芹菜山楂汁對非酒精性脂肪肝模型小鼠血壓、血脂、脂肪肝形成的影響

郎雪楠, 陳雪婷, 董婉維, 張梅英（中國醫(yī)科大學(xué)實驗動物部, 沈陽110001）

芹菜山楂汁對非酒精性脂肪肝模型小鼠血壓、血脂、脂肪肝形成的影響

郎雪楠, 陳雪婷, 董婉維, 張梅英
（中國醫(yī)科大學(xué)實驗動物部, 沈陽110001）

目的探討芹菜山楂混合提取液對非酒精性脂肪肝模型小鼠血壓、血脂以及脂肪肝形成的影響。方法30只3周齡C57BL/6小鼠按隨機數(shù)字表法分為對照組、高脂組和高脂飼料合并芹菜山楂汁灌胃組。飼養(yǎng)8周后進行血壓、血脂、肝組織病理學(xué)檢測。結(jié)果高脂組小鼠血壓、血清甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）較對照組有顯著的升高（P＜0.05），部分小鼠出現(xiàn)肝脂肪變性； 灌胃組小鼠血壓、血脂各項指標較對照組有顯著升高, 但低于高脂組（P＜0.05）, 且沒有明顯肝脂肪變性。結(jié)論芹菜山楂汁具有降血脂、降血壓和延緩脂肪肝形成的作用。［關(guān)鍵詞］ 芹菜山楂汁； 高脂飲食； 血壓； 血脂； 脂肪肝

隨著人們生活水平的提高和生活方式的改變，高血壓、高血脂、脂肪肝的發(fā)病率不斷升高，高脂飲食是引起上述幾種疾病的常見誘因之一。芹菜Apium graveolens）屬傘形花科蔬菜，性涼，含有豐富的黃酮類化合物，具有降壓安神、降血脂、保護心血管、增強免疫等功效［1］。山楂（Crataegus pinnatifida Bunge）為薔薇科植物山楂的成熟果實，其性微溫, 味酸, 歸脾、胃、肝經(jīng), 研究表明山楂有擴張血管和降壓，增強心肌調(diào)節(jié)血脂及膽固醇含量的功能［2］。梁華等［3］、袁圓等［4］已證實兩種植物單獨使用均有降血壓、降血脂作用。本實驗試將芹菜性涼, 山楂性微溫的飲食特點相結(jié)合，將二者汁液混合提取后進行灌胃，觀察其對非酒精性脂肪肝模型小鼠血壓、血脂、和脂肪肝形成的影響。

1　材料與方法

1.1動物分組與飼養(yǎng)

3周齡SPF級雄性C57BL/6小鼠30只, 體質(zhì)量13±1.5 g, 購自北京維通利華實驗動物有限公司［SCXK（京）2012-0001］。每籠5只, 飼養(yǎng)在中國醫(yī)科大學(xué)實驗動物部屏障系統(tǒng)內(nèi), 室溫23±3 ℃, 相對濕度40%～70%, 明暗各12h［SYXK（遼）2013-0007］。

1.2飼料

SPF大、小鼠生長繁殖飼料，購自北京科澳協(xié)力飼料有限公司。高脂飼料成分為10%豬大油，2%膽固醇，2%蛋黃，10%蔗糖，0.5%食鹽，5%花生，70.5%大、小鼠生長繁殖飼料，購自北京科澳協(xié)力飼料有限公司。

1.3主要儀器

電子稱（JA10003）、離心機（TGL-16）、 鼠尾無創(chuàng)血壓測定儀（BP-2010 Series）、全自動分析儀（TBA-120FR）、Olympus生物顯微鏡、組織勻漿器（IKAT10B）、切片機（美康HM315）、小鼠灌胃器（ZS0172）、榨汁機（JYZ-D57）。

1.4主要試劑

總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）試劑盒購自中生北控生物科技股份有限公司。

1.5山楂芹菜水提物制備

市售芹菜、山楂各250 g，清洗，山楂去核，混合后加入300 mL蒸餾水，用組織勻漿器破碎后榨汁機榨汁500 mL，過濾掉殘渣得到250 mL汁液，用0.22 μm的濾膜過濾后在超凈臺內(nèi)分裝，冷藏備用。

1.6實驗方法

將30只動物按照隨機數(shù)字表法分為3組，對照組10只給予正常飼料，高脂組10只給予高脂飼料，灌胃組10只給予高脂飼料且每日早晨灌胃山楂芹菜汁（0.2 mL/10 g）［5］，所有動物飼養(yǎng)8周后進行血壓、血脂、肝臟病理學(xué)檢查。

1.6.1血壓檢測運用鼠尾無創(chuàng)血壓測定儀，采用周期性阻斷小鼠尾部血流的方法，進行小鼠無創(chuàng)血壓測量。

1.6.2血脂檢測小鼠禁食12 h，眼眶取血每只約0.3～0.6 mL于干燥1.5 mL離心管內(nèi)，室溫靜置30 min后離心（3 000 r/min, 10 min）［6］，分離血清。應(yīng)用全自動生化分析儀檢測小鼠血清中TG、TC、LDL-C水平。

1.6.3病理學(xué)檢查飼養(yǎng)8周后處死取部分肝臟組織，分別浸泡于質(zhì)量分數(shù)4%多聚甲醛溶液中固定,液體石蠟包埋組織，切片機切片貼在載玻片上，HE染色，光鏡下觀察，按文獻方法判斷［7］。

1.7統(tǒng)計方法

2　結(jié)果

2.1小鼠血壓

由表1可見高脂組血壓明顯高于對照組（P＜0.05）,灌胃組血壓高于對照組但低于高脂組（P＜0.05）。

2.2小鼠血脂

由表2可見高脂組小鼠血脂各項指標較對照組相比有顯著的升高（P＜0.05），灌胃組小鼠血清血脂水平高于對照組但低于高脂組（P＜0.05）。

表1　小鼠血壓測定結(jié)果　　　　mmHg

表2　小鼠血脂測定結(jié)果　　　　mmol/L

2.3肝臟組織病理學(xué)結(jié)果

大體解剖可見對照組小鼠肝色暗紅、被膜光滑、邊緣銳利、質(zhì)韌； 高脂組小鼠肝臟體積明顯增大, 包膜緊張, 肝外觀呈紅黃色, 邊緣變鈍, 切面略帶油膩感； 灌胃組小鼠肝臟體積稍增大, 包膜稍緊張,邊緣鈍圓。光鏡下可見對照組小鼠肝臟未見異常,肝小葉結(jié)構(gòu)清晰, 肝細胞索排列整齊, 肝竇正常, 肝細胞無明顯病變（圖1A、a）； 高脂組小鼠肝細胞胞質(zhì)中出現(xiàn)脂肪變性, 肝細胞索紊亂, 肝小葉內(nèi)有炎癥細胞浸潤, 小葉界限不清（圖1B、b）； 灌胃組小鼠沒有肝細胞脂肪變性，肝細胞微見腫脹（圖1C、c）。

3　討論

高血壓、高血脂等慢性病均屬于非傳染性流行病, 嚴重危害人類健康。然而這些疾病的發(fā)生多與環(huán)境和不良飲食習(xí)慣相關(guān)，在我國特別是經(jīng)濟發(fā)達地區(qū)以高脂飲食為主的飲食結(jié)構(gòu)已經(jīng)逐步取代了低脂高纖維飲食［8］, 高血壓、高血脂的發(fā)病率也在日益升高且逐漸出現(xiàn)低齡化趨勢。鑒于高血壓、高血脂是引發(fā)心腦血管病變的危險因素之一, 且高血脂是引發(fā)脂肪肝導(dǎo)致肝細胞纖維化乃至肝硬化的危險因素之一, 為了降低此類疾病的發(fā)生率, 世界各國高度重視對普通食品中添加功能性添加物的研發(fā)。

目前，臨床上已經(jīng)有很多治療高血壓和高血脂的藥物，從藥物對機體的影響上來看，多數(shù)降壓降脂藥都會有一定的副作用，如引起心悸、心率變緩等，對腎功能不全者也有一定的危害，不宜長期使用。且部分藥物在降壓的同時還會出現(xiàn)升高血脂的作用，部分降膽固醇藥物對肝臟又有一定的危害。世界衛(wèi)生組織指出醫(yī)藥在健康中只起8%的作用，而類似高血壓這樣與生活方式密切相關(guān)疾病，科學(xué)合理的膳食結(jié)構(gòu)會起到47%的防治作用，因此研發(fā)具有降壓降脂功效的具有藥食兩用的中藥保健食品已成為一個重要的研究方向。芹菜和山楂這兩種食材比較常見，且二者同時服用，山楂性溫可緩解芹菜的寒涼之性，同時山楂味酸入肝經(jīng)，可助肝調(diào)暢氣機，協(xié)調(diào)脾升胃降，維持體內(nèi)物質(zhì)代謝平衡。因此，本實驗以防治兼收為目的嘗試將芹菜和山楂兩種食材的降壓、降脂功能相結(jié)合，設(shè)立三個實驗組，分別飼以動物普通飼料、高脂飼料、高脂飼料合并芹菜山楂汁灌胃，8周后血壓、血脂測定結(jié)果表明灌胃芹菜山楂汁的小鼠血壓、血脂水平顯著低于單純飼喂高脂飼料的小鼠并高于飼喂普通飼料的小鼠，由此可見芹菜山楂汁有降血壓、降血脂的作用，這一結(jié)果與以往的報道相似［1,3,4］。病理切片HE染色結(jié)果顯示配合芹菜山楂汁灌胃的高脂飲食小鼠肝細胞脂肪變性減少，肝細胞微見腫脹，肝組織脂肪變性程度低于高脂飲食組動物，結(jié)果表明對于長期高脂飲食的動物芹菜山楂汁有延緩肝脂肪變性速度的功能。 在日常生活中此配方可以作為高血壓高血脂病人的保健食品適當飲用，但能否長期大量飲用還需要做進一步探索。

圖1　小鼠肝臟組織切片光鏡下形態(tài)

［1］ 吳存花, 郭世忠. 高血壓患者飲用芹菜汁降血壓療效觀察［J］. 健康必讀（中旬刊）, 2013（2）：563.

［2］ 王玲, 吳軍林, 吳清平, 等. 山楂降血脂作用和機理研究進展［J］. 食品科學(xué), 2015, 36（15）：245-248.

［3］ 梁華, 夏薇, 苑林宏, 等. 芹菜提取物對自發(fā)高血壓大鼠血壓及高脂模型大鼠血脂的影響［J］. 疾病控制雜志, 2005, 9 （2）：97-99.

［4］ 袁圓, 趙軍, 高惠靜. 山楂對腎性高血壓復(fù)合高脂血癥大鼠的影響［N］. 新疆醫(yī)科大學(xué)學(xué)報, 2013, 36（1）：52-57.

［5］ 趙明德. 常用小型實驗動物灌胃給藥技術(shù)方法介紹［J］. 瀘州醫(yī)學(xué)院學(xué)報, 2004, 27（3）：258-259.

［6］ 周衛(wèi)民, 朱科燕, 方明筍, 等. 不同周齡LDLR-/-小鼠血脂變化的分析［J］. 中國畜牧獸醫(yī)文摘, 2013, （5）：44-46.

［7］ 中華醫(yī)學(xué)會肝臟病學(xué)分會脂肪肝和酒精性肝病學(xué)組.非酒精性脂肪性肝病診斷標準［J］. 中華肝臟病雜志, 2003, 11（2）：71-71.

［8］ 綦振峰, 李官浩, 鄭昌吉, 等. 山楂、決明子及其配伍的降血脂作用［J］. 食品與機械雜志, 2013, 29（2）：96-99.

Q95-33

B

1674-5817（2016）02-0134-03

10.3969/j.issn.1674-5817.2016.02.011

2015-05-30

郎雪楠（1986-）, 女, 助理實驗師。E-mail： 376394330@qq.com

張梅英。E-mail： zhmeiying@163.com