二烯丙基三硫醚固體制劑的制備及評(píng)價(jià)

張芳 趙忠熙 楊衛(wèi)麗

摘 要：本文通過不同的工藝手段將液體藥物二烯丙基三硫醚（diallyltrisulfide ，DATS）制備成固體制劑，并進(jìn)一步通過流動(dòng)性、穩(wěn)定性和體外溶出實(shí)驗(yàn)對(duì)制劑進(jìn)行評(píng)價(jià)。筆者選擇liquid-solid固體制劑固體制劑制備方法制備載藥顆粒，該固體制劑均有較高的載藥能力和穩(wěn)定性，載藥量為14.59%±0.11%，在30℃，60%RH的恒溫恒濕環(huán)境內(nèi)存放，制劑中二烯丙基三硫醚含量下降明顯，而在5℃冷藏環(huán)境下，藥物含量變化較小，表現(xiàn)出較高的穩(wěn)定性。通過該方法成功將液體藥物DATS制備成不同的固體制劑，為該化合物的產(chǎn)品開發(fā)提供更多可能性，同時(shí)也為后期更穩(wěn)定和性質(zhì)更優(yōu)良處方的發(fā)現(xiàn)提供數(shù)據(jù)基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞：二烯丙基三硫 顆粒劑 重復(fù)性 穩(wěn)定性 溶出度

中圖分類號(hào)：O623.82 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1672-3791（2018）07（a）-0080-03

大蒜是一種藥食同源性植物，在我國有悠久的使用歷史。大蒜為中藥名，出自《本草經(jīng)集注》。2015版《中華人民共和國藥典》中也收載有此中藥的藥典標(biāo)準(zhǔn)。大蒜中主要有效成分為有機(jī)硫類，這類化合物在食用和藥用方面均受到廣泛關(guān)注。二烯丙基三硫（diallyl trisulfide，DATS）是一種存在于大蒜、洋蔥等物質(zhì)中的揮發(fā)油類有機(jī)硫化合物之一[1]。該化合物在多種疾病治療領(lǐng)域均有一定的療效，比如抗腫瘤[2]、降糖[3]、抗炎[4]和抗氧化[5]等。該化合物本身所具有的一些理化性質(zhì)限制了其在臨床中的廣泛應(yīng)用，如在長期存放易揮發(fā)性造成了藥物主成分的揮散，從而引起制劑質(zhì)量的明顯變化。另外，高濃度時(shí)揮發(fā)油的強(qiáng)烈刺激性，可能導(dǎo)致惡心嘔吐等不良反應(yīng)，使得其臨床應(yīng)用的患者依從性降低[6]。本文所用模型藥物DATS為淺黃色液體，在弱酸和中性環(huán)境較穩(wěn)定，而在熱或堿性條件下水解迅速，也有文獻(xiàn)提示該化合物在有機(jī)溶劑和可溶性淀粉中性質(zhì)較為穩(wěn)定[7]。另外，揮發(fā)油難溶于水性介質(zhì)或輔料，制備成液體制劑需要較多助溶劑，且液體制劑的儲(chǔ)存便利性和長期臨床應(yīng)用的依從性都不及固體制劑。將液體揮發(fā)油類藥物制備成固體粉末具有以下優(yōu)勢(shì)：（1）減少揮發(fā)性成份的揮散，延長保質(zhì)期并降低刺激性；（2）減少揮發(fā)性物質(zhì)和外界環(huán)境的接觸防止變質(zhì)；（3）制備成粉末狀顆粒更適合進(jìn)一步開發(fā)成其他常用制劑形式，如片劑、膠囊等。

Liquid-solid系統(tǒng)是近年來發(fā)展的一種制劑形式，更適于液體藥物，難溶性藥物制劑的開發(fā)[8]。該系統(tǒng)制備簡(jiǎn)單，而且重現(xiàn)性高[9]。常用到多孔性吸附材料進(jìn)行液體吸附，比如，常用輔料多孔二氧化硅syloid FP244最高具有自身質(zhì)量9倍的液體吸附能力[10]。本文以DATS為模型藥物，期望這種制備簡(jiǎn)單，重現(xiàn)性高的Liquid-solid固體制劑制備方法能夠在揮發(fā)性液體藥物的制劑開發(fā)中廣泛應(yīng)用。并篩選多種輔料，將DATS制備成顆粒，以載藥量，包封率和長 期存放穩(wěn)定性為制劑制藥評(píng)價(jià)指標(biāo)，并通過體外溶出實(shí)驗(yàn)初步評(píng)價(jià)制劑的可開發(fā)性。

1 主要儀器和材料

DATS（江蘇正大清江制藥有限公司）；微晶纖維素（MCCPH101，日本旭化成制藥珠式會(huì)社）；乳糖（200目，F(xiàn)oremost Farms USA）；二氧化硅載體syloid FP244（美國Grace Ltd.產(chǎn)品）；DH系列干法造粒機(jī)（秦皇島，中國）；恒溫干燥箱（上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司）；ZRS-8G溶出儀（天津市天大天發(fā)科技有限公司）；ZRS-8GD溶出儀（天津市天大天發(fā)科技有限公司）；電子天平（METTLER TOLEDO MS204S）；磁力攪拌（德國Ika技術(shù)有限公司）。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 載體輔料的優(yōu)化

分別選擇不同的輔料和DATS混合研磨制備成載藥顆粒，直至顆粒表面泛油明顯。最大吸附量用液體載藥因子（Liquid load factor，Lf）表示。計(jì)算公式如下：Lf=W/Q， 液體量（W），固體載體用量（Q）[11]。綜合以上考查指標(biāo)，處方微晶纖維素，乳糖，二氧化硅載體syloid FP244三者按5∶5∶1比例混合制備的固體顆粒，載藥性能，流動(dòng)性均較好，可以用于后續(xù)處方的篩選。

2.2 干法制粒制備載藥顆粒

根據(jù)最大吸附量，稱取處方量混合載體。將混合載體少量多次添加到一定量液體藥物，并伴隨連續(xù)攪拌，通過研磨得濕顆粒。濕顆粒用少量syloid FP244包覆濕顆粒，以吸收多余的液體藥物。最終混合物通過干法造粒機(jī)制備成干燥顆粒，過20目篩整粒，得最終制劑。制備三批不同處方，編號(hào)為LS1，LS2和LS3。以上三個(gè)處方分別選擇Tween-80，TPGS和plurnic F408作為增溶劑，進(jìn)一步通過流動(dòng)性及吸附性能指標(biāo)（休止角和卡爾指數(shù)）評(píng)價(jià)所選擇輔料。

2.3 溶出度考查

通過溶出度對(duì)以上三個(gè)處方進(jìn)行初步篩選。溶出方法如下：將含藥固體制劑充填于0#腸溶膠囊，取樣時(shí)間點(diǎn)為5min，10min，15min，30min，45min，60min，120min，180min，預(yù)設(shè)溫度為（37±0.5）℃。到預(yù)設(shè)時(shí)間點(diǎn)，取出5mL溶出介質(zhì)，0.45μm水系濾膜濾過后HPLC進(jìn)行分析，同時(shí)在溶出杯中補(bǔ)充等體積37℃預(yù)熱空白溶出介質(zhì)。較濃溶液點(diǎn)用空白介質(zhì)稀釋合適倍數(shù)后測(cè)定，每次試驗(yàn)平行三次。

2.4 處方重復(fù)性、穩(wěn)定性及溶出度測(cè)定

該方法制備制劑快速簡(jiǎn)便，能夠較好地保持藥物不揮散。因此，按照制備處方，每批處方重復(fù)三次，重復(fù)處方編號(hào)為LS1，LS2和LS3。置于30℃，RH60%恒溫恒濕箱內(nèi)考查藥物存放長期穩(wěn)定性。5℃實(shí)驗(yàn)冰箱內(nèi)進(jìn)行冷藏環(huán)境下藥物穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)考查。

3 結(jié)果

3.1 顆粒劑流動(dòng)性評(píng)價(jià)

休止角測(cè)定法：注入法測(cè)定顆粒劑休止角，來評(píng)價(jià)顆 粒流動(dòng)性。休止角越小，流動(dòng)性越好，一般認(rèn)為θ≤30° 時(shí)流動(dòng)性好，θ≤40°時(shí)可以滿足生產(chǎn)過程中的流動(dòng)性需 求。卡爾指數(shù)測(cè)定法：卡爾系數(shù)=（振實(shí)密度-松密度）/振實(shí)密度。卡爾指數(shù)反應(yīng)了物料的流動(dòng)性，5%～15%流動(dòng)性極好，12%～16%流動(dòng)性好，18%～21%流動(dòng)性一般。 23%～35%流動(dòng)性差，>40%流動(dòng)性較差。顆粒劑制備后的 流動(dòng)性評(píng)價(jià)結(jié)果顯示，LS1處方流動(dòng)性較其他處方更優(yōu)。

3.2 溶出度考查

以LS1、LS2、LS3三個(gè)處方進(jìn)行溶出度考查，腸溶制劑以其3h的藥物累計(jì)溶出度作為評(píng)價(jià)指標(biāo)。3h的藥物累計(jì)溶 出度分別為84.47%，60.53%和70.23%。LS1處方在3h內(nèi)的 累計(jì)溶出度達(dá)到80%以上，較其他兩個(gè)處方明顯更高。同 樣比例的增溶劑，Tween-80顯示出更好的增溶效果。以上 結(jié)果提示，LS1處方具有可開發(fā)的可能性。

3.3 處方重復(fù)性

為進(jìn)一步驗(yàn)證處方的可重現(xiàn)性，按LS1處方進(jìn)行三批同樣實(shí)驗(yàn)，處方編號(hào)為LS7，LS8和LS9，測(cè)定其載藥量分別為14.59%±0.11%，14.60%±0.73%和14.33%±0.49%，RSD分別為0.75，5.00和3.42。結(jié)果可見，制劑具有較高重復(fù)性（RSD≤5%）。

3.4 重復(fù)處方加速穩(wěn)定性和長期穩(wěn)定性

考查結(jié)果如下表。從表中可見，在30℃下儲(chǔ)存，藥物含量含量下降顯著，而在5℃環(huán)境下，制劑含量變化幅度較小，表現(xiàn)出較高的穩(wěn)定性。結(jié)果和原料藥穩(wěn)定性評(píng)價(jià)的結(jié)果一致，提示該藥物原料藥和相應(yīng)制劑應(yīng)在低溫或冷藏條件下密封存放。

3.5 重復(fù)處方溶出實(shí)驗(yàn)

該制劑3h內(nèi)在腸溶性介質(zhì)中釋放完全（累積釋放率>90%），三批重復(fù)處方并無顯著性差異，符合腸溶制劑評(píng)價(jià)的需要。

4 結(jié)語

在液-固體系研究的基礎(chǔ)上，選擇具有良好流動(dòng)性和一定液體吸附能力的固體賦形劑，將液體藥物DATS制備成固體顆粒。本文成功地將多孔材料和常用的固體輔助材料結(jié)合起來，在一定程度上提高了一般固體輔助材料對(duì)液體的吸附性能，同時(shí)保證了良好的外觀和流動(dòng)性。充分考慮化合物的揮發(fā)性和水溶性差，在制劑中加入少量（處方藥和增溶劑比例為1∶10）增溶劑，增加藥物的分散性，并具有一定的輔助作用。在藥物溶解。雖然處方完全掩蓋了藥物的刺激性氣味，但顆粒的流動(dòng)性基本上滿足配方要求。結(jié)合溶出度和穩(wěn)定性研究，對(duì)制劑進(jìn)行了全面評(píng)估。該顆粒在冷藏條件下具有良好的穩(wěn)定性，并且在規(guī)定時(shí)間內(nèi)的累積溶解速率滿足制備要求?？梢赃M(jìn)一步開發(fā)顆粒制劑，例如填充膠囊，壓片和制備成臨床常用的制劑形式。該方法制備的制備載藥固體顆粒，后期更穩(wěn)定。更優(yōu)選處方的發(fā)現(xiàn)提供了物質(zhì)基礎(chǔ)該方法可以很大程度地改善藥物的穩(wěn)定性并掩蓋揮發(fā)性油類藥物的難聞氣味。以上常規(guī)劑型的制備目前國內(nèi)外均已有大生產(chǎn)的經(jīng)驗(yàn)，將以上處方進(jìn)行工業(yè)轉(zhuǎn)化較為容易。但在針對(duì)本化合物的研究中，由于化合物本身具有較高的揮發(fā)性，固體制劑在穩(wěn)定性方面仍有待改善，同時(shí)制劑的體內(nèi)動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)也應(yīng)及時(shí)完善。

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