慢性乙肝HBV—DNA、MAO及補(bǔ)體C3及C4對(duì)患者病情分級(jí)的臨床意義

徐彥超　　趙紅星

[摘要] 目的 探討慢性乙肝HBV-DNA、單胺氧化酶（MAO）及補(bǔ)體C3、C4對(duì)患者病情分級(jí)的臨床意義。 方法 選取我院2015年2月～2017年2月收治的慢性乙肝患者131例為研究對(duì)象，分為慢性乙肝組（乙肝組）68例，慢性乙肝合并肝硬化組（肝硬化組）63例。比較兩組HBV-DNA、MAO及補(bǔ)體C3、C4水平，并分析 HBV-DNA、MAO及補(bǔ)體與慢性乙型肝炎病理學(xué)分級(jí)、肝纖維化程度分級(jí)的關(guān)系。 結(jié)果 肝硬化組患者的HBV-DNA、MAO水平明顯高于乙肝組，補(bǔ)體C3、C4水平明顯低于乙肝組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。不同病理學(xué)分級(jí)的患者HBV-DNA水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），補(bǔ)體C3、C4水平隨G1、G2、G3、G4分級(jí)程度的升高逐漸下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。不同肝纖維化程度的患者HBV-DNA水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），血清MAO水平隨S0、S1、S2、S3、S4分級(jí)程度的升高逐漸升高，血清補(bǔ)體C3、C4水平隨分級(jí)程度的升高逐漸下降，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。 結(jié)論 慢性乙肝患者血清HBV-DNA使機(jī)體HBV持續(xù)復(fù)制，這與慢性乙肝的疾病發(fā)展及臨床結(jié)局有密切的關(guān)系，測(cè)定血清MAO及補(bǔ)體C3、C4水平可對(duì)慢性乙肝病理學(xué)分級(jí)及肝纖維化程度進(jìn)行判定，從而對(duì)慢性乙肝的病情分級(jí)及臨床診療提供參考依據(jù)。

[關(guān)鍵詞] 慢性乙肝；病情分級(jí)；HBV-DNA；MAO；補(bǔ)體

[中圖分類號(hào)] R512.62 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-9701（2018）31-0005-04

Clinical significance of chronic hepatitis B HBV-DNA， MAO and complement C3 and C4 in classifying patients' condition

XU Yanchao1 ZHAO Hongxing2

1.Department of Infectious Diseases， the First People's Hospital of Huzhou City in Zhejiang Province， Huzhou 313000， China； 2.Department of Radiology， the First People's Hospital of Huzhou City in Zhejiang Province， Huzhou 313000， China

[Abstract] Objective To investigate the clinical significance of chronic hepatitis B HBV-DNA， monoamine oxidase （MAO） and complement C3， C4 in classifying patients' condition. Methods A total of 131 patients with chronic hepatitis B admitted in our hospital from February 2015 to February 2017 were enrolled. The patients were divided into chronic hepatitis B group（HB group） with 68 cases， chronic hepatitis B combined with liver cirrhosis group （cirrhosis group） with 63 cases. The levels of HBV-DNA， MAO and complement C3 and C4 were compared between the two groups. And the relationship between HBV-DNA， MAO， complement and liver fibrosis grade classification of pathological grade of chronic hepatitis B was analyzed. Results The levels of HBV-DNA and MAO in cirrhosis group were significantly higher than those in hepatitis B group. The levels of complement C3 and C4 were significantly lower than those in hepatitis B group， and the difference was significant（P<0.05）. There was no significant difference in HBV-DNA levels between patients with different pathological grades（P>0.05）. The levels of complement C3 and C4 gradually decreased with the increase of G1， G2， G3 and G4. The difference was statistically significant（P<0.05）. There was no significant difference in HBV-DNA levels between patients with different degrees of liver fibrosis（P>0.05）. Serum MAO levels increased with the increase of S0， S1， S2， S3， and S4 levels. Serum complement C3， C4 gradually decreased with the increase of grade， and the difference was statistically significant （P<0.05）. Conclusion Serum HBV-DNA in patients with chronic hepatitis B can continuously replicate HBV， which is closely related to the development of chronic hepatitis B disease and clinical outcomes. The determination of serum MAO and complement C3 and C4 levels can be used to classify chronic hepatitis B pathology and liver fibrosis. The judgment is made to provide a reference for the classification and clinical diagnosis and treatment of chronic hepatitis B.

[Key words] Chronic hepatitis B； Disease classification； HBV-DNA； MAO； Complement

乙型肝炎是由乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）引起的傳染性疾病，是肝臟疾病的主要病因，慢性乙肝可逐漸發(fā)展為乙肝合并肝硬化甚至肝衰竭，嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量[1-2]。且近年來有文獻(xiàn)報(bào)道慢性乙肝合并肝硬化患者的HBV-DNA水平較高，可能是肝纖維化甚至肝癌等疾病的誘發(fā)因素[3]。以往判斷肝炎活動(dòng)度及肝纖維化程度主要依靠病理學(xué)檢查，但因其創(chuàng)傷大，不宜重復(fù)操作，臨床上逐漸發(fā)現(xiàn)單胺氧化酶（MAO）及補(bǔ)體C3、C4等生物學(xué)標(biāo)志物在肝損害的不同階段具有特征性變化[4-5]。本研究檢測(cè)分析了131例慢性乙肝患者的HBV-DNA、MAO及補(bǔ)體C3、C4水平變化，探討其對(duì)患者病情分級(jí)及疾病診療的臨床意義，為慢性乙肝患者的臨床診治提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2015年2月～2017年2月收治的慢性乙肝患者131例為研究對(duì)象，其中男73例，女58例；年齡25～76歲，平均（40±13）歲。所有研究對(duì)象分為慢性乙肝組（乙肝組）68例，其中男39例，女29例，平均年齡（41±11）歲；慢性乙肝合并肝硬化組（肝硬化組）63例，其中男34例，女29例，平均年齡（39±14）歲。兩組研究對(duì)象性別、年齡等一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：①研究對(duì)象符合《慢性乙型肝炎防治指南（2010年版）》[6]診斷標(biāo)準(zhǔn)；②病歷資料完整的患者；③所有研究對(duì)象均簽署知情同意。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①患甲肝、丙肝等病毒性肝炎患者及酒精性肝炎、自身免疫性肝炎、藥物性肝損傷、脂肪肝、肝癌等疾病患者；②合并心腦血管疾病患者；③參與研究前6個(gè)月內(nèi)服用免疫抑制劑或抗病毒藥物者；④妊娠期及哺乳期婦女。

本研究通過醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.3 方法

1.3.1 病理學(xué)檢查 觀察組患者使用利多卡因行表皮及局部麻醉，取右腋中線第8～9肋間隙為穿刺點(diǎn)，在彩色多普勒超聲引導(dǎo)下，用長(zhǎng)約15 cm、18G全自動(dòng)活檢槍，實(shí)施1 s快速經(jīng)皮肝穿刺術(shù)，于包膜下約3 cm處采集長(zhǎng)度≥1.5 cm肝組織，至少包括3個(gè)匯管區(qū)。用10%中性甲醛液固定標(biāo)本，以石蠟包埋，并進(jìn)行連續(xù)切片，以HE和網(wǎng)織纖維染色處理[7]。所有操作均由我院病理科專業(yè)人員1人獨(dú)立完成，并參照《病毒性肝炎防治方案》[8]對(duì)肝組織病理學(xué)及肝纖維化程度進(jìn)行分級(jí)，病理學(xué)分級(jí)為G1～G4級(jí)，肝纖維化程度分為S0～S4級(jí)。

1.3.2 指標(biāo)檢測(cè) 所有研究對(duì)象于清晨空腹時(shí)抽取靜脈血5 mL，使用離心機(jī)分離出血清，采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)HBV-DNA水平，檢測(cè)結(jié)果取對(duì)數(shù)表示；采用速率法檢測(cè)MAO水平；采用免疫散射法檢測(cè)補(bǔ)體C3、C4水平，C3正常參考值范圍為0.9～1.8 g/L，C4正常參考值范圍為0.1～0.4 g/L。所有操作均由我院檢驗(yàn)科專業(yè)人員操作完成。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用 SPSS 17.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用方差分析，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者血清HBV-DNA、MAO及補(bǔ)體水平比較

肝硬化組患者的HBV-DNA、MAO水平明顯高于乙肝組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。肝硬化組患者的補(bǔ)體C3、C4水平明顯低于乙肝組，組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

2.2 慢性乙肝組不同病理學(xué)分級(jí)患者的HBV-DNA及補(bǔ)體水平比較

慢性乙肝組不同病理學(xué)分級(jí)的患者HBV-DNA水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；不同病理學(xué)分級(jí)的患者補(bǔ)體C3、C4水平隨G1、G2、G3、G4分級(jí)程度的升高逐漸下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

2.3慢性乙肝組不同肝纖維化程度患者的HBV-DNA、MAO及補(bǔ)體水平比較

慢性乙肝組不同肝纖維化程度的患者HBV-DNA水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；不同肝纖維化程度患者的MAO水平隨S0、S1、S2、S3、S4分級(jí)程度的升高逐漸升高，血清補(bǔ)體C3、C4水平隨分級(jí)程度的升高逐漸下降，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表3。

3 討論

隨著人們生活方式的改變，慢性乙肝患者逐漸增多。而慢性乙肝發(fā)生的主要原因是感染HBV病毒，因此乙肝的治療關(guān)鍵是抗病毒治療。血清HBV-DNA是HBV感染最直接的指標(biāo)，血清HBV-DNA陽(yáng)性說明HBV具有復(fù)制性和傳染性，且HBV-DNA水平越高，HBV復(fù)制越活躍、傳染性越高[9-11]。本文中慢性乙肝合并肝硬化組患者的HBV-DNA水平高于慢性乙肝組，與袁媛等[12]研究結(jié)果一致，而高水平的HBV-DNA對(duì)肝細(xì)胞的損傷增大[13-14]。本研究進(jìn)一步比較不同病理學(xué)分級(jí)及纖維化程度的患者HBV-DNA水平，未發(fā)現(xiàn)HBV-DNA水平與慢性乙肝病理學(xué)分級(jí)及纖維化程度有相關(guān)性。因此，盡早采取措施抑制HBV復(fù)制，改善肝功能，控制疾病發(fā)展尤為重要。

MAO 是一種水溶性酶，主要存在于機(jī)體肝、腎等組織的線粒體中，可促使機(jī)體膠原和彈性硬蛋白的結(jié)合，臨床上常用作肝纖維化程度的診斷指標(biāo)。機(jī)體在感染HBV后，肝臟發(fā)生慢性炎癥反應(yīng)，炎癥反應(yīng)進(jìn)一步刺激肝臟形成纖維組織增生，隨肝纖維化程度加重，血清MAO水平增加[15-16]，這與本研究結(jié)果相同，慢性乙肝合并肝硬化患者的血清MAO水平明顯高于慢性乙肝患者，且肝纖維化程度越高，血清MAO水平越高，進(jìn)一步說明MAO可用于診斷慢性乙肝患者肝纖維化程度。

HBV是一種非細(xì)胞毒性病毒，機(jī)體在遭受該病毒感染時(shí)，易產(chǎn)生相應(yīng)的免疫反應(yīng)，體液免疫和細(xì)胞免疫共同發(fā)揮免疫作用，抵御HBV感染[17-19]。而體液免疫中的補(bǔ)體C3、C4作用重大。本研究發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)體C3、C4水平與患者病情有關(guān)。慢性乙型肝炎合并肝硬化患者的血清補(bǔ)體C3、C4水平較慢性乙型肝炎患者明顯下降。表明慢性乙型肝炎患者免疫功能異常，與肝臟受損有關(guān)，且隨肝臟損傷程度加重，補(bǔ)體水平逐漸下降，這與強(qiáng)占榮[20]、林孟新[21]等研究結(jié)果相似。朱書利[22]也認(rèn)為，補(bǔ)體C3、C4水平降低與HBV感染肝細(xì)胞受損導(dǎo)致補(bǔ)體合成減少及免疫功能紊亂補(bǔ)體大量消耗有關(guān)。本研究進(jìn)一步比較不同病理學(xué)分級(jí)患者的補(bǔ)體C3、C4水平，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，G1期C3、C4水平最高，隨著病理學(xué)分級(jí)升高補(bǔ)體水平逐漸下降；不同的肝纖維化程度患者比較，S1期C3、C4水平最高，隨纖維化程度加重，補(bǔ)體水平逐漸下降，與郭飛波[4]研究結(jié)果一致，說明補(bǔ)體C3、C4水平與慢性乙肝的病情分級(jí)有關(guān)。

綜上所述，慢性乙肝患者血清HBV-DNA使機(jī)體HBV持續(xù)復(fù)制，這與慢性乙肝的疾病發(fā)展及臨床結(jié)局有密切的關(guān)系，測(cè)定血清MAO及補(bǔ)體C3、C4水平可對(duì)慢性乙肝病理學(xué)分級(jí)及肝纖維化程度進(jìn)行判定，從而對(duì)慢性乙肝的病情分級(jí)及臨床診療提供參考依據(jù)。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 付艷玲. 慢性乙型肝炎抗病毒治療耐藥管理研究進(jìn)展[J].熱帶醫(yī)學(xué)雜志，2014，14（10）：1392-1395.

[2] Tian Y，Ni D，Yang W，et al. Telbivudine treatment corrects HBV-induced epigenetic alterations in liver cells of patients with chronic hepatitis B[J]. Carcinogenesis，2014，35（1）：53.

[3] 趙龍鳳，王艷. 臨床一線抗病毒藥物對(duì)慢性乙型肝炎治療結(jié)局的影響[J]. 中華肝臟病雜志，2017，25（7）：485-489.

[4] 郭飛波. 慢性乙肝患者血清補(bǔ)體C3、C4與肝炎分級(jí)程度以及肝纖維化程度的關(guān)系研究[J]. 中國(guó)免疫學(xué)雜志，2017，33（3）：426-428.

[5] 周艾強(qiáng)，陳陽(yáng)術(shù). 細(xì)胞自噬影響實(shí)驗(yàn)性大鼠肝纖維化進(jìn)展的分子機(jī)制以及藥物抗肝纖維化的作用研究[J]. 廣東醫(yī)學(xué)，2017，38（15）：2280-2283.

[6] 中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì). 慢性乙型肝炎防治指南（2010年版）[J]. 中華內(nèi)科雜志，2011，50（2）：1-12.

[7] 李霞，陳群，楊柳. 實(shí)時(shí)超聲彈性成像技術(shù)評(píng)估肝纖維化程度的研究[J]. 中西醫(yī)結(jié)合肝病雜志，2018，28（1）：46-47.

[8] 中華醫(yī)學(xué)會(huì)傳染病與寄生蟲病學(xué)分會(huì)，肝病學(xué)分會(huì). 病毒性肝炎防治方案[J]. 中華內(nèi)科雜志，2001，40（1）：62-68.

[9] 魏娟，王生，周迪，等. 乙型肝炎病毒前S1抗原與血清HBV-DNA及HBVM的相關(guān)性分析[J]. 中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2014，24（14）：3391-3393.

[10] 張寶，李世龍，么作義，等. 唐山地區(qū)慢性乙型肝炎患者臨床特征與HBV基因型的相關(guān)性研究[J]. 中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2016，26（5）：982-984.

[11] Seto W K，Lam Y F，F(xiàn)ung J，et al. Changes of HBsAg and HBV DNA levels in Chinese chronic hepatitis B patients after 5 years of entecavir treatment[J]. Journal of Gastroenterology & Hepatology，2014，29（5）：1028-1034.

[12] 袁媛，陳驥，王亞莉. HBeAg陰性慢性乙肝合并肝硬化患者血清HBV-DNA水平與肝功能的關(guān)系[J]. 山東醫(yī)藥，2017，57（1）：81-83.

[13] 方向，鄧偉. HBV DNA整合與肝癌關(guān)系的研究進(jìn)展[J]. 山東醫(yī)藥，2017，57（42）：102-104.

[14] 劉英麗，張青云. 甲胎蛋白和α-L-巖藻糖苷酶及乙肝病毒核酸水平與原發(fā)性肝癌的關(guān)系[J]. 標(biāo)記免疫分析與臨床，2016，23（3）：241-243.

[15] 袁秀梅，王愛霞，齊發(fā)梅. 乙肝、丙肝和肝硬化患者血清單胺氧化酶、腺苷脫氨酶及膽堿脂酶水平的比較[J]. 國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2014，35（9）：1194-1195.

[16] 沈震，費(fèi)新應(yīng)，劉文濤，等. 牡甲化纖方治療各種原因所致慢性肝病肝纖維化患者的臨床研究[J]. 中西醫(yī)結(jié)合肝病雜志，2017，27（1）：23-25.

[17] 劉志華，齊青松，張志安，等. 慢性乙型肝炎患者外周血CD4+IL-17A+IFN-γ+T細(xì)胞的變化及臨床意義[J]. 熱帶醫(yī)學(xué)雜志，2014，14（3）：342-344.

[18] 楊新星，李東升，周繼光，等. 乙肝病毒感染不同階段抗原肽特異性細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞的初步研究[J]. 中國(guó)免疫學(xué)雜志，2016，32（10）：1496-1502.

[19] 李勇，陳錦皇，舒曉剛，等. 已免疫CD4+記憶性T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)HBV轉(zhuǎn)基因小鼠抗HBsAg免疫應(yīng)答的研究[J].中華肝臟病雜志，2016，24（12）：897-901.

[20] 強(qiáng)占榮，易彩霞，劉穎，等. 慢性HBV感染者外周血淋巴細(xì)胞亞群及血清IgG和補(bǔ)體檢測(cè)的臨床意義[J]. 內(nèi)科，2016，11（1）：1-3.

[21] 林孟新，蘇智軍，郭如意. 乙型肝炎患者血清免疫球蛋白和補(bǔ)體C3/C4檢測(cè)的意義[J]. 實(shí)用肝臟病雜志，2015， 18（2）：182-183.

[22] 朱書利. 血清補(bǔ)體C3、C4水平檢測(cè)對(duì)慢性乙型肝炎患者肝組織病理學(xué)的意義評(píng)價(jià)[J]. 臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2016，15（5）：459-462.

（收稿日期：2018-05-23）