缺氧缺血性腦病早產(chǎn)兒血清tau蛋白、激活素A、神經(jīng)特異性烯醇化酶的水平變化及臨床意義

蔣婷婷 王偉 高繼生

[摘要] 目的 研究缺氧缺血性腦病早產(chǎn)兒血清tau蛋白、激活素A、神經(jīng)特異性烯醇化酶（NSE）的水平變化情況并分析其臨床意義。 方法 選取2016年2月～2017年12月徐州市兒童醫(yī)院收治的缺氧缺血性腦病早產(chǎn)兒131例作為研究組，同期未發(fā)生缺氧缺血性腦病的早產(chǎn)兒100例作為對(duì)照組。比較兩組早產(chǎn)兒出生后7 d血清tau蛋白、激活素A以及NSE水平。將研究組早產(chǎn)兒按照疾病嚴(yán)重程度分為輕度組32例，中度組61例，重度組38例。比較不同嚴(yán)重程度早產(chǎn)兒生后7 d血清tau蛋白、激活素A、NSE水平和新生兒神經(jīng)行為（NBNA）評(píng)分，分析NBNA評(píng)分、血清tau蛋白、激活素A以及NSE水平的相關(guān)性。 結(jié)果 研究組早產(chǎn)兒血清tau蛋白、激活素A以及NSE水平均明顯高于對(duì)照組，差異均有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P < 0.01）。輕度組、中度組以及重度組早產(chǎn)兒血清tau蛋白、激活素A以及NSE水平均呈逐漸上升趨勢(shì)，組間比較差異均有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P < 0.01）。重度組早產(chǎn)兒出生后7 d的NBNA評(píng)分明顯低于中度組與輕度組，而中度組又明顯低于輕度組，組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P < 0.05）。Pearson相關(guān)性分析結(jié)果顯示：缺氧缺血性腦病早產(chǎn)兒血清tau蛋白、激活素A、NSE水平與NBNA評(píng)分均呈負(fù)相關(guān)（r = -0.612、-0.583、-0.648，均P < 0.05），缺氧缺血性腦病早產(chǎn)兒血清tau蛋白水平與激活素A、NSE水平呈正相關(guān)（r = 0.531、0.487，均P < 0.05），血清激活素A與NSE水平呈正相關(guān)（r = 0.443，P < 0.05）。 結(jié)論 缺氧缺血性腦病早產(chǎn)兒血清tau蛋白、激活素A、NSE的水平存在明顯高表達(dá)，且與早產(chǎn)兒的神經(jīng)發(fā)育情況存在密切相關(guān)性。

[關(guān)鍵詞] 缺氧缺血性腦??；早產(chǎn)兒；tau蛋白；激活素A；神經(jīng)特異性烯醇化酶

[中圖分類號(hào)] R722.12 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-7210（2018）09（c）-0078-04

[Abstract] Objective To study the level changes of tau protein， activin A， neuro-specific enolase （NSE） in premature infants with hypoxic ischemic encephalopathy， and to analyze its clinical significance. Methods The total of 131 cases of hypoxic ischemic encephalopathy treated in Xuzhou Children′s Hospital from February 2016 to December 2017 were selected as the study group， 100 cases of premature infants without hypoxic ischemic encephalopathy at the same period were selected as the control group. The serums tau protein， activin A and NSE levels of postnatal 7 d infants in two groups were compared. The preterm infants in the study group were divided into mild group （32 cases）， moderate group （61 cases） and severe group （38 cases） according to the severity of the disease. The serum levels of tau protein， activin A， NSE and neonatal neurobehavioral （NBNA） score in postnatal 7 d infants with different severity was compared. The correlation between NBNA score， serum tau protein， activin A and NSE level was also analyzed. Results The levels of serum tau protein， activin A and NSE in preterm infants of the study group were significantly higher than those of the control group， the differences were statistically significant （all P < 0.01）. Serum tau protein and activin A and NSE levels of mild group， moderate group and severe group showed a rising trend， the differences between groups were statistically significant （all P < 0.01）. The NBNA score in the preterm 7 d infants of severe group was significantly lower than that of the moderate group and mild group， while the moderate group was significantly lower than that of the mild group， the differences between the groups were statistically significant （P < 0.05）. Pearson correlation analysis showed that serum tau protein， activin A and NSE levels in premature infants with hypoxic ischemic encephalopathy were negatively correlated with NBNA scores （r = -0.612， -0.583， -0.648， all P < 0.05）； the level of serum tau protein in premature infants with hypoxic ischemic encephalopathy was positively correlated with the levels of activin A and NSE （r = 0.531， 0.487， all P < 0.05）； serum activin A was positively correlated with NSE level （r = 0.443， P < 0.05）. Conclusion The serum tau protein， activin A and NSE of hypoxic-ischemic encephalopathy are highly expressed， and are closely related to the neural development of premature infants.

[Key words] Hypoxic ischemic encephalopathy； Premature infants； Tau protein； Activin A； Neuro-specific enolase

新生兒缺氧缺血性腦病是指新生兒在圍生期因各種原因引發(fā)的腦組織血流供應(yīng)減少或暫停，腦組織部分或完全性缺氧，而導(dǎo)致的新生兒腦組織損傷[1]。目前，我國(guó)新生兒缺氧缺血性腦病的發(fā)病率為0.3%～0.6%，早產(chǎn)兒中的發(fā)病率顯著高于足月兒，存活率顯著低于足月兒[2]。由于新生兒腦組織對(duì)缺氧、缺血損傷較為敏感，早期對(duì)缺氧缺血性腦病診斷并給予有效的治療是提高患兒預(yù)后的關(guān)鍵。然而由于缺氧缺血性腦病早產(chǎn)兒組織器官發(fā)育仍不完善，臨床癥狀多不典型，給疾病早期診斷帶來(lái)困難。tau蛋白是一種表達(dá)于神經(jīng)系統(tǒng)的微管相關(guān)蛋白；激活素A是轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子家族的重要成員；而神經(jīng)特異性烯醇化酶（NSE）是中樞神經(jīng)系統(tǒng)特異性蛋白質(zhì)，三種物質(zhì)與中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷密切相關(guān)[3-5]。鑒于此，本研究通過(guò)研究缺氧缺血性腦病早產(chǎn)兒血清tau蛋白、激活素A、NSE的水平變化情況并分析其臨床意義，旨在為缺氧缺血性腦病早產(chǎn)兒的早期診斷、治療方案的制訂以及預(yù)后評(píng)估提供參考依據(jù)，現(xiàn)作以下報(bào)道。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年2月～2017年12月江蘇省徐州市兒童醫(yī)院（以下簡(jiǎn)稱“我院”）收治的缺氧缺血性腦病早產(chǎn)兒131例為研究組。納入標(biāo)準(zhǔn)：①與《兒科學(xué)》[6]中早產(chǎn)兒相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)相符；②出生后存活時(shí)間在6個(gè)月以上；③研究組早產(chǎn)兒均符合缺氧缺血性腦病的診斷以及分度標(biāo)準(zhǔn)[7]。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并染色體異常、腦發(fā)育不全以及嚴(yán)重膈疝等一系列先天畸形者；②存在電解質(zhì)紊亂、產(chǎn)傷以及顱內(nèi)出血所導(dǎo)致的抽搐者；③因?qū)m內(nèi)感染或遺傳性代謝性疾病等因素引發(fā)的腦損傷者。其中男86例，女45例；胎齡29～36周，平均（34.29±2.20）周；出生體重1.0～2.6 kg，平均（1.57±0.42）kg；分娩方式：順產(chǎn)55例，剖宮產(chǎn)76例；疾病嚴(yán)重程度：輕度32例，中度61例，重度38例。另取同期我院收治的未發(fā)生缺氧缺血性腦病的早產(chǎn)兒100例作為對(duì)照組。其中男62例，女38例；胎齡29～36周，平均胎（34.31±2.22）周；出生體重1.1～2.7 kg，平均（1.58±0.43）kg；分娩方式：順產(chǎn)41例，剖宮產(chǎn)59例。兩組性別、胎齡、出生體重以及分娩方式比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05），具有可比性。兩組早產(chǎn)兒父母均知情同意并簽署了知情同意書，本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 研究方法

1.2.1 血清tau蛋白、激活素A、NSE水平的檢測(cè) 兩組早產(chǎn)兒均于出生后7 d采集清晨空腹臍靜脈血5 mL，靜置于促凝管中在常溫狀態(tài)下放置30 min，隨后以3000 r/min離心10 min，取上層血清保存于-20℃冰箱中待檢。采用酶聯(lián)免疫吸附法分別檢測(cè)各組早產(chǎn)兒血清tau蛋白、激活素A、NSE水平，具體操作均嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行，相關(guān)試劑盒均購(gòu)自上海酶聯(lián)科技有限公司。

1.2.2 神經(jīng)發(fā)育情況評(píng)估 參照北京協(xié)和醫(yī)院鮑秀蘭教授修訂的《新生兒神經(jīng)行為（NBNA）》[8]20項(xiàng)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)予以神經(jīng)行為情況評(píng)估，主要內(nèi)容為行為能力、主動(dòng)肌張力、被動(dòng)肌張力、一般反應(yīng)以及原始反應(yīng)5個(gè)方面，得分越高表示早產(chǎn)兒的神經(jīng)行為越佳。

1.3 觀察指標(biāo)

比較研究組與對(duì)照組早產(chǎn)兒血清tau蛋白、激活素A以及NSE水平，比較病情嚴(yán)重程度不同研究組早產(chǎn)兒的血清tau蛋白、激活素A、NSE水平以及出生后7 d的NBNA評(píng)分情況。分析NBNA評(píng)分、血清tau蛋白、激活素A以及NSE水平的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 25.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用LSD檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)；采用Pearson相關(guān)性分析指標(biāo)間的相關(guān)性。以P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 研究組與對(duì)照組早產(chǎn)兒血清tau蛋白、激活素A以及NSE水平比較

研究組早產(chǎn)兒血清tau蛋白、激活素A以及NSE水平均明顯高于對(duì)照組，組間比較差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.01）。見表1。

2.2 不同嚴(yán)重程度研究組早產(chǎn)兒的血清tau蛋白、激活素A、NSE水平以及NBNA評(píng)分比較

輕度組、中度組以及重度組早產(chǎn)兒血清tau蛋白、激活素A、NSE水平均呈逐漸上升趨勢(shì)，NBNA評(píng)分呈下降趨勢(shì)，且經(jīng)方差分析可得，組間比較差異均有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P < 0.01）；組間兩兩比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P < 0.05）。見表2。

2.3 缺氧缺血性腦病早產(chǎn)兒血清tau蛋白、激活素A、NSE水平與NBNA評(píng)分相關(guān)性分析

經(jīng)Pearson相關(guān)性分析顯示：缺氧缺血性腦病早產(chǎn)兒血清tau蛋白、激活素A、NSE水平與NBNA評(píng)分均呈負(fù)相關(guān)（P < 0.01），缺氧缺血性腦病早產(chǎn)兒血清tau蛋白水平與激活素A、NSE水平呈正相關(guān)，血清激活素A與NSE水平呈正相關(guān)（P < 0.01）。見表3。

3 討論

缺氧缺血性腦病會(huì)導(dǎo)致患兒遺留不同程度的智力缺陷、腦性癱瘓等一系列神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥，病情嚴(yán)重者甚至?xí)霈F(xiàn)永久性神經(jīng)功能缺陷，對(duì)患兒的生存質(zhì)量造成了嚴(yán)重影響[9]。因此，對(duì)患兒進(jìn)行早期有效、準(zhǔn)確的診斷顯得尤為重要。目前，臨床上評(píng)估缺氧缺血性腦病以及神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育的方式包括胎動(dòng)、羊水污染、臍動(dòng)脈血pH值、腦部CT以及核磁共振成像等[10-11]。然而，上述檢查方式均存在特異性較低的缺陷，加之診斷具有一定的滯后性，臨床應(yīng)用價(jià)值不高。缺氧缺血性腦病早產(chǎn)兒的基本病理與足月兒不同，主要臨床表現(xiàn)包括腦水腫、顱內(nèi)出血以及腦組織壞死等。由于早產(chǎn)兒免疫系統(tǒng)尚未成熟，全身各個(gè)器官均處于發(fā)育階段，臨床診斷以及預(yù)后評(píng)估難度更大[12-13]。近年來(lái)隨著醫(yī)學(xué)的不斷發(fā)展，血清學(xué)標(biāo)志物不斷發(fā)現(xiàn)，為缺氧缺血性腦病早產(chǎn)兒的診斷提供了新的方向。

本研究通過(guò)對(duì)我院收治的缺氧缺血性腦病早產(chǎn)兒和未發(fā)生缺氧缺血性腦病的早產(chǎn)兒比較發(fā)現(xiàn)，研究組早產(chǎn)兒血清tau蛋白、激活素A以及NSE水平均明顯高于對(duì)照組，這與索有梅等[14]的研究報(bào)道一致，說(shuō)明了缺氧缺血性腦病早產(chǎn)兒的血清tau蛋白、激活素A以及NSE水平存在明顯的升高。分析原因，筆者認(rèn)為tau蛋白廣泛存在于神經(jīng)系統(tǒng)的大腦額葉、顳葉、海馬以及外周神經(jīng)軸突內(nèi)，在維持細(xì)胞骨架機(jī)構(gòu)與促進(jìn)軸突運(yùn)輸過(guò)程中發(fā)揮著至關(guān)重要作用，且在神經(jīng)元發(fā)生損傷是會(huì)從微管上脫落[15]。激活素A則是β轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子家族成員之一，具有多細(xì)胞功能，特別是在抗炎方面具有顯著的作用，參與了組織損傷以及炎癥修復(fù)過(guò)程[16]。NSE是一種存在于神經(jīng)元和神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞中的蛋白質(zhì)，具有促進(jìn)2-磷酸甘油酸轉(zhuǎn)化呈磷酸烯醇式丙酮酸的作用，其在正常生理狀況下血清表達(dá)水平極低，而在缺氧缺血性腦病患兒中由于神經(jīng)元水腫以及神經(jīng)脫髓鞘改變等因素影響，其被大量釋放，從而導(dǎo)致血清水平升高[17-19]。因此，在臨床工作中可能通過(guò)對(duì)上述三項(xiàng)血清學(xué)指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)，從而對(duì)缺氧缺血性腦病早產(chǎn)兒進(jìn)行早期有效診斷。此外，輕度組、中度組以及重度組早產(chǎn)兒血清tau蛋白、激活素A以及NSE水平均呈逐漸上升趨勢(shì)，組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.01）。這提示了隨著缺氧缺血性腦病早產(chǎn)兒病情的不斷加劇，血清tau蛋白、激活素A以及NSE水平逐漸升高，提示上述三項(xiàng)指標(biāo)可能參與了疾病的發(fā)展過(guò)程。究其原因，筆者認(rèn)為隨著疾病嚴(yán)重程度的不斷增加，患兒的腦損傷程度相應(yīng)加重，從而導(dǎo)致神經(jīng)元損傷，使得tau蛋白自神經(jīng)軸突或胞體中被釋放，進(jìn)一步導(dǎo)致血清中的tau蛋白水平升高[20-21]。同時(shí)，在疾病發(fā)展過(guò)程中，激活素A與腫瘤壞死因子-α?xí)徽{(diào)控釋放，并誘導(dǎo)白細(xì)胞介素-6以及單核巨噬細(xì)胞分泌卵泡抑素，進(jìn)一步對(duì)患兒的腦組織造成損傷。而隨著腦損傷程度的增加，患兒的血腦屏障通透性逐漸增加，促使腦脊液中的NSE通過(guò)血腦屏障入血，進(jìn)一步導(dǎo)致血清NSE水平升高。而重度組早產(chǎn)兒出生后7 d的NBNA評(píng)分明顯低于中度組與輕度組，而中度組又明顯低于輕度組，提示缺氧缺血性腦病早產(chǎn)兒的神經(jīng)功能隨著病情的逐漸加劇而降低。

本研究還分析了缺氧缺血性腦病早產(chǎn)兒血清tau蛋白、激活素A、NSE水平與NBNA評(píng)分相關(guān)性，結(jié)果顯示缺氧缺血性腦病早產(chǎn)兒血清tau蛋白、激活素A、NSE水平與NBNA評(píng)分均呈負(fù)相關(guān)，這提示了隨著tau蛋白、激活素A、NSE水平的不斷升高，缺氧缺血性腦病早產(chǎn)兒神經(jīng)發(fā)育越差。因此，在臨床工作中可通過(guò)對(duì)血清tau蛋白、激活素A、NSE水平進(jìn)行檢測(cè)，從而有效評(píng)估缺氧缺血性腦病早產(chǎn)兒神經(jīng)發(fā)育預(yù)后情況。此外，本研究發(fā)現(xiàn)，缺氧缺血性腦病早產(chǎn)兒血清tau蛋白水平與激活素A、NSE水平呈正相關(guān)，血清激活素A與NSE水平呈正相關(guān)。提示tau蛋白、激活素A、NSE在缺氧缺血性腦病發(fā)展中起到了重要作用，三者可能通過(guò)某些共同的通路引起患兒腦組織損傷，其具體機(jī)制有待于進(jìn)一步研究證實(shí)。

綜上所述，血清tau蛋白、激活素A、NSE水平在缺氧缺血性腦病早產(chǎn)兒中顯著升高，且通過(guò)聯(lián)合檢查三者水平，可有效評(píng)估早產(chǎn)兒神經(jīng)發(fā)育情況。

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（收稿日期：2018-05-09 本文編輯：任 念）