子宮內(nèi)膜樣腺癌中具有IQ結(jié)構(gòu)域的人RasGTP激活蛋白相關(guān)蛋白1和E-cadherin的表達(dá)及臨床意義

紀(jì) 紅

(錦州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院婦產(chǎn)科，遼寧 錦州 121001)

子宮內(nèi)膜樣腺癌常見于中老年婦女，病變進(jìn)展時(shí)蛋白的表達(dá)明顯異常〔1〕。具有IQ結(jié)構(gòu)域的人Ras GTP激活蛋白相關(guān)蛋白(IQGAP)1是新發(fā)現(xiàn)的活化蛋白，因其含有類似于RasGAPs催化域的廣泛序列和位于N端的4個(gè)可與鈣調(diào)蛋白相互作用的IQ模體而被學(xué)者關(guān)注〔2〕。IQGAP1在腫瘤增殖和轉(zhuǎn)移中有一定促進(jìn)作用〔3〕。上皮型黏附蛋白(E-cadherin)是上皮細(xì)胞膜上的特異性蛋白，正常機(jī)體中高表達(dá)，對(duì)上皮細(xì)胞的黏附性和緊密連接有重要作用，當(dāng)其表達(dá)丟失后，上皮細(xì)胞間連接松散，細(xì)胞易于離開原發(fā)灶進(jìn)行播散和遠(yuǎn)處定植〔4〕。本文分析子宮內(nèi)膜樣腺癌患者術(shù)后組織中IQGAP1和E-cadherin的表達(dá)意義及相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1臨床資料 2014年1月至2016年4月錦州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院診斷為子宮內(nèi)膜樣腺癌，并進(jìn)行根治手術(shù)的患者63例為觀察組。年齡38～75歲，平均56.3歲。均符合WHO中的診斷標(biāo)準(zhǔn)，并經(jīng)病理醫(yī)師證實(shí)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①伴有嚴(yán)重其他內(nèi)臟器官疾??；②林奇綜合征；③近3個(gè)月有嚴(yán)重感染。子宮肌瘤術(shù)后留取的非腫瘤性子宮內(nèi)膜組織35例為對(duì)照組，年齡39～68歲，平均52.7歲。兩組一般資料無明顯差異。

1.2IQGAP1和E-cadherin的檢測(cè)方法 兩組術(shù)后留取的組織經(jīng)病理醫(yī)師常規(guī)取材(2～3 mm厚)，脫水，包埋，切取4 μm切片后行IQGAP1和E-cadherin蛋白檢測(cè)。IQGAP1和E-cadherin表達(dá)檢測(cè)應(yīng)用免疫組化SP法、二氨基聯(lián)苯胺(DAB)染色。做好質(zhì)量控制，減少人為誤差。

1.3IQGAP1和E-cadherin結(jié)果的判定 IQGAP1和E-cadherin免疫組化結(jié)果的判讀均由病理醫(yī)師進(jìn)行，應(yīng)用Olympus BX41顯微鏡觀察。IQGAP1的陽(yáng)性部位是細(xì)胞膜和(或)細(xì)胞質(zhì)，E-cadherin的陽(yáng)性部位是細(xì)胞膜，以出現(xiàn)黃色、棕褐色為陽(yáng)性細(xì)胞。共選擇5個(gè)染色密集且明顯的高倍視野(400倍)進(jìn)行觀察，計(jì)算陽(yáng)性細(xì)胞的百分率，取平均值，以<25%定為陰性，以≥25%定為陽(yáng)性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)、線性相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

2.1兩組IQGAP1和E-cadherin陽(yáng)性率的比較 兩組IQGAP1和E-cadherin陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001)。見表1。

表1 兩組IQGAP1和E-cadherin陽(yáng)性率的比較〔n(%)〕

2.2觀察組IQGAP1和E-cadherin陽(yáng)性率在不同臨床特征中的比較 觀察組中IQGAP1和E-cadherin表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，IQGAP1的表達(dá)與腫瘤的肌層浸潤(rùn)、細(xì)胞增殖指數(shù)相關(guān)。二者的陽(yáng)性率與年齡及分化程度無明顯相關(guān)性。見表2。

表2 觀察組中IQGAP1和E-cadherin陽(yáng)性率在不同臨床特征中的比較〔n(%)〕

2.3觀察組中IQGAP1和E-cadherin陽(yáng)性率相關(guān)性 IQGAP1和E-cadherin呈負(fù)相關(guān)(r=-0.41，P=0.041)。

3 討 論

IQGAP家族包含IQGAP1、IQGAP2和IQGAP3三個(gè)成員〔5〕。IQGAP1位于染色體15q26上，分子量約為189 kD，含鈣結(jié)合蛋白同源性結(jié)構(gòu)域、脯氨酸富集的蛋白-蛋白結(jié)構(gòu)域、RasGTP酶活化蛋白相關(guān)結(jié)構(gòu)域、C-末端 RasGAP相關(guān)結(jié)構(gòu)域和4個(gè)串聯(lián)排列的IQ基序列〔6〕。IQGAP1參與細(xì)胞的最基本生命活動(dòng)，主要是通過其自身?yè)碛械慕Y(jié)構(gòu)域及與之相結(jié)合的受體蛋白實(shí)現(xiàn)的〔7，8〕。IQGAP1可以對(duì)機(jī)體細(xì)胞增殖有效調(diào)節(jié)〔9〕。研究認(rèn)為IQGAP1是新型的血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白，參與活性氧依賴性的血管內(nèi)皮增殖和遷移〔10，11〕。E-cadherin是分布在上皮組織中的鈣依賴性單次跨膜糖蛋白。E-cadherin胞內(nèi)肽段與一組稱為連環(huán)蛋白的細(xì)胞骨架蛋白結(jié)合，參與細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、組織發(fā)生和胚胎發(fā)育等過程〔12〕，其功能有：①介導(dǎo)上皮細(xì)胞之間的黏附，維持組織結(jié)構(gòu)完整性。②維持細(xì)胞極性和參與細(xì)胞分化。③參與胚胎形成時(shí)的調(diào)節(jié)〔13〕。E-cadherin 被看作是上皮細(xì)胞連接性黏著劑，E-cadherin表達(dá)下調(diào)是上皮細(xì)胞離散的分子基礎(chǔ)，因此E-cadherin正常表達(dá)具有抑制腫瘤侵襲作用〔14，15〕。

本研究結(jié)果提示IQGAP1和E-cadherin二者異常表達(dá)是促進(jìn)腫瘤形成的因素，二者異常表達(dá)是促進(jìn)腫瘤淋巴道轉(zhuǎn)移的因素，IQGAP1高表達(dá)引起細(xì)胞外基質(zhì)形成有效的降解，細(xì)胞易于通過基底膜屏障而到原發(fā)灶以外的部位，腫瘤細(xì)胞定植，形成轉(zhuǎn)移性的子宮內(nèi)膜癌病灶。本文提示IQGAP1高表達(dá)是促進(jìn)腫瘤細(xì)胞向深部侵襲性生長(zhǎng)的重要細(xì)胞因子，此時(shí)腫瘤的侵襲性生長(zhǎng)能力強(qiáng)，細(xì)胞的體積小，易于向深部擴(kuò)散。本文提示IQGAP1高表達(dá)是促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖的重要蛋白。IQGAP1可以引起腫瘤細(xì)胞的異型增生，細(xì)胞分裂活躍，細(xì)胞數(shù)量增多，同時(shí)異型性明顯的細(xì)胞也明顯增多，細(xì)胞的分化程度低，細(xì)胞趨于原始，趨于幼稚。本文提示E-cadherin和IQGAP1二者之間具有負(fù)向調(diào)控的可能性，IQGAP1高表達(dá)時(shí)與E-cadherin介導(dǎo)的細(xì)胞間黏附性的丟失同時(shí)出現(xiàn)，使腫瘤細(xì)胞與原發(fā)灶的結(jié)合疏松，細(xì)胞易于離開原發(fā)灶，進(jìn)而促進(jìn)轉(zhuǎn)移的形成。這可能是IQGAP1對(duì)轉(zhuǎn)移調(diào)節(jié)的作用之一。有研究顯示在內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行遷移時(shí)，IQGAP1在內(nèi)皮細(xì)胞連接處作為一個(gè)接頭蛋白結(jié)合到絲狀肌動(dòng)蛋白和微管上起作用〔16，17〕。

也有研究顯示單體GTP酶Rac1的活性有助于抑制E-cadherin介導(dǎo)細(xì)胞與細(xì)胞間的黏附作用，其主要特征是使E-cadherin和β-catenin在細(xì)胞連接處的集聚減少，而E-cadherin的黏附作用依賴于cadherin-catenin-actin網(wǎng)絡(luò)的完整，而IQGAP1的表達(dá)使細(xì)胞黏附作用減弱并發(fā)生解離，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞發(fā)生遷移和侵襲〔18〕；但是其體機(jī)制有待研究證實(shí)。

1陳 嘉，梁麗梅，王 斌，等.子宮內(nèi)膜癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移因素及特征分析〔J〕.中國(guó)婦幼保健，2014；29(36)：6003-5.

2Jadeski L，Mataraza JM，Jeong HW，etal.IQGAP1 stimulates proliferation and enhances tumorigenesis of human breast epithelial cells〔J〕.J Biol Chem，2008；283(2)：1008-17.

3Dong P，Nabeshima K，Nishimura N，etal.Overexpression and diffuse expression pattern of IQGAP1 at invasion fronts are independent prognostic parameters in ovarian carcinomas〔J〕.Cancer Lett，2006；243(1)：120-7.

4袁偉杰，陳志康，伍紹斌，等.EphA2和E-cadherin在胃癌中的表達(dá)及其意義〔J〕.中國(guó)普通外科雜志，2008；17(4)：397-9.

5Hayashi H，Nabeshima K，Aoki M，etal.Overexpression of IQGAP1 in advanced colorectal cancer correlates with poor prognosis-critical role in tumor invasion〔J〕.Int J Cancer，2010；126(11)：2563-74.

6王夏煒，曹永倩，張 芮.支架蛋白IQGAP1與腫瘤研究現(xiàn)狀〔J〕.中華腫瘤防治雜志，2014；21(20)：1657-61.

7Hage B.Rac1 activation inhibits E-cadherin-mediated adherens junctions via binding to IQGAP1 in pancreatic carcinoma cells〔J〕.Cell Commu Signal，2009；7(1)：267-8.

8Wing Yee L，Mruk DD，C Yan C.Interactions among IQGAP1，Cdc42，and the cadherin/catenin protein complex regulate Sertoli-germ cell adherens junction dynamics in the testis〔J〕.J Cellular Physiol，2005；202(1)：49-66.

9Izumi G，Sakisaka T，Baba T，etal.Endocytosis of E-cadherin regulated by Rac and Cdc42 small G proteins through IQGAP1 and actin filaments〔J〕.J Cell Biol，2004；166(2)：237-48.

10Suzuki K，Takahashi K.Induction of E-cadherin endocytosis by loss of protein phosphatase 2A expression in human breast cancers〔J〕.Biochem Biophys Res Commu，2006；349(1)：255-60.

11Liu Z，Liu D，Bojdani E，etal.IQGAP1 plays an important role in the invasiveness of thyroid cancer〔J〕.Clin Cancer Res，2011；16(24)：6009-18.

12劉 暉，胡 祥，童曉文，等.E-cadherin在胃癌中的表達(dá)及意義〔J〕.同濟(jì)大學(xué)學(xué)報(bào)醫(yī)學(xué)版，2007；28(1)：37-9.

13馬 偉，吳繼鋒，張 紅，等.轉(zhuǎn)錄因子Snail及黏附分子E-cadherin在胃癌中的表達(dá)及意義〔J〕.臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志，2007；23(1)：48-52.

14Romero-Pérez L，López-García M，Díaz-Martín J，等.ZEB1過表達(dá)及E-cadherin、mR-NA-200s表達(dá)下調(diào)是未分化子宮內(nèi)膜癌的特征性表現(xiàn)〔J〕.臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志，2014；35(4)：370-1.

15陳 芳，劉文臻，劉云香.子宮內(nèi)膜樣腺癌組織Twist和HIF-1α及E-cadherin表達(dá)的臨床意義〔J〕.中華腫瘤防治雜志，2015；22(11)：858-62.

16劉子冬，方 芳，王 芳，等.卵巢漿液性腫瘤中IQGAP1與E-cadherin表達(dá)的檢測(cè)〔J〕.細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志，2014；30(5)：530-2.

17Schrick C，F(xiàn)ischer A，Srivastava DP，etal.N-cadherin regulates cytoskeletally associated IQGAP1/ERK signaling and memory formation〔J〕.Neuron，2007；55(5)：786-98.

18Noritake J，Watanabe T，Sato K，etal.IQGAP1：a key regulator of adhesion and migration〔J〕.J Cell Sci，2005；118(10)：2085-92.