缺血性卒中患者血清和腦脊液CysC及PAI-1水平變化及其臨床意義

孫秀海,代學(xué)良,劉洪義

卒中是一種急性腦血管疾病[1，2]。卒中分為缺血性和出血性卒中，缺血性卒中的發(fā)病率高于出血性卒中，占腦卒中總數(shù)的60%～70%。缺血性腦卒中是一類由腦部頸動脈和椎動脈狹小或閉塞，引起腦組織供血不足，最終導(dǎo)致腦組織壞死的疾病的總稱[3，4]。隨著社會節(jié)奏日益加快及老齡化加劇，缺血性腦卒中的發(fā)病率日益增加，其高致死致殘率嚴重危害人類生命健康。研究發(fā)現(xiàn)，炎癥是缺血性腦卒中發(fā)病的重要誘因[5，6]。胱抑素C(cystatin C,CysC)是半胱氨酸蛋白酶抑制劑超家族成員之一，能激活中性粒細胞，與炎癥反應(yīng)關(guān)系密切[7]；纖溶酶原激活物抑制劑-1（plasminogen activator inhibitor 1,PAI-1）是內(nèi)源性纖溶酶原激活物的主要生理抑制劑，具有抑制纖維蛋白降解、促進纖維蛋白沉積于血管壁和刺激平滑肌細胞增生等作用，是最重要的纖溶和凝血系統(tǒng)平衡調(diào)節(jié)者[8]。研究發(fā)現(xiàn)，人體內(nèi)CysC及PAI-1水平與多種心血管疾病具有相關(guān)性，如冠心病、動脈粥樣硬化、原發(fā)性高血壓、深靜脈血栓形成、肺血栓栓塞、腦血栓形成等[8-10]。因此，我們推測缺血性卒中患者體內(nèi)的CysC及PAI-1水平與卒中的發(fā)生發(fā)展具有一定相關(guān)性。本研究通過檢測缺血性卒中患者血漿及腦脊液中CysC及PAI-1水平，探究CysC及PAI-1水平與缺血性卒中的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機選取2015年8月至2016年8月住院的120例缺血性腦卒中患者，均符合中華醫(yī)學(xué)會神經(jīng)病學(xué)分會腦血管病學(xué)組急性缺血性腦卒中診治指南撰寫組制定的《中國急性缺血性腦卒中診治指南2010》相關(guān)診斷標準。納入標準：①局灶性神經(jīng)功能缺損，少數(shù)為全面神經(jīng)功能缺損；②癥狀和體征持續(xù)24 h以上；③首次發(fā)病且分別處于急性期或恢復(fù)期[11]。排除標準：①蛛網(wǎng)膜下腔出血、腦出血、短暫性腦缺血發(fā)作、腦動脈炎、有認知功能障礙或語言障礙；②合并嚴重肝腎疾病、造血系統(tǒng)及代謝系統(tǒng)疾病者[11]。120例缺血性卒中患者中，處于急性期60例為急性期組，男38例,女22例；年齡35～68歲，平均（49.3±16.7)歲；處于恢復(fù)期60例為恢復(fù)期組，男35例,女25例；年齡33～67歲，平均(47.4±17.5)歲。此外，30名健康人作為對照組，男17例，女13例；年齡35～66歲，平均（46.6±15.9）歲。3組患者性別、年齡等一般資料差異無統(tǒng)計學(xué)意義。

1.2 檢測方法

分別于早晨8點左右抽取3組受試者血漿1 mL，在腰椎部位穿刺抽取腦脊液1 mL。采用酶聯(lián)免疫分析法（ELISA）測定3組受試者血漿及腦脊液中CysC及PAI-1水平（試劑盒購于R&D生物公司)，實驗操作均按購買試劑盒的說明書操作。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 3組受試者血漿中CysC及PAI-1水平比較

急性期組和恢復(fù)期組患者血漿中CysC及PAI-1水平較對照組顯著升高（P＜0.05），且急性期組顯著高于恢復(fù)期組（P＜0.05），見表1。

2.2 3組受試者腦脊液中CysC及PAI-1水平比較

急性期組和恢復(fù)期組患者腦脊液中CysC及PAI-1水平較對照組顯著升高（P＜0.05），且急性期組顯著高于恢復(fù)期組（P＜0.05），見表2。

3 討論

缺血性卒中的發(fā)病原因包括過度勞累、飲食不規(guī)律及血淤等[12]。該病嚴重影響人們的日常學(xué)習(xí)、工作及生活質(zhì)量，若不及時治療，會導(dǎo)致卒中并發(fā)癥的發(fā)生，最終威脅患者的生命安全[12]。

近些年研究表明，缺血性卒中的發(fā)病機制與多種因素相關(guān)，其中機體免疫功能紊亂是卒中發(fā)病的一個非常重要的因素[13]。炎癥是機體免疫功能紊亂的直接結(jié)果，當(dāng)機體處于慢性炎癥過程中，單核細胞、T淋巴細胞等會浸入血管內(nèi)膜，其中單核細胞在血管內(nèi)膜中轉(zhuǎn)化為巨噬細胞，使血管處于高炎癥水平狀態(tài)，而長時間炎癥可使血管內(nèi)大量炎性細胞如巨噬細胞、粒細胞的局部浸潤和組織壞死，這些損傷的組織會繼續(xù)釋放大量炎性因子進一步激活血管中單核細胞及淋巴細胞，激活的淋巴細胞侵入血管內(nèi)膜，啟動炎癥連鎖級聯(lián)反應(yīng)，最終引發(fā)廣泛的血管內(nèi)炎癥，引起血管堵塞，引發(fā)患者腦部缺血[14，15]。腦部缺血后，受損部位會發(fā)生白細胞浸潤及分泌各種炎性因子，如IL-1、IL-6、TNF-α等，這些炎性因子共同參與腦損傷部位免疫反應(yīng)、應(yīng)激反應(yīng)、炎癥反應(yīng)及神經(jīng)內(nèi)分泌調(diào)控，最終引發(fā)神經(jīng)內(nèi)分泌免疫網(wǎng)絡(luò)功能紊亂，引發(fā)及加重卒中病情。因此，炎癥在缺血性卒中發(fā)生與發(fā)展過程中扮演非常重要的角色[16]。

表1 3組受試者血漿中CysC及PAI-1水平比較（pg/mL，±s）

表1 3組受試者血漿中CysC及PAI-1水平比較（pg/mL，±s）

注：與對照組比較，①P＜0.05；與恢復(fù)期組比較，②P＜0.05

組別對照組急性期組恢復(fù)期組例數(shù)30 60 60 CysC 53.46±13.62 98.41±16.63①②79.59±17.13①PAI-1 88.16±16.49 140.57±24.82①②113.22±20.58①

表2 3組受試者腦脊液中CysC及PAI-1水平比較（pg/mL，±s）

表2 3組受試者腦脊液中CysC及PAI-1水平比較（pg/mL，±s）

注：與對照組比較，①P＜0.05；與恢復(fù)期組比較，②P＜0.05

組別對照組急性期組恢復(fù)期組例數(shù)30 60 60 CysC 121.46±24.11 208.19±36.27①②154.61±31.51①PAI-1 213.69±37.94 312.83±50.15①②266.72±45.33①

Cys C是一種廣泛分布于各種體液中，在腦脊液和精漿中含量最高的小分子蛋白，血清CysC主要來源于有核血細胞[17]。CysC的一個重要生理功能是抑制內(nèi)源性半胱氨酸蛋白酶如胰蛋白酶、木瓜蛋白酶及組織蛋白酶的活性，是一種半胱氨酸蛋白酶抑制劑，起到調(diào)控抗原呈遞、細胞外基質(zhì)分解等功能[17]。有研究表明，血管炎癥對CysC水平具有較大影響，炎癥介質(zhì)的刺激促進血管平滑肌細胞分泌組織蛋白酶S及K等，使這類具有促進彈性組織解離特性的半胱氨酸蛋白酶在動脈彈力蛋白損傷處過度表達[17]。此外，近些年研究發(fā)現(xiàn)，血清CysC與眾多心腦血管疾病具有相關(guān)性，如冠心病、心肌梗死、進展性腦梗死等[17，18]?；谇叭说难芯浚覀兺茰yCysC水平可能與缺血性腦卒中存在一定關(guān)系。本研究發(fā)現(xiàn)缺血性卒中患者血漿和腦脊液中CysC水平顯著高于健康受試者，且急性期患者顯著高于恢復(fù)期患者。

PAI-1廣泛分布于機體的血管內(nèi)皮細胞、平滑肌細胞、肝細胞、脂肪細胞、巨噬細胞、中性粒細胞、腎小球系膜細胞、血小板等細胞上[19]。研究發(fā)現(xiàn)，PAI-1與血管炎癥密切相關(guān)，PAI-1可調(diào)節(jié)巨噬細胞、纖維母細胞的黏附和遷移，使其侵入損傷的血管內(nèi)膜,還能與炎癥及細胞因子如TNF-α、TGF-β、血小板衍生生長因子、白細胞介素-1、白細胞介素-6等相互作用,使炎性因子滲出增加[19，20]。近些年研究發(fā)現(xiàn)，血漿PAI-1水平升高與許多血栓性疾病密切相關(guān)，如動脈粥樣硬化、冠心病、心肌梗死、腦梗死、深靜脈血栓等,目前認為PAI-1是血栓性疾病相關(guān)的標記物之一[19,21]。而PAI-1是否與缺血性卒中有關(guān)，能否作為缺血性卒中的一個標記物尚不得知。本研究發(fā)現(xiàn)缺血性卒中患者血漿和腦脊液中PAI-1水平顯著高于健康受試者，且急性期患者顯著高于恢復(fù)期患者。

綜上所述，本研究發(fā)現(xiàn)缺血性腦卒中患者血漿及腦脊液中CysC及PAI-1水平顯著升高，通過檢測血漿和腦脊液中CysC及PAI-1水平有助于臨床上對缺血性卒中患者的病情診斷及預(yù)后預(yù)測。

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