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    NOB1在宮頸癌及癌前病變中的表達及其與高危型HPV感染的關系

    2018-02-13 07:50:40趙洪萍馮琴琴黃俊杰俞巧稚
    現代泌尿生殖腫瘤雜志 2018年6期
    關鍵詞:負荷量內瘤宮頸炎

    趙洪萍 馮琴琴 黃俊杰 俞巧稚

    宮頸癌是常見的婦科惡性腫瘤,我國每年新增患者占全球宮頸癌新發(fā)病例數的1/4以上[1-2],尋求宮頸癌相關生物學指標,是早期診斷、制定個體化治療方案以及預后的關鍵。人乳頭瘤病毒(human papilloma virus, HPV)感染是宮頸癌的主要致病因素,文獻報道超過95%的宮頸癌組織中含有HPV[3]。NOB1蛋白是一種鋅指蛋白,有文獻報道NOB1參與了核糖體的組裝和蛋白酶體的合成,與腫瘤的形成和發(fā)展均有直接關系[4]。本研究對宮頸癌組織中NOB1的表達及高危型HPV(HR-HPV)的感染情況進行了分析,旨在探討NOB1與HR-HPV感染的關系,為宮頸癌的早期診斷、治療及預后提供理論依據。

    對象與方法

    一、一般資料

    選取2014年8月至2017年10月我院收治的宮頸病變患者的組織標本114例進行研究,其中宮頸癌53例、宮頸上皮內瘤變42例、慢性宮頸炎19例,均經病理活檢證實。患者年齡32~70歲,平均年齡(47.6±6.5)歲,病程4個月~5年,平均(1.9±0.8)年。排除標準:①非首次發(fā)病就診患者;②近3個月內接受了抗腫瘤或抗HPV病毒治療患者;③具有自身免疫性疾病患者;④有嚴重心、肝、腎臟疾病史患者。

    二、NOB1的檢測及結果判定

    10%福爾馬林固定標本,經清洗脫水后進行石蠟包埋、切片、脫蠟及染色,采用En Vision二步法,按試驗盒說明書進行操作。NOB1多克隆抗體來自Proteintech Group公司,試劑盒采用廣州健侖生物科技有限公司。依據高倍光鏡下細胞的特征進行評分:①無色、淺棕色、棕黃色、棕褐色分別為0、1、2、3分;②染色的陽性細胞數占比≤5%為0分,6%~25%為1分,26%~50%為2分,≥51%為3分。將染色程度和陽性細胞比例相乘后劃分等級:0~1分為陰性(-),2~3分為弱陽(+),4~6分為中度陽(++),7~9分為強陽(+++)。

    三、HR-HPV的檢測及結果判定

    采用美國Digene公司生產的試劑盒檢測樣本中HPV-DNA的含量,按照試劑盒說明書進行操作,試劑一次可檢測13種HR-HPV(包括HPV 16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59和68)。根據樣本檢測出的HPV-DNA的RLU與標準陽性對照樣本的RLU的比值進行分級,比值≥1.0相當于標本中檢出的HPV-DNA含量>l.0 pg/ml,可以判定為HR-HPV陽性,<1.0判定為陰性。根據比值大小計算病毒負荷量具體值,包括1~100(不包括100)、100~1 000(不包括1 000)、≥1 000。

    四、統(tǒng)計學方法

    結 果

    一、HR-HPV陽性率及DNA負荷量比較

    宮頸癌HR-HPV陽性率為83.0%,顯著高于宮頸上皮內瘤變(46.5%)和慢性宮頸炎(26.3%),3組之間差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05);隨著宮頸病變的惡化進展,HR-HPV DNA負荷量逐漸增加(Z=13.35)。見表1。

    二、NOB1蛋白表達水平比較

    宮頸癌NOB1蛋白質陽性表達率為73.6%,顯著高于宮頸上皮內瘤變(35.7%)和慢性宮頸炎(10.5%),3組之間差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表2。

    表1 不同組別間HR-HPV陽性率及DNA負荷量比較[n(%)]

    與慢性宮頸炎比較aP<0.05;與宮頸上皮內瘤變比較bP<0.05

    表2 不同組別間NOB1蛋白表達水平比較[n(%)]

    與慢性宮頸炎比較aP<0.05;與宮頸上皮內瘤變比較bP<0.05

    三、NOB1的表達及HR-HPV感染與宮頸癌臨床病理參數的相關性

    HR-HPV感染陽性率與宮頸癌各臨床病理參數均無明顯相關(P>0.05);NOB1表達陽性率與宮頸癌組織學分級、淋巴結轉移有關(P<0.05),與組織學類型、FIGO分期及肌層浸潤深度等因素均無關(P>0.05)。見表3。

    表3 不同臨床病理參數的宮頸癌中NOB1表達及HR-HPV感染陽性率[n(%)]

    四、宮頸癌NOB1的表達與HR-HPV DNA負荷量的相關性

    Spearman秩相關分析表明,宮頸癌NOB1的表達與HR-HPV DNA負荷量具有顯著的正相關關系(r=0.457,P<0.05)。

    討 論

    宮頸癌是威脅婦女健康的主要婦科惡性腫瘤,宮頸癌的發(fā)展主要經歷癌前病變、早期浸潤癌及浸潤癌3個階段,及時明確宮頸癌相關生物學指標,早期篩查并進行干預,是避免宮頸病變發(fā)展為宮頸癌、提高預后質量的關鍵[5]。有報道顯示,HR-HPV病毒感染是導致宮頸細胞加速惡變的主要原因,DNA負荷量可以反映宮頸病變的惡化程度[6]。本研究表明,宮頸癌HR-HPV陽性率為83.0%,顯著高于宮頸上皮內瘤變(46.5%)和慢性宮頸炎(26.3%),3組之間差異具有統(tǒng)計學意義,且隨著宮頸癌病變的惡化,HR-HPV DNA負荷量逐漸增加(Z=13.35),此研究結論與王宇華等[7]的研究結果一致,表明HR-HPV感染可誘導宮頸上皮的惡性轉化,同時進一步說明了宮頸癌病變與HR-HPV病毒感染密切相關。

    NOB1蛋白是一種鋅指蛋白,在核糖體、蛋白酶體生物形成過程中起關鍵作用。當NOB1的表達出現異常時,核糖體合成受到影響,進而影響細胞生長周期的調控作用[8-9]。目前,關于NOB1基因在宮頸癌中表達的報道較少。本研究結果顯示,隨著宮頸的惡性病變增強,NOB1蛋白質陽性表達率逐漸增加,宮頸癌NOB1蛋白質陽性表達率為73.6%,顯著高于宮頸上皮內瘤變(35.7%)和慢性宮頸炎(10.5%),3組之間差異具有統(tǒng)計學意義,表明NOB1過表達可能在宮頸癌變過程中發(fā)揮顯著作用。本研究還表明,HR-HPV感染陽性率與宮頸癌各臨床病理參數均無明顯相關(P>0.05);NOB1表達陽性率與宮頸癌組織學分級、淋巴結轉移有關(P<0.05),與其他病理因素無顯著相關(P>0.05),此研究結論與盧洪勝等[10]、楊桂春等[11]的研究一致。本研究同時還表明宮頸癌NOB1的表達與HR-HPV DNA負荷量具有顯著的正相關關系,NOB1表達陽性與惡性程度高(分化程度低)有關,而與淋巴結轉移負相關,推測其與HR-HPV共同參與了宮頸癌的發(fā)展和惡化過程。

    綜上所述,宮頸癌患者普遍存在NOB1的過度表達,且與HR-HPV感染密切相關,兩者共同參與了宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展過程。進一步深入研究NOB1與HR-HPV感染在宮頸癌中的作用機制意義重大。

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