微小RNA在妊娠中的研究進(jìn)展*

楊文梅綜述，植枝福，劉俐伶，岳錦春，龐麗紅△審校（廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科，廣西南寧500）

微小RNA（miRNA）是一種內(nèi)源性非編碼小RNA，以完全或非完全互補(bǔ)的方式與其靶基因相結(jié)合，通過影響靶基因轉(zhuǎn)錄或翻譯調(diào)控細(xì)胞發(fā)育、分化、增殖、凋亡，以及疾病的發(fā)生、發(fā)展等。miRNA被用于多種疾病發(fā)病機(jī)制的研究。早期主要集中于腫瘤、免疫性疾病等研究中。近年來，越來越多的學(xué)者將miRNA用于妊娠的相關(guān)研究中，在妊娠生理、異常妊娠、妊娠期并發(fā)癥等方面均進(jìn)行了相關(guān)研究。本文就miRNA在妊娠中的研究進(jìn)展作一綜述。

1 miRNA與妊娠生理

miRNA在整個(gè)妊娠期間具有重要作用，其參與了內(nèi)膜容受性、受精卵著床、胎兒發(fā)育、胎盤功能、分娩過程等環(huán)節(jié)。ALTM?E等[1]通過采集健康婦女容受期內(nèi)膜組織及容受期前內(nèi)膜組織進(jìn)行基因測(cè)序發(fā)現(xiàn)，容受期內(nèi)膜組織hsa-miR-30b和hsa-miR-30d顯著升高，hsamiR-494和hsa-mir-923在容受期子宮內(nèi)膜表達(dá)下調(diào)。其可能通調(diào)節(jié)靶基因——鈣蛋白酶抑制蛋白、囊性纖維化跨膜轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子、成纖維生長因子受體2、白血病抑制因子（LIF）等調(diào)節(jié)子宮內(nèi)膜容受性。miRNA及其目標(biāo)基因可能在子宮內(nèi)膜容受性的形成中扮演著重要角色。

胚胎著床是哺乳動(dòng)物生殖的至關(guān)重要的一步。胚胎著床是活性胚胎與子宮相互對(duì)話，并建立緊密聯(lián)系的復(fù)雜過程。在雌激素和黃體酮的協(xié)同調(diào)控下，一些黏附分子、細(xì)胞因子和生長因子等呈時(shí)空特異性表達(dá)，許多信號(hào)通路間的相互協(xié)作對(duì)胚胎著床至關(guān)重要。近年來發(fā)現(xiàn)，miRNA等非編碼RNA也參與了胚胎著床的分子調(diào)控網(wǎng)絡(luò)[2]。miRNA-101a、miRNA-199a在植入小鼠子宮中呈時(shí)空表達(dá)，通過轉(zhuǎn)錄后調(diào)控胚胎植入的關(guān)鍵基因——環(huán)氧化酶2的表達(dá)，調(diào)節(jié)胚胎植入[3]。此外，還有許多影響著床的其他關(guān)鍵基因也與miRNA相關(guān)，如miRNA-181的表達(dá)對(duì)胚胎植入的發(fā)生至關(guān)重要[4]。miRNA-181的瞬態(tài)和長時(shí)間轉(zhuǎn)基因表達(dá)導(dǎo)致植入受損。miRNA-181能直接作用于靶基因LIF，使LIF表達(dá)下調(diào)，從而抑制胚胎著床。

妊娠屬孕產(chǎn)婦特有的生理過程，胚胎形成類似于同種異體移植過程，這時(shí)對(duì)母體而言其屬半同種異體抗原，妊娠的成功在很大程度上便是成功的妊娠免疫耐受狀態(tài)。miRNA在生物過程中發(fā)揮者重要的監(jiān)管作用，包括免疫監(jiān)管環(huán)境。最近有研究表明，miRNA參與了孕期免疫耐受的建立。精液接觸有助于激活子宮內(nèi)膜基因表達(dá)和免疫細(xì)胞變化，miRNA參與了產(chǎn)生耐受性樹突狀細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞，不僅影響隨后的妊娠質(zhì)量，還影響后代的健康[5]。

miRNA在胚胎發(fā)育過程中也具有重要作用。PERNAUTE等[6]研究證實(shí)，miRNA參與調(diào)節(jié)細(xì)胞信號(hào)和早期胚胎的體內(nèi)平衡。具體而言，miRNA通過細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶信號(hào)通路調(diào)節(jié)胚外內(nèi)胚層，以及細(xì)胞周期進(jìn)程外胚層的胚外組織和細(xì)胞凋亡。HIGASHIJIMA等[7]研究發(fā)現(xiàn)，miRNA-518b、miRNA-1323、miRNA-516b、miRNA-515-5p、miRNA-520 h、miRNA-519d、miRNA-526b 在胎兒生長受限患者中表達(dá)下調(diào)。

有研究發(fā)現(xiàn)，miRNA在小鼠和人胎盤中高表達(dá)，某些miRNA在胎盤的發(fā)育過程中發(fā)揮著重要功能。2004年SEITZ等[8]采用Northern印跡雜交方法在小鼠胎盤組織中檢測(cè)到一系列 miRNA（miRNA-B6、miRNA-C3、miRNA-A24、miRNA-C2、miRNA-M）表達(dá)，推測(cè) miRNA在胎盤生長、發(fā)育過程中發(fā)揮了一定的基因調(diào)控作用。此外，CHIM等[9]應(yīng)用實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）技術(shù)檢測(cè)了母體血漿中胎盤來源的157個(gè)miRNA的表達(dá)，并檢測(cè)了這些miRNA在母體血漿中的穩(wěn)定性，發(fā)現(xiàn)4個(gè)胎盤來源 miRNA（miRNA-141、miRNA-149、miRNA-299-5p、miRNA-135b）在孕期母體血漿中高表達(dá)，其中miRNA-141在母體血漿中的水平隨妊娠進(jìn)展而增高，且其穩(wěn)定性高于胎盤催乳素等孕期血漿標(biāo)志物，提示胎盤來源的miRNA可作為新的監(jiān)測(cè)孕期進(jìn)展的分子標(biāo)志物。已有研究證實(shí)，miRNA表達(dá)異常與一些胎盤疾病、糖尿病及妊娠期高血壓疾病等相關(guān)[10-12]。此外，mi-RNA-17-92、miRNA-371-3、C19MC 也與胎盤功能有關(guān)[13]。

2 miRNA與妊娠時(shí)限異常

2010年HASSAN等[14]在宮頸組織中檢測(cè)出226種miRNA。比較了自發(fā)性陰道分娩孕婦和無自發(fā)性陰道分娩孕婦宮頸組織miRNA表達(dá)的差異，結(jié)果顯示，自發(fā)性陰道分娩孕婦宮頸組織中miRNA-223、miRNA-34b、miRNA-34c表達(dá)明顯升高。其通過調(diào)節(jié)可能的靶基因Toll樣受體3和緊密連接蛋白8的表達(dá)參與了宮頸擴(kuò)張?？赏ㄟ^監(jiān)測(cè)血液中miRNA-223、miRNA-34b、miRNA-34c表達(dá)情況幫助判斷宮頸軟化擴(kuò)張趨勢(shì)，有助于對(duì)早產(chǎn)的診斷和評(píng)估。還有研究表明，miRNA-200a在孕激素受體功能下降導(dǎo)致的早產(chǎn)中具有重要作用[15]。

3 miRNA與妊娠期并發(fā)癥

子癇前期是妊娠特有疾病，表現(xiàn)為妊娠20周后出現(xiàn)收縮壓大于或等于140 mmHg（1 mm Hg=0.133 kPa）和（或）舒張壓大于或等于90 mm Hg伴蛋白質(zhì)大于或等于0.3 g/24 h或隨機(jī)尿蛋白（+）。是孕產(chǎn)婦和新生兒死亡的主要原因之一。子癇前期的發(fā)病機(jī)制涉及滋養(yǎng)細(xì)胞增殖、遷移和侵襲能力不足導(dǎo)致的間質(zhì)浸潤過淺和子宮螺旋動(dòng)脈重塑不良。最近有研究表明，miRNA參與了子癇前期的發(fā)展[16-18]。與健康孕婦胎盤組織比較，子癇前期患者胎盤中存在一群差異性表達(dá)的miRNA。而很多子癇前期相關(guān)miRNA的靶基因與細(xì)胞增殖和侵襲有關(guān)。miRNA-141在子癇前期患者胎盤組織中表達(dá)上調(diào)，miRNA可調(diào)節(jié)滋養(yǎng)細(xì)胞侵襲力及細(xì)胞間信號(hào)傳導(dǎo)[19]。LU等[20]研究發(fā)現(xiàn)，miRNA-137通過調(diào)節(jié)靶基因——雌激素相關(guān)受體能顯著減少子癇前期患者胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞增殖和遷移能力，可能成為該疾病基因治療的潛在靶基因[21]。此外，miRNA的靶基因還參與了子癇前期患者血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷過程。

妊娠期糖尿?。℅DM）指妊娠期首次發(fā)生或發(fā)現(xiàn)的糖代謝異常，我國GDM發(fā)生率為1%～5%，近年來有明顯增高趨勢(shì)[22]。miRNA在GDM中的研究也逐漸成熟。李偉等[23]選取GDM孕婦和健康孕婦分娩后胎盤組織，采用測(cè)序及熒光定量PCR法檢測(cè)miRNA，利用數(shù)據(jù)庫對(duì)miRNA靶基因進(jìn)行分析，結(jié)果顯示，GDM孕婦胎盤組織中胰島素信號(hào)通路相關(guān)的47種miRNA表達(dá)水平升高，5種表達(dá)降低。熒光定量PCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，GDM組孕婦hsa-miRNA-548am-5p、hsa miRNA-95-5p表達(dá)明顯升高；而hsa-miRNA-1246表達(dá)明顯降低。部分miRNA靶基因可對(duì)PI3K等靶點(diǎn)發(fā)揮調(diào)節(jié)作用，參與GDM的發(fā)病。王曉晶等[24]采用TaqMan探針法檢測(cè)GDM孕婦與健康孕婦單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)基因型，比較兩組孕婦各單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)等位基因和基因型頻率的差異，結(jié)果顯示，hsa-miRNA-27a基因rs895819位點(diǎn)與GDM相關(guān)，C等位基因降低GDM的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。miRNA-132、miRNA-29a和miRNA-222[25]在GDM孕婦中低表達(dá)，由于能在循環(huán)血液中檢測(cè)到，可能作為GDM的生物標(biāo)志物。

近年來，與妊娠相關(guān)miRNA的研究取得很大進(jìn)展。從基因篩查到靶基因的預(yù)測(cè)及功能測(cè)定，從發(fā)病機(jī)制研究到逐漸延伸至疾病的干預(yù)和治療，已一步步在前進(jìn)。然而，近期研究還有很大的探索空間：（1）很多研究者在相同的研究方法下取得的結(jié)果存在差異，其原因可能與miRNA的種類較多、miRNA在妊娠期的動(dòng)態(tài)變化、取材部位不同等有關(guān)；（2）miRNA在妊娠中的作用及相關(guān)機(jī)制還有很多未知空間，如miRNA對(duì)妊娠期免疫耐受具有至關(guān)重要的作用，但很少有研究特定的miRNA在各種免疫細(xì)胞中如何參與調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞的發(fā)展；（3）miRNA與妊娠期特有疾病的研究越來越受到重視，由于能在循環(huán)血液中監(jiān)測(cè)到miRNA，在妊娠期特有疾病領(lǐng)域miRNA具有臨床診斷價(jià)值和評(píng)估預(yù)后的價(jià)值，目前，較有潛力的代表就是miRNA-21和miRNA-132[26]。miRNA在妊娠期疾病的靶向治療方面也具有前景，尚需不斷研究和探索。

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