喉鱗狀細(xì)胞癌中白細(xì)胞分化抗原74和基質(zhì)金屬蛋白酶-7的表達(dá)及意義

李俊娟 趙 珺 祁艷娟 王 芳 王青海 謝添慧 付海生 楊春花 熊向菁

(西寧市第一人民醫(yī)院耳鼻喉科，青海 西寧 810001)

喉鱗狀細(xì)胞癌(喉鱗癌)最重要的特征是從喉黏膜上皮的不典型增生進(jìn)展而來，病變形成后進(jìn)展快，侵襲能力強(qiáng)〔1〕。白細(xì)胞分化抗原(CD)74作為主要組織相容性復(fù)合物的相關(guān)分子伴侶，對(duì)腫瘤轉(zhuǎn)移和進(jìn)展可能有一定促進(jìn)作用〔2，3〕。細(xì)胞外基質(zhì)和基底膜是阻止轉(zhuǎn)移的重要屏障，而基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)家族在分泌量多時(shí)可以對(duì)其進(jìn)行有效降解，MMP-7是家族中的重要成員，其作用更持久〔4〕。本文關(guān)注喉鱗癌術(shù)后組織中CD74和MMP-7表達(dá)，分析其臨床意義。

1 資料與方法

1.1臨床資料 西寧市第一人民醫(yī)院行喉鱗癌手術(shù)患者的臨床資料及術(shù)后留取的蠟塊組織為觀察組，病例的納入均經(jīng)病理科醫(yī)師復(fù)診，并符合WHO關(guān)于喉鱗癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)，觀察組63例，其中男33例，女30例，年齡45～82〔平均(63.7±9.7)〕歲。其中高分化20例，中分化31例，低分化12例，術(shù)前均未進(jìn)行放、化療。同時(shí)選取聲帶息肉組織31例為對(duì)照組，其中男16例，女15例，年齡40～69〔平均(54.9±6.0)〕歲。兩組常規(guī)資料差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2CD74和MMP-7蛋白表達(dá)的檢測(cè) CD74和MMP-7均為濃縮液，先行預(yù)實(shí)驗(yàn)，選擇兩種抗體顯色較好的濃度進(jìn)行正式實(shí)驗(yàn)(CD74為1∶150，MMP-7為1∶200)。CD74和MMP-7檢測(cè)均基于術(shù)后石蠟包埋的組織，應(yīng)用免疫組化SP法、二氨基聯(lián)苯胺(DAB)染色，嚴(yán)格按實(shí)驗(yàn)步驟完成，努力減少誤差。

1.3CD74和MMP-7結(jié)果的判定 CD74和MMP-7的陽性表達(dá)部位均為細(xì)胞質(zhì)，以細(xì)胞質(zhì)中染成淺黃-棕黃-棕褐色為陽性細(xì)胞，判斷以著色強(qiáng)度和陽性細(xì)胞百分比的評(píng)分之和進(jìn)行評(píng)定。著色強(qiáng)度評(píng)分：0分，無顯色；1分，弱顯色；2分，中顯色；3分，強(qiáng)顯色。陽性細(xì)胞百分比評(píng)分：選擇3個(gè)400倍的高倍視野，計(jì)數(shù)陽性率，取其平均值；0分，<5%；1分，5%～10%；2分，11%～20%；3分，21%～49%；4分，≥50%。取兩項(xiàng)評(píng)分之和的值作為最終評(píng)分結(jié)果。以0～2分為陰性，以>2分為陽性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)、線性相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

2.1兩組CD74和MMP-7蛋白表達(dá) 兩組CD74和MMP-7表達(dá)陽性率差異顯著(P<0.001)。見表1。

2.2觀察組中不同臨床特征患者CD74和MMP-7的表達(dá)比較 觀察組中CD74表達(dá)與腫瘤最大徑、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和神經(jīng)侵犯密切相關(guān)。MMP-7表達(dá)與腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和神經(jīng)侵犯密切相關(guān)。見表2。

表1 兩組中CD74和MMP-7蛋白表達(dá)〔n(%)〕

表2 觀察組不同臨床特征患者CD74和MMP-7表達(dá)比較〔n(%)〕

2.3觀察組中CD74和MMP-7表達(dá)相關(guān)性 CD74和MMP-7表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.47，P=0.044 6)。

3 討 論

喉鱗癌病變發(fā)展過程中多種基因和蛋白表達(dá)異常。有研究顯示當(dāng)腫瘤增長(zhǎng)的速度超過其脈管系統(tǒng)的蔓延能力時(shí)，由缺氧誘導(dǎo)因子調(diào)控的蛋白表達(dá)增強(qiáng)活力，此時(shí)腫瘤間質(zhì)供血系統(tǒng)的再生和修復(fù)能力增強(qiáng)，同時(shí)引起適應(yīng)缺氧環(huán)境的腫瘤細(xì)胞表型更容易存活，腫瘤細(xì)胞為了存活而更易于獲得侵襲轉(zhuǎn)移的潛能〔6，7〕，MMPs家族與這種生長(zhǎng)能力有關(guān)。MMP-7發(fā)揮作用時(shí)能夠在細(xì)胞的表面對(duì)MMP-9等MMPs家族的成員進(jìn)行有效活化，同時(shí)又反作用于MMP-7，使MMP-7表達(dá)明顯增高，形成環(huán)式循環(huán)，進(jìn)而促進(jìn)腫瘤離開原發(fā)部位發(fā)生轉(zhuǎn)移〔8，9〕。CD74屬于跨膜糖蛋白，編碼基因位于5號(hào)染色體(5q32)，其具有非多態(tài)性，參與免疫系統(tǒng)中的抗原表達(dá)、呈遞和運(yùn)輸?shù)取?0，11〕。研究顯示CD74在機(jī)體免疫細(xì)胞中有表達(dá)，參與免疫調(diào)節(jié)〔12〕。而CD74在上皮細(xì)胞中的表達(dá)通常與相應(yīng)器官的炎性反應(yīng)相關(guān)〔13〕。CD74在上皮性惡性腫瘤中的表達(dá)預(yù)示著炎細(xì)胞浸潤(rùn)的增多，炎性因子的釋放增多，對(duì)腫瘤上皮細(xì)胞的增殖、凋亡有明顯的影響〔14〕。

本研究結(jié)果提示CD74和MMP-7高表達(dá)可以促進(jìn)腫瘤的發(fā)生過程，即兩種蛋白參與了腫瘤的形成過程。CD74和MMP-7高表達(dá)促進(jìn)腫瘤的作用，與癌基因的作用相似，其實(shí)質(zhì)是CD74和MMP-7均可以有效調(diào)節(jié)細(xì)胞間的物質(zhì)代謝進(jìn)程，使細(xì)胞間和細(xì)胞基質(zhì)間的信息傳遞出現(xiàn)異常，進(jìn)而引發(fā)腫瘤細(xì)胞的失控性增生，導(dǎo)致腫瘤〔15，16〕。本文結(jié)果提示CD74和MMP-7可能具有正向協(xié)同效應(yīng)，即CD74/MMP-7共同促進(jìn)喉鱗癌的進(jìn)展。CD74可以促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)、腫瘤的侵襲及轉(zhuǎn)移過程。MMP-7對(duì)腫瘤的作用主要是促進(jìn)腫瘤的轉(zhuǎn)移過程。MMP-7對(duì)腫瘤的作用可能更多，如對(duì)血管生成的促進(jìn)作用使腫瘤的體積增大，生長(zhǎng)加速。而CD74是以炎性介導(dǎo)為主的炎性因子伴腫瘤化的過程，二者對(duì)腫瘤生長(zhǎng)的調(diào)控機(jī)制可能不完全相同。CD74作為促黑激素釋放抑制因子(MIF)的受體分子可能通過配體-受體的結(jié)合與腫瘤的發(fā)生有密切關(guān)聯(lián)〔17〕。研究認(rèn)為CD74與受體結(jié)合后可以激活核因子，促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)和細(xì)胞的增殖，同時(shí)引起細(xì)胞凋亡的減少，腫瘤體積增大，同時(shí)可以有效地促進(jìn)轉(zhuǎn)移〔18〕。

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