三種麻醉方法對(duì)萊亨雞麻醉效果比較

曹春艷, 孫雪健, 胡正云, 肖　苒（中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院整形外科醫(yī)院, 北京 100144）

·經(jīng)驗(yàn)交流·

三種麻醉方法對(duì)萊亨雞麻醉效果比較

曹春艷, 孫雪健, 胡正云, 肖苒
（中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院整形外科醫(yī)院, 北京 100144）

目的比較3種不同麻醉方法在萊亨雞的麻醉效果。方法將30只實(shí)驗(yàn)用萊亨雞隨機(jī)分為A、B、C三組，A組10只（速眠新II組），B組10只（鹽酸氯胺酮組），C組10只（速眠新II與鹽酸氯胺酮復(fù)合組），三組均采用肌肉注射麻醉，在麻醉過程中觀察其臨床表現(xiàn)及麻醉效果，比較麻醉起效時(shí)間、麻醉維持、蘇醒時(shí)間和動(dòng)物的死亡率等。結(jié)果A組麻醉誘導(dǎo)時(shí)間和蘇醒時(shí)間長，死亡率高； B組麻醉誘導(dǎo)時(shí)間和蘇醒時(shí)間短，但麻醉效果不理想； C組麻醉誘導(dǎo)時(shí)間短，麻醉效果理想，死亡率低。結(jié)論速眠新II與鹽酸氯胺酮復(fù)合麻醉萊亨雞，是一種較為安全、可靠的麻醉方法。

萊亨雞； 麻醉； 速眠新II； 氯胺酮

近年來，雞在生物醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用越來越廣泛，如藥物評(píng)價(jià)、激素代謝研究、高血脂動(dòng)物模型制作、老年學(xué)研究等。而許多研究項(xiàng)目必須對(duì)雞實(shí)施有效麻醉才能正常開展，尤其是那些必須進(jìn)行外科手術(shù)才能完成研究的課題。因此，選擇安全、有效的麻醉方法尤為重要。然而，目前對(duì)雞的麻醉方法國內(nèi)鮮有報(bào)道，作者在雞冠模擬血管瘤治療實(shí)驗(yàn)中，根據(jù)以往的麻醉經(jīng)驗(yàn)，對(duì)實(shí)驗(yàn)用萊亨雞分別進(jìn)行了速眠新Ⅱ、氯胺酮及速眠新Ⅱ復(fù)合氯胺酮的麻醉效果比較，優(yōu)選出適于此實(shí)驗(yàn)的麻醉方法，現(xiàn)報(bào)道如下：

1　材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)用動(dòng)物

8～9周齡實(shí)驗(yàn)用萊亨雞，雌雄不限，來源于北京梅里亞維通實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司［SCXK（京）2014-0002］。動(dòng)物飼養(yǎng)、觀察及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)均在整形外科醫(yī)院研究中心動(dòng)物室完成［SYXK（京）2015-0009］。動(dòng)物飼養(yǎng)在普通環(huán)境，單籠飼養(yǎng)，室溫20～26 ℃，相對(duì)濕度40%～60%，每日保持光照12 h, 飼養(yǎng)間每日清潔, 定期消毒, 動(dòng)物自由進(jìn)食、飲水, 并保持飼養(yǎng)環(huán)境安靜，待動(dòng)物生長至5～6月齡、體質(zhì)量1.8～2.5 kg時(shí)用于實(shí)驗(yàn)。

1.2麻醉藥品

速眠新Ⅱ（鹽酸塞拉嗪注射液，批準(zhǔn)文號(hào)為獸藥字（2010）070031582，規(guī)格20 mg/mL）, 吉林省華牧有限公司。氯胺酮注射液（福建古田藥業(yè)有限公司），批號(hào)： 120821, 規(guī)格0.1 g/2 mL。

1.3實(shí)驗(yàn)方法

實(shí)驗(yàn)前, 通過預(yù)實(shí)驗(yàn)對(duì)實(shí)驗(yàn)用萊亨雞的麻醉劑量摸索，速眠新Ⅱ的麻醉劑量為0.4 mL/kg體質(zhì)量,鹽酸氯胺酮的麻醉劑量為1.2 mL/kg體質(zhì)量, 速眠新Ⅱ復(fù)合氯胺酮的麻醉劑量為0.35 mL/kg體質(zhì)量。速眠新Ⅱ與氯胺酮混合液為1∶1等體積配制。

選用健康無異常萊亨雞30只，隨機(jī)平均分成3組，各組月齡及體質(zhì)量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，A組（速眠新Ⅱ），B組（鹽酸氯胺酮），C組（速眠新Ⅱ復(fù)合氯胺酮）。術(shù)前12 h禁食、禁水并且麻醉前稱體質(zhì)量。A組（速眠新Ⅱ）： 按速眠新Ⅱ0.4 mL/kg體質(zhì)量肌肉注射麻醉，如20 min后未達(dá)到有效麻醉狀態(tài)時(shí)，追加劑量為首次劑量的半量； B組（鹽酸氯胺酮）： 按鹽酸氯胺酮1.2 mL/kg體質(zhì)量肌肉注射麻醉，待有效麻醉消失后，追加劑量為首次劑量的半量； C組（速眠新Ⅱ復(fù)合氯胺酮）： 先按0.25 mL/ kg體質(zhì)量的劑量肌肉注射麻醉, 待動(dòng)物反應(yīng)遲鈍時(shí)再次按0.1 mL/kg體質(zhì)量的劑量肌肉注射, 有效麻醉狀態(tài)消失后, 追加劑量為總劑量（0.35 mL/kg體質(zhì)量）的半量。

1.4觀察指標(biāo)

觀察實(shí)驗(yàn)用雞在麻醉過程中呼吸、心率及體溫等生命體征，記錄麻醉誘導(dǎo)時(shí)間、麻醉維持時(shí)間、麻醉恢復(fù)時(shí)間及麻醉維持期間測得動(dòng)物的體溫直腸肛溫）。

1.4.1麻醉誘導(dǎo)時(shí)間自肌肉注射麻醉藥物至出現(xiàn)麻醉狀態(tài)的時(shí)間。此時(shí)動(dòng)物表現(xiàn)出萎靡，閉眼，低頭，站立不穩(wěn)，雞翅下垂，蹲下然后慢慢臥倒，骨骼肌漸漸松弛，痛覺漸漸消失。

1.4.2麻醉維持時(shí)間動(dòng)物進(jìn)入麻醉狀態(tài)到動(dòng)物蘇醒的時(shí)間。表現(xiàn)為閉眼、角膜反射消失，呼吸均勻, 呼吸頻率為12～21次/min,心率120～140次/min,全身肌肉松弛，對(duì)手術(shù)切割、牽拉無痛反應(yīng)。

1.4.3麻醉蘇醒期指對(duì)手術(shù)切割、牽拉出現(xiàn)疼痛反應(yīng)開始至站立行走時(shí)間。在此期間可觀察到動(dòng)物呼吸加快，睜眼，角膜反射恢復(fù)直至掙扎站立。

1.5麻醉效果判斷

鎮(zhèn)痛效果評(píng)價(jià)：切開皮膚進(jìn)行手術(shù)時(shí)對(duì)手術(shù)切割、牽拉無痛感反應(yīng)為優(yōu)；切開皮膚進(jìn)行手術(shù)時(shí)對(duì)手術(shù)切割、牽拉有輕度痛感并需追加藥物時(shí)為良。肌肉松弛度評(píng)價(jià)：手術(shù)時(shí)骨骼肌完全處于松弛狀態(tài)者為優(yōu)； 手術(shù)時(shí)骨骼肌不能完全松弛，有一定張力為良。麻醉死亡判斷：因麻醉導(dǎo)致動(dòng)物術(shù)前、術(shù)中或術(shù)后死亡。

1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2　結(jié)果

2.1三種麻醉方法的麻醉時(shí)間

A組麻醉起效時(shí)間明顯長于B組和C組（P＜0.05）；A組與C組的麻醉時(shí)長大于B組（P＜0.05）； C組的蘇醒期明顯短于A組，長于B組（P＜0.05）； A組在麻醉維持期內(nèi)所測得的體溫略低于C、B兩組，但三組所測得的體溫?cái)?shù)據(jù)差異無顯著（P＞0.05）（表1）。

2.2麻醉效果

3組的麻醉效果表現(xiàn)不一，A組和B組麻醉效果不理想， A組肌松效果理想但鎮(zhèn)痛效果不理想，而B組表現(xiàn)為肌肉不夠松弛，鎮(zhèn)痛效果欠佳，A、B兩組常常需反復(fù)追加麻醉藥，因而存在動(dòng)物死亡的麻醉風(fēng)險(xiǎn)，尤其是A組，麻醉過程中，動(dòng)物死亡2只，其死亡率明顯高于其他2組，C組的麻醉效果較為理想（表2）。

表1　三種麻醉方法對(duì)萊亨雞麻醉時(shí)間比較

表2　三種麻醉方法對(duì)萊亨雞麻醉效果比較

3　討論

實(shí)驗(yàn)用雞屬于鳥綱，雞形目。其聽力靈敏，且具有神經(jīng)質(zhì)的特點(diǎn)，極易驚恐，突然地聲響和突然發(fā)出的光都會(huì)使其驚恐萬狀［1］。對(duì)此，在雞的實(shí)驗(yàn)外科手術(shù)過程中，對(duì)于麻醉的鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛要求較高，因而麻醉質(zhì)量的好壞尤為重要。而麻醉質(zhì)量的好壞與麻醉方法和麻醉劑的選擇密不可分，如果選擇的麻醉方法和麻醉劑不合適，就會(huì)出現(xiàn)麻醉過淺或麻醉過深的現(xiàn)象，麻醉過淺，動(dòng)物就會(huì)因疼痛而掙扎，很難配合手術(shù)，就會(huì)直接影響著動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的進(jìn)程及準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)；麻醉過深，就會(huì)加大動(dòng)物死亡率的風(fēng)險(xiǎn)，就會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)造成一定的損失，因此選擇合適的麻醉方法和麻醉劑是實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵因素之一。

目前，有關(guān)實(shí)驗(yàn)用雞的麻醉報(bào)道很少。以往我們常用的麻醉方法是靜脈注射麻醉，它誘導(dǎo)快，蘇醒也快，但其有一定的缺點(diǎn)：首先大多動(dòng)物往往很難配合實(shí)驗(yàn)者，易躁動(dòng)，常常給靜脈穿刺帶來很大的困難；其次因術(shù)者技術(shù)不熟練或在推藥過程中動(dòng)物稍微躁動(dòng)而刺破靜脈，需再次穿刺，有的甚至無法完成以至于影響實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行。而腹腔注射麻醉盡管操作簡單，但也存在著一定的缺點(diǎn)：如注射手法上對(duì)操作者有一定要求，是否能夠把握好注射部位也非常重要；誘導(dǎo)時(shí)間往往很長，麻醉深度不易控制，不適合需連續(xù)處理多只動(dòng)物的實(shí)驗(yàn)。因此，作者首選肌肉注射麻醉方法，同時(shí)根據(jù)以往實(shí)驗(yàn)動(dòng)物麻醉經(jīng)驗(yàn)，選擇了應(yīng)用較為廣泛的速眠新Ⅱ及氯胺酮兩種麻醉劑進(jìn)行單一肌肉注射麻醉。由于對(duì)實(shí)驗(yàn)用雞進(jìn)行單純麻醉的效果不理想，隨后進(jìn)行了速眠新Ⅱ復(fù)合氯胺酮麻醉方法的試驗(yàn)，取得了較好的麻醉效果。

速眠新Ⅱ是α2-受體激動(dòng)劑，通過激活α2-腎上腺素能受體來起麻醉作用, 鎮(zhèn)靜、肌松較好，鎮(zhèn)痛作用較差, 抑制呼吸和心臟傳導(dǎo)系統(tǒng)，易導(dǎo)致動(dòng)物死亡［2］。在單獨(dú)應(yīng)用速眠新Ⅱ0.4 mL/kg體質(zhì)量對(duì)雞進(jìn)行麻醉時(shí), 其誘導(dǎo)時(shí)間長（21.60±1.89 min），蘇醒時(shí)間也長（89.15±18.40 min）。雖然鎮(zhèn)靜、肌肉松馳效果較好，麻醉維持時(shí)間能夠滿足實(shí)驗(yàn)要求，但其鎮(zhèn)痛作用較差。由于鎮(zhèn)痛作用弱，麻醉深度較淺，不能很好配合手術(shù)，且有時(shí)易出現(xiàn)麻醉不全的狀況，有的動(dòng)物出現(xiàn)躁動(dòng)，導(dǎo)致反復(fù)追加麻藥，用藥量大，對(duì)呼吸有明顯抑制作用，易發(fā)生麻醉意外，導(dǎo)致動(dòng)物死亡。另外，通過預(yù)實(shí)驗(yàn)觀察，單獨(dú)應(yīng)用速眠新Ⅱ0.4 mL/kg以上的劑量時(shí)動(dòng)物死亡率更高，表明速眠新Ⅱ0.4 mL/kg以上的劑量已經(jīng)接近安全極限，與陳海南等［3］研究結(jié)果一致。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，0.4 mL/kg的麻醉劑量在雞冠模擬血管瘤治療實(shí)驗(yàn)中的麻醉效果不佳，對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果及實(shí)驗(yàn)進(jìn)程都有不同程度的影響。

鹽酸氯胺酮單獨(dú)應(yīng)用時(shí)誘導(dǎo)迅速、蘇醒期短、對(duì)呼吸影響輕微，對(duì)交感神經(jīng)和循環(huán)系統(tǒng)有興奮作用, 但有唾液及器官分泌物增多, 骨骼肌緊張等副作用, 且對(duì)心肌有直接的抑制作用, 大劑量、快速給藥可出現(xiàn)呼吸抑制和呼吸暫停，因此動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中單獨(dú)使用氯胺酮麻醉存在著諸多問題［4-5］。作者曾以鹽酸氯胺酮1 mL/kg、1.2 mL/kg、1.4 mL/kg的麻醉劑量進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，1 mL/kg的劑量未達(dá)到麻醉效果，采用 1.4 mL/kg的麻醉劑量進(jìn)行麻醉，雖然麻醉起效快，但麻醉維持時(shí)間和蘇醒時(shí)間上與1.2 mL/kg的麻醉劑量相差不大，并且出現(xiàn)呼吸抑制、唾液和氣管支氣管分泌物增多等麻醉危象。而采用1.2 mL/kg體質(zhì)量的劑量肌肉注射麻醉時(shí)，麻醉起效時(shí)間和蘇醒時(shí)間均優(yōu)于 A組，尤其是此劑量對(duì)動(dòng)物呼吸影響輕微，呼吸頻率都在正常范圍內(nèi)，但麻醉維持時(shí)間較短，麻醉深度較淺，觀察到麻醉中有的動(dòng)物不能耐受手術(shù)的刺激，肌肉張力增加，口內(nèi)有分泌物，術(shù)中躁動(dòng)，反復(fù)追加麻藥后，易造成藥量蓄積，唾液和氣管支氣管分泌物增多，同樣出現(xiàn)麻醉危象，因此不適合用于手術(shù)時(shí)間要求比較長的實(shí)驗(yàn)，但可作為簡單清創(chuàng)縫合、測量及短時(shí)手術(shù)的麻醉劑［6］。

在雞冠模擬血管瘤治療實(shí)驗(yàn)中，需要在雞冠上實(shí)施手術(shù)，此部位較為敏感，且需要連續(xù)處理多只動(dòng)物。對(duì)此作者在麻醉方案的設(shè)計(jì)中，首先考慮麻醉誘導(dǎo)快，鎮(zhèn)痛效果好，鎮(zhèn)靜、肌松作用較強(qiáng)，能夠保證實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行，同時(shí)又能提高實(shí)驗(yàn)動(dòng)物術(shù)后成活率的麻醉方法；其次最大限度地減少動(dòng)物的疼痛、痛苦和緊張恐懼感，盡量避免對(duì)動(dòng)物造成的各種傷害，保證動(dòng)物的安全，從而提高動(dòng)物福利。而麻醉質(zhì)量是動(dòng)物福利方面最基本的要求，麻醉過淺會(huì)導(dǎo)致動(dòng)物疼痛，加劇動(dòng)物應(yīng)激反應(yīng), 無法保證實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行, 麻醉過深則會(huì)造成動(dòng)物死亡，都不符合動(dòng)物福利要求［7,8］。為了達(dá)到對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的科學(xué)保護(hù)以及提高和改善動(dòng)物麻醉效果，經(jīng)過速眠新Ⅱ與氯胺酮復(fù)合麻醉方法的反復(fù)試驗(yàn), 從 0.25 mL/kg、0.35 mL/kg、0.45 mL/kg的劑量中摸索出適宜此實(shí)驗(yàn)的麻醉劑量為0.35 mL/kg,實(shí)踐證明此劑量用于雞的麻醉效果確實(shí)，副作用小，大大的改善了單純麻醉方法的不足。在預(yù)實(shí)驗(yàn)中，0.25 mL/kg的麻醉劑量未達(dá)到本實(shí)驗(yàn)的麻醉要求, 麻醉深度較淺, 無法保證手術(shù)的順利進(jìn)行。此外, 以0.45 mL/kg的劑量進(jìn)行麻醉時(shí), 出現(xiàn)動(dòng)物死亡現(xiàn)象, 表明此劑量接近安全極限而不可取。在本實(shí)驗(yàn)中, 速眠新Ⅱ與氯胺酮復(fù)合麻醉按0.35 mL/kg的劑量進(jìn)行肌注麻醉，起效時(shí)間短（4.94±0.81 min）,從而節(jié)省了實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備時(shí)間, 提高了麻醉工作效率； 麻醉維持時(shí)間適宜（42.21±0.78 min），比單純氯胺酮麻醉的維持時(shí)間長，能夠滿足此實(shí)驗(yàn)的手術(shù)時(shí)間要求，并且鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、肌松效果好于單一麻醉，同時(shí)無嘔吐、流涎等現(xiàn)象，呼吸及心率都在正常范圍內(nèi)，麻醉平穩(wěn)，能夠保證手術(shù)順利進(jìn)行。不僅如此，復(fù)合麻醉方法中的速眠新Ⅱ的劑量不足其單純麻醉藥物劑量的一半，這就大大降低了它的毒副作用，擴(kuò)大了安全范圍，因而有效降低了動(dòng)物死亡率。而氯胺酮的用藥量大約是單純氯胺酮麻醉方法的1/6，但其與速眠新Ⅱ復(fù)合的麻醉效果遠(yuǎn)比單純麻醉要好，不僅延長了麻醉維持時(shí)間，還加強(qiáng)了速眠新Ⅱ的中樞性鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜作用，減輕心血管和呼吸抑制作用，降低了麻醉意外發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)，從而彌補(bǔ)了單純麻醉方法的不足，起到互補(bǔ)作用。

在本實(shí)驗(yàn)中，三組雞體溫?cái)?shù)據(jù)無顯著差異，且麻醉前后體溫變化不大，可能與手術(shù)時(shí)間有關(guān)。另外，為防止實(shí)驗(yàn)中動(dòng)物流涎、嘔吐以及保持呼吸道通暢，實(shí)驗(yàn)前需12 h禁食、禁水。由于雞具有神經(jīng)質(zhì)的特點(diǎn)，極易驚恐，因此在肌肉注射麻醉藥后要保持安靜，以利于動(dòng)物盡快進(jìn)入麻醉狀態(tài)。同時(shí)，作者在麻醉過程中觀察到，首次麻醉劑量如果先按0.25 mL/kg體質(zhì)量的劑量肌肉注射麻醉，待動(dòng)物反應(yīng)遲鈍時(shí)，再按0.1 mL/kg體質(zhì)量的劑量肌肉注射, 麻醉效果好于直接按0.35 mL/kg麻醉，并且動(dòng)物很快進(jìn)入麻醉狀態(tài)，麻醉的起效時(shí)間大大縮短。

綜上所述，作者所采用的速眠新Ⅱ復(fù)合氯胺酮麻醉方法在雞冠模擬血管瘤治療實(shí)驗(yàn)中不僅能夠縮短麻醉起效時(shí)間，還能在延長麻醉維持時(shí)間的情況下不延長蘇醒時(shí)間，麻醉效果理想，麻醉過程平穩(wěn)，不失為一種操作方便，易掌握，安全可靠的麻醉方法。

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R332Q95-33

A

1674-5817（2016）02-0137-04

10.3969/j.issn.1674-5817.2016.02.012

2015-10-30

曹春艷（1965-）, 女, 主管技師, 研究方向： 醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)。E-mail： caochunyanaa@163.com

肖苒（1970-）, 女, 研究員, 研究方向： 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究。E-mail： rxiao163@163.com