1-脫氧野尻霉素對(duì)肥胖小鼠脂代謝的影響及機(jī)理

王 玲，曾藝濤，黃先智，丁曉雯,*

（1.西南大學(xué)食品科學(xué)學(xué)院，重慶 400716；2.家蠶基因組生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，重慶 400716）

1-脫氧野尻霉素對(duì)肥胖小鼠脂代謝的影響及機(jī)理

王 玲1，曾藝濤1，黃先智2，丁曉雯1,*

（1.西南大學(xué)食品科學(xué)學(xué)院，重慶 400716；2.家蠶基因組生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，重慶 400716）

探究1-脫氧野尻霉素（1-deoxynojirimycin，DNJ）對(duì)營養(yǎng)性肥胖的脂代謝調(diào)控作用及其途徑，旨在為開發(fā)DNJ降糖、降脂減肥產(chǎn)品提供依據(jù)。通過飼喂高脂飼料建立肥胖小鼠模型，之后喂食普通飼料40 d，同時(shí)實(shí)驗(yàn)組灌胃不同劑量（8.0、4.0、2.0 mg/（kg·d），以體質(zhì)量計(jì)）DNJ，用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）法測(cè)定小鼠的血脂水平、脂肪細(xì)胞因子、脂肪酸合成及氧化過程中相關(guān)酶活力。結(jié)果顯示，與陰性對(duì)照組比較，在8.0 mg/（kg·d）劑量組中DNJ可使雌、雄鼠體質(zhì)量分別下降9.06%、14.07%，肝脂含量分別下降4.13%、27.82%，腹腔脂肪系數(shù)分別下降9.00%、34.30%，血清總膽固醇含量分別下降11.57%、35.13%，總甘油三酯含量分別下降46.89%、30.65%，高密度脂蛋白含量分別增加28.86%、7.00%，游離脂肪酸含量分別下降10.60%、10.20%，內(nèi)脂素含量分別下降38.44%、26.76%，脂聯(lián)素含量分別上升29.66%、26.96%，肝臟中乙酰輔酶A羧化酶活力分別下降17.03%、15.52%，脂肪酸合成酶活力分別下降23.53%、21.13%，肉毒堿脂酰轉(zhuǎn)移酶Ⅰ活力分別上升20.38%、17.20%，?；o酶A氧化酶活力分別上升11.00%、16.29%。上述結(jié)果表明，肥胖小鼠在控制飲食的同時(shí)攝入適量DNJ可以有效控制脂肪的合成、促進(jìn)脂肪的氧化分解，達(dá)到調(diào)控血脂、減少脂肪積累、控制體質(zhì)量的目的。DNJ對(duì)雌、雄鼠脂代謝調(diào)控的作用途徑不同，其對(duì)雄鼠的降脂效果更顯著。

1-脫氧野尻霉素；血脂；脂肪因子；酶活力

肥胖是一種由多種因素引起的慢性代謝疾病，其中多發(fā)生的是營養(yǎng)性肥胖，即能量攝入過多造成的脂肪堆積異常。肥胖與糖、脂代謝異常互為作用，易導(dǎo)致機(jī)體功能發(fā)生紊亂，引發(fā)糖尿病、高脂血癥、動(dòng)脈粥樣硬化、心腦血管疾病等[1-2]。現(xiàn)今針對(duì)肥胖的常用治療方法除控制飲食、加強(qiáng)運(yùn)動(dòng)外，還有用西布曲明、奧利司他等藥品的藥物治療法[3]。藥物療法雖然效果顯著，但周期較長，且副作用較大。因此，研發(fā)毒副作用低的天然減肥產(chǎn)品成為相關(guān)學(xué)科關(guān)注的熱點(diǎn)。

1-脫氧野尻霉素（1-deoxynojirimycin，DNJ）是一種哌啶類多羥基生物堿[4]，在桑樹中有著較高的含量，已有3 種人工合成途徑可用于生產(chǎn)[5-6]。由于其特殊的結(jié)構(gòu)以及豐富的來源，受到國內(nèi)外學(xué)者的廣泛關(guān)注。大量研究證明，DNJ作為一種糖苷酶抑制劑，對(duì)糖尿病的治療具有顯著效果[7-10]。但是，針對(duì)其在降脂減肥方面的研究則比較有限，且不夠深入。有研究顯示，DNJ可以調(diào)控機(jī)體血脂水平，緩解高脂血癥，抑制脂肪堆積，控制體質(zhì)量增加[11-12]，但對(duì)其作用機(jī)制未有完整闡述。本研究以高脂飼料誘導(dǎo)的肥胖小鼠為研究對(duì)象，建立營養(yǎng)性肥胖小鼠模型，探索在減少能量攝入的同時(shí)輔以DNJ攝入，觀察DNJ對(duì)肥胖的影響以及其作用途徑，期望為開發(fā)DNJ降脂減肥產(chǎn)品提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

100 只4 周齡清潔級(jí)昆明小鼠（雌雄各半，體質(zhì)量（20±2） g）（許可證號(hào)：SCXK（渝）2007-006）、基礎(chǔ)飼料，由重慶騰鑫比爾實(shí)驗(yàn)動(dòng)物銷售有限公司提供。

高脂飼料配方按膽固醇2%、豬油10%、白糖10%、基礎(chǔ)飼料78%的比例[3]由本課題組自行配制。

DNJ（純度≥98%） 北京德威鈉生物技術(shù)有限公司；總甘油三酯（total triglyceride，TG）測(cè)定試劑盒、總膽固醇（total cholesterol，TC）測(cè)定試劑盒、高密度脂蛋白（high-density lipoprotein，HDL）測(cè)定試劑盒、低密度脂蛋白（low-density lipoprotein，LDL）測(cè)定試劑盒四川邁克生物技術(shù)股份有限公司；游離脂肪酸（free fatty acid，F(xiàn)FA）、脂聯(lián)素（adiponectin，ADP）、內(nèi)脂素、脂肪酸合成酶（factty acid synthetasein，F(xiàn)AS）、乙酰輔酶A羧化酶（acetyl CoA carboxylasec，ACC）、酰基輔酶A氧化酶（acyl-CoA oxidase，ACO）、肉毒堿脂酰轉(zhuǎn)移酶Ⅰ（carnitine palmitoyl transferase-1，CPTⅠ）酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）試劑盒 廈門慧嘉生物科技有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

7020型全自動(dòng)生化分析儀 日本日立公司；F6/10勻漿機(jī) 上海弗魯克流體機(jī)械制造有限公司；M680型酶標(biāo)儀 美國伯樂公司；H2500R-2型冷凍離心機(jī)湘儀離心機(jī)儀器有限公司。

1.3 方法

1.3.1 DNJ溶液配制

用0.9 g/100 mL的NaCl溶液配制質(zhì)量濃度分別為0.2、0.4、0.8 mg/mL的DNJ溶液，4 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.2 肥胖小鼠模型建立

[11,13]的方法，100 只4 周齡小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)5 d后，隨機(jī)挑選10 只作為陰性對(duì)照組，用基礎(chǔ)飼料飼喂4 周，另外90 只作為實(shí)驗(yàn)組，用高脂飼料飼喂4 周，根據(jù)式（1）計(jì)算肥胖度。

式中：m1為實(shí)驗(yàn)組實(shí)際體質(zhì)量/g；m0為陰性對(duì)照組平均體質(zhì)量/g。

隨機(jī)挑選80 只肥胖度大于20%的小鼠用做后續(xù)實(shí)驗(yàn)，將其分為4 組（每組20 只，雌雄各半）：陰性對(duì)照組，DNJ高、中、低劑量組。各組小鼠按每只5 g/d的飼喂量持續(xù)用基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng)40 d，同時(shí)陰性對(duì)照組以0.5 mL/d灌胃生理鹽水，高、中、低劑量組分別以8.0、4.0、2.0 mg/（kg·d）灌胃DNJ。實(shí)驗(yàn)期間小鼠自由飲水，5 d稱1 次體質(zhì)量，一周換2 次墊料，室溫（22±2）℃，12 h輪換照明。

1.3.3 樣品采集及指標(biāo)測(cè)定

灌胃結(jié)束后，小鼠禁食不禁水12 h，稱體質(zhì)量，眼球取血，解剖，摘取腹腔脂肪組織和肝臟，參考文獻(xiàn)[11]處理后稱質(zhì)量。按照式（2）～（4）計(jì)算相關(guān)指標(biāo)[14]。

式中：m1為小鼠初始體質(zhì)量/g；m2為小鼠終體質(zhì)量/g；m3為小鼠腹腔脂肪質(zhì)量/g；S1為陰性對(duì)照組小鼠腹腔脂肪系數(shù)/%；S2為DNJ劑量組小鼠腹腔脂肪系數(shù)/%。

參考文獻(xiàn)[15]的血樣處理方法，釆用全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定血脂水平；用ELISA試劑盒測(cè)定血清FFA、ADP、內(nèi)脂素含量。以1∶7（m/V）的比例向肝臟中加入磷酸鹽緩沖液（pH 7.4）進(jìn)行勻漿，3 000 r/min離心20 min，取上清液按照試劑盒說明書的方法測(cè)定FAS、ACC、ACO、CPTⅠ活力。

烘至恒質(zhì)量的濾紙冷卻后稱其質(zhì)量（m/g）；稱取充分研磨的肝臟樣品質(zhì)量（m1/g）；濾紙包裹樣品后放入帶蓋玻璃瓶中，加入10 mL石油醚，密封，100 W、55 ℃超聲2 次，每次40 min，取出紙包于105 ℃烘干至恒質(zhì)量，冷卻后稱其質(zhì)量（m2/g）。按式（5）計(jì)算肝臟脂肪含量。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS 13.0軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析及顯著性檢驗(yàn)；P＜0.05為差異顯著，P＜0.01為差異極顯著。數(shù)據(jù)結(jié)果用±s表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 DNJ對(duì)肥胖小鼠體質(zhì)量的影響

表1 DNJ對(duì)肥胖小鼠體質(zhì)量的影響（n＝10）Table 1 Effect of DNJ on body weight of obese mice (n= 10)

肥胖的一個(gè)重要表現(xiàn)為體質(zhì)量的過度增加，有效控制體質(zhì)量增加就意味著控制肥胖，抑制肥胖可能導(dǎo)致的冠心病、脂肪肝、糖尿病、高血壓等各種疾病的發(fā)生率[1-2]。由表1可知，灌胃DNJ 40 d后，各劑量組的雌、雄鼠體質(zhì)量下降率均高于各自的陰性對(duì)照組，但中、低劑量組差異均不顯著（P＞0.05），高劑量組均為極顯著（P＜0.01）?？梢娍刂骑嬍车耐瑫r(shí)長期灌胃適量DNJ可以有效控制體質(zhì)量增加、抑制肥胖。

2.2 DNJ對(duì)肥胖小鼠肝臟脂肪含量的影響

肝臟脂肪含量過高可能會(huì)形成脂肪肝，導(dǎo)致肝硬化、肝纖維化的發(fā)生，嚴(yán)重?fù)p害機(jī)體健康[16]。DNJ對(duì)肥胖小鼠肝臟脂肪含量的影響如表2所示。灌胃DNJ 40 d后，與陰性對(duì)照組相比，各劑量組雌鼠的肝臟脂肪含量的下降不具有顯著性（P＞0.05）；而各劑量組雄鼠的肝臟脂肪含量均呈極顯著下降趨勢(shì)（P＜0.01），且表現(xiàn)出明顯的劑量-效應(yīng)關(guān)系?？梢姡瑢?duì)于控制飲食的肥胖雄鼠，灌胃實(shí)驗(yàn)劑量的DNJ能減少肝臟脂肪的積累，降低脂肪肝的發(fā)生。

表2 DNJ對(duì)肥胖小鼠肝臟脂肪含量的影響Table 2 Effect of DNJ on liver fat content in obese mice

2.3 DNJ對(duì)肥胖小鼠腹腔脂肪系數(shù)的影響

表3 DNJ對(duì)肥胖小鼠腹腔脂肪系數(shù)的影響Table 3 Effect of DNJ on intra-abdominal fat to body weight in obese mice

長期高脂飲食所導(dǎo)致的營養(yǎng)性肥胖通常為腹型肥胖，其典型特征是腹腔中脂肪堆積過多[17]。DNJ對(duì)肥胖小鼠腹腔脂肪系數(shù)的影響從表3可以看出，在灌胃DNJ 40 d后，與陰性對(duì)照組相比，低、中、高劑量DNJ對(duì)雌鼠腹腔脂肪系數(shù)的降低不顯著（P＞0.05）；但高劑量DNJ可以極顯著地降低雄鼠的腹腔脂肪系數(shù)（P＜0.01）。說明對(duì)于控制飲食的肥胖雄鼠，灌胃適量DNJ能有效抑制腹部脂肪的形成。

有研究表明，當(dāng)機(jī)體脂肪含量過多時(shí)，脂肪組織可能會(huì)加速TG的分解，其分解代謝產(chǎn)物經(jīng)循環(huán)到達(dá)肝臟后又重新合成TG，造成肝臟中脂肪合成速率大于脂肪輸出及代謝的速率，從而形成脂肪肝[16,18]?？梢姼骨恢窘M織的形成與肝臟脂肪含量之間存在一定關(guān)系，DNJ可抑制雄鼠腹腔脂肪的形成與上述DNJ可抑制雄鼠脂肪肝形成的結(jié)論是一致的。

2.4 DNJ對(duì)肥胖小鼠血脂水平的影響

肥胖與脂代謝紊亂互為作用，其嚴(yán)重后果表現(xiàn)為血液中的脂蛋白含量發(fā)生異常，即TC、TG、LDL中一種或幾種含量過高，HDL含量過低。任何一種脂蛋白水平的異常都會(huì)導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生[19-21]。DNJ對(duì)肥胖小鼠血脂水平的影響由表4可知，灌胃DNJ 40 d后，與陰性對(duì)照組比較，高劑量組雌鼠血清TC含量下降11.57%（P＜0.05），低、中、高劑量組雄鼠TC分別下降25.38%、28.20%、35.13%（P＜0.01）；低、中、高劑量的DNJ分別使雌鼠血清TG含量下降25.42%、42.37%、46.89%（P＜0.01），雄鼠TG含量下降27.00%、28.46%、30.65%（P＜0.01）；各劑量組雌、雄鼠血清LDL含量均無顯著變化（P＞0.05）；低、中、高劑量的DNJ使雌鼠血清HDL含量分別上升21.65%、23.71%、28.86%（P＜0.01），但對(duì)雄鼠HDL含量無顯著影響（P＞0.05）。

表4 DNJ對(duì)肥胖小鼠血脂水平的影響Table 4 Effect of DNJ on blood lipid levels in obese mice

由上述結(jié)果可知，對(duì)于控制飲食的肥胖鼠，DNJ可以調(diào)控血脂水平，可能的作用機(jī)制一方面是DNJ通過抑制脂肪組織的合成、降低脂肪細(xì)胞的脂解作用，使進(jìn)入肝臟中的分解代謝產(chǎn)物減少，肝臟合成內(nèi)源性TG減少，使得血液中的TG水平降低；另一方面DNJ可以通過增加血液中HDL含量來加速TC向肝臟的運(yùn)輸，從而加快TC向膽汁酸的轉(zhuǎn)化，降低血液中TC含量。

2.5 DNJ對(duì)肥胖小鼠血清中FFA、內(nèi)脂素、ADP含量的影響

肥胖機(jī)體中形成的脂肪組織在儲(chǔ)存能量的同時(shí)，其脂解作用也有所增加，導(dǎo)致血清中FFA含量增加。過多FFA不僅使肝臟合成TG的原料增多，造成脂肪肝，還會(huì)對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生毒性作用[22-23]。脂肪組織在進(jìn)行脂代謝的同時(shí)，還是一個(gè)重要的內(nèi)分泌器官，如內(nèi)脂素、ADP、瘦素等脂肪細(xì)胞因子也參與脂肪細(xì)胞形成及其他脂代謝過程[17]。DNJ對(duì)肥胖小鼠血清中FFA、內(nèi)脂素、ADP含量的影響如表5所示。

表5 DNJ對(duì)肥胖小鼠血清中FFA、內(nèi)脂素、ADP水平的影響Table 5 Effect of DNJ on FFA, visfatin and adiponectin levels in obese mice

從表5可以看出，灌胃DNJ 40 d后，高劑量DNJ分別使肥胖雌、雄鼠血清FFA濃度下降10.60%、10.20%（P＜0.05），可見對(duì)于控制飲食的肥胖鼠，一定劑量DNJ可通過控制脂肪組織的形成來降低FFA含量，減少肝內(nèi)脂肪的合成，同時(shí)降低對(duì)肝細(xì)胞的損傷及毒性。研究顯示，內(nèi)脂素在促進(jìn)前脂肪細(xì)胞的分化和以葡萄糖及脂肪酸為原料合成TG方面具有重要作用；機(jī)體的肥胖度增加，則內(nèi)脂素含量也增加[24-25]。高劑量組雌鼠的血清內(nèi)脂素含量下降38.44%（P＜0.05），低、中、高劑量組雄鼠內(nèi)脂素含量分別下降16.81%、22.39%、26.76%（P＜0.01）。說明對(duì)于控制飲食的肥胖鼠，適量DNJ可以降低內(nèi)脂素的分泌來減少TG的合成，抑制過多脂肪的形成。這與上述適量DNJ可以降低血清TG含量、控制體重增加的結(jié)果一致。ADP含量通常和TG、LDL含量呈負(fù)相關(guān)，與HDL含量呈正相關(guān)，且能促進(jìn)脂肪的氧化[26]。由表5可知，中、高劑量組雌鼠血清ADP含量分別上升22.12%、29.66%（P＜0.05），高劑量組雄鼠ADP含量極顯著上升26.96%（P＜0.01）。說明對(duì)于控制飲食的肥胖鼠，適量DNJ可以降低血清TC、TG水平及腹脂系數(shù)可能是通過增加ADP含量，以促進(jìn)脂肪的分解消耗起作用的。

2.6 DNJ對(duì)肥胖小鼠肝臟中ACC、FAS活力的影響

葡萄糖經(jīng)糖酵解后形成的丙酮酸在線粒體中經(jīng)氧化脫羧反應(yīng)后生成乙酰輔酶A，轉(zhuǎn)運(yùn)出線粒體的乙酰輔酶A在ACC作用下形成丙二酸單酰輔酶A，再經(jīng)FAS酶系的一系列催化作用生成長鏈脂肪酸[15]?？梢奆AS和ACC在脂肪的合成途徑中發(fā)揮著重要作用，可以說它們是脂肪合成的限速酶。DNJ對(duì)肥胖小鼠肝臟中ACC、FAS活力的影響見表6。

表6 DNJ對(duì)肥胖小鼠肝臟中ACC、FAS活力的影響Table 6 Effect of DNJ on acetyl CoA carboxylasec and factty acid synthetase activities in the liver of obese mice

從表6可以看出，灌胃DNJ 40 d后，與陰性對(duì)照組相比，中、高劑量組DNJ的雌鼠肝臟中ACC活力分別下降16.15%（P＜0.05）、17.03%（P＜0.01），高劑量組雄鼠ACC活力下降15.52%（P＜0.05）；中、高劑量組雌鼠肝臟中FAS活力分別下降19.76%、23.53%（P＜0.01），雄鼠FAS活力分別下降16.35%（P＜0.05）、21.13%（P＜0.01）。這一結(jié)果表明，對(duì)于控制飲食的肥胖鼠，一定劑量DNJ能夠通過抑制脂肪酸合成途徑中關(guān)鍵酶的活性來減緩脂肪酸的合成，從而抑制TG的形成。另外有文獻(xiàn)表明，ADP可以使單磷酸腺苷蛋白激酶（adenosine 5’-monophosphate activated protein kinase，AMPK）磷酸化，后者會(huì)導(dǎo)致ACC活力下降[27]。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，DNJ可使ADP含量增加，這可能是ACC活力下降的一個(gè)重要原因。

2.7 DNJ對(duì)肥胖小鼠肝臟中CPTⅠ、ACO活力的影響

脂肪進(jìn)行氧化產(chǎn)能的主要方式是β氧化，該反應(yīng)是在線粒體基質(zhì)中進(jìn)行的。長鏈脂肪酸需與極性肉堿分子結(jié)合后，在CPTⅠ作用下轉(zhuǎn)移至線粒體內(nèi)，與肉堿分離后在ACO作用下進(jìn)行氧化分解，產(chǎn)生能量以供機(jī)體需要[15]。CPTⅠ和ACO作為脂肪酸氧化過程中的關(guān)鍵酶，其活性高低直接影響著機(jī)體的脂代謝狀況。DNJ對(duì)肥胖小鼠肝臟中CPTⅠ、ACO活力的影響見表7。

表7 DNJ對(duì)肥胖小鼠肝臟中CPTⅠ、ACO活力的影響Table 7 Effect of DNJ on carnitine palmitoyl transferase-1 and acyl-CoA oxidase in obesity mice

從表7可以看出，灌胃DNJ 40 d后，與陰性對(duì)照組比較，中、高劑量DNJ使雌、雄鼠肝臟中CPTⅠ活力分別增加13.11%（P＜0.05）、20.38%（P＜0.01）和10.75%（P＜0.05）、17.20%（P＜0.01）；高劑量DNJ使雌、雄鼠肝臟中ACO活力分別增加11.00%（P＜0.05）、16.29%（P＜0.01）?？梢?，對(duì)于控制飲食的肥胖鼠，適量DNJ可以通過提高脂肪酸氧化酶的活性來加速脂肪的分解代謝，促進(jìn)脂肪消耗，達(dá)到控制肥胖的目的。

3 討 論

DNJ作為一種特殊生物堿在桑樹中有著較高的含量，國內(nèi)外學(xué)者在研究其降糖作用時(shí)發(fā)現(xiàn)其同樣具有降脂作用。Tsuduki等[28]用5 mg/（kg·d）劑量的DNJ灌胃高脂飲食的小鼠12 周后，發(fā)現(xiàn)小鼠的肝臟脂肪含量及腹腔脂肪含量均表現(xiàn)為顯著下降。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果同樣顯示，8.0 mg/（kg·d）劑量的DNJ可使肥胖雄鼠的腹腔脂肪系數(shù)和肝臟脂肪含量極顯著下降（P＜0.01），表明DNJ可抑制白色脂肪組織的形成，減少肝臟中脂肪蓄積，具有抗脂肪肝作用。其研究結(jié)果還顯示，DNJ劑量組小鼠的體質(zhì)量變化與對(duì)照組相比并無顯著性差異，而本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，8.0 mg/（kg·d）劑量DNJ可使肥胖鼠的體質(zhì)量明顯下降（P＜0.01），這可能是由灌胃時(shí)間和灌胃劑量的差異引起的。

血脂水平是機(jī)體脂代謝狀況的直觀反映，促使其含量處于正常范圍是保障脂代謝過程穩(wěn)定和機(jī)體健康的重要舉措。本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果顯示，高劑量DNJ可以調(diào)控肥胖小鼠的血脂水平，使雌、雄鼠TC、TG含量均顯著下降（P＜0.05，P＜0.01），雌鼠HDL含量極顯著增加（P＜0.01）；這與高嶺等[29]發(fā)現(xiàn)桑葉可使患有高脂血癥大鼠的HDL-膽固醇含量顯著上升，TC、TG、LDL-膽固醇含量顯著下降的結(jié)論基本一致。說明DNJ作為桑葉中的一種特殊成分，在調(diào)控脂代謝、控制血脂水平方面具有重要作用。但在LDL含量變化方面的結(jié)論不一致，考慮這可能是由于桑葉中含有多種成分及各成分之間的協(xié)同作用等原因引起的。因此，尋找多種具有降脂減肥作用的功能物質(zhì)，探究多個(gè)組分之間的有效組合也是開發(fā)相關(guān)產(chǎn)品的一個(gè)研究方向。

ADP主要由脂肪組織合成、釋放，在改善機(jī)體的脂代謝和碳水化合物代謝方面發(fā)揮重要作用[30]。Lee等[31]發(fā)現(xiàn)，3T3-L1脂肪細(xì)胞在DNJ作用下分泌的ADP增加，同時(shí)測(cè)定其mRNA的表達(dá)量也增加，這與本實(shí)驗(yàn)的研究結(jié)果一致。ADP可以增加胰島素敏感性，降低血糖和FFA含量，加速肝臟和肌肉的脂肪酸氧化[30]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，高劑量DNJ使肥胖小鼠的血清FFA含量呈顯著性下降（P＜0.05），同時(shí)肝臟中CPTⅠ、ACO活力顯著上升（P＜0.05，P＜0.01），說明DNJ是通過刺激脂肪組織分泌更多的ADP來促使脂肪酸氧化酶的活性升高，從而加速脂肪酸的分解產(chǎn)能，減少血液中FFA含量。Hyun等[32]研究結(jié)果顯示，DNJ處理組小鼠肝臟中ACC、FAS的mRNA表達(dá)量顯著低于高脂組，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果同樣顯示，高劑量DNJ使肥胖小鼠肝臟中ACC、FAS活力顯著下降（P＜0.05，P＜0.01）。同時(shí)有研究表明[27]，ADP通過使AMPK磷酸化導(dǎo)致ACC活性下降，表明DNJ可以抑制脂肪酸合成酶的活性，這種抑制作用與刺激ADP的分泌之間有著較大關(guān)系。

綜合上述分析可見，DNJ對(duì)控制飲食的肥胖鼠具有一定的減肥作用。它的主要作用途徑是通過調(diào)節(jié)脂肪細(xì)胞因子的分泌來控制脂肪酸代謝過程中的相關(guān)酶活性，抑制脂肪合成、加速脂肪氧化，達(dá)到調(diào)控血脂、減少脂肪積累、控制體質(zhì)量的目的。由于作用方式具有性別差異，導(dǎo)致DNJ對(duì)雄鼠的降脂效果更顯著。DNJ在控制肥胖方面的顯著作用使研發(fā)相關(guān)降脂減肥產(chǎn)品成為現(xiàn)今科研領(lǐng)域的一個(gè)熱點(diǎn)。但就本項(xiàng)研究而言，未能深入到基因水平不能從根本上闡述其減肥機(jī)制；且對(duì)于其他脂代謝相關(guān)酶及作用因子的影響也未涉及，這都是之后需要進(jìn)一步探究的內(nèi)容。

參考文獻(xiàn)：

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Effect and Mechanism of 1-Deoxynojirimycin on Lipid Metabolism in Obese Mice

WANG Ling1, ZENG Yitao1, HUANG Xianzhi2, DING Xiaowen1,*
(1. College of Food Science, Southwest University, Chongqing 400716, China;2. State Key Laboratory of Silkworm Genome Biology, Chongqing 400716, China)

This study explored the regulatory effect of 1-deoxynojirimycin (DNJ) on lipid metabolism in obese mechanism rats as well as the underlying mechanism of action to provide valuable information for the development of DNJ-based antilipemic and antidiabetic agents. An obese mouse model was created by feeding mice on a high-fat diet, and then all mice were fed on a normal diet for 40 days. During this period, the animals in the experimental groups were gavaged with DNJ at different doses (8.0, 4.0 and 2.0 mg/ (kg·d)). At the end, serum biochemical indicators, serum adipocytokines, and the enzyme activities involved in the synthesis and oxidation of fatty acids were determined by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) kits. Compared with the negative control group, DNJ at 8.0 mg/(kg·d) reduced the body weight of obese female and male mice by 9.06% and 14.07%, decreased liver fat content by 4.13% and 27.82%, intra-abdominal fat to body weight ratio by 9.00% and 34.30%, serum total cholesterol (TC) level by 11.57% and 35.13%, triglyceride level by 46.89% and 30.65%, high-density lipoprotein (HDL) level by 28.86% and 7.00%, free fatty acid (FFA) content by 10.60%and 10.20% and visfatin level by 38.44% and 26.76%, increased adiponectin level by 29.66% and 26.96%, decreased acetyl CoA carboxylasec (ACC) activity in the liver by 17.03% and 15.52% and fatty acid synthetasein (FAS) activity by 23.53%and 21.13%, and elevated carnitine palmitoyl transferase (CPT) activity by 20.38% and 17.20% and acyl-CoA oxidase(ACO) activity by 11.00% and 16.29%, respectively. These results suggested that when combined with less energy intake,DNJ can improve blood lipid levels, reduce fat accumulation and control body weight by inhibiting fatty acid synthesis and accelerating fatty acid oxidation. In addition, DNJ has a better effect on male mice than female ones.

1-deoxynojirimycin; blood lipid; adipocytokines; enzyme activity

10.7506/spkx1002-6630-201801031

S888.9

A

1002-6630（2018）01-0207-06

2016-10-20

國家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)（家蠶）產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)（CARS-22-0503）；公益性行業(yè)（農(nóng)業(yè)）科研專項(xiàng)（201303053）

王玲（1993—），女，碩士研究生，研究方向?yàn)槭称钒踩c功能食品。E-mail：1528542433@qq.com

*通信作者簡介：丁曉雯（1963—），女，教授，博士，研究方向?yàn)槭称钒踩c功能食品。E-mail：xiaowend@sina.com

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DOI:10.7506/spkx1002-6630-201801031. http://www.spkx.net.cn

WANG Ling, ZENG Yitao, HUANG Xianzhi, et al. Effect and mechanism of 1-deoxynojirimycin on lipid metabolism in obese mice[J]. Food Science, 2018, 39(1): 207-212. (in Chinese with English abstract)

10.7506/spkx1002-6630-201801031. http://www.spkx.net.cn