FAME試劑槽對(duì)兩家HBsAg ELISA試劑檢測結(jié)果的影響分析

劉玉強(qiáng)，謝 輝（開封市中心血站檢驗(yàn)科，河南475000）

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）具有操作簡單、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)，在臨床及血液安全篩查中得到廣泛應(yīng)用[1-3]。但在日常工作中常遇到假陽性率高、重復(fù)性不好等問題，原因是影響ELISA試劑檢測結(jié)果的因素很多[4-6]。本研究探討了全自動(dòng)酶免分析儀FAME試劑槽對(duì)兩家乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）ELISA試劑檢測結(jié)果的影響，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器 STAR全自動(dòng)加樣儀（瑞士HAMILTON公司）、FAME24/20全自動(dòng)酶免分析儀（瑞士HAMILTON公司）等。

1.1.2 試劑 4項(xiàng)混合質(zhì)控血清（康徹思坦公司，批號(hào)：201601002）、HBsAg ELISA試劑盒（北京萬泰公司生產(chǎn)，批號(hào)：B20151228；法國伯樂公司生產(chǎn)，批號(hào)：5L0207）、抗丙型肝炎病毒ELISA試劑盒（北京萬泰公司生產(chǎn)，批號(hào)：CS20151208，珠海麗珠公司生產(chǎn)，批號(hào)：2015121608）、抗人類免疫缺陷病毒ELISA試劑盒（珠海麗珠公司生產(chǎn)，批號(hào)：2015122308；法國伯樂公司生產(chǎn)，批號(hào)：5L0342）、抗梅毒螺旋體ELISA試劑盒（北京萬泰公司生產(chǎn)，批號(hào)：N20151222；珠海麗珠公司生產(chǎn)，批號(hào)：2015121908）等，試劑均在有效期內(nèi)使用。

1.2 方法 啟用新的FAME試劑槽后，對(duì)兩家HBsAg ELISA試劑進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控品檢測，每次檢測重復(fù)10次，計(jì)算檢測結(jié)果與臨界值比值（S/CO）均值，連續(xù)檢測5 d，記錄每天的S/CO均值，分析S/CO值變化趨勢。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料以率或構(gòu)成比表示，采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 兩家HBsAg ELISA試劑進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控品檢測結(jié)果比較 國產(chǎn)HBsAg ELISA試劑S/CO變異系數(shù)（CV）為10.5%（＜20.0%），符合實(shí)驗(yàn)室對(duì)批間變異的要求；進(jìn)口 HBsAg ELISA 試劑 S/COCV為 20.4%（＞20.0%），不符合實(shí)驗(yàn)室對(duì)批間變異的要求；FAME試劑槽對(duì)2家HBsAg ELISA試劑檢測結(jié)果的影響比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=5.21，P=0.025），見表 1。

表1 兩家HBsAg ELISA試劑進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控品檢測結(jié)果比較

2.2 兩家HBsAg ELISA試劑進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控品檢測結(jié)果趨勢性分析 國產(chǎn)HBsAg ELISA試劑S/CO沒有發(fā)生趨勢性變化，進(jìn)口HBsAg ELISA試劑S/CO發(fā)生逐漸降低的趨勢性變化。見圖1。

圖1 兩家HBsAg ELISA試劑進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控品檢測結(jié)果趨勢性分析

3 討 論

ELISA法檢測HBsAg因具有靈敏度高、特異性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)而被廣泛應(yīng)用，在日常工作中影響ELISA法檢測HBsAg的因素很多，HBsAg假陽性結(jié)果易給廣大獻(xiàn)血者造成極大的精神壓力，易引起獻(xiàn)血資源的流失[7]。但HBsAg假陰性結(jié)果卻給受血者帶來額外的痛苦。

全國采供血機(jī)構(gòu)為防止ELISA法檢測HBsAg假陰性結(jié)果，普遍選擇高靈敏度的HBsAg ELISA試劑，設(shè)置一定范圍的檢測灰區(qū)[8]或選擇靈敏度更高的核酸檢測，以進(jìn)一步提高血液檢測的安全性。

本研究探討了FAME試劑槽對(duì)兩家HBsAg ELISA試劑檢測結(jié)果的影響，結(jié)果顯示，國產(chǎn)HBsAg ELISA試劑連續(xù)5 d室內(nèi)質(zhì)控品檢測S/CO為3.65～4.88，CV為10.5%（＜20.0%），符合血站技術(shù)操作規(guī)程要求[9]，檢測結(jié)果在有效控制范圍內(nèi)。進(jìn)口HBsAg ELISA試劑室內(nèi)質(zhì)控品檢測S/CO由第1天的3.16逐漸降低至第5天的1.80，CV為20.4%（＞20.0%），超出血站技術(shù)操作規(guī)程要求，檢測結(jié)果出現(xiàn)失控，必須采取相應(yīng)措施進(jìn)行控制。FAME試劑槽對(duì)兩家HBsAg ELISA試劑檢測結(jié)果的影響比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。因此，為保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，進(jìn)口HBsAg ELISA試劑使用FAME試劑槽時(shí)應(yīng)及時(shí)更換，而國產(chǎn)HBsAg ELISA試劑使用FAME試劑槽時(shí)應(yīng)注意觀察室內(nèi)質(zhì)控檢測數(shù)據(jù)，如發(fā)生不可逆轉(zhuǎn)的趨勢性降低變化時(shí)再更換新的FAME試劑槽。

從圖1可見，國產(chǎn)HBsAg ELISA試劑在連續(xù)5 d檢測時(shí)間內(nèi)檢測結(jié)果沒有發(fā)生趨勢性變化，進(jìn)口HBsAg ELISA試劑在連續(xù)5 d檢測時(shí)間內(nèi)檢測結(jié)果呈逐漸降低的趨勢性變化。因此，為保證血液檢測質(zhì)量，對(duì)進(jìn)口試劑應(yīng)密切觀察檢測結(jié)果的趨勢性變化，及時(shí)更換FAME試劑槽，防止檢測結(jié)果出現(xiàn)失控；對(duì)國產(chǎn)試劑應(yīng)密切觀察室內(nèi)質(zhì)控圖，如發(fā)生不可逆轉(zhuǎn)的趨勢性降低變化時(shí)再更換FAME試劑槽。

綜上所述，在5 d檢測時(shí)間內(nèi)，F(xiàn)AME試劑槽對(duì)進(jìn)口HBsAg ELISA試劑影響隨檢測時(shí)間呈逐漸降低的趨勢性變化，第5天檢測結(jié)果已出現(xiàn)失控，必須采取有效措施進(jìn)行控制；而對(duì)國產(chǎn)HBsAg ELISA試劑影響隨檢測時(shí)間無趨勢性變化，5 d的檢測結(jié)果均在有效控制范圍內(nèi)；FAME試劑槽對(duì)進(jìn)口HBsAg ELISA試劑影響大于國產(chǎn)HBsAg ELISA試劑，對(duì)二者的影響存在顯著差異。因此，建議及時(shí)更換進(jìn)口HBsAg ELISA試劑的FAME試劑槽，對(duì)國產(chǎn)HBsAg ELISA試劑應(yīng)密切觀察室內(nèi)質(zhì)控變化趨勢，當(dāng)檢測結(jié)果發(fā)生趨勢性降低不可逆轉(zhuǎn)時(shí)分析其產(chǎn)生原因，采取糾正措施，確保檢測結(jié)果準(zhǔn)確性。目前，F(xiàn)AME檢測分析系統(tǒng)在全國采供血系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室得到廣泛應(yīng)用[10]，應(yīng)加強(qiáng)對(duì)全自動(dòng)檢測設(shè)備的維護(hù)，注重細(xì)節(jié)管理，避免因設(shè)備、耗材等原因?qū)z測結(jié)果造成影響，確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

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