先天性耳聾基因篩查與診斷的臨床應用進展探討

劉繼紅 王霞

先天性耳聾是常見的臨床出生缺陷，因技術條件的影響，不能描述性診斷耳聾，也不能研究深層病因[1]。隨著近年來基因診斷技術的應用和發(fā)展，發(fā)現(xiàn)不少先天性耳聾致病基因，臨床上開始應用耳聾基因診斷技術，可有效診斷和預防遺傳性耳聾。隨著不斷研究與應用分子遺傳學技術，對于耳聾的診斷基因診斷技術的作用顯著，具有指導康復、防聾的效果。目前國內(nèi)部分區(qū)域已經(jīng)實施新生兒耳聾基因篩查的相關工作，但還是處于發(fā)展起步的階段。以耳聾基因篩查檢測新生兒，能夠提前預警篩查陽性患兒，利于后期的預防和干預。

1 耳聾基因概述

遺傳性耳聾包括綜合征性耳聾、非綜合征性耳聾兩類[2]。遺傳性耳聾中大約有70%為非綜合征性耳聾，是主要的先天性耳聾表現(xiàn)方式。依據(jù)不同的遺傳方式，遺傳性耳聾包括顯性遺傳、X連鎖遺傳、隱性遺傳、母系遺傳等模式。非綜合征性耳聾中常染色體隱性遺傳占據(jù)80%，常染色體顯性遺傳占據(jù)15%，X連鎖遺傳或者線粒體母系遺傳占據(jù)5%。非綜合征性耳聾實際上是在人類基因組結構基礎上依據(jù)耳聾基因遺傳方式、定位和報告順序進行命名[3]。經(jīng)附加DFNA定位顯性遺傳的基因，以附加DFN來對隱性遺傳經(jīng)X連鎖遺傳和DFNB進行命名。

2 基因診斷方法

目前變性高效液相色譜（DHPLC）分析、基因測序、限制性酶切、高分辨率熔解（HRM）曲線分析、基因檢測芯片等是主要的耳聾基因診斷措施[4]?，F(xiàn)今應用范圍最廣的是基因測序，屬于基因突變檢測診斷的金標準，具有結果準確直觀、平臺標準化的優(yōu)勢，可有序分析任意基因片段，不但適合檢測已知耳聾基因，也適合檢測新出現(xiàn)的耳聾基因，但是需要測序公司進行測序工作，存在較長檢測時間[5]。變性高效液相色譜（DHPLC）分析與高分辨率熔解（HRM）曲線分析雖然存在不同的檢測原理，但是具備特異度高、靈敏度高以及檢測快速、成本低等特點，適合檢測已知耳聾基因的大樣本。限制性酶切實際上是依據(jù)限制性內(nèi)切酶來切割DNA中特定序列，構建不等大小的核酸片段，之后通過凝膠電泳方式比對核酸片段分子量，對是否存在已知類型進行判斷，適合在大樣本定點突變檢測中應用，成本雖然較低，但耗費時間比較長?；蛐酒瑱z測是在人類基因組測序基礎上實現(xiàn)的[6]，依據(jù)已知基因位點特異性引物來擴增以及熒光標記相關基因位點的基因片段和帶有特異性核苷酸序列核酸探針進行雜交處理，依據(jù)熒光結果進行判讀。相比較傳統(tǒng)檢測方法，基因芯片檢測方式擁有速度快、高準確性、高通量的特點，但因存在較高價格，只能同時檢測GJB2基因、SLC26A4基因、線粒體12S rRNA基因、GJB3基因等9個位點。耳聾基因存在多種類型，單一檢測方法不能檢測所有耳聾基因，所以，需要設計有效、合理、快速且經(jīng)濟的診斷方式[7]。

3 基因診斷的應用

耳聾基因診斷技術能夠提供給先天性遺傳性耳聾患者準確的基因水平診斷依據(jù)，有利于評估后代遺傳性耳聾患病風險或者進行婚育指導。基因診斷也能夠檢測懷孕早期胎兒基因發(fā)生突變的情況，有利于降低發(fā)生遺傳性耳聾的概率?，F(xiàn)今在國內(nèi)外開已經(jīng)開展對于聽力殘疾人群的相關基因診斷措施，但一般都是在耳聾患者中，在篩查正常人群耳聾基因方面還處于初步發(fā)展階段[8]。

4 結論

聽力殘疾是目前各類殘疾的首位疾病，如發(fā)生聽力障礙不僅會嚴重威脅殘疾人健康，也會對其日后生存質量帶來極大影響，是對出生人口素質影響的關鍵因素，同時也是遺傳咨詢和孕前檢查的常見疾病。人聽覺系統(tǒng)中聽覺傳導通道、感覺通絡、傳音通路的中樞系統(tǒng)和聽覺神經(jīng)出現(xiàn)病變，十分容易誘發(fā)聽力減退現(xiàn)象，統(tǒng)稱為耳聾，聽力障礙是該疾病的主要表現(xiàn)。遺傳性是由于改變了遺傳素質引發(fā)阿的耳聾，異常遺傳物質會嚴重影響后代，引發(fā)其耳聾，是常見的一種神經(jīng)系統(tǒng)缺陷疾病，如與外耳畸形合并發(fā)生，叫做綜合征型耳聾。如果患者沒有發(fā)生其他系統(tǒng)疾病和外耳畸形，被叫做非綜合征型耳聾。遺傳性耳聾的存在很多種基因，目前已鑒定或者克隆的常染色體隱性遺傳耳聾基因為40個，常染色體顯性遺傳耳聾基因為27個，線粒體耳聾基因為7個，X連鎖耳聾基因為3個。先天性耳聾是因孕前遺傳因素引發(fā)的，也可能是因為妊娠不良因素引發(fā)的，如孕婦感染梅毒、風寒等引發(fā)的，或者孕期耳毒性藥物的不合理使用；未來耳聾治療過程中干細胞治療和基因治療屬于主要方向，但還處于發(fā)展階段，不能正式應用。耳聾基因篩查能夠早期診斷與干預遺傳性耳聾，有利于后期的預防。目前國內(nèi)擁有眾多的耳聾患者，由于耳聾群體交流存在一定特殊性，最為常見的就是同證婚配。因同證婚配提升同基因型耳聾婚配率，若不開展人為的干預，會將遺傳性耳聾新生兒發(fā)生例數(shù)增加[9-12]。