• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    低溫乳酸菌系馴化及其在玉米秸稈與馬鈴薯渣混合發(fā)酵中的接種效果

    2017-12-29 07:24:39賈軍曹文悅晏磊高亞梅王彥杰曲永利王偉東

    賈軍 ,曹文悅 ,晏磊 ,高亞梅 ,王彥杰 ,曲永利 ,王偉東

    (1.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院,大慶 163319;2.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)動物科技學(xué)院)

    低溫乳酸菌系馴化及其在玉米秸稈與馬鈴薯渣混合發(fā)酵中的接種效果

    賈軍1,曹文悅1,晏磊1,高亞梅1,王彥杰1,曲永利2,王偉東1

    (1.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院,大慶 163319;2.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)動物科技學(xué)院)

    為了構(gòu)建一種在低溫條件下使玉米秸稈與馬鈴薯渣混合飼料良好發(fā)酵的復(fù)合菌系,通過連續(xù)限制性培養(yǎng)的方法,在10℃條件下靜止培養(yǎng),以pH值作為指標(biāo),獲得一組使玉米秸稈與馬鈴薯渣混合飼料發(fā)酵的低溫復(fù)合菌系。結(jié)果表明,在接種后7 d,低溫乳酸菌復(fù)合系的pH可以下降到4以下。通過高通量測序結(jié)果表明,低溫乳酸菌復(fù)合系的細(xì)菌組成在屬的水平上主要為乳桿菌屬(lactobacillus,72.8%),Candidatus Solibacter,2.2%,嗜酸棲熱菌屬(Acidothermus,0.8%)。接種乳酸菌復(fù)合菌系處理的發(fā)酵物有強(qiáng)烈的芳香氣味,發(fā)酵15 d后,在發(fā)酵液中檢測到大量乳酸和甘油。說明接種低溫乳酸菌復(fù)合菌系可以明顯改善玉米秸稈與馬鈴薯渣混合發(fā)酵飼料的品質(zhì)。

    低溫;乳酸復(fù)合菌系;玉米秸稈;馬鈴薯渣;飼料

    玉米秸稈是最豐富的農(nóng)作物資源之一,中國玉米秸稈年產(chǎn)量約7億t,占全國秸稈年產(chǎn)量56.6%[1]。世界第四大糧食作物是馬鈴薯,僅次于小麥、水稻和玉米[2]。據(jù)聯(lián)合國糧農(nóng)組織統(tǒng)計,我國的馬鈴薯種植面積超過530多萬hm2,年產(chǎn)量已突破8 000萬t,馬鈴薯種植面積和總產(chǎn)量均躍居世界前列[3]。我國每年資源化利用的秸稈量約1.82 t[4]。秸稈焚燒造成嚴(yán)重的環(huán)境污染和巨大的資源浪費(fèi)。同時,加工1 t馬鈴薯會產(chǎn)生9 t馬鈴薯淀粉渣,2010年我國馬鈴薯加工產(chǎn)業(yè)消耗馬鈴薯300萬t,生產(chǎn)淀粉產(chǎn)生的馬鈴薯淀粉渣約為2 700萬t[5-6],基本沒有無害化處理而丟棄,造成嚴(yán)重的環(huán)境污染。因此,開發(fā)出能夠把秸稈和馬鈴薯渣資源化利用的技術(shù),對于治理環(huán)境污染,促進(jìn)相關(guān)產(chǎn)業(yè)發(fā)展意義重大。利用馬鈴薯渣和玉米秸稈混合發(fā)酵生產(chǎn)動物飼料,是可行的技術(shù)途徑之一。

    在我國北方,玉米收獲、馬鈴薯收獲和加工都是在9月以后,此時環(huán)境平均溫度已經(jīng)下降到10℃以下。在北方玉米秸稈和馬鈴薯渣混合發(fā)酵生產(chǎn)飼料的主要限制因素有:收獲后的玉米秸稈與馬鈴薯渣的儲運(yùn)問題,發(fā)酵溫度低的問題[7],發(fā)酵方式和發(fā)酵配方合理性問題等。一些研究者就上述問題開展過相關(guān)研究,如,惠文森[8]在室溫條件下用酵母菌對玉米秸稈成功的進(jìn)行發(fā)酵試驗,發(fā)現(xiàn)在一定程度上提高粗蛋白和粗脂肪的含量。王彥杰[9]通過連續(xù)限制性培養(yǎng)的方法在低溫下獲得了低溫乳酸菌復(fù)合菌系,接種于干秸稈中可促進(jìn)低溫微貯進(jìn)程,提高飼料品質(zhì)。李娟[10]以馬鈴薯渣和玉米秸稈為主要原料,多菌種混合固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)蛋白飼料,顯著提高了發(fā)酵物中的粗蛋白質(zhì)和純蛋白質(zhì)含量。但是,針對于收獲后玉米秸稈和馬鈴薯渣混合發(fā)酵用低溫發(fā)酵菌劑及其應(yīng)用效果的研究鮮有報道。

    試驗以玉米秸稈和馬鈴薯渣為主要處理對象,篩選富集了一組10℃低溫乳酸菌復(fù)合系,分析了菌系的微生物多樣性,并研究了接種低溫乳酸菌復(fù)合菌系對于玉米秸稈和馬鈴薯渣混合發(fā)酵的影響。以期為寒區(qū)秸稈和馬鈴薯渣等農(nóng)業(yè)廢棄物的資源化利用行的技術(shù)途徑和技術(shù)支持。

    1 材料與方法

    1.1 低溫乳酸菌復(fù)合菌系的馴化

    試驗樣品采自黑龍江省克山農(nóng)場的奶牛小區(qū)的玉米青貯窖,從新鮮的青貯料中取樣200 g,用無菌封口袋保存,現(xiàn)場取樣后放在4℃冷藏待用。

    乳酸菌的限制性培養(yǎng)采用MRS培養(yǎng)基(蛋白胨10 g,牛肉膏 10 g,酵母提取物 5 g,K2HPO42 g,檸檬酸氫二銨 2 g,乙酸鈉 5 g,葡萄糖 20 g,吐溫 801 mL,Mg-SO4·7H2O 0.5 g,MnSO4·4H2O 0.25 g,蒸餾水1 L),調(diào)節(jié)pH為6.2,121℃滅菌20 min,冷卻后4℃保存待用。

    取45 mL MRS培養(yǎng)基裝入50 mL螺口離心管中,加入2 g玉米秸稈青貯原料,作為原代,10℃靜置培養(yǎng)。培養(yǎng)24 h后,按1%(體積分?jǐn)?shù)比)的接種量,接入已滅菌的裝有50 mL培養(yǎng)基的螺口試管中,在10℃條件下靜置培養(yǎng),連續(xù)培養(yǎng)7 d,每天定時檢測培養(yǎng)液的pH值變化,連續(xù)繼代培養(yǎng)20代,獲得pH值下降基本穩(wěn)定和菌種組成穩(wěn)定的培養(yǎng)物。

    1.2 低溫乳酸菌復(fù)合系指標(biāo)檢測

    1.2.1 低溫乳酸菌復(fù)合系pH的測定

    在培養(yǎng)的當(dāng)天,第 1、2、3、4、5 d 時,用移液器在無菌操作臺內(nèi)取樣200 μL,用HORIBA-212型酸度計測定培養(yǎng)液的pH。

    1.2.2 低溫乳酸菌復(fù)合系微生物量的測定

    在培養(yǎng)的當(dāng)天,1、2、3、4、5 d 時,取培養(yǎng)液于 2 mL離心管中,12 000 rpm離心10 min,棄上清,在波長為600 nm條件下測定吸光值,以不接菌的MRS培養(yǎng)基作為對照,測定復(fù)合菌系在生長過程中的微生物量。

    1.2.3 低溫乳酸菌復(fù)合系有機(jī)酸和醇含量測定

    在復(fù)合菌系發(fā)酵的第5 d取發(fā)酵液2 mL,經(jīng)12 000 rpm離心10 min后,取上清用0.45 μm的濾膜過濾,用高效液相色方法測定乳酸,乙酸,丙酸,甘油等成分含量。色譜條件:色譜柱:美國安捷倫1 200(300 mm×7.8 mm,5 μm),氫型色譜柱,流動相:2.5 mmol·L-1硫酸水溶液,流動相比例始終不變,流速:0.55 mL·min-1,柱溫:室溫,檢測波長:210 nm,檢測器為示差折光檢測器。

    1.2.4 低溫乳酸菌復(fù)合菌系組成多樣性分析

    復(fù)合系在MRS培養(yǎng)基中培養(yǎng)24 h時,取6 mL發(fā)酵液12 000 rpm離心10 min,棄上清,用氯化芐法提取其總DNA[11]。

    提取樣品總DNA后,根據(jù)細(xì)菌V3+V4區(qū)設(shè)計得到引物,合并引物接頭,進(jìn)行PCR擴(kuò)增并對其產(chǎn)物進(jìn)行純化、定量和均一化形成測序文庫,建好的文庫先進(jìn)行文庫質(zhì)檢,質(zhì)檢合格的文庫用Illumina MiSeq PE300進(jìn)行測序。對序列進(jìn)行聚類,將97%相似性的序列聚類成為 OTUs(Operational Taxonomic Units)。按眾數(shù)原則對序列進(jìn)行注釋,對序列進(jìn)行物種注釋,統(tǒng)計每個樣品中在屬和種分類水平上的菌群做聚類,用相同顏色表示該屬類所含的OTU序列豐度的相對高低。

    1.3 低溫乳酸菌復(fù)合菌系的接種效果及指標(biāo)測定

    1.3.1 發(fā)酵產(chǎn)物pH的測定

    將玉米秸稈和馬鈴薯渣粉碎,玉米秸稈過65目篩。按照玉米秸稈與馬鈴薯渣重量比為3∶1的比例添加,并且添加麩皮1%,玉米面1%,尿素2%,將低溫乳酸菌復(fù)合系均勻噴灑在發(fā)酵物表面,接種量為1%,含水率調(diào)節(jié)為70%,裝于100 mL螺口瓶壓實,用封口膜封口。10℃條件下發(fā)酵。以等量滅菌的MRS培養(yǎng)基處理作對照,每個處理重復(fù)三次,設(shè)置6次處理,在發(fā)酵的當(dāng)天,2、5、7、10、15 d 時進(jìn)行 pH 分析測定[12]。

    1.3.2 發(fā)酵產(chǎn)物干物質(zhì)、ADF和NDF的測定

    稱取發(fā)酵15 d后樣品,105℃烘干8 h后,測定干物質(zhì)含量,后粉碎,過40目篩,稱取粉碎后樣品1 g,利用纖維素分析儀測定酸性洗滌纖維ADF和中性洗滌纖維NDF[13]。

    1.3.3 發(fā)酵產(chǎn)物有機(jī)酸和醇含量測定

    取發(fā)酵15 d后的發(fā)酵液2 mL,經(jīng)12 000 rpm離心10 min后,取上清用0.45 μm的濾膜過濾,用高效液相色方法測定乳酸,乙酸,丙酸,甘油等成分含量。色譜條件:色譜柱:美國安捷倫1 200(300 mm×7.8 mm,5 μm),氫型色譜柱,流動相:2.5 mmol·L 硫酸水溶液,流動相比例始終不變,流速:0.55 mL·min-1,柱溫:室溫,檢測波長:210 nm,檢測器為示差折光檢測器[14]。

    2 結(jié)果

    2.1 低溫乳酸菌復(fù)合菌系的馴化及指標(biāo)

    2.1.1 低溫乳酸菌復(fù)合系的馴化

    將青貯原料接種到MRS培養(yǎng)液,進(jìn)行連續(xù)繼代培養(yǎng)獲得了一組功能和組成穩(wěn)定的復(fù)合系。篩選過程中,第2、4、6、8和10代菌群發(fā)酵液的pH值如表1所示。在10℃條件下培養(yǎng),培養(yǎng)到第3 d時,pH可迅速下降到4.2左右,之后pH下降緩慢,直到發(fā)酵的第5 d,pH穩(wěn)定在3.6左右,各代pH變化趨勢相差不大。從pH指標(biāo)衡量,復(fù)合菌系性質(zhì)已經(jīng)穩(wěn)定。

    2.1.2 低溫乳酸菌復(fù)合菌系生長曲線

    取第20代的低溫乳酸菌復(fù)合系進(jìn)行微生物量的測定,從接種后的第0 d開始,每天定時取樣,測定其在600 nm下的吸光值,以監(jiān)測其生長過程中微生物量的變化,結(jié)果,如圖1所示。由中可以看出,從整體上來說,微生物量隨著培養(yǎng)的進(jìn)行而不斷增大。在培養(yǎng)的前3 d里,微生物量直線上升,由接種初期的0.582增加到3.498,從第4 d開始,微生物量增加緩慢,到第7 d時,微生物量趨于穩(wěn)定,穩(wěn)定在3.433~3.498之間。

    表1 復(fù)合菌系在MRS培養(yǎng)基中發(fā)酵過程中的pH變化Table 1 Change of pH of bacterial community in MRS culture medium during fermentation

    圖1 復(fù)合菌系在MRS培養(yǎng)基中生長過程中微生物量的變化Fig.1 Dynamic trends of OD value of bacterial community in MRS culture medium

    2.1.3 低溫乳酸菌復(fù)合菌系發(fā)酵過程中的產(chǎn)物分析

    利用高效液相色譜法測定培養(yǎng)液中有機(jī)酸等含量成分,其乳酸、乙酸、乙醇含量分別為1.19 g·L-1,0.3 g·L-1,0.15 g·L-1,未檢測到丁酸(圖 2)??梢娫趶?fù)合菌系培養(yǎng)5 d時,復(fù)合菌系培養(yǎng)液中含量最多的有機(jī)酸為乳酸。這表明此復(fù)合系可以接種于玉米秸稈與馬鈴薯渣混合發(fā)酵飼料中,并且有利于提高混合發(fā)酵飼料的品質(zhì)。

    圖2 復(fù)合菌系發(fā)酵產(chǎn)物含量Fig.2 The organic acids concentration in the products of composite bacterial community

    2.1.4 低溫乳酸菌復(fù)合菌系組成多樣性分析

    采用細(xì)菌16SrDNA高通量測序技術(shù)一共得到優(yōu)化序列78 937條,平均長度462 bp,GC(%)含量為54.2%(表2),測序深度超過99.9%,理論上測序數(shù)據(jù)已經(jīng)覆蓋了樣本中的全部序列。對序列隨機(jī)抽樣,統(tǒng)計抽樣樣本的序列數(shù)及其OUT數(shù)目,繪制稀釋性曲線(圖3)??梢钥吹角€已經(jīng)近平臺期,說明更大的測序量不會引起OUT數(shù)目的顯著增加,基于現(xiàn)有的數(shù)據(jù)量分析結(jié)果是準(zhǔn)確可靠的。

    表2 樣品測序數(shù)據(jù)處理結(jié)果統(tǒng)計Table 2 Sample sequence data processing and statistics

    圖3 樣品稀釋曲線Fig.3 Dilution curve of samples

    按相似度97%進(jìn)行聚類分析,一共獲得1 148個OUTs(表3),對樣本的OUT多樣性進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)Simpson指數(shù)為 0.295 307,Shannon指數(shù)為2.860 409。對序列進(jìn)行隨機(jī)抽樣,統(tǒng)計抽樣樣本的序列數(shù)和shannon指數(shù),發(fā)現(xiàn)曲線已經(jīng)到達(dá)平臺期(圖4),說明更多的測序量已經(jīng)不會引起物種多樣性的增加,基于現(xiàn)有的數(shù)據(jù)量分析結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

    表3 細(xì)菌組成豐度和多樣性指數(shù)Table 3 Richness and diversity index of bacterial community

    圖4 多樣性指數(shù)Fig.4 Relationship between Shannon-Wiener index

    以O(shè)UT的物種分類結(jié)果為依據(jù),分別在屬和種兩個分類級別上對樣本中細(xì)菌的種類和相對豐度進(jìn)行分析。在屬的分類水平上分析可見,復(fù)合系主要由乳桿菌屬(lactobacillus,72.8%),Candidatus Solibacter,2.2%,嗜酸棲熱菌屬(Acidothermus,0.8%),芽孢桿菌屬(Bacillus,0.7%)構(gòu)成,進(jìn)一步在種水平上分析可知,復(fù)合系主要由副干酪乳桿菌(Lactobacillus paracasei,52.4%),乳酸腸球菌(Enterococcus faecium,0.6%),食烷菌(Alcanivorax dieselolei,0.5%)組成(圖 5)。

    圖5 物種的種屬分布圖Fig.5 Distribution of genera

    2.2 低溫乳酸菌復(fù)合菌系的接種效果

    2.2.1 發(fā)酵產(chǎn)物pH的測定

    利用復(fù)合系對重量比為3∶1的玉米秸稈馬鈴薯渣混合飼料進(jìn)行發(fā)酵,發(fā)酵過程中發(fā)現(xiàn),隨著培養(yǎng)時間的延長,接種復(fù)合菌的發(fā)酵物從第2 d開始有微芳香味,之后芳香味越來越濃,到第7 d味道達(dá)到最大。pH變化情況如表4所示,可知接種復(fù)合系的第2 d,pH從6.6迅速降到5,而對照組pH從6.6降到5.7。接種復(fù)合系的發(fā)酵物質(zhì)的pH第5 d就可以降到4.1左右,而對照組的pH第5 d才降到4.5。由此可以判斷,接種復(fù)合系不僅促進(jìn)了pH的快速降低,創(chuàng)造了酸性環(huán)境,還可以抑制有害微生物的增長。

    表4 接種復(fù)合菌系的玉米秸稈與馬鈴薯渣混合發(fā)酵過程pH的變化Table 4 Change of pH during mixed fermentation of corn stalk and potato residue after inoculated treatments

    2.2.2 發(fā)酵產(chǎn)物干物質(zhì)、ADF和NDF的測定

    由圖6結(jié)果可見,將接種復(fù)合系處理的混合發(fā)酵飼料和不接菌處理的混合發(fā)酵飼料的干物質(zhì)進(jìn)行了比較。二者的干物質(zhì)變化整體趨勢相同,均為先升高后降低。接種復(fù)合系的混合發(fā)酵飼料和不接菌混合發(fā)酵飼料的干物質(zhì)發(fā)酵15 d后,分別達(dá)到了47%和48.3%。接種復(fù)合系處理的試驗組與不接菌處理的對照組相比干物質(zhì)減少了1.3%,差異不顯著。

    圖6 接種復(fù)合系干物質(zhì)含量的變化Fig.6 Dry matter change of composite bacterial community after inoculated treatments

    由圖7圖8可知,接種復(fù)合系處理的混合發(fā)酵飼料和不接菌處理的混合發(fā)酵飼料的中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維均成下降趨勢。發(fā)酵15 d后,接種復(fù)合系處理組的酸性洗滌纖維可降低到40.5%,而不接復(fù)合系處理的對照組的酸性洗滌纖維只減少到49.2%。接種復(fù)合系處理組的中性洗滌纖維可降低到71.4%,而不接復(fù)合系處理的對照組的中性洗滌纖維只減少到73.1%。結(jié)果表明,在馬鈴薯渣與玉米秸稈混合發(fā)酵飼料中接種此復(fù)合菌系可以降低中性洗滌纖維與酸性洗滌纖維含量,與對照組相比差異顯著。

    2.2.3 發(fā)酵產(chǎn)物有機(jī)酸和醇的測定

    使用高效液相方法檢測接種低溫乳酸菌復(fù)合系的玉米秸稈和馬鈴薯渣混合發(fā)酵飼料的發(fā)酵液有機(jī)酸含量(圖9),使用峰面積外標(biāo)法對產(chǎn)物進(jìn)行定量分析,與對照組相比,接種處理的乳酸和乙醇含量都要高于對照組,接種處理組的乳酸含量達(dá)到1.11 g·L-1,而對照組的乳酸含量只有0.57 g·L-1。接種處理組在發(fā)酵的第15 d甘油含量為0.11 g·L-1,而對照組沒有檢測到甘油(表5)。說明此復(fù)合可以促進(jìn)發(fā)酵過程并且產(chǎn)生大量乳酸和甘油,有利于提高玉米秸稈與馬鈴薯渣混合發(fā)酵飼料的品質(zhì)。

    圖7 接種復(fù)合系酸性洗滌纖維含量的變化Fig.7 ADF change of composite bacterial community after inoculated treatments

    圖8 接種復(fù)合系對中性洗滌纖維含量的變化Fig.8 NDF change of composite bacterial community after inoculated treatments

    圖9 接種發(fā)酵15 d后發(fā)酵液有機(jī)酸含量Fig.9 The organic acid in inoculation of composite bacterial community after 15 days

    表5 接種復(fù)合系發(fā)酵15 d后有機(jī)酸含量(g·L-1)Table 5 The organic acid in inoculation after 15 days

    3 討論與結(jié)論

    關(guān)于利用微生物來發(fā)酵處理粗飼料到目前已經(jīng)有很多報道,大多是依靠一種菌或者兩種菌的簡單組合來完成。研究表明,在飼料發(fā)酵中,利用復(fù)合系發(fā)酵的飼料產(chǎn)乳酸量要高于單一菌種或幾種菌的人工組合,并且接種復(fù)合系發(fā)酵效的飼料營養(yǎng)價值要優(yōu)于單一菌種或幾種菌的人工組合[15-16]。利用復(fù)合系為飼料的接菌劑已經(jīng)成為飼料業(yè)發(fā)展的必然趨勢。

    目前,由于研究目的和應(yīng)用技術(shù)的不同,對利用乳酸菌復(fù)合系發(fā)酵的研究領(lǐng)域和深度也有不同的觀點(diǎn)。大多數(shù)的研究主要是幾種在常溫乳酸菌復(fù)合菌系的研究,高麗娟[16]等將篩選的常溫乳酸菌復(fù)合系接種于水稻、玉米、小麥秸稈,發(fā)現(xiàn)接種復(fù)合系的秸稈發(fā)酵產(chǎn)物中乳酸含量非常高,為18.53 g·kg-1,并檢測到可以提高飼料風(fēng)味的甘油、乙醇等物質(zhì)。賴玉嬌[17]等以紫花苜蓿為原料,添加不同乳酸菌劑,在常溫條件下發(fā)酵發(fā)現(xiàn),乳酸菌劑能在一定程度上通過保護(hù)真蛋白含量和提高快速降解碳水化合物組分及非結(jié)構(gòu)性碳水化合物含量,從而提高苜蓿青貯營養(yǎng)價值。綜合所述,發(fā)酵通常在常溫下進(jìn)行,對于在低溫下向秸稈中接種微生物菌劑進(jìn)行發(fā)酵的研究較少。

    針對東北寒區(qū)秋季秸稈與馬鈴薯收獲后,環(huán)境溫度低的特點(diǎn),試驗以玉米秸稈青貯飼料中的自然菌為基礎(chǔ),通過長期限制培養(yǎng)和定向馴化,篩選到一組能在10℃條件下快速生長,使pH快速降低的低溫乳酸菌復(fù)合菌系,復(fù)合菌系培養(yǎng)液中檢測到乳酸、乙酸和甘油,其中以乳酸含量最為豐富。此復(fù)合菌系可在低溫條件下使玉米秸稈與馬鈴薯渣的混合發(fā)酵飼料的pH值快速下降,隨著發(fā)酵時間的進(jìn)行,中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維含量也明顯降低。通過高效液相結(jié)果可看出,接種復(fù)合菌系的發(fā)酵產(chǎn)物中乳酸含量比對照組多,并且檢測到甘油,而對照組沒有。結(jié)果表明接種此低溫復(fù)合系可以改善飼料風(fēng)味并且提高飼料的適口性和風(fēng)味,有效降低玉米秸稈與馬鈴薯淀粉渣混合飼料的pH值,抑制腐敗菌的繁殖,提高秸稈飼料的營養(yǎng)價值。因此,低溫復(fù)合系在東北寒區(qū)的飼料業(yè)具有很好的應(yīng)用潛力和發(fā)展前景。

    [1] Zeng X Y,Ma Y T,Ma L R,et al.Utilization of straw in biomass energy in China [J].Renewable and Sustainable Energy Reviews,2007,11:976-987.

    [2] Xiao G J,Zhang Q,Xiong Y C,et al.Effects of temperature increase on water use and crop yields in apea-spring wheat-potato rotation[J].Agricultural Water Management,2007,91(1-3):86-91.

    [3] Li B C,An S S.Potential market and countermeasures of potato industrialization production on Loess Plateau[J].Research of Soil and Water Conservation,2005,12(3):150-153.

    [4] 高利偉,馬林,馬文奇,等.中國作物秸稈養(yǎng)分資源數(shù)量估算及其利用狀況[J].農(nóng)業(yè)工程學(xué)報,2009,25(7):173-179.

    [5] 王典,李發(fā)弟,周凌云,等.馬鈴薯淀粉渣-玉米秸稈混合青貯料對肉羊生產(chǎn)性能、瘤胃內(nèi)環(huán)境和血液生化指標(biāo)的影響[J].草業(yè)學(xué)報,2012,10:47-54.

    [6] 顧正彪,程力,李兆豐.馬鈴薯淀粉渣生產(chǎn)過程中薯渣的有效利用技術(shù)[J].食品科學(xué)技術(shù)學(xué)報,2013,31(1):64-69.

    [7] 楊洪巖,袁旭峰,崔宗均,等.水稻秸稈低溫復(fù)合菌系多樣性及發(fā)酵動態(tài)[J].微生物學(xué)報,2011,51(9):1248-1255.

    [8] 惠文森,申曉蓉,王康英,等.酵母菌發(fā)酵玉米秸稈試驗研究[J].草業(yè)學(xué)報,2011,12:180-185.

    [9] 王彥杰,荊瑞勇,王偉東,等.低溫乳酸菌復(fù)合系的構(gòu)建及其在秸稈飼料發(fā)酵中的應(yīng)用[J].黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)學(xué)報,2008,20(1):54-58.

    [10] 李娟,王文麗,趙旭.馬鈴薯渣和玉米秸稈混合發(fā)酵產(chǎn)蛋白質(zhì)飼料研究[J].中國飼料,2013(11):40-42.

    [11] Wang W D,Yan L,Cui Z J,et al.Characterization of a microbial consortium capable of degrading lignocellulose[J].Bioresource Technology,2011,102:9321-9324.

    [12] HAN K J,COLLINS M,VANZANT E S,et al.Bale density and moisture effects on alfalfa round bale silage[J].Crop science,2004,44(3):914-919.

    [13] COERING H K,VANSOES P J.Forage fiber analysis[M].Washington:Department of Agriculture Handbook,1970:379-385.

    [14] 許方慶.影響苜蓿青貯品質(zhì)的主要因素及苜蓿青貯在奶牛日糧生產(chǎn)中應(yīng)用效果的研究[D].北京:中國農(nóng)業(yè)大學(xué),2005.

    [15] 王小芬.苜蓿青貯接種菌復(fù)合系的構(gòu)建及其在青貯過程中的作用機(jī)理[D].北京:中國農(nóng)業(yè)大學(xué),2006.

    [16] Gao L J,Wang X F,Cui Z J,et al.Construction and composition diversity of a lactic acid bacterial community SFC-2[J].EnvironmentalScience,2007,28(5):1088-1094.

    [17] 賴玉嬌,羅海玲,王朕朕,等.添加不同乳酸菌劑對苜蓿青貯營養(yǎng)價值的影響[J].動物營養(yǎng)與飼料科學(xué),2014,41(8):111-116.

    Domestication of Lactic Acid Bacterial Community at Low Temperature and the Effect of Inoculation on Mixed Fermentation Fodder with Corn Stalks and Potato Residues

    Jia Jun1,Cao Wenyue1,Yan Lei1,Gao Yamei1,Wang Yanjie1,Qu Yongli2,Wang Weidong1
    (1.College of Life Science and Technology,Heilongjiang Bayi Agricultural University,Daqing 163319;2.College of Animal Science and Technology,Heilongjiang Bayi Agricultural University)

    In order to get a composite microbial system used for fermenting mixing stalks of corn and potato residue to produce feeds at low temperature,the limited cultivation method and stable cultivating were carried out at 10 ℃ and pH value was used as the indicator of fermentation effect.The results showed that a composite microbial system capable of high lactic acid production was screened.After first 7 days of inoculation,the pH of microbial composite system could drops below 4.The results of high-throughput sequencing showed that mainly microbial in the genus classification levels was lactobacillus 72.8%,Candidatus Solibacter 2.2%and Acidothermus 0.8%.After 15 days of inoculation,the strong fragrant smell was emitted from feed of inoculated treatment.At the same time,a large number of lactic acid and glycerol were detected in the inoculated treatment.Therefore,the feed quality of mixed fermentation with corn stalk and potato residues could be improved by inoculation of the bacteria community.

    low temperature;lactic acid bacteria community;corn stalk;potato residues;fodder

    Q89

    A

    1002-2090(2017)06-0033-07

    10.3969/j.issn.1002-2090.2017.06.009

    2016-09-12

    “十二五”國家科技攻關(guān)計劃項目(2012BAD12B05-3);黑龍江農(nóng)墾總局科技攻關(guān)項目(HNK125B-11-11A,HNK135-04-08)。

    賈軍(1991-),女,黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院2014級碩士研究生。

    王偉東,男,教授,博士研究生導(dǎo)師,E-mail:wwdcyy@126.com。

    丰满人妻一区二区三区视频av| 日韩一区二区三区影片| 中文字幕免费在线视频6| 午夜福利成人在线免费观看| 尾随美女入室| 亚洲精品,欧美精品| av又黄又爽大尺度在线免费看 | 禁无遮挡网站| 老女人水多毛片| 日韩国内少妇激情av| 国产亚洲5aaaaa淫片| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 午夜福利在线观看免费完整高清在| 成人国产麻豆网| 日本爱情动作片www.在线观看| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 天堂网av新在线| 久久久久国产网址| 欧美日本亚洲视频在线播放| 精品免费久久久久久久清纯| 成人亚洲精品av一区二区| 麻豆成人av视频| 日日啪夜夜撸| 国产亚洲最大av| 国产精品久久久久久精品电影小说 | ponron亚洲| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 在线免费十八禁| 亚洲人成网站高清观看| 国产午夜福利久久久久久| 国产成人91sexporn| 欧美激情在线99| 久热久热在线精品观看| 三级经典国产精品| 国产伦精品一区二区三区视频9| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 成人鲁丝片一二三区免费| 18+在线观看网站| 国产乱人视频| 嫩草影院精品99| 久久久色成人| 赤兔流量卡办理| 国产爱豆传媒在线观看| 国产高清国产精品国产三级 | 婷婷色综合大香蕉| 日本免费a在线| 久久99热6这里只有精品| 美女被艹到高潮喷水动态| 国产免费一级a男人的天堂| 黑人高潮一二区| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 99热这里只有精品一区| 精品不卡国产一区二区三区| 99久久中文字幕三级久久日本| 一区二区三区乱码不卡18| 亚洲精品一区蜜桃| 夫妻性生交免费视频一级片| 亚洲av.av天堂| 美女内射精品一级片tv| 最近最新中文字幕大全电影3| 国产老妇女一区| 日韩制服骚丝袜av| 久久久色成人| 国产伦理片在线播放av一区| 亚洲成人中文字幕在线播放| 99国产精品一区二区蜜桃av| 国产av一区在线观看免费| 波野结衣二区三区在线| 国产男人的电影天堂91| 少妇人妻精品综合一区二区| 伊人久久精品亚洲午夜| 草草在线视频免费看| 国产精品久久视频播放| 国产av一区在线观看免费| 小说图片视频综合网站| 国产私拍福利视频在线观看| 亚洲欧美清纯卡通| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品 | 亚洲欧美日韩无卡精品| 欧美成人a在线观看| av线在线观看网站| 成人毛片60女人毛片免费| 麻豆国产97在线/欧美| 能在线免费观看的黄片| 亚洲人成网站在线观看播放| 日韩精品青青久久久久久| or卡值多少钱| 欧美成人午夜免费资源| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 国产亚洲最大av| a级毛色黄片| 亚洲性久久影院| 91aial.com中文字幕在线观看| 乱人视频在线观看| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 搞女人的毛片| 高清日韩中文字幕在线| 免费黄色在线免费观看| 女人久久www免费人成看片 | 国产伦一二天堂av在线观看| 国产精品久久久久久精品电影| 插阴视频在线观看视频| 观看免费一级毛片| 日韩精品青青久久久久久| 深爱激情五月婷婷| 精品久久久久久久久久久久久| 九九在线视频观看精品| 爱豆传媒免费全集在线观看| 成人性生交大片免费视频hd| 免费一级毛片在线播放高清视频| 五月伊人婷婷丁香| 国产亚洲精品久久久com| 中文字幕久久专区| 日本与韩国留学比较| 国产黄片视频在线免费观看| 成人二区视频| 高清午夜精品一区二区三区| 成人特级av手机在线观看| 欧美丝袜亚洲另类| 看免费成人av毛片| 国产一区亚洲一区在线观看| 99热这里只有是精品在线观看| 国产伦一二天堂av在线观看| 丰满人妻一区二区三区视频av| 亚洲欧美日韩高清专用| 亚洲无线观看免费| 精品一区二区免费观看| 99热6这里只有精品| 国产免费男女视频| 少妇丰满av| 97热精品久久久久久| 男女那种视频在线观看| av在线观看视频网站免费| 一个人免费在线观看电影| 桃色一区二区三区在线观看| 国产毛片a区久久久久| 99久久精品热视频| 在线a可以看的网站| 美女黄网站色视频| 亚洲国产色片| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 国产精品国产三级国产专区5o | 老司机影院成人| 人人妻人人看人人澡| 国产美女午夜福利| 欧美高清性xxxxhd video| 日本免费在线观看一区| 久久久精品欧美日韩精品| 国产v大片淫在线免费观看| 在线观看66精品国产| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 极品教师在线视频| 波多野结衣高清无吗| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 春色校园在线视频观看| 国产伦在线观看视频一区| 国内揄拍国产精品人妻在线| 在现免费观看毛片| 欧美人与善性xxx| 日韩制服骚丝袜av| 人妻系列 视频| 欧美激情久久久久久爽电影| 我的女老师完整版在线观看| 久久人人爽人人片av| 国产精品99久久久久久久久| 亚州av有码| 亚洲欧美一区二区三区国产| 在线a可以看的网站| 亚洲内射少妇av| 成人二区视频| 亚洲欧美精品自产自拍| 一边亲一边摸免费视频| 日本黄色片子视频| 国产极品精品免费视频能看的| 日韩强制内射视频| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 久久久久久九九精品二区国产| 综合色丁香网| 真实男女啪啪啪动态图| 亚洲欧美日韩无卡精品| 国产精品嫩草影院av在线观看| 中国美白少妇内射xxxbb| 少妇丰满av| 99在线视频只有这里精品首页| 国产精品不卡视频一区二区| 我的女老师完整版在线观看| 久久精品国产亚洲网站| 你懂的网址亚洲精品在线观看 | 日韩,欧美,国产一区二区三区 | 久久久久久久久中文| 成人国产麻豆网| 国模一区二区三区四区视频| 国产午夜精品一二区理论片| 国产不卡一卡二| 亚洲最大成人手机在线| 中国美白少妇内射xxxbb| 国产成人91sexporn| 久久精品夜色国产| 黄色一级大片看看| 我要看日韩黄色一级片| 亚洲在线自拍视频| 在线观看一区二区三区| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 国产精品.久久久| 爱豆传媒免费全集在线观看| 啦啦啦啦在线视频资源| 永久网站在线| 日本爱情动作片www.在线观看| 国产一区有黄有色的免费视频 | 国产伦精品一区二区三区视频9| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 黄色日韩在线| 一个人免费在线观看电影| 国产色爽女视频免费观看| 亚洲精品,欧美精品| 午夜老司机福利剧场| 午夜视频国产福利| 久久久成人免费电影| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 欧美不卡视频在线免费观看| 久久久久久大精品| av在线老鸭窝| 国产不卡一卡二| 能在线免费观看的黄片| 亚洲国产高清在线一区二区三| 综合色丁香网| 午夜视频国产福利| 国产高清视频在线观看网站| 级片在线观看| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 亚洲欧美一区二区三区国产| 国产老妇女一区| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 丝袜喷水一区| 男女下面进入的视频免费午夜| 简卡轻食公司| 插逼视频在线观看| 一个人观看的视频www高清免费观看| 最近最新中文字幕大全电影3| 91久久精品国产一区二区成人| av播播在线观看一区| 久久久久九九精品影院| 黄色日韩在线| 欧美激情在线99| 精品国内亚洲2022精品成人| 国产精品一及| 日本三级黄在线观看| 日本五十路高清| 春色校园在线视频观看| 网址你懂的国产日韩在线| a级毛片免费高清观看在线播放| 亚洲国产精品国产精品| 日本色播在线视频| 久久久久性生活片| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 淫秽高清视频在线观看| 美女被艹到高潮喷水动态| 久久久久久久久大av| 国产精品伦人一区二区| 国产极品天堂在线| 最近中文字幕高清免费大全6| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 亚洲av福利一区| 免费看日本二区| 国产乱人视频| 乱系列少妇在线播放| 免费av不卡在线播放| 久久综合国产亚洲精品| 国产精品不卡视频一区二区| 欧美性猛交黑人性爽| 国产 一区 欧美 日韩| 精品人妻视频免费看| 水蜜桃什么品种好| 亚洲av日韩在线播放| 一二三四中文在线观看免费高清| 色5月婷婷丁香| 亚洲内射少妇av| 午夜久久久久精精品| 欧美日韩精品成人综合77777| 成人性生交大片免费视频hd| 永久网站在线| 亚洲四区av| 天天一区二区日本电影三级| 深爱激情五月婷婷| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 亚洲av福利一区| 99久久成人亚洲精品观看| 精品久久久久久久久亚洲| 少妇人妻精品综合一区二区| 欧美精品一区二区大全| 好男人在线观看高清免费视频| 在线a可以看的网站| av视频在线观看入口| 亚洲欧美成人精品一区二区| 成年女人永久免费观看视频| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 婷婷色av中文字幕| 欧美日本亚洲视频在线播放| 麻豆av噜噜一区二区三区| 日韩人妻高清精品专区| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 91久久精品电影网| av女优亚洲男人天堂| 人体艺术视频欧美日本| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 99久久九九国产精品国产免费| 综合色丁香网| 一个人看视频在线观看www免费| 九九热线精品视视频播放| 国产成人精品一,二区| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 神马国产精品三级电影在线观看| 三级毛片av免费| 亚洲精品aⅴ在线观看| 亚洲国产最新在线播放| 国产精品一区二区在线观看99 | 男女国产视频网站| 看片在线看免费视频| 国产男人的电影天堂91| 中文字幕久久专区| 床上黄色一级片| 夜夜爽夜夜爽视频| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 亚洲三级黄色毛片| АⅤ资源中文在线天堂| 亚洲三级黄色毛片| 亚洲国产欧美在线一区| 成人综合一区亚洲| 久久精品影院6| 国产 一区 欧美 日韩| 亚洲伊人久久精品综合 | 中文欧美无线码| 三级国产精品片| 神马国产精品三级电影在线观看| a级毛色黄片| 亚洲av中文av极速乱| 国产片特级美女逼逼视频| 永久网站在线| 在线免费十八禁| 天堂中文最新版在线下载 | 亚洲精品色激情综合| 亚洲国产精品国产精品| 最近最新中文字幕免费大全7| 又爽又黄a免费视频| www.色视频.com| 别揉我奶头 嗯啊视频| 久久亚洲精品不卡| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 婷婷六月久久综合丁香| 乱码一卡2卡4卡精品| 免费av毛片视频| 精品久久久久久久久久久久久| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄 | 国产精品无大码| 成人鲁丝片一二三区免费| 亚洲欧美精品专区久久| 亚洲精品456在线播放app| 少妇人妻一区二区三区视频| 中文字幕免费在线视频6| 少妇丰满av| 国产精品久久电影中文字幕| 国产伦精品一区二区三区视频9| 高清毛片免费看| 色噜噜av男人的天堂激情| 久久久久久久国产电影| 久久99热这里只有精品18| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 久久亚洲精品不卡| 乱码一卡2卡4卡精品| 最近最新中文字幕免费大全7| 丝袜喷水一区| 有码 亚洲区| 美女被艹到高潮喷水动态| 国产亚洲午夜精品一区二区久久 | 国产 一区 欧美 日韩| 丰满人妻一区二区三区视频av| 丝袜喷水一区| 亚洲内射少妇av| 国产精品野战在线观看| 国产高清国产精品国产三级 | 亚洲综合精品二区| 天堂中文最新版在线下载 | 亚洲精品国产成人久久av| 国产又色又爽无遮挡免| 深爱激情五月婷婷| 精品酒店卫生间| 男女视频在线观看网站免费| 波野结衣二区三区在线| 亚洲最大成人手机在线| 日韩av不卡免费在线播放| 国产中年淑女户外野战色| 久久99精品国语久久久| 欧美成人精品欧美一级黄| 看非洲黑人一级黄片| 午夜福利成人在线免费观看| 亚洲av.av天堂| 国产 一区 欧美 日韩| 亚洲自偷自拍三级| 麻豆一二三区av精品| 一级毛片电影观看 | 国产av不卡久久| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品 | 亚洲欧美精品专区久久| 久久久久久久国产电影| 最近最新中文字幕免费大全7| 亚洲在线自拍视频| a级毛片免费高清观看在线播放| 在线播放无遮挡| 日本av手机在线免费观看| 免费看光身美女| 欧美激情在线99| 国产高清不卡午夜福利| 精品一区二区三区视频在线| 只有这里有精品99| 亚洲久久久久久中文字幕| 日韩制服骚丝袜av| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 久久精品综合一区二区三区| 国产午夜精品论理片| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 免费av不卡在线播放| 大香蕉97超碰在线| 亚洲精品aⅴ在线观看| 精品无人区乱码1区二区| 亚洲欧美日韩无卡精品| 高清在线视频一区二区三区 | 亚洲精品国产成人久久av| 99九九线精品视频在线观看视频| 国产精品久久视频播放| av专区在线播放| 亚洲av中文av极速乱| 久久午夜福利片| 麻豆av噜噜一区二区三区| 国产免费又黄又爽又色| ponron亚洲| 成人无遮挡网站| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 久久久午夜欧美精品| 精品久久久久久久久av| 久久精品国产亚洲网站| 欧美+日韩+精品| 久久精品国产自在天天线| 最后的刺客免费高清国语| 看黄色毛片网站| 国产私拍福利视频在线观看| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 亚洲国产精品合色在线| 亚洲内射少妇av| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 婷婷色综合大香蕉| 亚洲五月天丁香| 国内精品一区二区在线观看| 97热精品久久久久久| 18禁动态无遮挡网站| 纵有疾风起免费观看全集完整版 | 精品一区二区免费观看| 一级av片app| 日本免费一区二区三区高清不卡| 欧美zozozo另类| 午夜视频国产福利| 亚洲国产欧美人成| 国产精品乱码一区二三区的特点| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 我的老师免费观看完整版| 午夜激情福利司机影院| 精品久久久久久久久亚洲| 欧美成人午夜免费资源| 国产一区亚洲一区在线观看| 少妇的逼水好多| 午夜亚洲福利在线播放| 亚洲成人av在线免费| 午夜老司机福利剧场| 国产av码专区亚洲av| 国内精品宾馆在线| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 国产一级毛片在线| 在线观看一区二区三区| 亚洲人成网站高清观看| 国产精品爽爽va在线观看网站| 少妇的逼水好多| 亚洲av熟女| 九九在线视频观看精品| 最近2019中文字幕mv第一页| 亚洲精品日韩av片在线观看| 天堂影院成人在线观看| 国国产精品蜜臀av免费| 天天一区二区日本电影三级| 一本久久精品| 日本五十路高清| 精品久久久久久成人av| 亚洲国产欧美在线一区| 国产精品不卡视频一区二区| 一个人观看的视频www高清免费观看| 久久精品91蜜桃| 三级毛片av免费| 精华霜和精华液先用哪个| 中文在线观看免费www的网站| 精品久久久久久久久av| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 一级毛片我不卡| 91久久精品电影网| 久热久热在线精品观看| 丰满人妻一区二区三区视频av| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 搡老妇女老女人老熟妇| 你懂的网址亚洲精品在线观看 | 婷婷色综合大香蕉| 黄色欧美视频在线观看| 一级毛片久久久久久久久女| 欧美日韩综合久久久久久| 久99久视频精品免费| 美女大奶头视频| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 亚洲国产欧美人成| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 日韩亚洲欧美综合| 欧美日韩在线观看h| 99久久成人亚洲精品观看| 亚洲精品国产成人久久av| 亚洲av二区三区四区| 精品一区二区三区视频在线| 国产 一区精品| 久久久久久久亚洲中文字幕| 亚洲av电影在线观看一区二区三区 | 高清在线视频一区二区三区 | 亚洲18禁久久av| 国产综合懂色| 日日撸夜夜添| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 男人舔女人下体高潮全视频| 99热这里只有是精品在线观看| 午夜福利在线在线| 亚洲av免费高清在线观看| 国内精品美女久久久久久| 久久久色成人| 麻豆久久精品国产亚洲av| 丰满少妇做爰视频| 国产精品1区2区在线观看.| 91精品伊人久久大香线蕉| 亚洲欧美日韩东京热| 观看美女的网站| 国产在线男女| 91久久精品国产一区二区三区| 免费人成在线观看视频色| 亚洲国产欧美在线一区| 内地一区二区视频在线| 亚洲精品成人久久久久久| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 国产免费一级a男人的天堂| 99在线视频只有这里精品首页| 日本黄大片高清| 嫩草影院入口| 亚洲av二区三区四区| 国产高清有码在线观看视频| 看免费成人av毛片| 免费观看性生交大片5| 天天一区二区日本电影三级| 我要看日韩黄色一级片| 欧美潮喷喷水| av又黄又爽大尺度在线免费看 | 亚洲精品aⅴ在线观看| 亚洲国产精品成人久久小说| 边亲边吃奶的免费视频| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 成人毛片60女人毛片免费| 国产亚洲av嫩草精品影院| 精品国产露脸久久av麻豆 | 中国国产av一级| 国产日韩欧美在线精品| 精品一区二区免费观看| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 亚洲自拍偷在线| 国产一区二区在线av高清观看| 国产淫语在线视频| 久久精品影院6| 亚洲av成人精品一区久久| 国产高清视频在线观看网站| 男女那种视频在线观看| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 欧美一区二区亚洲| 国产午夜精品论理片| 国产精品女同一区二区软件| 伦精品一区二区三区| 日本爱情动作片www.在线观看| 国产免费男女视频| 最近中文字幕高清免费大全6| www.av在线官网国产| 亚洲国产精品成人综合色| 白带黄色成豆腐渣| 一本久久精品| 久久精品人妻少妇| 成人二区视频| 精品久久久久久电影网 | 男女啪啪激烈高潮av片| 亚洲欧美清纯卡通| 国产免费福利视频在线观看| 麻豆成人午夜福利视频| 亚洲精品久久久久久婷婷小说 | 26uuu在线亚洲综合色| 国产成人午夜福利电影在线观看| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 波多野结衣高清无吗| 天堂影院成人在线观看| 免费观看性生交大片5| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 国产乱人偷精品视频| 精品免费久久久久久久清纯| 中文天堂在线官网| 乱码一卡2卡4卡精品| 日本爱情动作片www.在线观看| 久久久亚洲精品成人影院|