北京地區(qū)貓杯狀病毒和皰疹病毒流行病學(xué)調(diào)查

許楚楚 ， 胡士玲,2 ， 陳宋杰 ， 劉辰光 ， 劉 洋 ， 呂艷麗,2

(1.中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)院 ， 北京 海淀 100193 ； 2.中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院 ， 北京 海淀 100193)

貓上呼吸道感染(Upper respiratory tract disease, URTD)是貓常見的臨床問題，導(dǎo)致該癥狀的病原有很多，主要的病原是貓皰疹病毒(Felineherpesvirus, FHV)和貓杯狀病毒(Felinecalicivirus, FCV)。其他病原，包括支氣管敗血波氏桿菌和衣原體的感染也會造成貓的上呼吸道感染，但衣原體主要造成結(jié)膜感染[1-2]。FHV和FCV均為貓上呼吸道感染的重要病原。FHV通常造成上呼吸道和眼部癥狀，其中，角膜樹突狀潰瘍是這種感染的特征性癥狀[3]。FCV會造成急性的口腔和上呼吸道癥狀，有口腔潰瘍的貓通常提示有FCV感染，F(xiàn)CV感染也有可能導(dǎo)致貓出現(xiàn)跛行的癥狀[4]。

盡管針對預(yù)防FHV和FCV的疫苗(貓三聯(lián)疫苗)已經(jīng)普遍在幼貓中使用，但這兩種病毒仍然在貓中流行。一些研究顯示，F(xiàn)CV和FHV的感染風(fēng)險與貓的性別、年齡、品種有關(guān)[5]。本文對北京地區(qū)來中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)院就診的412例存在URTD并做FCV和FHV病原檢查的病例進(jìn)行回顧性調(diào)查，以明確FCV和FHV可能的感染風(fēng)險因素，為預(yù)防個體家養(yǎng)貓發(fā)生FHV和FCV感染及相關(guān)疾病的臨床診治提供參考。

1 材料與方法

1.1 樣本來源 本研究412例樣本來自于2015年1月至2017年2月來中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)院就診的有上呼吸道癥狀的患貓。患貓主要表現(xiàn)為打噴嚏、鼻分泌物增多、眼分泌物增多、結(jié)膜炎、呼吸困難、咳嗽、多涎和口腔潰瘍等其中的1個或多個臨床癥狀。部分患貓同時具有厭食和/或發(fā)熱等臨床表現(xiàn)。

1.2 樣本采集 采集具有上述呼吸道癥狀的患貓的眼、鼻和咽拭子用于FHV 和FCV的檢測。取無菌棉拭子采集咽部分泌物、眼結(jié)膜分泌物和鼻分泌物，將分泌物拭子放于裝有0.5 mL的滅菌磷酸鹽緩沖液的離心管中，充分混合， 4 ℃保存，24 h之內(nèi)完成檢測。

1.3 檢測方法 本研究的所有樣本檢測均采用PetNAD 貓卡里西病毒檢測套組和PetNAD 貓皰疹病毒檢測套組提供的試劑，按照PetNAD 寵物診間核酸檢測系統(tǒng)(金瑞鴻捷生物技術(shù)有限公司，廈門)流程提取核酸，與引物混合，上機檢測。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計 計算FCV和FHV的陽性率；用二元邏輯回歸分析(SPSS 19.0)方法分析不同性別、年齡和品種貓發(fā)生病毒感染的發(fā)生率和風(fēng)險因素；用Fisher精確試驗方法(SPSS 19.0)分析FCV和FHV陽性病例不同癥狀的發(fā)生率和風(fēng)險因素。

2 結(jié)果

2.1 FCV和FHV混合感染和單獨感染在貓上呼吸道疾病的發(fā)生率 對FCV陽性和FHV陽性的樣本數(shù)量及FCV和FHV感染在貓呼吸道疾病中的發(fā)生率進(jìn)行統(tǒng)計(表1)。結(jié)果顯示，在412份被檢樣本中，F(xiàn)CV和/或FHV感染病例占被檢總樣本數(shù)的60.2%， FHV單一感染在檢測FHV的病例中發(fā)生率為26.3%，F(xiàn)CV單一感染在檢測FCV的病例中發(fā)生率為46.3%，F(xiàn)HV和FCV混合感染在FCV和FHV同時檢測的病例中發(fā)生率為11.8%。

表1 FHV和FCV的檢出率

2.2 FCV和FHV感染在不同性別、年齡、品種貓的發(fā)生率 對不同性別、年齡、品種的貓FHV和FCV發(fā)生率進(jìn)行統(tǒng)計，利用二元邏輯回歸分析統(tǒng)計了各個因素對于FHV和FCV感染的優(yōu)勢比(Odd Ratio，OR)和顯著性(P)的影響(表2和表3)。在邏輯回歸分析中，將每組的最后指標(biāo)作為參考分類(OR=1.0)，OR>1或OR<1的意義是該因素和參考因素相比的風(fēng)險大小。每種因素對于疾病的相關(guān)性通過P值評估。統(tǒng)計結(jié)果顯示，家養(yǎng)長毛貓與FHV感染呈顯著正相關(guān)(P<0.05，OR=3.25)，波斯血統(tǒng)貓與FHV感染呈顯著負(fù)相關(guān)(P<0.05，OR=0.32)。其余因素與FCV或FHV感染均無顯著相關(guān)性(P>0.05)。

表2 不同性別、年齡、品種的貓FHV感染的發(fā)生率和風(fēng)險評估

表3 不同性別、年齡、品種的貓FCV感染的發(fā)生率和風(fēng)險評估

2.3 FHV和FCV感染引起的不同上呼吸道癥狀的發(fā)生率和風(fēng)險評估 對FHV和FCV感染引起的常見呼吸道癥狀的發(fā)生率進(jìn)行了統(tǒng)計和風(fēng)險評估(表4)。其中OR值代表該癥狀在疾病中發(fā)生的風(fēng)險，其結(jié)果的評估需結(jié)合P值。從統(tǒng)計結(jié)果可知，打噴嚏和口腔潰瘍與FCV感染呈顯著相關(guān)(P<0.05)，其他癥狀與FCV或FHV感染均無顯著相關(guān)性。

表4 FHV和FCV感染不同上呼吸道癥狀的發(fā)生率和風(fēng)險評估

3 討論

本文首次對北京地區(qū)貓FCV和FHV的感染情況進(jìn)行統(tǒng)計分析。在其他國家和地區(qū)已經(jīng)有FCV和FHV感染的相關(guān)的統(tǒng)計報道。Mireia Fernandez[6]等人2016年對西班牙地區(qū)有呼吸道癥狀和沒有癥狀的貓進(jìn)行FHV的篩查，結(jié)果顯示，F(xiàn)HV的發(fā)生率為18.5%。在其他調(diào)查中，由于調(diào)查對象的飼養(yǎng)環(huán)境和貓的臨床狀態(tài)不同，F(xiàn)HV的發(fā)病率的變化范圍也很大，在日本[7]、美國[8]、澳大利亞[9]和意大利[10]等國家對家養(yǎng)有臨床癥狀的貓調(diào)查中FHV的陽性率從4.5%到76.3%。本研究中FHV的發(fā)生率為26.3%，相對其他研究較低。對于FHV的檢測要考慮到FHV是間歇排毒，并且大多數(shù)情況下是潛伏在三叉神經(jīng)，所以有時很難用PCR的方法檢測到[1]。對于FCV的發(fā)病率，之前有0%到29%不同的報道[11-13]。本研究中FCV的感染率高達(dá)46.3%，可能由于試驗選取的樣本均為有呼吸道癥狀的貓，病毒感染的幾率較大。本調(diào)查中，出現(xiàn)呼吸道癥狀的貓檢出FCV和/或FHV的比率高達(dá)60.2%，這一方面表明患有上呼吸疾病的貓感染FCV或FHV的風(fēng)險極高，另一方面提示，具有呼吸道癥狀的貓除了感染FHV和/或HCV外，尚有40%的病貓是有其他病原或病因引起的。因此，對于有呼吸道癥狀的貓，排查FHV和FCV是鑒別呼吸道致病微生物的較為有效的手段。

本研究中，不同性別的貓對于FHV和FCV單獨或混合感染均無顯著相關(guān)性。有的研究發(fā)現(xiàn)，未去勢的公貓呼吸道疾病和病毒感染的風(fēng)險更高，這個結(jié)果可能的原因是公貓更易外出，與病原的接觸機會較多[14-15]。但對于嚴(yán)格在室內(nèi)生活的貓的研究中，沒有發(fā)現(xiàn)性別和病毒感染存在相關(guān)性[6]。對于各個年齡段的貓對FCV和FHV的易感性，本研究沒有顯示出相關(guān)性。在其他大部分研究中，幼齡貓和老年貓由于抵抗力下降，可能有更高的上呼吸道疾病的發(fā)生率[5,16]。但對于FHV和FCV的感染，Jane E.Sykes等人和本研究的類似，沒有發(fā)現(xiàn)FHV對于不同年齡段患貓的感染有顯著差異[17]。以往我們對FCV和FHV的印象可能是幼年貓的發(fā)生率更高，是因為幼年貓發(fā)生上呼吸道疾病的數(shù)量較多，造成臨床上的誤解。所以在診斷上呼吸道疾病時，成年貓有呼吸道癥狀時，也應(yīng)把病毒感染考慮進(jìn)去。對于不同品種的貓發(fā)生上呼吸道疾病的風(fēng)險，有報道稱純種貓不易感染FHV，但是在一些研究中發(fā)現(xiàn)純種貓在貓舍的環(huán)境中接觸病原的機會少，使得它們在主人飼養(yǎng)之后有更高的發(fā)病風(fēng)險，在應(yīng)激或更換環(huán)境后也有更高的復(fù)發(fā)風(fēng)險[18-19]。本研究結(jié)果顯示，家養(yǎng)長毛貓與FHV的感染呈顯著正相關(guān)，可能與中國北京地區(qū)飼養(yǎng)貓的品種傾向性有關(guān)。 有文獻(xiàn)報道，波斯血統(tǒng)貓易發(fā)生呼吸道疾病，波斯血統(tǒng)貓包括加菲，布偶，喜馬拉雅，金吉拉等品種，它們的主要特點是短頭顱，但還沒有報道短頭顱的貓和病毒感染有相關(guān)性[20]。本研究中發(fā)生FHV感染和波斯血統(tǒng)貓呈顯著負(fù)相關(guān)，表明波斯血統(tǒng)貓發(fā)生上呼吸道感染患貓較多，但病毒感染的比例較少，對于波斯貓這種短頭顱品種發(fā)生呼吸道癥狀除了病毒原因外應(yīng)注意排查其他可能因素。

有較多關(guān)于FCV和FHV感染的臨床癥狀的報道，其中打噴嚏是兩種病毒感染最常發(fā)的癥狀，其次是眼鼻分泌物、角膜炎和咳嗽[21]。對于FHV感染，經(jīng)常發(fā)生的是鼻腔黏膜和眼角膜表面的侵蝕和潰瘍，這會導(dǎo)致打噴嚏，眼鼻分泌物增多的臨床表現(xiàn)[22]。本研究中，各個癥狀和FHV的發(fā)生沒有顯著相關(guān)性，但發(fā)生打噴嚏癥狀的貓發(fā)生率和數(shù)量都相對較高。FCV感染時，除了會伴發(fā)一些常見的上呼吸道癥狀，如打噴嚏、眼鼻分泌物增多等，還有報道稱會出現(xiàn)明顯的口腔、齒齦或舌部的潰瘍[23]。本研究中，F(xiàn)CV感染和打噴嚏、口腔潰瘍顯著相關(guān)，和文獻(xiàn)報道一致。FCV感染后病毒會在口腔上皮中復(fù)制，從而導(dǎo)致口腔、齒齦、舌部的潰瘍，這是區(qū)分FHV感染和FCV感染的主要特征[24]。其他癥狀中，有報道咳嗽更常見于FHV感染，但是咳嗽也是其他感染，比如支氣管敗血波氏桿菌感染的主要癥狀，本研究對于有呼吸道癥狀的貓沒有排查其他原因，一些混合癥狀可能伴隨其他因素的感染，應(yīng)注意其鑒別診斷。

針對貓FHV和FCV感染，還存在其他風(fēng)險因素，比如免疫情況，是否有外出的生活習(xí)慣，家中是否有其他貓和動物等等。由于臨床病例信息條件所限，無法進(jìn)行這些信息的詳細(xì)調(diào)查，下一步研究應(yīng)該針對這些因素進(jìn)行調(diào)查，并且對引起上呼吸道疾病的其他病原(支原體，衣原體)開展檢測。從而對貓上呼吸道感染的風(fēng)險因素進(jìn)行更全面的評估。

4 結(jié)論

本調(diào)查首次對北京地區(qū)貓上呼吸道FCV和FHV感染做了調(diào)查。結(jié)果顯示，北京地區(qū)貓的上呼吸道FCV和FHV感染率較高，同時DLH較易發(fā)生FHV感染，波斯血統(tǒng)貓發(fā)生上呼吸道癥狀可能與病毒感染相關(guān)性不大。也顯示出FCV感染的癥狀與打噴嚏和口腔潰瘍相關(guān)。為進(jìn)一步研究病毒在貓上呼吸道感染所起作用提供理論基礎(chǔ)。

[1] Binns S, Dawson S, Speakman A,etal. A study of feline upper respiratory tract disease with reference to prevalence and risk factors for infection with feline calicivirus and feline herpesvirus[J].Journal of feline medicine and surgery, 2000, 2(3): 123-133.

[2] Cohn L A. Feline respiratory disease complex[J]. Veterinary Clinics of North America: Small Animal Practice, 2011, 41(6): 1 273-1 289.

[3] Thiry E, Addie D, Belák S,etal. Feline herpesvirus infection ABCD guidelines on prevention and management[J]. Journal of feline medicine and surgery, 2009, 11(7): 547-555.

[4] Radford A D, Addie D, Belák S,etal. Feline calicivirus infection ABCD guidelines on prevention and management[J]. Journal of feline medicine and surgery, 2009, 11(7): 556-564.

[5] Helps C R, Lait P, Damhuis A,etal. Factors associated with upper respiratory tract disease caused by feline herpesvirus, feline calicivirus, Chlamydophila felis and Bordetella bronchiseptica in cats: experience from 218 European catteries[J]. Vet Rec, 2005, 156(21): 669-673.

[6] Fernandez M,Manzanilla E G,Lloret A,etal. Prevalence of feline herpesvirus-1, feline calicivirus, Chlamydophila felis and Mycoplasma felis DNA and associated risk factors in cats in Spainwith upper respiratory tract disease, conjunctivitis and/or gingivostomatitis[J]. J Feline Med Surg,2016.

[7] Cai Y,Fukushi H,Koyasu S,etal. An etiological investigation of domestic cats with conjunctivitis and upper respiratory tract disease in Japan[J]. Journal of Veterinary Medical Science,2002, 64(3): 215-219.

[8] Nasisse M P,Glover T L,Moore C P,etal. Detection of feline herpesvirus 1DNA in corneas of cats with eosinophilic keratitis or corneal sequestration[J]. Journal of Small Animal Practice, 1998,59(7): 856-858.

[9] Sykes J E,Allen J L,Studdert V P,etal. Detection of feline calicivirus, feline herpesvirus 1 and Chlamydia psittaci mucosal swabs by multiplex RT-PCR/PCR[J]. Veterinary Microbiology, 2001,81(2): 95-108.

[10] Rampazzo A,Appino S,Pregel P,etal. Prevalence of Chlamydophila felis and feline herpesvirus 1 in cats with conjunctivitis in northern Italy[J]. Journal of veterinary internal medicine,2003, 17(6): 799.

[11] Belgard S,Truyen U,Thibault J C,etal. Relevance of feline calicivirus, feline immunodeficiency virus, feline leukemia virus, feline herpesvirus and Bartonella henselae in cats withchronic gingivostomatitis[J]. Berl Munch Tierarztl Wochenschr, 2010, 123(9-10): 369-376.

[12] Henzel A,Brum M C,Lautert C,etal. Isolation and identification of feline calicivirus and feline herpesvirus in Southern Brazil[J]. Braz J Microbiol, 2012, 43(2): 560-568.

[13] Quimby J M,Elston T,Hawley J,etal. Evaluation of the association of Bartonella species, feline herpesvirus 1, feline calicivirus, feline leukemia virus and feline immunodeficiency virus with chronic feline gingivostomatitis[J]. J Feline Med Surg, 2008, 10(1): 66-72.

[14] Dinnage J D,Scarlett J M, Richards J R.Descriptive epidemiology of feline upper respiratory tract disease in an animal shelter[J]. J Feline Med Surg, 2009, 11(10): 816-825.

[15] Wong W T,Kelman M, Ward M P. Surveillance of upper respiratory tract disease in owned cats in Australia, 2009-2012[J]. Prev Vet Med, 2013, 112(1-2): 150-155.

[16] Edwards D S, Coyne K, Dawson S,etal. Risk factors for time to diagnosis of feline upper respiratory tract disease in UK animal adoption shelters[J]. Prev Vet Med, 2008, 87(3-4): 327-339.

[17] Sykes J E,Anderson G A,Studdert V P,etal. Prevalence of feline Chlamydia psittaci and feline herpesvirus 1 in cats with upper respiratory tract disease[J]. J Vet Intern Med, 1999, 13(3):153-162.

[18] Pedersen N C,Sato R,Foley J E,etal. Common virus infections in cats, before and after being placed in shelters, with emphasis on feline enteric coronavirus[J]. J Feline Med Surg, 2004, 6(2): 83-88.

[19] Bannasch M J, Foley J E. Epidemiologic evaluation of multiple respiratory pathogens in cats in animal shelters[J]. J Feline Med Surg, 2005, 7(2): 109-119.

[20] Ginn J A,Kumar M S,McKiernan B C,etal. Nasopharyngeal turbinates in brachycephalic dogs and cats[J]. J Am Anim Hosp Assoc, 2008, 44(5): 243-249.

[21] Cohn L A. Feline respiratory disease complex[J]. Vet Clin North Am Small Anim Pract, 2011, 41(6): 1 273-1 289.

[22] Maggs D J. Update on pathogenesis, diagnosis, and treatment of feline herpesvirus type 1[J]. Clin Tech Small Anim Pract, 2005, 20(2): 94-101.

[23] Addie D D,Radford A,Yam P S,etal. Cessation of feline calicivirus shedding coincident with resolution of chronic gingivostomatitis in a cat[J]. J Small Anim Pract, 2003, 44(4): 172-176.

[24] Lommer M J, Verstraete F J. Concurrent oral shedding of feline calicivirus and feline herpesvirus 1 in cats with chronic gingivostomatitis[J]. Oral Microbiol Immunol, 2003, 18(2): 131-134.