啶酰菌胺在馬鈴薯中殘留量的膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

傅 強(qiáng) ，黃穎婕 ，付啟明 ，梁 驥 ，馬 婧 ，馮 雪

（1.湖南化工研究院 國家農(nóng)藥創(chuàng)制工程技術(shù)研究中心，長沙 410014；2.湖南加法檢測(cè)有限公司，長沙 410014；3.湖南師范大學(xué)附屬中學(xué)，長沙 410006）

啶酰菌胺（boscalid）是琥珀酸脫氫酶抑制劑（SDHI）類殺菌劑重要品種，主要用于油菜、果樹、蔬菜和谷物防治白粉病、灰霉病及各種腐爛病、褐腐病和根腐病等[1]。目前，啶酰菌胺已在我國番茄、黃瓜、葡萄、草莓、花生、馬鈴薯、蘋果、甜瓜、香蕉和油菜上登記使用，并已制定啶酰菌胺在黃瓜、蘋果、葡萄、草莓、甜瓜中的最大殘留限量[2]。目前已有關(guān)于啶酰菌胺分析方法[3-5]、毒性方面[6-7]的研究，但未見啶酰菌胺在我國使用的膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。本試驗(yàn)通過1年6地的田間殘留試驗(yàn)，研究了噴施方式下啶酰菌胺在馬鈴薯中的最終殘留量，以期推薦啶酰菌胺在馬鈴薯上最大殘留限量值，為其安全使用提供科學(xué)依據(jù)。本研究還根據(jù)啶酰菌胺在馬鈴薯中的最終殘留量進(jìn)行膳食攝入評(píng)估，以期為啶酰菌胺在馬鈴薯生產(chǎn)上的科學(xué)、合理使用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試劑和儀器

50%啶酰菌胺水分散粒劑，巴斯夫歐洲公司；啶酰菌胺標(biāo)準(zhǔn)品（99%）；乙腈、甲醇、甲酸，色譜純；氯化鈉，分析純。

Agilent 1290-6460高效液相色譜-三重四級(jí)桿質(zhì)譜儀 （LC-MS/MS）、Agilent SB-C18色譜柱（50 mm×2.1 mm，1.8 μm），美國Agilent公司；AL204型電子天平，瑞士梅特勒-托利多儀器有限公司；Sartorius BL310型電子天平，德國賽多利斯公司；T25B型高速均質(zhì)機(jī)，德國IKA公司。

1.2 田間試驗(yàn)設(shè)計(jì)

田間試驗(yàn)依據(jù)《農(nóng)藥殘留試驗(yàn)準(zhǔn)則》（NY/T 788—2004）[8]和《農(nóng)藥登記殘留田間試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》[9]進(jìn)行。田間試驗(yàn)在2015年開展，試驗(yàn)地設(shè)在湖南省平江縣翁江鎮(zhèn)楊潭村花屋組、江蘇省儀征市樸席鎮(zhèn)曹橋村西莊組、山東省濟(jì)南市歷城區(qū)大辛莊村、北京市昌平區(qū)興壽鎮(zhèn)東營村、黑龍江省哈爾濱市南崗區(qū)紅旗鄉(xiāng)、云南省昆明市五華區(qū)沙市街道辦大村。田間試驗(yàn)方案及田間樣品的采集、制備及貯存參考文獻(xiàn)[10]。啶酰菌胺在最終殘留試驗(yàn)中有效成分用量分別為450 g/hm2和675 g/hm2，施藥3次和4次，采收間隔期為5,7,10 d。

1.3 殘留檢測(cè)分析方法

1.3.1 樣品前處理

稱取馬鈴薯樣品10 g于100 mL離心管中，加入40 mL乙腈，高速均質(zhì)提取1 min，加入5 g氯化鈉，再均質(zhì)提取1 min，在3 800 r/min離心5 min，取上清液，過0.22 μm有機(jī)相濾膜，待LC-MS/MS檢測(cè)。

1.3.2 儀器條件

流速：0.4 mL/min；梯度洗脫程序：乙腈＋0.1%甲酸水溶液（體積比40∶60）保持2 min，乙腈＋0.1%甲酸水溶液（體積比80∶20）保持1.5 min，乙腈＋0.1%甲酸水溶液（體積比90∶10）保持1.5 min，隨后，乙腈＋0.1%甲酸水溶液（體積比40∶60）保持4 min；柱溫：35℃；進(jìn)樣量：2 μL。

質(zhì)譜條件：多離子反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）模式掃描，電噴霧正離子源（ESI+）；離子噴霧電壓：3 500 V；霧化氣壓力：103.4 kPa；干燥氣溫度：300℃；干燥氣流速：6 L/min。具體質(zhì)譜檢測(cè)參數(shù)見表1。

表1 啶酰菌胺質(zhì)譜檢測(cè)參數(shù)

1.3.3 標(biāo)樣溶液的配制

稱取0.025 3 g啶酰菌胺標(biāo)準(zhǔn)品，用色譜純乙腈溶解，定容至50 mL，配制成500 mg/L的母液。再用色譜純乙腈稀釋母液，逐級(jí)配制0.001,0.002,0.01,0.02,0.1,0.2 mg/L質(zhì)量濃度的系列標(biāo)樣溶液。

1.4 長期膳食攝入風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估方法

依據(jù)國家衛(wèi)生計(jì)生委發(fā)布的《中國居民營養(yǎng)與慢性病狀況報(bào)告（2015年）》[11]，結(jié)合良好農(nóng)業(yè)規(guī)范條件下啶酰菌胺殘留試驗(yàn)中值，計(jì)算啶酰菌胺的國家估計(jì)每日攝入量［NEDI，μg/(kgbw)］，計(jì)算公式如下：

式中：STMRi—第i類初級(jí)食用農(nóng)產(chǎn)品的規(guī)范試驗(yàn)殘留中值，mg/kg；Fi—第i類食用農(nóng)產(chǎn)品的消費(fèi)量，g；bw—人群平均體重，kg。

啶酰菌胺的慢性攝入風(fēng)險(xiǎn)（RQc）用國家估計(jì)每日攝入量占每日允許攝入量［ADI，μg/(kg bw)］的百分率表示，計(jì)算公式如下：

當(dāng)RQc≤100%時(shí)，表示慢性風(fēng)險(xiǎn)可以接受，RQc越小，風(fēng)險(xiǎn)越小；當(dāng)RQc＞100%時(shí)，表示有不可接受的慢性風(fēng)險(xiǎn)，RQc越大，風(fēng)險(xiǎn)越大[12-13]。

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線

在上述液相色譜條件下對(duì)啶酰菌胺系列標(biāo)樣溶液進(jìn)行檢測(cè)，并以啶酰菌胺質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，色譜峰峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。得啶酰菌胺線性方程為y＝69 288 x＋92.18，R2為0.999 7。

圖1 啶酰菌胺標(biāo)準(zhǔn)曲線

2.2 添加回收率

將不同質(zhì)量濃度的啶酰菌胺標(biāo)樣溶液分別加入馬鈴薯空白樣品中，進(jìn)行樣品的提取和凈化。當(dāng)添加水平為0.01,0.1,1 mg/kg時(shí)，啶酰菌胺的平均回收率在89.0%～97.0%之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）在1.9%～7.0%之間（見表2）。啶酰菌胺的最低檢測(cè)濃度為0.01 mg/kg，最小檢出量為1.0×10-12g。

2.3 啶酰菌胺最終殘留量

不同采收間隔期，啶酰菌胺在湖南、江蘇、山東、北京、黑龍江、云南馬鈴薯中的最終殘留量結(jié)果見表3。采收間隔期為5d時(shí)，啶酰菌胺殘留量在＜0.01～0.212 mg/kg之間；采收間隔期為7 d時(shí)，殘留量在＜0.01～0.052 1 mg/kg之間；采收間隔期為10 d時(shí)，殘留量在＜0.01～0.085 7 mg/kg之間。

表2 添加回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差結(jié)果(n=5)

表3 啶酰菌胺在馬鈴薯上的規(guī)范殘留試驗(yàn)結(jié)果

2.4 長期膳食攝入和慢性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

啶酰菌胺已在我國馬鈴薯上登記使用，且登記使用的安全間隔期為5 d。目前，我國尚未制定啶酰菌胺在馬鈴薯中的最大殘留限量標(biāo)準(zhǔn)。根據(jù)表3中安全間隔期5 d的殘留數(shù)據(jù)，推薦馬鈴薯中啶酰菌胺的最大殘留限量（MRL）為0.5 mg/kg，并對(duì)推薦的限量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行長期膳食攝入和慢性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。

我國制定啶酰菌胺的每日允許攝入量（ADI）為0.04 mg/(kg bw)[2]，我國居民的平均體重為63 kg[11]。薯類取規(guī)范殘留試驗(yàn)得出的馬鈴薯殘留中值0.01 mg/kg，則NEDI為0.495 μg/(kg bw)；深色蔬菜取番茄中啶酰菌胺MRL值3 mg/kg，NEDI則為0.274 5 mg/(kg bw)；淺色蔬菜取黃瓜中啶酰菌胺MRL值5 mg/kg，NEDI則為0.918 5 mg/(kg bw)；水果取葡萄中啶酰菌胺MRL值5 mg/kg，NEDI則為0.228 5 mg/(kg bw)；植物油取油菜中啶酰菌胺MRL值1 mg/kg，NEDI則為0.032 7 mg/(kg bw)。未在我國登記使用的沒有列入統(tǒng)計(jì)。啶酰菌胺在普通人群中的國家估計(jì)每日攝入量是1.455 mg/(kg bw)，慢性攝入風(fēng)險(xiǎn)在57.7%左右。因此，啶酰菌胺在馬鈴薯中的殘留對(duì)一般人群健康的影響是在一個(gè)可接受的風(fēng)險(xiǎn)水平。

3 結(jié)論

啶酰菌胺國家估計(jì)每日攝入量為1.455mg/(kgbw)，而馬鈴薯中國家估計(jì)每日攝入量為0.495μg/(kgbw)，幾乎可忽略不計(jì)。據(jù)此，按本試驗(yàn)的施藥劑量、施藥次數(shù)和采收間隔期在馬鈴薯上施用啶酰菌胺，對(duì)一般人群的健康不會(huì)產(chǎn)生風(fēng)險(xiǎn)。

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