化學(xué)發(fā)光法對(duì)免疫功能低下患兒確診為巨細(xì)胞病毒性肺炎的臨床應(yīng)用價(jià)值

廖翠樂(lè)，戴洪法，米沛明，徐志威，潘杰文

（清遠(yuǎn)市婦幼保健院，廣東 清遠(yuǎn)511500）

巨細(xì)胞病毒性肺炎是患者感染巨細(xì)胞病毒 （CMV）后，以被感染細(xì)胞核及胞質(zhì)內(nèi)形成巨大的包涵體為特征的病毒性肺炎，多數(shù)為無(wú)癥狀隱性感染，但在免疫功能低下的嬰幼兒中表現(xiàn)較為嚴(yán)重，甚至導(dǎo)致死亡［1］。因此，對(duì)免疫功能低下的嬰幼兒CMV感染進(jìn)行早期診斷具有重要的臨床意義。有研究［2］顯示，CMV－PP65抗原作為CMV感染早期表達(dá)的特異性蛋白，CMV－PP65抗原陽(yáng)性表達(dá)可作為CMV肺炎的臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)之一。本研究以免疫功能低下疑似巨細(xì)胞病毒性肺炎患兒為對(duì)象，應(yīng)用化學(xué)發(fā)光法對(duì)患兒外周血CMV－PP65抗原進(jìn)行檢測(cè)，探討化學(xué)發(fā)光法在免疫功能低下患兒巨細(xì)胞病毒性肺炎診斷中的臨床應(yīng)用價(jià)值，具體報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2016年1月至2017年6月間收治的100例免疫功能低下疑似巨細(xì)胞病毒性肺炎的患兒作為觀察組，所有患兒臨床ELISA檢測(cè)血清免疫五項(xiàng)中IgG＜4 mg／L，患兒經(jīng)CT、胸片檢查符合巨細(xì)胞病毒性肺炎診斷標(biāo)準(zhǔn)［3］。其中男性56例，女性44例；年齡0～1歲，平均 （7.43±2.35）個(gè)月。另選取本院健康體檢兒童100例作為對(duì)照組，其中男性57例，女性43例；年齡0～1歲，平均 （7.76±2.42）月。兩組患兒的一般資料比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＞0.05）。

1.2 檢測(cè)方法

采用化學(xué)發(fā)光法對(duì)外周血多形核白細(xì)胞中CMV－PP65抗原進(jìn)行檢測(cè)，取兒童外周靜脈血5 mL，經(jīng)離心分離后獲得血清，并將分離出的血清放置在－20℃的環(huán)境下保存等待檢測(cè)，注意所分離的血清不要進(jìn)行反復(fù)凍融，檢測(cè)前對(duì)樣本進(jìn)行常規(guī)質(zhì)控；樣本檢測(cè)結(jié)果S／Co≥1.0為陽(yáng)性。同時(shí)應(yīng)用ELISA法對(duì)所有樣本血清CMV－IgG及IgM抗體進(jìn)行檢測(cè)［4］，作為對(duì)照分析，樣本檢測(cè)結(jié)果S／Co≥1.02為陽(yáng)性。本研究所用的檢驗(yàn)試劑、體外診斷試劑盒及鼠抗人CMV－PP65抗原單克隆抗體、羊抗鼠IgG單克隆抗體等均來(lái)自于鄭州安圖生物工程股份有限公司，檢驗(yàn)過(guò)程所有操作步驟均嚴(yán)格按照使用說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.3 檢測(cè)結(jié)果判斷

取所有檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性的兒童的血液，如果CMV－IgM陽(yáng)性，則提示近期存在巨細(xì)胞病毒感染。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，行χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組的化學(xué)發(fā)光法CMV－PP65抗原陽(yáng)性率比較

觀察組的CMV－PP65抗原陽(yáng)性率顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P ＜0.05）， 見(jiàn)表 1。

表1 兩組的化學(xué)發(fā)光法陽(yáng)性率結(jié)果比較 ［n（%）］

2.2 兩種檢測(cè)方法的陽(yáng)性檢出率比較

觀察組中，化學(xué)發(fā)光法CMV－PP65抗原的陽(yáng)性檢出率顯著高于ELISA法檢測(cè)血清CMV－IgM抗體的陽(yáng)性檢出率 （χ2＝15.171， P ＝ 0.000）。 所有 100 例樣本中， CMV－PP65 抗原陽(yáng)性為45例，CMV－IgM抗體陽(yáng)性為13例，二者均陽(yáng)性為11例，陽(yáng)性一致率為11.00%，陰性一致率為53.00%。見(jiàn)表2。

表2 CMV－PP65抗原與血清CMV－IgM抗體檢測(cè)結(jié)果比較 ［n（%）］

3 討論

巨細(xì)胞病毒 （CMV）作為臨床易感染型病毒，在人群中的感染率非常高，可達(dá)90%以上，一旦感染便會(huì)終身攜帶［5］。CMV在免疫功能正常的感染者體內(nèi)多為隱性感染，無(wú)臨床感染癥狀，而當(dāng)患者免疫功能低下時(shí)，如嚴(yán)重性疾病、器官移植后及新生兒等，CMV便會(huì)由潛伏狀態(tài)變?yōu)榛钴S狀態(tài)，誘發(fā)感染性疾?。?］。臨床報(bào)道顯示，多數(shù)嬰幼兒由于免疫能力低下極易感染巨細(xì)胞病毒性肺炎，可導(dǎo)致患兒死亡［7］。我科每年收治大約5 000例肺炎患兒，嬰幼兒占30%左右。因此，盡早診斷出CMV性肺炎感染患兒對(duì)臨床治療及預(yù)后具有重要的意義。

傳統(tǒng)的CMV感染診斷方法以ELISA法為主，主要是通過(guò)檢測(cè)感染者體內(nèi)CMV－IgM抗體的形式對(duì)CMV感染進(jìn)行診斷，對(duì)CMV活動(dòng)性感染者具有一定的確診價(jià)值［8］。由于感染者機(jī)體CMV－IgM抗體的出現(xiàn)具有較長(zhǎng)時(shí)間的延遲，當(dāng)檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性時(shí)，患者由于感染所致的并發(fā)癥已經(jīng)處于較嚴(yán)重的狀態(tài)，診斷已無(wú)實(shí)際意義。因此，臨床上需要一種敏感度和特異度均較高的診斷方法?；瘜W(xué)發(fā)光法能夠?qū)gG和IgM抗體水平進(jìn)行定量分析，并且檢測(cè)全過(guò)程均由機(jī)器進(jìn)行操作，避免了檢測(cè)過(guò)程或檢測(cè)結(jié)果因操作者本身或其他外界因素影響出現(xiàn)的偏差，其對(duì)IgG和IgM抗體的陽(yáng)性檢出率和對(duì)CMV的診斷靈敏度、特異度以及陽(yáng)性預(yù)測(cè)值都比ELISA法明顯更好［9－10］。臨床上對(duì)于CMV性肺炎的治療目前主要以抗病毒及增強(qiáng)免疫功能為主。因此對(duì)免疫功能低下的CMV性肺炎患兒在病毒感染早期進(jìn)行診斷，對(duì)其臨床治療及預(yù)后具有重要的作用。本研究結(jié)果顯示，化學(xué)發(fā)光法的陽(yáng)性檢出率明顯高于ELISA法，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＜0.05），且敏感度及特異度均較高。

綜上所述，應(yīng)用化學(xué)發(fā)光法能夠在巨細(xì)胞病毒感染早期快速確診，為免疫功能低下巨細(xì)胞病毒性肺炎患兒的早期預(yù)防、診斷及治療提供一定的依據(jù)，有利于改善患兒預(yù)后。

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[2] 陳杰華,鄭躍杰,馬紅玲,等.免疫正常嬰兒肺泡灌洗液巨細(xì)胞病毒DNA檢測(cè)陽(yáng)性與抗病毒治療必要性探討 [J].兒科藥學(xué)雜志,2017,23(2):4-8.

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