夜视频国产福利| 综合色丁香网| 国产精品一区二区在线观看99| 成人无遮挡网站| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 亚洲欧美日韩另类电影网站| av在线观看视频网站免费| 黄色视频在线播放观看不卡| av播播在线观看一区| 新久久久久国产一级毛片| 免费av中文字幕在线| 精品少妇黑人巨大在线播放| 观看美女的网站| 免费看光身美女| 在线观看免费高清a一片| 精品熟女少妇av免费看| 国产黄色视频一区二区在线观看| 蜜臀久久99精品久久宅男| 久热久热在线精品观看| 搡女人真爽免费视频火全软件| 免费少妇av软件| 人人澡人人妻人| 黄色配什么色好看| 亚洲国产最新在线播放| 日本-黄色视频高清免费观看| 天堂俺去俺来也www色官网| 精品久久久久久电影网| 少妇被粗大的猛进出69影院 | 另类亚洲欧美激情| 国产成人免费无遮挡视频| 熟女电影av网| av女优亚洲男人天堂| av在线观看视频网站免费| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 精品国产一区二区久久| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 在线观看国产h片| 久久久国产精品麻豆| 国产精品一区www在线观看| 亚洲一区二区三区欧美精品|