江蘇省5種冷背藥材的顯微鑒別研究

王亞瓊 張華鋒 周 堅 顧炳仁

（蘇州市藥品檢驗檢測研究中心，江蘇蘇州215104）

冷背藥材，是指那些不常用或用量較小的藥材品種。在我國，植物、動物、礦石等來源藥材已達(dá)萬余個品種，而常用的藥材品種僅有數(shù)百個。冷背藥材品種繁多，采購困難，大部分需要自己采集。近幾年來，隨著人們保健意識的增強以及信息化產(chǎn)業(yè)的高速發(fā)展，越來越多的冷背藥材逐步得到開發(fā)利用，逐漸從冷背的后臺走向市場。本研究所選擇的藥材是在修訂《江蘇省中藥飲片炮制規(guī)范》的過程中發(fā)現(xiàn)并加以研究的一些冷僻品種，觀察了它們的顯微特征，現(xiàn)報道如下。

1 材料

1.1 儀器 DFY-300粉碎機（溫嶺市林大機械有限公司）；標(biāo)準(zhǔn)藥篩（遼寧省遼陽金屬制品廠）；電熱恒溫水浴鍋（上海躍進(jìn)醫(yī)療器械有限公司）；冰凍切片機CM1860（Leica，Genmany）；顯微鏡BX43（OLYMPUS，Japan）。

1.2 試劑 甘油、水合氯醛、乙醇均為分析純，購自國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

1.3 藥材 木槿皮、川桐皮、草大戟、香樟木、接骨木每個品種收集至少3批，主要為江蘇省內(nèi)飲片廠家提供，并自采原藥材1～2批為輔助參考，由蘇州市藥品檢驗檢測研究中心中藥室主任張華鋒鑒定。各檢測藥材樣品來源與批號見表1。

2 方法

2.1 橫切片樣品制備及觀察 將樣品泡水軟化后，切成小塊，用冷凍膠固定，置冰凍切機切片。將切好的片純水沖洗，滴加水合氯醛試液3～5滴，加熱透化后置顯微鏡下，由低倍到高倍進(jìn)行觀察，并拍照記錄。

2.2 粉末樣品制備及觀察 取樣品粉末適量，滴加水合氯醛試液3～5滴，加熱透化后置顯微鏡下，由低倍到高倍進(jìn)行觀察，并拍照記錄。

表1 5種江蘇省冷背藥材檢測樣品來源

3 結(jié)果

3.1 木槿皮 為錦葵科植物木槿Hibiscus syriacus L.的干燥樹皮。春、夏二季剝?nèi)?，曬干?/p>

3.1.1 性狀 多呈槽狀或單筒狀，長短不一，厚約1mm。外表面青灰白色或灰褐色，有彎曲的縱皺紋及點狀小突起（皮孔）；內(nèi)表面淡黃白色，光滑，有細(xì)縱紋。質(zhì)韌，斷面強纖維性。氣微，味淡。

3.1.2 顯微鑒別 橫切面：木栓層由數(shù)十列不規(guī)則長方形細(xì)胞構(gòu)成，栓內(nèi)層窄。韌皮部占大部分，中柱鞘纖維呈束狀，在韌皮部外層斷續(xù)排列呈橫帶狀。初生射線向外呈喇叭狀，或瓶嘴狀，射線中散有眾多草酸鈣簇晶。

粉末灰白色。纖維成束，紋孔細(xì)小，圓形或斜縫狀，直徑5～31μm。草酸鈣簇晶眾多，直徑16～65μm，棱角鈍尖。木栓細(xì)胞淡黃棕色或近無色，表面觀呈類方形、類長方形或類多角形，壁稍厚，微彎曲。見圖1。

圖1 木槿皮顯微特征

3.2 川桐皮（刺楸） 為五加科植物刺楸Kalopanax septemlobus（Thumb.）Koidz.的干燥樹皮。初夏剝?nèi)∮嗅敶痰臉淦?，曬干?/p>

3.2.1 性狀 呈絲或塊狀。外表面黑褐色或灰褐色，有的可見破碎的釘刺，內(nèi)表面淡黃棕色至黃棕色。質(zhì)脆，斷面纖維性，略呈層片狀。氣微，味微辛，略有麻舌感。

3.2.2 顯微鑒別 橫切面：木栓層由數(shù)十列細(xì)胞組成，細(xì)胞類長方形，壁略增厚。較老的樹皮外側(cè)為落皮層，由木栓細(xì)胞環(huán)帶組成。釘刺部位基部為徑向延長的木化細(xì)胞，邊緣及尖部有纖維束。皮層較窄，有石細(xì)胞、簇晶散在。韌皮部較寬，纖維束環(huán)帶可達(dá)十?dāng)?shù)列，射線寬1～3列細(xì)胞，韌皮薄壁細(xì)胞也含有眾多草酸鈣結(jié)晶。

粉末灰棕色。草酸鈣簇晶眾多，直徑14～163μm，以50μm以上的多見，有的棱角寬大或帶方形，也有簇晶和方晶合生。草酸鈣方晶大小不一，直徑12～85μm。韌皮纖維較多，成束或單個散在，末端鈍圓，壁厚，木化，孔溝明顯，胞腔狹細(xì)。直徑16～77μm。釘刺中纖維壁厚，木化，孔溝一般不明顯，直徑18～57μm。石細(xì)胞呈類長圓形、類長方形或紡錘形，直徑35～55μm。分泌道多破碎，含細(xì)小油滴。木栓細(xì)胞無色或淡棕色，表面觀類長方形或類多角形。見圖2。

3.3 草大戟 為豆科植物美麗胡枝子Lespedeza formosa（Vog.）Koehne的干燥根皮。夏、秋兩季挖取根部，剝?nèi)「?，洗凈，曬干?/p>

3.3.1 性狀 呈卷筒狀或半卷筒段狀，厚0.1～0.5cm。外表皮灰棕色至棕褐色，粗糙，栓皮較疏松，易脫落。內(nèi)表皮紅棕色至暗棕色，具細(xì)縱紋。質(zhì)韌，不易折斷，斷面纖維性。氣微，味淡、微澀。

3.3.2 顯微鑒別 橫切面：木栓層為數(shù)列細(xì)胞，含紅棕色物，栓內(nèi)層窄，皮層和韌皮部散在大量晶纖維群和紅棕色分泌物，射線寬1～5列細(xì)胞。

粉末棕紅色。纖維成束或離散，細(xì)長，直徑10～20μm。纖維周圍薄壁細(xì)胞含草酸鈣方晶，形成晶纖維；草酸鈣方晶多見，呈菱形、方形或多面體，存在于薄壁細(xì)胞中。木栓細(xì)胞類長方形，內(nèi)含紅棕色物。見圖3。

圖3 草大戟顯微特征

3.4 香樟木 為樟科植物樟Cinnamomum camphora（L.）Presl.的干燥木材。鋸下樹干，砍、劈成小塊曬干。市場上多以帶皮藥材砍伐，混有皮部，而皮部的顯微特征最為特別。

3.4.1 性狀 為形狀、大小不一的木塊，表面紅棕色或暗棕色，橫斷面可見年輪，縱斷面有縱直走向的條紋。質(zhì)堅體輕。有特異的樟腦香氣，味微苦而辛涼。

3.4.2 顯微鑒別 橫切面：木栓層由數(shù)十列細(xì)胞組成，細(xì)胞類長方形，壁略增厚，有石細(xì)胞散在，在靠近皮層內(nèi)側(cè)有石細(xì)胞環(huán)帶。皮層較窄，有纖維和石細(xì)胞散在。韌皮部纖維極多，斷續(xù)數(shù)十列，石細(xì)胞群散在。韌皮部射線1～2列細(xì)胞。韌皮薄壁細(xì)胞和射線細(xì)胞中含棕色物。木質(zhì)部寬廣，木射線寬1～2列細(xì)胞。導(dǎo)管類圓形或圓多角形，有的含棕色樹脂。木纖維類圓形，壁稍厚，木化。

粉末黃棕色，韌皮纖維多數(shù)，胞腔狹小，孔溝不明顯，壁略波狀彎曲，直徑17.8～48.5μm，長123.7～722.6μm。石細(xì)胞單個或成群，類方形，類長方形，類三角形，不規(guī)則長條狀，直徑21～59.8μm，長至184.5μm。淀粉粒類圓形，臍點點狀、星狀、人字狀，3復(fù)粒偶見，直徑4.0～22.1μm。木纖維成束，無色，木化，胞腔線形，直徑7.8～23μm。導(dǎo)管主要為具緣紋孔導(dǎo)管，直徑74～195μm。分泌物黃棕色。見圖4。

圖4 香樟木顯微特征

3.5 接骨木 為忍冬科植物接骨木Sambucus williamsii Hance的干燥莖枝。全年可采收，干燥。

3.5.1 性狀 莖呈圓柱形，長15～35cm，直徑1～5cm。表面黃棕色、灰褐色或綠褐色，有縱裂紋及多數(shù)圓點狀皮孔。質(zhì)堅硬，不易折斷，斷面不平坦，皮部薄，木部黃白色至黃色，髓部疏松，呈棕黃色海綿狀。氣微，味淡。

3.5.2 顯微鑒別 莖橫切面：木栓層由10余列細(xì)胞組成。皮層由數(shù)層橢圓形薄壁細(xì)胞組成，內(nèi)側(cè)散在有纖維束，有的斷續(xù)呈環(huán)，韌皮部薄壁細(xì)胞含草酸鈣砂晶，形成層明顯，木質(zhì)部寬廣。髓部細(xì)胞含紅棕色分泌物。

粉末淡黃色。分泌道紅棕色，直徑32.4～77.1μm。砂晶散在薄壁細(xì)胞中。木栓細(xì)胞類長方形，木化。皮層纖維長條形，平直，腔體寬大，直徑16.2～38.9μm。木纖維長條形，直徑10.2～25.8μm，夾有射線細(xì)胞。導(dǎo)管多為具緣紋孔導(dǎo)管，直徑15.5～30.7μm。見圖5。

圖5 接骨木顯微特征

4 討論

隨著數(shù)碼成像技術(shù)的發(fā)展，各種組織、粉末的顯微特征不再以墨線圖的形式出現(xiàn)，而是以彩色圖片的形式更加形象、真實地呈現(xiàn)。同時隨著各種智能化儀器和新技術(shù)的使用，也為顯微鑒別工作打開了新的局面[1-2]。本研究采用冰凍切機切片，直接水合氯醛透化觀察橫切面的特征，為細(xì)胞后含物的保存提供了保證，避免了傳統(tǒng)石蠟切片工藝復(fù)雜，細(xì)胞形態(tài)改變和后含物易丟失的缺點。

木槿皮、川桐皮、草大戟、香樟木、接骨木5種藥材飲片，在不同省份有的有著不同的來源，有的有著不同的藥用部位。本研究主要以《江蘇省中藥飲片炮制規(guī)范》[3-4]記載來源為準(zhǔn)，收集藥材，進(jìn)行顯微鑒別研究。

木槿皮雖然為樹皮，但在飲片外觀上卻與杜仲、肉桂、厚樸等樹皮類藥材相差甚遠(yuǎn)，更易與土荊皮、五加皮、香加皮混淆。從顯微特征上看，木槿皮的初生射線形狀特殊，并含有大量草酸鈣簇晶是鑒別要點，而土荊皮可見大量的黏液細(xì)胞，可見石細(xì)胞和樹脂細(xì)胞，五加皮的顯微特征為大量的樹脂道和草酸鈣簇晶，香加皮則含有乳汁管和草酸鈣方晶[5-7]。川桐皮在飲片外觀上，大型的釘刺很容易辨別，但飲片切制大小不一，釘刺也易脫落。川桐皮的顯微特征鑒別點在于韌皮部十?dāng)?shù)列的纖維束環(huán)帶，以及大型的簇晶和方晶合生草酸鈣結(jié)晶。草大戟在飲片外觀上和地骨皮較為類似，但地骨皮的顯微特征為大量的砂晶，草大戟為大量的晶纖維和紅棕色的分泌物。京大戟含草酸鈣簇晶，紅大戟含草酸高針晶，紫丹參無結(jié)晶類后含物[8]。香樟木在多省市的地方標(biāo)準(zhǔn)中多為去皮的木材[4-9]，但實際飲片市場上以帶皮多見，且皮部和近皮處的樹脂量較心材處多。香樟木的鑒別點主要在于樹皮部位，木栓層內(nèi)側(cè)有石細(xì)胞環(huán)帶，韌皮部有斷續(xù)數(shù)十列纖維群及石細(xì)胞群。接骨木的鑒別點與《中華本草》資料有所差別，《中華本草》記載其皮層有網(wǎng)狀增厚的細(xì)胞群，韌皮部有紅棕色物質(zhì)[10]，但在收集的3批飲片以及江蘇地區(qū)采集的3批原藥材中均未發(fā)現(xiàn)網(wǎng)狀增厚的細(xì)胞群，韌皮部也未發(fā)現(xiàn)紅棕色物質(zhì)，卻在髓部發(fā)現(xiàn)紅棕色分泌道。推測接骨木的莖枝結(jié)構(gòu)可能存在地區(qū)差異，或者不同生長階段有著不同的特征，還需要進(jìn)一步研究加以確證。

冷背藥材由于使用量少，關(guān)注度低，文獻(xiàn)資料偏少，甚至沒有?，F(xiàn)在隨著冷背藥材逐漸走向市場，易出現(xiàn)混偽品，因此對冷背藥材進(jìn)行生藥學(xué)鑒別的研究迫在眉睫。本研究對江蘇省內(nèi)5種冷背藥材進(jìn)行了顯微特征研究，找到各自的顯微特征點，為今后的生藥學(xué)鑒別和混偽品的區(qū)分提供參考。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典中藥材顯微鑒別圖鑒[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2009：3.

[2]龍芳，李會軍，李萍.新技術(shù)和新方法在中藥性狀與顯微鑒別中的應(yīng)用[J].中國中藥雜志，2012，37（8）：1076.

[3]江蘇省藥品監(jiān)督管理局.江蘇省中藥飲片炮制規(guī)范（2002年版）[M].南京：江蘇科學(xué)技術(shù)出版社，2002：154，161，164，165.

[4]江蘇省藥品監(jiān)督管理局.江蘇省中藥飲片炮制規(guī)范（1980年版）[M].南京：江蘇科學(xué)技術(shù)出版社，1980：145.

[5]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：一部[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015：66，124，257.

[6]趙中振，陳虎彪.中藥顯微鑒定圖典[M].福建：福建科學(xué)出版社，2016：232.

[7]肖耀軍.木槿皮、川槿皮、紫荊皮和土荊皮的鑒別使用[J].北京中醫(yī)藥，2012，31（9）：710.

[8]馬立軍.京大戟、紅大戟、草大戟的鑒別[J].基層中藥雜志，2000（5）：29.

[9]上海市食品藥品監(jiān)督管理局.上海市中藥飲片炮制規(guī)范[M].上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2008：397.

[10]國家中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會.中華本草[M].上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社，1999：545.