ELISA法檢測乙肝兩對半常見影響因素和臨床意義分析

賈梓含

（阜康市中醫(yī)醫(yī)院 新疆 昌吉 831500）

在對乙肝患者進行檢測的過程中，乙肝兩對半是其檢測的重要的依據(jù)和指標。臨床中的檢測方法較為普及方法的即為酶聯(lián)免疫吸附實驗（簡稱ELISA），但由于這種方法所受到的影響因素較多，致使在檢測過程中對各項指標容易造成影響[1]。并且ELISA法對乙肝兩對半進行檢測的臨床意義重大，因此需要對這些影響因素進行克服。本次研究主要采取回顧分析法對我院2017年1月1日至今的8535例患者的樣本進行研究，現(xiàn)將研究分析做如下報告。

1.資料和方法

1.1 一般資料

選取我院2017年1月1日至今的8535例樣本作為研究對象。其中男性患者5254例，女性患者3281例，患者的年齡區(qū)間為25～67歲，平均年齡為（48.72±6.54）歲，對所有患者均進行采樣，并通過ELISA法對樣本進行檢測。

1.2 方法

在應(yīng)用ELISA法進行檢測的過程中，需要對其影響因素和臨床意義進行分析。具體分析如下：

（1）檢測前的影響因素分析

檢測前應(yīng)該對以下三個方面影響因素進行分析：首先，檢測樣本可能對檢測產(chǎn)生影響。樣本應(yīng)避免溶血，當紅細胞出現(xiàn)破裂后能夠?qū)⑦^氧化物釋放，并對酶活性物質(zhì)進行干擾，是受到干擾的酶活性物質(zhì)與顯色劑接觸之后形成顯色反應(yīng)。當血塊出現(xiàn)完全收縮的情況后，樣本中的活性物質(zhì)會失去活性，若在血液尚未凝固的情況下進行血清強行分離，則ELISA檢測過程中會觀察到纖維蛋白塊，從而容易導致假陽性的檢測結(jié)果，影響檢測的準確性；其次，試劑盒可能對檢測產(chǎn)生影響。在進行檢測之前，必須要確保試劑盒的質(zhì)量，其保存的環(huán)境應(yīng)該在3℃～7℃之間，在進行實驗檢測的過程中應(yīng)將其提前取出，使其在正常室溫狀態(tài)下存放30min后方可使用，若其穩(wěn)定性、精密度、靈敏度等方面存在問題，則會影響檢測的準確性；最后，檢驗人員的檢驗水平和技能也可能會對檢測結(jié)果造成影響[2]。

（2）檢測過程中存在的影響因素分析

在進行檢測過程中，可以從四個方面進行分析：首先，加樣過程中可能會對檢測結(jié)果造成影響，原因在于吸嘴不清潔以及吸量不準確；其次，溫育可能會對檢測結(jié)果產(chǎn)生影響，當樣本置入板孔后，容易出現(xiàn)邊緣效應(yīng)，并且還會出現(xiàn)內(nèi)部孔存在差異的現(xiàn)象，而干育則易出現(xiàn)周邊效應(yīng)，也就是中間孔的溫度與周邊孔的溫度形成差異，這樣就會導致檢測結(jié)果會受到升溫速率的影響而有失準確性。在實操過程中，應(yīng)該以水育的方法使反應(yīng)孔的底部與恒溫水進行接觸，使溫度保持平衡，降低因邊緣效應(yīng)造成的誤差率；第三，洗板過程中可能使檢測結(jié)果受到影響。在洗板過程中，可能會存在洗滌液出現(xiàn)污染的狀況，當存在污染時，洗板的效果便會受到影響，進而影響檢測的結(jié)果，因此，應(yīng)該保證洗板過程中使用新鮮蒸餾水或者是通過去離子水對洗滌液進行稀釋，以防止洗板過程中受洗滌液污染；第四，可能在顯色過程中使檢測產(chǎn)生影響。顯色為ELISA檢測法的最后步驟，在顯色過程中，可能會受到溫度、光線以及時間等方面的因素所影響，一般情況下，底物顯色應(yīng)該在37℃的環(huán)境下完成，并且時間需要控制在15～30min內(nèi)全部完成，而底物液在受到光線照射下會改變顏色，因此，顯色反應(yīng)應(yīng)該在避光的條件下來進行。

（3）檢測結(jié)果的研究過程的影響因素分析

對檢測結(jié)果進行有效的判斷需在一定時間和條件下完成，一般是在終止液加入之后的10min內(nèi)完成，其目的在于避免孔內(nèi)結(jié)晶的出現(xiàn)，從而影響檢測結(jié)果。

（4）臨床意義分析

通過對以上影響因素進行控制，能夠使ELISA法對乙肝兩對半的各項指標進行檢測的準確性得到保證，通過ELISA法能夠?qū)σ腋位颊叩年栃圆±磉M行有效的確認，并通過乙肝兩對半的相關(guān)指標使乙肝的臨床診斷和治療存在意義。

2.結(jié)果

通過ELISA法對8535例樣本的乙肝兩對半進行檢測，其中大三陽患者248例，約占2.9%；小三陽患者796例，約占9.3%；雙陽患者207例，約占2.4%。表明通過ELISA法對乙肝兩對半檢測出的各項指標對乙肝患者進行的診治具有有效的指導作用。

3.討論

乙肝是當今較為流行的一種傳染性疾病，通過使用ELISA法對乙肝兩對半進行檢測，能夠?qū)ζ涓黜椫笜撕完栃圆±靡詸z測，并且能夠?qū)颊叩牟〕踢M行監(jiān)測，因此這種檢測方法對患者的療效觀察能夠起到重要的作用，但在對ELISA法進行檢測的過程中，容易受到一些因素制約，例如上述研究所提及的樣本準備、檢驗操作人員的水平和技能、檢驗時所遵循的規(guī)范和標準以及對檢驗結(jié)果的研究等方面因素都會對檢測結(jié)果造成影響，因此，需要通過采取必要的手段對這些影響因素進行預防，從而使ELISA法檢測能夠真正發(fā)揮其臨床檢測意義。

通過ELISA法對8535例樣本的乙肝兩對半進行檢測，其中大三陽患者248例，約占2.9%；小三陽患者796例，約占9.3%；雙陽患者207例，約占2.4%，可見檢測的效果較為顯著，因此，ELISA檢測法可以在臨床及檢測中推廣。

[1]陶麗娜.用ELISA法檢測乙肝兩對半準確性的影響因素探討[J].中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用，2017，11（9）：49-51.

[2]王慧玲.探討ELISA法檢測乙肝兩對半常見影響因素[J].中國保健營養(yǎng)，2016，26（25）：326-327.