中藥抗血小板聚集作用機(jī)制研究概況

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1.長春中醫(yī)藥大學(xué)，吉林 長春 130117；2.吉林省中醫(yī)藥科學(xué)院，吉林 長春 130021

中醫(yī)理論中“血瘀”的范疇即為血栓形成、血小板聚集，血小板聚集是血栓性疾病發(fā)生的主要原因，抗血小板聚集藥物作為抗血栓性疾病的經(jīng)典藥物之一，對其相關(guān)機(jī)制的深入研究日益迫切。本文從血小板聚集機(jī)制、抗血小板聚集中藥及有效成分等方面綜述如下。

1 抗血小板聚集作用機(jī)制

在正常血液循環(huán)過程中，血小板處于靜止?fàn)顟B(tài)，受到生理或病理刺激因子作用時，血小板發(fā)生活化，在von-Willebrand因子(vWF)存在下粘附于受損血管處暴露的內(nèi)皮下組織，啟動內(nèi)皮下組織或局部形成的凝血酶，發(fā)生釋放反應(yīng)和花生四烯酸代謝(AA代謝)，前者分泌釋放的二磷酸腺苷(ADP)和后者形成的血栓烷A2(TXA2)可以引起血小板聚集。血小板聚集是由血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲ a(GPⅡb/Ⅲ a)受體所調(diào)節(jié)，纖維蛋白原與活化的GPⅡb/Ⅲa受體結(jié)合，在相鄰的血小板之間形成橫橋，形成血栓和骨架，參與生理性止血和病理性血栓形成[1]。

2 抗血小板聚集藥物

中藥來源廣、不良反應(yīng)小、治療作用平和，逐漸被人們認(rèn)知，但其成分繁多且交互作用復(fù)雜，盡管很多活血化瘀中藥在抗血小板聚集的防治中取得了良好的效果，但其物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機(jī)制尚需深入研究。

2.1 中藥有效成分

2.1.1 黃酮類 黃酮類化合物可以通過抑制血小板的活化，信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，抗氧自由基，阻斷TXA2受體，抑制5-HT和TXA2的釋放以及抑制血小板內(nèi)CA2+濃度的升高等作用來達(dá)到預(yù)防心腦血管疾病的發(fā)生[2-4]。有學(xué)者研究化橘紅6種黃酮成分抑制血小板聚集的活性，并對其構(gòu)效關(guān)系進(jìn)行分析，結(jié)果顯示在抑制 ADP 誘導(dǎo)的大鼠血小板聚集中，川陳皮素抑制作用最強(qiáng)，隨后依次是桔紅素、橙皮素、柚皮素或橙皮苷、柚皮苷，得出抑制血小板聚集的活性與其結(jié)構(gòu)密切相關(guān)，甲氧基和酚羥基數(shù)目以及A環(huán)C7羥基可能影響黃酮抑制血小板聚集的生物活性[5]。 游離態(tài)的黃酮苷元、與糖結(jié)合的黃酮糖苷及天然黃酮混合物都具有抗血小板聚集的明確功效，但其溶解性差、藥效緩慢、生物利用度不高，因此可通過研究黃酮類化合物的活性結(jié)構(gòu)和作用機(jī)制，進(jìn)行結(jié)構(gòu)優(yōu)化，提高藥物靶向性、藥效性及安全性，進(jìn)行系統(tǒng)科學(xué)的臨床試驗(yàn)研究，從而為研發(fā)更加安全、高效、低毒的抗血小板聚集藥物奠定堅實(shí)的基礎(chǔ)。

2.1.2 有機(jī)酸、酚類 劉岱琳等[6]考察了19種酚酸類、有機(jī)酸類化合物體外抗ADP誘導(dǎo)兔血小板聚集活性，發(fā)現(xiàn)沒食子酸、阿魏酸、琥珀酸、酒石酸、壬二酸、對羥基桂皮酸、丹皮酚等具有明顯抑制血小板聚集作用，并認(rèn)為該類化合物抗血小板聚集活性與其結(jié)構(gòu)存在構(gòu)效關(guān)系。此外，有學(xué)者將將2-溴甲基-3,5,6-三甲基吡嗪與魏酸乙酯等含酚羥基的芳酸反應(yīng)，再經(jīng)水解，得到了川芎嗪芳酸醚類衍生物，體外藥效篩選結(jié)果顯示，部分川芎嗪芳酸衍生物對ADP誘導(dǎo)的血小板聚集具有較好的抑制活性，其中川芎嗪與阿魏酸的拼合物的抑制活性是奧扎格雷的5.7倍，是阿魏酸川芎嗪的192倍[7]。有機(jī)酸類成分具有結(jié)構(gòu)多樣性，以其為先導(dǎo)物進(jìn)行結(jié)構(gòu)改造和修飾是我國進(jìn)行創(chuàng)新藥物研究的可行途徑之一，因此，有機(jī)酸進(jìn)行結(jié)構(gòu)改造和修飾，有可能開發(fā)出活性更強(qiáng)、毒副作用更小的有機(jī)酸類衍生物藥物。

2.1.3 生物堿類 透骨草中吡啶-2,6(1H,3H)二酮生物堿，能抑制ADP、AA、collagen等誘導(dǎo)的兔血小板聚集，其中對ADP誘導(dǎo)的血小板聚集抑制作用最強(qiáng)，且劑量和作用呈現(xiàn)一定的正相關(guān)性[8]。巖烏頭根部的二萜生物堿類化合物sachaconitine和化合物14-acetylsachaconitine對PAF誘導(dǎo)的血小板聚集具有一定的抑制作用[9]。有學(xué)者采用ADP誘導(dǎo)體外血小板聚集模型，篩選生物堿單體的體外抗血小板聚集活性，結(jié)果表明藜蘆的主要成分甾體生物堿具有顯著的抗血栓活性[10]，之后對藜蘆總生物堿以及單一生物堿的抗血栓活性進(jìn)行比較研究，結(jié)果顯示藜蘆生物堿中抗血小板聚集的主要活性成分可能是A2，同時初步的構(gòu)效關(guān)系研究表明西藜蘆堿骨架是抗血栓活性所必備的，C3位酯基取代基的疏水性和空間位阻效應(yīng)對生物堿抗血栓活性有很大影響，可提高化合物的抗血栓活性[11]。因此，研究生物堿類化合物的活性結(jié)構(gòu)和作用，對于提高某一中藥活性優(yōu)化具有重要意義，在以后的研究中，可通過掌握結(jié)構(gòu)和功能之間的規(guī)律性，有針對性和目的性地進(jìn)行結(jié)構(gòu)優(yōu)化和改造，進(jìn)而提高藥物的靶向性及藥效性。

2.2 經(jīng)典中藥

2.2.1 川芎 川芎為傘形科植物L(fēng)igusticumchuanxiongHort.的干燥根莖，具有活血行氣、祛風(fēng)止痛的功效，能夠改善血液流變性、降低血黏度、抗腦缺血、解熱鎮(zhèn)痛[12]。川芎的主要有效活性成分為川芎嗪、川芎內(nèi)酯、阿魏酸鈉、揮發(fā)油、揮發(fā)性油狀生物堿及酚性物質(zhì)等[13]。

川芎嗪抗血小板聚集作用機(jī)制有以下幾方面：抑制血小板合成TXA2，明顯增加血管內(nèi)皮細(xì)胞合成和釋放PGI2，阻止局部血栓的形成；增加血小板c AMP含量，抑制血小板聚集和釋放反應(yīng)；鈣拮抗劑作用：川芎嗪使血小板內(nèi)CA2+濃度降低，阻斷CA2+對血小板激活和前列腺素的代謝，增強(qiáng)NOS的活性，刺激血小板中NO的生成[14]；川芎嗪還可顯著降低腦缺血后血漿TXA2，升高6酮前列腺素F1a(6-Keto-PGF1a)，調(diào)節(jié)TXA2/PGI2失衡狀態(tài)，起到抗血栓作用[15]。阿魏酸能夠明顯抑制血小板聚集，抑制5-HT、TXA2樣物質(zhì)的釋放，選擇性抑制TXA2合成酶活性，使PGI2/TXA2比率升高[16]。有學(xué)者基于藥物設(shè)計的生物電子等排和拼合原理，設(shè)計、合成了川芎嗪/查耳酮類雜合物，得到活性較強(qiáng)的抗血小板聚集藥物。其中，目標(biāo)化合物對ADP和AA誘導(dǎo)的血小板聚集均顯示不同程度的抑制，其中化合物8活性最強(qiáng)，對ADP誘導(dǎo)的血小板聚集的抑制作用(IC50=0.14 mmol/L)是川芎嗪的9.1倍，查耳酮的10.5倍；對AA誘導(dǎo)的血小板聚集的抑制作用( IC50=0.09 mmol / L) 是川芎嗪的8.8倍，查耳酮的10.0倍，且略優(yōu)于阿司匹林(IC50=0.15 mmol/L)[17]。

川芎嗪常被認(rèn)為是川芎抗血小板聚集的主要有效成分、是評價川芎質(zhì)量的指標(biāo)性成分，隨著川芎嗪類合成產(chǎn)物的出現(xiàn)，對川芎抗血小板聚集的研究將不僅僅限于川芎嗪和阿魏酸，應(yīng)以此為基點(diǎn)逐步提高對川芎其他有效成分、有效成分群、有效部位、有效部位群之間的藥效學(xué)及作用機(jī)制研究，為闡明川芎抗血小板聚集作用機(jī)制提供科學(xué)依據(jù)。

2.2.2 丹參 丹參為唇形科植物SalviamiltiorrhizaBge.的干燥根或根莖，為中醫(yī)活血化瘀的要藥，具有活血化瘀、通絡(luò)止痛、清心除煩的功效[18]。丹參的有效成分包括丹酚酸、丹酚酸B、迷迭香酸、乙酰丹酚酸A、丹酚酸A等。

丹酚酸可顯著抑制ADP、膠原(collagen)、AA誘導(dǎo)的大鼠血小板聚集；丹酚酸B能夠抑制正常大鼠血漿血小板粘附性，降低血漿TXB2水平，此外能夠抑制α2β1抗體與血小板的結(jié)合及可溶性α2β1與膠原的結(jié)合；迷迭香酸能夠抑制大鼠靜脈血栓形成和collagen誘導(dǎo)的血小板聚集，促進(jìn)纖維蛋白溶解活性；丹酚酸A能夠抑制血小板聚集，降低血液粘度，改善血液的高凝狀態(tài)及顯著升高血小板中cAMP含量；乙酰丹酚酸A能夠抑制ADP、collagen、AA、凝血酶等引起的大鼠和兔血小板聚集[19]。此外脂溶性的隱丹參酮抗血小板聚集活性也有報道[20]，但對其抗血小板聚集作用機(jī)制和研究尚不深入，其抗血小板高活性功能的發(fā)現(xiàn)，為進(jìn)一步開發(fā)抗血小板聚集的新藥的前體化合物提供可能，因此，尚需從分子生物學(xué)水平，并結(jié)合藥效學(xué)研究和藥動學(xué)研究對隱丹參酮進(jìn)行更深層次的探索。

2.2.3 葛根 葛根為豆科植物野葛Puerarialobata(Willd.) ohwi.的干燥根和根莖，具有解肌退熱、生津 止渴、透疹、升陽止瀉等功效，可解熱、改善心肌缺血、抗氧化等，用于治療頭暈頭痛、高血壓病、心絞痛等疾患[21]。葛根的主要活性成分為異黃酮類化合物，以葛根素、大豆苷元、大豆苷、葛根素-7-木糖苷[22]等。葛根總黃酮在臨床應(yīng)用中，500～1000 μg/kg，連續(xù)口服7d，能顯著降低大鼠血黏度、血小板粘附率，抑制血栓形成及ADP誘導(dǎo)的血小板聚集[23]。葛根素在臨床應(yīng)用中，具有擴(kuò)張血管、調(diào)節(jié)TXA2/PGI2比值，抑制血小板聚集、降低血漿兒茶酚胺水平以及恢復(fù)受損內(nèi)皮細(xì)胞功能的作用，從而抑制HIRI時的血小板聚集[24]；此外，葛根素對心腦血管系統(tǒng)的藥理作用顯著，可使外周循環(huán)得到改善，減少血小板的聚集，有β受體的阻斷作用，以及降血糖、血壓的效果[25]。相關(guān)藥理實(shí)驗(yàn)表明，葛根素低、中、高劑量可顯著延長出、凝血時間，對ADP誘導(dǎo)的血小板聚集也有較強(qiáng)的抑制作用且呈劑量依賴關(guān)系[26]。此外，葛根素可使血小板最大聚集率(Ptmax)、最大聚集時間(Pt T)均明顯下降，PtT顯著延長，且與缺血再灌注組比較差異有顯著性，表明葛根素能有效地抑制血小板的聚集功能[27]。野葛根莖中的主要成分葛根素和大豆黃苷及其代謝物大豆黃酮對ADP和collagen誘導(dǎo)的體外血小板聚集有抑制作用[28]。

抗血小板聚集過程為多個媒介相互結(jié)合，多種物質(zhì)相互作用，因此，單一作用的抗血小板制劑往往難以取得令人滿意的療效，而中藥制劑成分復(fù)雜，具有多靶點(diǎn)作用，其機(jī)制不能以拮抗單一致病因素的理論來解釋，因此葛根黃酮及葛根素等單一藥物、多種機(jī)制的藥物正是研究方向，因此可拓寬思路，研究中藥各類成分結(jié)構(gòu)與相應(yīng)功能之間是否存有規(guī)律性、中藥抗血小板作用是否和其他作用有協(xié)同性，以篩選出高效、全面的中藥抗血小板制劑。

3 小結(jié)

綜上所述，中藥抗血小板聚集作用機(jī)制可以分為抑制ADP、collagen、AA、凝血酶等方面。具有抗血小板聚集活性中藥是良好的天然產(chǎn)物，在心腦血管血栓性疾病的防治中取得了良好的效果，同時這些藥物分子的多樣性和豐富性是合理選擇、使用藥物，評價、設(shè)計新藥的基礎(chǔ)，隨著現(xiàn)代天然產(chǎn)物化學(xué)和藥理學(xué)研究的不斷發(fā)展，各類中藥的物質(zhì)基礎(chǔ)和有效成分的作用機(jī)制將會逐步得以闡明。