生血增白湯對(duì)環(huán)磷酰胺致血虛小鼠RBC、Hb、WBC、Plt含量的影響

邱 云 ，戎 寬 ，楊 惠 ，毛 果 ，劉天舒 ，尹天雷 ，匡建軍 *

（1.湖南省中醫(yī)藥研究院附屬醫(yī)院，湖南 長(zhǎng)沙 410006；2.湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，湖南 長(zhǎng)沙 410007）

生血增白湯對(duì)環(huán)磷酰胺致血虛小鼠RBC、Hb、WBC、Plt含量的影響

邱 云1，戎 寬1，楊 惠2，毛 果1，劉天舒1，尹天雷1，匡建軍1*

（1.湖南省中醫(yī)藥研究院附屬醫(yī)院，湖南 長(zhǎng)沙 410006；2.湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，湖南 長(zhǎng)沙 410007）

目的研究生血增白湯對(duì)環(huán)磷酰胺（CTX）致血虛小鼠RBC、Hb、WBC、Plt含量的影響，旨在探討生血增白湯對(duì)化學(xué)性損傷血虛癥的補(bǔ)血作用。方法取ICR小鼠60只，隨機(jī)分為6組，即正常對(duì)照組(A組)，模型對(duì)照組(B組)，陽(yáng)性藥四物合劑組(C組)，生血增白湯低、中、高劑量組(D1、D2、D3組)，每組10只，連續(xù)給藥8 d。除A組外，其他組小鼠每日均于給藥后4 h注射環(huán)磷酰胺100 mg/kg，第8天給藥后測(cè)全血紅細(xì)胞(RBC)、血紅蛋白(Hb)、白細(xì)胞(WBC)、血小板（Plt)值，并對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果B組小鼠RBC、Hb、WBC、Plt含量較A組顯著降低（P＜0.01）。與B組比較，D3組能使血虛證小鼠Hb升高(P＜0.05)；D1、D2、D3組及C組能使血虛證小鼠WBC升高(P＜0.01)；D3組及C組能升高小鼠Plt(P＜0.05)。結(jié)論生血增白湯對(duì)CTX致化學(xué)性損傷造成的血虛證模型小鼠具有補(bǔ)血作用。

生血增白湯；血虛證；環(huán)磷酰胺；血常規(guī)

在世界范圍內(nèi)，癌癥的發(fā)生是死亡的主要原因。目前放、化療療法仍然是治療惡性腫瘤的必要手段之一，但其伴隨的毒副作用嚴(yán)重影響了患者生存質(zhì)量，因此降低放、化療治療過(guò)程中的毒副作用，提高療效，逐漸成為腫瘤治療中的一個(gè)重要研究課題。臨床中，中藥輔助放、化療有助于癌癥的預(yù)防和治療，而且可以促進(jìn)化療／放療恢復(fù)，防止腫瘤再生或轉(zhuǎn)移的發(fā)展[1-2]。生血增白湯為湖南省中醫(yī)藥研究院附屬醫(yī)院臨床應(yīng)用多年的特色處方，處方組成為淫羊藿、黃芪、白術(shù)、當(dāng)歸、女貞子等，功效為補(bǔ)氣養(yǎng)血，主要用于降低放、化療治療過(guò)程中帶來(lái)的全血紅細(xì)胞、血紅蛋白、白細(xì)胞、血小板降低等類(lèi)似于中醫(yī)學(xué)中“血虛”毒副作用[3]。本文研究生血增白湯對(duì)化學(xué)性損傷血虛癥的補(bǔ)血作用，為生血增白湯的功能主治提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

ICR 小鼠，SPF 級(jí)，雌雄各半，體質(zhì)量（22±2）g，購(gòu)自湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)SCXK(湘)2014-0003，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物合格證號(hào)：43004700002373，43004700002374。 全價(jià)顆粒飼料由長(zhǎng)沙市天勤生物技術(shù)有限公司提供。

1.2 主要藥物和試劑

生血增白湯（淫羊藿20 g，黃芪20 g，白術(shù)15 g，當(dāng)歸10 g，女貞子20 g）飲片購(gòu)自湖南省中醫(yī)藥研究院附屬醫(yī)院中藥房。用蒸餾水浸泡1 h，煮沸30 min后過(guò)濾取液，殘?jiān)偌铀蠓?0 min，合并2次濾液，濃縮至每千克含生藥 5.63 g、11.26 g、22.52 g 3種劑量 （分別相當(dāng)于臨床等效劑量的1、2、4倍）。血細(xì)胞檢測(cè)試劑：稀釋液，批號(hào)：130325，130933；清洗劑，批號(hào)：1309014；溶血?jiǎng)?，批?hào)：1301033，均為南昌特康科技有限公司產(chǎn)品。環(huán)磷酰胺：粉針劑，0.2 g/瓶，使用時(shí)用生理鹽水配成5 mg/mL，山西普德藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)04121004。四物合劑（四川新斯頓制藥有限責(zé)任公司提供，組成：當(dāng)歸、川芎、白芍、熟地黃）10 mL/支。

1.3 儀器

TEK3600血細(xì)胞自動(dòng)分析儀，江西南昌特康科技有限公司產(chǎn)品。AB204型電子分析天平為瑞士梅特勒-托利多公司產(chǎn)品。

2 方法

2.1 分組與干預(yù)

取ICR小鼠60只，隨機(jī)分為6組，即正常對(duì)照組(A組)，模型對(duì)照組(B組)，陽(yáng)性藥四物合劑組(C組)，生血增白湯低、中、高劑量組(D1、D2、D3 組)，每組10只。A組、B組灌胃純凈水，C組以10.7 g/kg灌胃給予四物合劑，D1、D2、D3 組分別以 5.63、11.26、22.52 g/kg灌胃給予生血增白湯，每日1次，連續(xù)8 d。

2.2 造模方法[4-9]

除A組外，其他組小鼠均于給藥后4 h，在左側(cè)腹部腹腔注射環(huán)磷酰胺100 mg/kg，連續(xù)8 d，第8天給藥后1 h摘眼球取血，EDTA-K2抗凝，小鼠脫頸處死，符合倫理學(xué)要求。

2.3 指標(biāo)檢測(cè)

采用TEK3600血細(xì)胞自動(dòng)分析儀測(cè)定全血紅細(xì)胞(RBC)、血紅蛋白(Hb)、白細(xì)胞(WBC)、血小板（Plt)值。

2.4 統(tǒng)計(jì)分析方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料均采用“±s”表示，多組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較，方差齊采用LSD法進(jìn)行分析，方差不齊的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Dunnett’s法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

與正常對(duì)照組比較，模型對(duì)照組小鼠RBC、Hb、WBC、Plt含量顯著降低（P＜0.01）。 與模型對(duì)照組比較，生血增白湯高劑量組能使血虛證小鼠Hb升高(P＜0.05)；生血增白湯低、中、高劑量組及四物合劑陽(yáng)性對(duì)照組能使血虛證小鼠WBC顯著升高(P＜0.01)；生血增白湯高劑量組及四物合劑陽(yáng)性對(duì)照組能升高小鼠 Plt(P＜0.05)。 見(jiàn)表 1。

4 討論

血虛證是惡性腫瘤患者接受放、化療后的主要證候之一。隨著國(guó)家對(duì)中醫(yī)藥的發(fā)展在政策上的大力扶持，中醫(yī)藥輔助治療癌癥得到大力的推廣，有很多學(xué)者和臨床一線工作者發(fā)文報(bào)道了中藥作為輔助放、化療治療各種類(lèi)型癌癥的實(shí)驗(yàn)以及臨床經(jīng)驗(yàn)。褚松齡等[10]采用單盲、分層隨機(jī)對(duì)照設(shè)計(jì)，以60例惡性腫瘤放化療后中醫(yī)辨證為血虛證的患者為臨床研究對(duì)象，觀察四物湯對(duì)患者臨床癥狀、外周血細(xì)胞及免疫功能的調(diào)節(jié)作用。研究中惡性腫瘤放、化療后患者服用四物湯/四物合劑后，血虛證癥狀均明顯改善。然而臨床上腫瘤患者病情復(fù)雜，血虛受諸多因素影響，治療則宜根據(jù)兼證用綜合治法以取得更顯著療效[11-13]。

表1 生血增白湯對(duì)化學(xué)性血虛 RBC、Hb、WBC、Plt含量的影響 （±s，n=10）

表1 生血增白湯對(duì)化學(xué)性血虛 RBC、Hb、WBC、Plt含量的影響 （±s，n=10）

注：與正常對(duì)照組比較 ##P＜0.01；與模型對(duì)照組比較 *P＜0.05，**P＜0.01。

組別正常對(duì)照組模型對(duì)照組生血增白湯低劑量組生血增白湯中劑量組生血增白湯高劑量組四物合劑組F值P值給藥劑量/g·kg-1－ －5.63 11.26 22.52 10.70 RBC/×1012·L-1 8.15±1.48 6.28±0.86##6.97±0.77 6.43±0.96 6.65±0.70 6.52±0.69 3.62 0.01 Hb/g·L-1 23.55±2.74 18.13±2.96##19.07±2.96 19.30±3.88 21.34±1.99*20.42±2.98 13.05 0.06 WBC/×109·L-1 9.27±2.87 4.61±1.14##7.99±1.49**7.48±1.59**6.95±1.61**7.33±1.73**2.97 0.01 Plt/×109·L-1 791±189 446±117##535±132 556±118 576±138*565±125*9.08 0.01

生血增白湯是根據(jù)《內(nèi)經(jīng)》“中焦受氣取汁，變化而赤”“腎主藏精而化血”“血為精之本”理論而來(lái)。腎藏精生髓，既藏生殖之精，又藏五臟六腑之精和骨髓之精，精可化血有賴于骨髓之氣，骨髓源自腎陽(yáng)，故欲生血當(dāng)補(bǔ)腎陽(yáng)以淫羊藿為君藥溫補(bǔ)腎陽(yáng)，促使其功能旺盛而精化生為血；女貞子為臣藥，滋補(bǔ)肝腎之陰，補(bǔ)充化血的物質(zhì)；白術(shù)、黃芪為補(bǔ)肺脾之氣，化后天營(yíng)衛(wèi)之氣為精血；當(dāng)歸為使，養(yǎng)血活血，將化生之血運(yùn)達(dá)諸臟。全方合用調(diào)腎之陰陽(yáng)，補(bǔ)骨髓之氣，促后天之本化生，增強(qiáng)精化血、使其化之有道生之有源。本文證明了生血增白湯對(duì)化學(xué)性損傷造成的血虛證模型具有補(bǔ)血作用，亦為生血增白湯的功能主治(補(bǔ)氣養(yǎng)血，用于氣血虧虛證缺鐵性貧血)提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

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Effects of Shengxue Zengbai Decoction on the RBC,Hb,WBC and Plt in Blood-Deficient Model Mice Induced by Cyclophosphamide

QIU Yun1,RONG Kuan1,YANG Hui2,MAO Guo1,LIU Tianshu1,YIN Tianlei1,KUANG Jianjun1*
(1.The Affiliated Hospital of Hunan Academy of Chinese Medicine,Changsha,Hunan 410006,China;2.The First Affiliated Hospital of Hunan University of Chinese Medicine,Changsha,Hunan 410007,China)

ObjectiveTo explore the enriching blood effect on chemical damage blood deficiency syndrome in mice through observing the influence ofShengxue Zengbaidecoction on the RBC,Hb,WBC and Pltconcentration in blood-deficient model mice induced by cyclophosphamide(CTX).Methods60 ICR mice were randomLy divided into 6 groups,10 in each group,the normal control group(group A),model control group(group B),Siwu mixture positive drug group(group C),low,medium and high dose groups of Shengxue Zengbai decoction (group D1,D2 and D3),continuous administration for 8 days.All groups were injected with 100 mg of cyclophosphamide after administration of 4 h every day except group A.After eighth days of administration,the red blood cell(RBC),hemoglobin(Hb),white blood cell(WBC)and platelet(Plt)value in whole blood of all groups were measured,and carried on statistics analysis to its data.ResultsThe levels of RBC,Hb,WBC and Plt in group B were significantly lower than that in group A (P＜0.01).Compared with group B,the level of Hb markedly increased in group D3 (P＜0.05);the level of WBC increased in group D1,D2,D3 and group C (P＜0.01)；and the level of Plt increased in group D3 and group C (P＜0.05).ConclusionShengxue Zengbai decoction has enriching blood effect on the chemical damage blood-deficient model mice induced by cyclophosphamide.

Shengxue Zengbai decoction;blood deficiency syndrome;cyclophosphamide;blood routine examination

R285.5；R551

A

10.3969/j.issn.1674－070X.2017.12.007

本文引用：邱 云，戎 寬，楊 惠，毛 果，劉天舒，尹天雷，匡建軍.生血增白湯對(duì)環(huán)磷酰胺致血虛小鼠RBC、Hb、WBC、Plt含量的影響[J].湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2017，37（12）：1323-1325.

2017-03-31

長(zhǎng)沙市科技計(jì)劃項(xiàng)目（kq1701166）；湖南省中醫(yī)藥研究院院級(jí)課題（201312）。

邱 云，女，主管中藥師，研究方向：中藥藥理研究。

*匡建軍，男，博士，研究員，E-mail:13786165656@163.com。

（本文編輯 楊 瑛）