病理診斷中免疫組化技術(shù)的應(yīng)用

胡詠

摘要免疫組織化學(xué)是臨床病理診斷中一種重要的手段，在腫瘤分類、診斷、預(yù)后判斷等方面具有十分重要的應(yīng)用價(jià)值，在臨床得到廣泛應(yīng)用。但免疫組化技術(shù)在病理診斷中也存在一定局限性。本文探討病理診斷中免疫組化技術(shù)的應(yīng)用，希望能夠?yàn)楹侠響?yīng)用提供指導(dǎo)。

關(guān)鍵詞病理診斷；免疫組化技術(shù)；應(yīng)用

免疫組化技術(shù)近年來由于具有準(zhǔn)確、快速等諸多優(yōu)點(diǎn)而在臨床病理診斷中得到了越來越廣泛的應(yīng)用，并且已經(jīng)成為病理診斷中不可或缺的重要手段。這項(xiàng)技術(shù)在腫瘤診斷及鑒別診斷、預(yù)后判斷等方面均具有顯著的應(yīng)用價(jià)值，但是也存在假陽性、假陰性等一定的局限性，因此加強(qiáng)病理診斷中免疫組化技術(shù)的應(yīng)用研究具有十分重要的現(xiàn)實(shí)意義和作用。

病理診斷中免疫組化技術(shù)的應(yīng)用

腫瘤性質(zhì)的判斷：對(duì)B淋巴細(xì)胞增生的單克隆或多克隆性采用免疫球蛋白（Ig）的輕鏈抗體進(jìn)行檢測能夠區(qū)別腫瘤是屬于反應(yīng)性增生還是腫瘤性增生。如果患者的腫塊性質(zhì)為濾泡反應(yīng)性增生，則細(xì)胞凋亡蛋白（bcl-21不會(huì)表達(dá)在濾泡反應(yīng)中心的細(xì)胞中，而是呈現(xiàn)為bcl-2陰性；但是如果患者的腫塊性質(zhì)為濾泡性淋巴瘤，那么9/10以上的患者腫瘤性濾泡細(xì)胞中存在bel-2高表達(dá)的情況，并且bcl-2呈現(xiàn)為陽性；腫瘤細(xì)胞增生的程度能夠通過周期素（cyclin）、增殖細(xì)胞核抗原（PCNA）、核抗原（Ki-67）等來進(jìn)行有效評(píng)價(jià)，從而能夠?qū)υ錾?xì)胞的良惡性進(jìn)行準(zhǔn)確的判斷。

腫瘤分期的確定：腫瘤分期與患者是否出現(xiàn)血管侵襲、有無淋巴管以及是否浸潤等有著密切的關(guān)系，因此腫瘤分期的確定對(duì)于患者的治療以及預(yù)后效果的判斷均具有十分重要的作用。采用免疫組化技術(shù)能夠通過Ⅳ型膠原以及層粘連蛋白的單克隆抗體來對(duì)基膜的主要成分進(jìn)行清晰的顯示，從而能夠?qū)υ话┖徒櫚┻M(jìn)行準(zhǔn)確的區(qū)分，如果出現(xiàn)上皮性癌未突破基膜則可以判定為原位癌，如果突破基膜的情況則可以判定患者為浸潤癌；除此之外，標(biāo)記物第8因子相關(guān)蛋白、Anti-HAP40抗體、D2-40等能夠?qū)ρ芎土馨凸軆?nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行清晰的顯示，從而能夠使腫瘤對(duì)血管或淋巴管的浸潤清晰地顯示。由此可見，免疫組化技術(shù)無論是對(duì)有無血管或淋巴管浸潤的鑒別還是腫瘤的良惡性鑒別均能夠提供重要的科學(xué)依據(jù)。

細(xì)胞屬性的判定：細(xì)胞的屬性通過免疫組化技術(shù)能夠利用具有標(biāo)記出細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的抗原成分作用的特定抗體來進(jìn)行判定，從而能夠?qū)δ[瘤的來源進(jìn)行準(zhǔn)確判斷。例如，上皮性標(biāo)記細(xì)胞角蛋白（CK）如果為陽性，則可以判定患者的腫瘤屬性為上皮源性腫瘤；甲狀腺髓樣癌特有的標(biāo)記為降鈣素多克隆抗體；甲狀腺濾泡性癌則可以通過甲狀腺球蛋白（Tg）陽性來進(jìn)行判斷；僅在前列腺上皮存在前列腺特異性抗原（PAS）；B細(xì)胞淋巴瘤可以通過CD20和CD79a陽性來進(jìn)行判斷；膠質(zhì)腫瘤則可以通過膠質(zhì)纖維酸性蛋白（GFA P）陽性來進(jìn)行判斷；內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)記物CD34陽性可以提示為血管源性腫瘤；原癌基因蛋白產(chǎn)物CD117陽性則提示患者為胃腸道間質(zhì)瘤。

來源不明的轉(zhuǎn)移瘤原發(fā)部位的確定：如果患者的轉(zhuǎn)移瘤來源不明，惡性腫瘤的組織學(xué)來源則能夠通過免疫組化技術(shù)來進(jìn)行確定，從而能夠?qū)υl(fā)部位進(jìn)行進(jìn)一步的確定。例如，在膽管癌、胰腺癌、胃腸道癌中角蛋白抗體（CK20）為陽性，但是在乳腺癌、腎癌以及肺癌中則呈現(xiàn)為陰性；如果通過免疫組化技術(shù)顯示Tg陽性，則首先需要懷疑為甲狀腺出現(xiàn)轉(zhuǎn)移；如果通過免疫組化技術(shù)顯示染色法（PAS）陽性，則首先需要懷疑為前列腺出現(xiàn)轉(zhuǎn)移；如果通過免疫組化技術(shù)顯示S-100蛋白若為陽性，則首先需要懷疑為黑色素瘤；如果通過免疫組化技術(shù)顯示結(jié)蛋白、肌紅蛋白、肌球蛋白、肌動(dòng)蛋白陽性，則首先需要懷疑為橫紋肌肉瘤。由此能夠看出，免疫組化技術(shù)能夠?qū)碓床幻鞯霓D(zhuǎn)移瘤的原發(fā)部位進(jìn)行確定，并且對(duì)患者的臨床治療和預(yù)后均具有至關(guān)重要的作用。

對(duì)“未分化”的惡性腫瘤的判斷：肉瘤或者癌是臨床上常見的“未分化”的惡性腫瘤類型，由于腫瘤尚未分化，就不存在典型的細(xì)胞起源特征，從而也就無法對(duì)其進(jìn)行準(zhǔn)確的分類。非特異性與特異性抗體是組織學(xué)分類中常用的鑒定方法，而在臨床病理診斷中，則一般采用免疫組化技術(shù)來對(duì)其進(jìn)行準(zhǔn)確的判斷，這種技術(shù)不僅能夠?qū)ζ溥M(jìn)行準(zhǔn)確的定位，還能夠?qū)M織器官交界處的不同類型的腫瘤進(jìn)行較為準(zhǔn)確的區(qū)分，并且能夠?qū)ξ⑿〔≡钸M(jìn)行準(zhǔn)確的發(fā)現(xiàn)，這對(duì)于患者疾病的臨床治療以及預(yù)后效果的判斷均具有至關(guān)重要的作用和意義。除此之外，免疫組化技術(shù)能夠利用細(xì)菌、病毒、真菌等特異性的抗體來對(duì)各種傳染病進(jìn)行較為準(zhǔn)確的診斷，具有十分顯著的臨床應(yīng)用價(jià)值。

免疫組化技術(shù)的局限性

理想的腫瘤標(biāo)記物應(yīng)該具備靈敏度高、精確性和特異性強(qiáng)等特點(diǎn)，但是目前在臨床研究和實(shí)踐中均未發(fā)現(xiàn)這樣的腫瘤標(biāo)記物存在，適當(dāng)?shù)年栃耘c陰性對(duì)照是免疫組化技術(shù)操作過程中必須具備的重要內(nèi)容。

假陽性：在免疫組化技術(shù)應(yīng)用過程中如果出現(xiàn)背景著色、著色不勻、邊緣效應(yīng)等情況，則均有可能出現(xiàn)陽性信號(hào)定位不正確的現(xiàn)象，即假陽性的出現(xiàn)。除此之外，假陽性的出現(xiàn)還有可能是由于組織的某些特定成分所導(dǎo)致的。假陽性出現(xiàn)的原因有很多，主要有以下幾種情況：一抗是否失效以及一抗?jié)舛?；組織未經(jīng)試劑覆蓋；組織變干；非特異性染色的出現(xiàn)；抗體孵育時(shí)間過長；DAB（3，3'-二氨基聯(lián)苯胺）顯色時(shí)間太長；壞死組織中非特異性抗體的吸附導(dǎo)致較高的背景染色。

假陰性：所有抗體標(biāo)記的切片均無陽性信號(hào)，均呈陰性就是免疫組化結(jié)果中的假陰性，該結(jié)果不是真實(shí)的反應(yīng)，導(dǎo)致這種情況出現(xiàn)的原因主要有以下幾點(diǎn)：①?zèng)]有選擇合理的抗原修復(fù)方法，修復(fù)方法需要根據(jù)不同的抗原特點(diǎn)來進(jìn)行針對(duì)性的選擇，熱修復(fù)是最常用的修復(fù)方法，但是還有些抗原需要用酶消化，例如表皮生長因子要求使用胃蛋白酶消化。②一抗本身的問題：一抗效價(jià)降低或失效均會(huì)導(dǎo)致免疫組化結(jié)果中的假陰性的出現(xiàn)，從而有可能造成臨床疾病的漏診或者錯(cuò)診。

綜上所述，隨著越來越多的新型抗體的出現(xiàn)以及各種抗體新的用途不斷被發(fā)現(xiàn)，臨床病理診斷中免疫組化技術(shù)在臨床上的應(yīng)用也越來越廣泛，該技術(shù)能夠判斷腫瘤的性質(zhì)、確定腫瘤的分期、判定細(xì)胞的屬性、確定來源不明的轉(zhuǎn)移瘤的原發(fā)部位以及判斷“未分化”的惡性腫瘤，其臨床應(yīng)用價(jià)值十分顯著。但是這項(xiàng)技術(shù)也存在著一定的局限性，因此相關(guān)醫(yī)護(hù)人員要明確該技術(shù)的優(yōu)勢和缺陷，并且通過不斷總結(jié)經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)等來充分發(fā)揮其優(yōu)勢。endprint