淺析高效液相色譜在食品添加劑檢測(cè)中的應(yīng)用

□ 馬滕霞 臨沂市食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)中心

食品中的添加劑主要有甜味劑、防腐劑及色素等，這些添加劑如果過(guò)量攝入則會(huì)給人體造成很大的傷害。高效液相色譜技術(shù)可以對(duì)食品中添加劑進(jìn)行全面分析。

1 食品中甜味劑的檢驗(yàn)

食品檢測(cè)中，對(duì)于檢測(cè)食物中的甜味劑的含量采用高效液相色譜法，經(jīng)常選用的色譜柱是C18柱和NH2柱等。如果在檢測(cè)甜味劑時(shí)，選擇的檢測(cè)方法用XDB-C18色譜柱，將乙酸胺緩沖液作為流動(dòng)相，將酒水里存在的安賽蜜的含量檢驗(yàn)出來(lái)，它的加樣回收率基本≧95.0%，相對(duì)偏差＜5.0%。根據(jù)顯示的結(jié)果來(lái)看，體現(xiàn)的安賽蜜最低檢出限是1.7～1.8 mg/kg[1]。當(dāng)選擇次氯酸鈉在酸性條件下把食品中的甜蜜素變?yōu)槁然h(huán)乙烷，正乙烷萃取，流動(dòng)相選擇乙腈-水和ODS-C18柱，在波長(zhǎng)為314 nm處紫外進(jìn)行測(cè)量，選擇測(cè)定方法為外標(biāo)法，定量進(jìn)行測(cè)量。這樣可以阻止對(duì)被測(cè)對(duì)象中復(fù)雜基質(zhì)的干擾，更重要可以降低檢出限。其中固體的檢測(cè)對(duì)象，最低檢出限為2.0 mg/kg，針對(duì)干擾少的液體檢測(cè)對(duì)象，完全可以降低檢出限，大約在0.5 mg/L，達(dá)到回收率為70%～110%。當(dāng)用HPLC-FLD法檢驗(yàn)出食品里存在的糖精鈉，最低檢出限為0.005～0.200 mg/mL，它和高效液相色譜-紫外檢測(cè)法進(jìn)行比較，重現(xiàn)性更佳的為高效液相色譜-熒光法，它的準(zhǔn)確度高，能快速分析較復(fù)雜的食品，完全可以作為檢驗(yàn)糖精鈉的測(cè)定方法[2]。

2 食品中防腐劑的檢驗(yàn)

食品中防腐劑的檢驗(yàn)，人們過(guò)去通常采用分光光度法或氣相色譜法進(jìn)行，但要經(jīng)過(guò)繁雜的預(yù)處理操作。目前，采用高效液相色譜法只需經(jīng)過(guò)簡(jiǎn)單的處理，就可以直接進(jìn)行測(cè)定。

例如：用高效相色譜法快速測(cè)定飲品中的防腐劑方法，將飲品過(guò)濾后直接注入液相色譜系統(tǒng)。10～20 min可同時(shí)測(cè)定多種防腐劑的含量。該法的色譜條件是：以u(píng)BandapakC18柱為分析柱，含有0.02 mol/L乙酸胺的甲醇-水（35∶65）溶液為流動(dòng)相，洗脫速率1 mL/min，在254 μm的紫外檢測(cè)器下進(jìn)行檢測(cè)，該方法的回收率和標(biāo)準(zhǔn)差分別為97%和0.29%。

選取Diamon-sil ODS色譜柱，將它的方式技術(shù)選擇的適用性與主色譜柱體的檢測(cè)合理性進(jìn)行保留，對(duì)于四氫呋喃和乙腈-水，讓它們發(fā)生流動(dòng)相梯度洗脫，得到可以超出265 nm波長(zhǎng)的紫外光測(cè)量依據(jù)，加樣回收率大約可以達(dá)到93%，可以使更多種防腐劑較好地分離。

3 食品中色素的檢驗(yàn)

在食用色素中超出標(biāo)準(zhǔn)的食用色素越來(lái)越多，高效液相色譜法檢測(cè)色素，不僅操作簡(jiǎn)單，而且效率很高。

當(dāng)前，更多的食品檢驗(yàn)員選擇C18柱分離梯度洗脫系統(tǒng)，此法檢出率非常高。如以水果蔬菜飲品里的番茄紅素作為檢測(cè)樣品，依據(jù)C18色譜柱外校標(biāo)準(zhǔn)曲線將果蔬飲品檢驗(yàn)，檢測(cè)結(jié)束后體現(xiàn)番茄紅素在1.0×10-2～3.9×10-5g/L范圍內(nèi)產(chǎn)生很好的線性關(guān)系，檢出限最后值是6.3×10-8g/L。

選用HPLC法檢測(cè)，采用保健類包衣片里的食用合成色素為樣品，選擇粉碎提取法、漂洗法兩種方法進(jìn)行檢測(cè)，聚酰胺吸附純化Lichrospher C18柱，甲醇-乙酸胺流動(dòng)相梯度洗脫，單波長(zhǎng)或多波長(zhǎng)檢測(cè)誘惑紅和檸檬黃以及靛藍(lán)這三樣色素；它們線性在寬（0～100 g/mL）之間，回收率達(dá)到（91.3%～103.1%），體現(xiàn)的重現(xiàn)性很好（RSD=2.11%～5.63%)，體現(xiàn)檢出限最低為2～11 ng。其中，檢測(cè)方法采用多波長(zhǎng)和梯度洗脫以及粉碎提取法所得的效果更為理想。

選擇HPLC法和凝膠色譜凈化測(cè)定法對(duì)食品中蘇丹紅的檢測(cè)，應(yīng)選取乙酸乙酯，也可用正乙烷∶環(huán)乙烷（1∶1）將蘇丹紅進(jìn)行提取，用凝膠色譜（GPC）將被測(cè)對(duì)象包含的分子量較大的油脂天然色素干擾物去除，然后采取HPLC進(jìn)行測(cè)量。

4 食品中抗氧化劑的檢驗(yàn)

抗氧化劑在食品中的作用是阻止氧氣和食品中接觸之后，食品將出現(xiàn)氧化變質(zhì)。如超出用量，就會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生后果。所以，一定要將抗氧化劑控制在規(guī)定的范圍之內(nèi)。

用油炸食品作為檢測(cè)對(duì)象時(shí)，檢測(cè)食品中的抗氧化劑含量，選擇RPHPLC法進(jìn)行檢測(cè)。其中，沒食子酸內(nèi)酯、叔丁基對(duì)苯二酯采取50%甲醇作為流動(dòng)相，羥基茴香醚、4-己基間苯二酚、2246和BHT用80%甲醇作流動(dòng)相，檢驗(yàn)的波長(zhǎng)是280 nm，相關(guān)系數(shù)是0.998 3～0.999 6，最低檢出限是1.0～2.0 μg/g，產(chǎn)生回收率平均在85%之上。選取基質(zhì)固相分散萃取植物油里的抗氧化劑BHT、羥基茴香醚、叔丁基對(duì)苯二酯和食子酸內(nèi)酯,采用高效相色譜法進(jìn)行分離；產(chǎn)生的結(jié)果顯示，運(yùn)用基質(zhì)固相分散技術(shù)，大大減少了有機(jī)溶劑的用量，并將分析時(shí)間縮短，同時(shí)將分析效率提高，回收率在85.8%～94.3%，最低檢出限是2 ng。

5 結(jié)語(yǔ)

高效液相色譜法具有定量精度高、靈敏度高等優(yōu)勢(shì)，目前在食品添加劑檢測(cè)工作中被廣泛運(yùn)用。