樣品前處理技術(shù)結(jié)合高效液相色譜技術(shù)在食品安全檢驗(yàn)中的應(yīng)用

□ 姜子健 毛瑞琦 劉 欣 濰坊市食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)中心

作為當(dāng)今社會(huì)的熱點(diǎn)，食品安全不僅與人體的健康密切相關(guān)，并且還會(huì)對(duì)國(guó)民經(jīng)濟(jì)和社會(huì)的發(fā)展造成一定影響?？刂剖称钒踩那疤釛l件在于食品檢驗(yàn)，在食品檢測(cè)階段，應(yīng)先處理樣品以排除基本干擾，基于對(duì)照組制備任務(wù)的完成，從而綜合采用定性定量方法，應(yīng)用高效液相色譜技術(shù)對(duì)待測(cè)組進(jìn)行檢測(cè)，基于對(duì)食品的精準(zhǔn)檢驗(yàn)，進(jìn)而為食品質(zhì)量、人們的飲食安全提供有力保障。

1 樣品前處理技術(shù)

在樣品制備階段，采用分解或溶解的方法萃取、凈化、濃縮待測(cè)樣品以消除基體的干擾，為實(shí)驗(yàn)提供樣品對(duì)照組的過(guò)程即為樣品前處理。由于該項(xiàng)技術(shù)是以提升被測(cè)組的精準(zhǔn)度為目的，因此在實(shí)踐操作階段，應(yīng)采用合理方法，進(jìn)而徹底清除雜質(zhì)并規(guī)避新雜質(zhì)的引入。

根據(jù)樣品形態(tài)，可將傳統(tǒng)樣品前處理技術(shù)劃分為氣體、液體、固體樣品前處理技術(shù)三大類別。也可依照待測(cè)樣品的結(jié)構(gòu)劃分為有機(jī)、無(wú)機(jī)污染物樣品前處理技術(shù)。在科技不斷發(fā)展的形勢(shì)下，濁點(diǎn)萃取法等技術(shù)均被普遍應(yīng)用于食品檢測(cè)[1]。

2 高效液相色譜技術(shù)

作為色譜分析中最為常見(jiàn)的方法，高效液相色譜技術(shù)是在氣相色譜、經(jīng)典液相色譜的基礎(chǔ)上發(fā)展而來(lái)的，該技術(shù)常被用于物質(zhì)的定性定量分析中，也被叫做現(xiàn)代液相色譜技術(shù)。

基于經(jīng)典液相色譜法與氣相色譜法發(fā)展而來(lái)的高效液相色譜技術(shù)具備多重優(yōu)勢(shì)，如檢測(cè)范圍廣、較為靈敏、分辨率高等。相較于氣相色譜法，液相色譜不會(huì)因檢測(cè)樣品的穩(wěn)定性以及揮發(fā)性而受限，并且可在室溫下進(jìn)行分析。憑借著操作自動(dòng)化、檢測(cè)的靈敏性等優(yōu)點(diǎn)，高效液相色譜技術(shù)已發(fā)展為當(dāng)代化學(xué)分離分析的核心手段。

3 樣品前處理技術(shù)與高效液相色譜技術(shù)結(jié)合

3.1 在食品安全檢驗(yàn)中的實(shí)踐應(yīng)用

在測(cè)定飲料中的赤蘚紅時(shí)，應(yīng)采用濁點(diǎn)萃取結(jié)合高效液相色譜技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)。

3.1.1 實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)

作為一種人工合成色素，赤蘚紅能夠改善食物色澤。依照相關(guān)規(guī)定，在食品中，這一成分的最大添加量為0.05 mg/kg。本實(shí)驗(yàn)采用濁點(diǎn)萃取方法，即將水溶液加熱至一定溫度時(shí)，通過(guò)表面活性劑的分離進(jìn)而實(shí)現(xiàn)待測(cè)溶液的分離提純，在此基礎(chǔ)上采用高效液相色技術(shù)進(jìn)行定量分析。

3.1.2 實(shí)驗(yàn)方法

在15 mL離心管中加入10 mL待測(cè)溶液，并加入緩沖溶液以及一定濃度的適量TritonX-114溶液，經(jīng)超聲、加熱后進(jìn)行離心處理，隨后取出離析生成的水相，添加100 μL甲醇溶液以降低黏性，從中取出20 μL進(jìn)行后續(xù)檢測(cè)。采用流動(dòng)相為65∶35的甲醇∶0.01 mol/L的乙酸銨溶液以0.45 μm的濾膜、40 ℃的溫度、520 nm的檢測(cè)波長(zhǎng)在高效液相色譜儀中運(yùn)行12 min。

3.1.3 結(jié)果討論

結(jié)合表面活性劑溶液濃度以及體積變化進(jìn)行反復(fù)試驗(yàn)，其中ER是指在濃度不變的情況下，赤蘚紅待測(cè)溶液中赤蘚紅的峰面積與標(biāo)準(zhǔn)赤蘚紅溶液峰面積之比，即赤蘚紅的萃取回收率。經(jīng)實(shí)驗(yàn)得知，在TritonX-114溶液體積為1 mL、濃度為4%的情況下，ER值均最大。對(duì)于前者，體積過(guò)大或過(guò)小都會(huì)降低萃取效果。對(duì)于后者，如繼續(xù)增加濃度會(huì)導(dǎo)致萃取效率下降。

3.2 固相微萃取結(jié)合

針對(duì)水體中的氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留物質(zhì)采用高效液相色譜技術(shù)進(jìn)行測(cè)定。

3.2.1 實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)

氨基甲酸酯類農(nóng)藥因殺蟲(chóng)效果顯著而被普遍應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，但用量過(guò)度則會(huì)殘留于蔬菜上，更有甚者造成水體污染，進(jìn)而危害人類健康。采用固相微萃取法能夠在無(wú)需使用溶劑的情況下，便捷地對(duì)待測(cè)樣品進(jìn)行樣品前處理，因此該方法對(duì)于野外樣品的采集研究而言，極其適用。本試驗(yàn)旨在對(duì)西維因進(jìn)行檢測(cè)，其含量在0.5～25.0 μg/L時(shí)表明水性良好。

3.2.2 實(shí)驗(yàn)方法

在甲醇流動(dòng)相中對(duì)待測(cè)溶液處理120 min，風(fēng)干2 min去除表層甲醇以備使用。經(jīng)預(yù)處理后，取4 mL的待測(cè)溶液進(jìn)行攪拌萃取處理。并以流動(dòng)相為50∶50的乙腈∶水，檢測(cè)波長(zhǎng)220 nm、過(guò)0.45 μm濾膜、流速為1 mL/min、在高效液相色譜儀中進(jìn)行分析測(cè)定。

3.2.2 結(jié)果討論

在萃取時(shí)間少于1 h的情況下，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，萃取效率也會(huì)增加，萃取時(shí)間應(yīng)以半小時(shí)為宜進(jìn)而為靈敏度、萃取效果提供有力保障。

4 結(jié)語(yǔ)

高效液相色譜技術(shù)的應(yīng)用有助于對(duì)各類需檢測(cè)物質(zhì)的含量進(jìn)行精準(zhǔn)檢測(cè)，能幫助人們更好地篩選安全食品，有效規(guī)避不良食品對(duì)人體健康所造成的危害。在食品安全領(lǐng)域，高效液相色譜技術(shù)是人類取得的重大突破。隨著該項(xiàng)技術(shù)的不斷改善，未來(lái)食品安全檢測(cè)將邁向新高度。