粒細(xì)胞集落刺激因子治療缺血性腦卒中的臨床分析

李渝陽(yáng)， 王 琰

(1.重慶市精神衛(wèi)生中心老年科， 重慶 401147 2.四川省成都市第五人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科, 四川 成都 611130)

粒細(xì)胞集落刺激因子治療缺血性腦卒中的臨床分析

李渝陽(yáng)1， 王 琰2

(1.重慶市精神衛(wèi)生中心老年科， 重慶4011472.四川省成都市第五人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科, 四川 成都611130)

目的探討粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)在缺血性腦卒中患者臨床治療中的價(jià)值及對(duì)患者神經(jīng)功能的影響。方法選取120例缺血性腦卒中患者為受試對(duì)象，隨機(jī)數(shù)字表法分為研究組和對(duì)照組各60例。其中對(duì)照組(60例，完成56例，脫落4例)，予以常規(guī)對(duì)癥治療(溶栓、抗凝、改善腦循環(huán)、降顱壓、吸氧、抗感染、抗腦水腫、腦保護(hù)等)措施；研究組(60例，完成54例，脫落6例)，在對(duì)照組治療基礎(chǔ)上聯(lián)合重組人粒細(xì)胞集落刺激因子注射液[2μg·kg-1·d-1,iH,持續(xù)用藥5d]；均治療12周后觀察療效。比較兩組治療前后血清神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)、神經(jīng)肽Y(NPY)、血清核因子-κB(NF-κB)及炎癥因子[白細(xì)胞介素-6(IL-6)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)]檢測(cè)結(jié)果變化情況，記錄其不良反應(yīng)發(fā)生率，分析治療前后神經(jīng)功能[神經(jīng)功能缺損程度評(píng)分(NFDS)]恢復(fù)情況差異。結(jié)果治療5d、12w時(shí)，兩組血清NSE、NPY、NF-κB檢測(cè)結(jié)果，血清IL-6、TNF-α等炎癥因子檢測(cè)結(jié)果及NFDS評(píng)分結(jié)果均較治療前顯著降低，且研究組<對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)。兩組均無(wú)嚴(yán)重不良反應(yīng)發(fā)生，輕度食欲減退、惡心、肌肉酸痛、皮疹等不良反應(yīng)發(fā)生率比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論G-CSF能有效促進(jìn)缺血性腦卒中患者腦神經(jīng)功能恢復(fù)，抗炎效果理想，于患者預(yù)后恢復(fù)有利。

粒細(xì)胞集落刺激因子； 缺血性腦卒中； NSE； NPY

隨著我國(guó)逐漸步入老齡化社會(huì)，缺血性腦卒中等以老年人群為主要患病群體的疾病發(fā)病人數(shù)也不斷增多，現(xiàn)已引起社會(huì)及臨床的廣泛關(guān)注。由于當(dāng)前仍缺乏促進(jìn)缺血性腦卒中患者神經(jīng)功能恢復(fù)的有效辦法，部分學(xué)者將研究重點(diǎn)轉(zhuǎn)向骨髓基質(zhì)細(xì)胞移植等新途徑，發(fā)現(xiàn)此方案雖在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究中取得一定成果，但仍易因操作復(fù)雜、感染風(fēng)險(xiǎn)高等弊端錯(cuò)失最佳治療時(shí)間窗[1]，影響預(yù)后恢復(fù)。重組人粒細(xì)胞集落刺激因子(rhG-CSF)是一種利用基因重組技術(shù)生產(chǎn)的人粒細(xì)胞集落刺激因子，能選擇性作用于粒系造血祖細(xì)胞[2]，通過(guò)促進(jìn)其增殖、分化、增加粒系終未分化細(xì)胞功能等方式調(diào)節(jié)骨髓中粒系造血能力、動(dòng)員造血干細(xì)胞及骨髓基質(zhì)細(xì)胞進(jìn)入血循環(huán)[3]，以達(dá)到治療目的。將該藥物用于缺血性腦卒中的臨床治療中，對(duì)促進(jìn)受試者腦神經(jīng)功能修復(fù)、改善臨床療效等具有積極影響。本研究以此為方向，選取120例患者為受試對(duì)象，以證實(shí)G-CSF在缺血性腦卒中患者臨床治療中的價(jià)值、分析該療法對(duì)患者神經(jīng)功能的影響，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1納入、排除與脫落標(biāo)準(zhǔn):納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)影像學(xué)及實(shí)驗(yàn)室檢查聯(lián)合確診，符合《中國(guó)急性缺血性腦卒中診治指南(2014版)》[4]中缺血性腦卒中相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)的患者；②缺血性腦卒中發(fā)病至就診時(shí)間間隔≤12h的患者；③符合上述指南中相關(guān)治療適應(yīng)癥的患者；④了解并自愿簽署知情同意書的患者；⑤經(jīng)我院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)的患者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并嚴(yán)重臟器功能不全、自身免疫性疾病、其他器質(zhì)性病變、精神疾病、意識(shí)障礙或惡性腫瘤的患者；②年齡不足40歲或超過(guò)80歲的患者；③孕期或哺乳期婦女；④過(guò)敏體質(zhì)、相關(guān)藥物過(guò)敏等治療禁忌證的患者；⑤缺血性腦卒中發(fā)病至就診時(shí)間間隔>12h的患者。脫落標(biāo)準(zhǔn)：①臨床資料不全、中途轉(zhuǎn)院、死亡、更改治療方案或隨訪期失聯(lián)的患者；②自愿退組的患者；③治療依從性不足的患者。

1.2研究對(duì)象：選取2014年4月至2015年10月于我院就診的120例缺血性腦卒中患者為受試對(duì)象，隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)將患者分為研究組和對(duì)照組各60例。其中對(duì)照組共56例有效病例入組，中途脫落4例；研究組共54例有效病例入組，中途脫落6例。兩組患者性別、年齡、發(fā)病至就診時(shí)間間隔等一般資料對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性，詳見(jiàn)表1。本試驗(yàn)經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)審核通過(guò)，患者知情同意并簽署知情同意書。

表1 兩組受試者一般資料比較

1.3治療方法：兩組患者均嚴(yán)格遵守《中國(guó)急性缺血性腦卒中診治指南(2014版)》[4]中相關(guān)治療原則完成治療。其中對(duì)照組予以常規(guī)對(duì)癥治療(溶栓、抗凝、改善腦循環(huán)、降顱壓、吸氧、抗感染、抗腦水腫、腦保護(hù)等)措施；研究組在對(duì)照組治療基礎(chǔ)上聯(lián)合重組人粒細(xì)胞集落刺激因子注射液(生產(chǎn)企業(yè)：協(xié)和發(fā)酵麒麟株式會(huì)社，規(guī)格：0.3mL：75μg，批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字S200100631)，2μg·kg-1·d-1，iH，持續(xù)用藥5d。

1.4檢測(cè)方法：兩組受試者均于治療前、治療5d、4周、12周時(shí)常規(guī)取晨起肘前靜脈血6mL，靜置1h后置入2500r/min離心機(jī)離心15min，取上層清液待檢；應(yīng)用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)血清NF-κB水平；應(yīng)用ELISA法檢測(cè)血清NSE、IL-6水平；應(yīng)用放射免疫法(RIA)檢測(cè)血清NPY、TNF-α水平。

1.5觀察指標(biāo)及療效判定方法

1.5.1神經(jīng)功能評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)：以神經(jīng)功能缺損程度評(píng)分(NFDS)[4]作為神經(jīng)功能的評(píng)估依據(jù)，分別于治療前、治療5d、2周、8周、12周時(shí)評(píng)估兩組受試者神經(jīng)功能狀態(tài)；該量表總分記0～45分，輕度0～15分；中度16～30分；重度31～45分。

1.5.2觀察指標(biāo)：觀察比較兩組受試者治療前后血清NSE、NPY、血清NF-κB及炎癥因子(IL-6、TNF-α)檢測(cè)結(jié)果變化情況，分析治療前后NFDS評(píng)分結(jié)果差異,記錄其不良反應(yīng)發(fā)生率。

2 結(jié) 果

2.1兩組患者治療前后血清NSE、NPY及NF-κB水平比較：治療前，兩組患者血清NSE、NPY及NF-κB檢測(cè)結(jié)果比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；治療5d、12周時(shí)，兩組上述指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果均較治療前顯著降低，且研究組<對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；詳見(jiàn)表2。

表2 兩組患者治療前后血清NSE、NPY及NF-κB水平比較

注：與同組治療前比較，△P<0.05；與同時(shí)段對(duì)照組比較，▲P<0.05

2.2兩組患者治療前后炎癥因子水平比較：治療前，兩組患者血清IL-6、TNF-α等炎癥因子檢測(cè)結(jié)果比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；治療5d、12周時(shí)，兩組上述指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果均較治療前顯著降低，且研究組<對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；詳見(jiàn)表3。

表3 兩組患者治療前后炎癥因子水平比較

注：與同組治療前比較，△P<0.05；與同時(shí)段對(duì)照組比較，▲P<0.05

2.3兩組患者治療前后神經(jīng)功能評(píng)估結(jié)果比較：治療前，兩組患者NFDS評(píng)分結(jié)果比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；治療5d、12周時(shí)，兩組NFDS評(píng)分結(jié)果均較治療前顯著降低，且研究組<對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；詳見(jiàn)表4。

表4 兩組患者治療前后神經(jīng)功能評(píng)估結(jié)果比較分)

注：與同組治療前比較，△P<0.05；與同時(shí)段對(duì)照組比較，▲P<0.05

2.4兩組患者不良反應(yīng)發(fā)生率比較：兩組均無(wú)嚴(yán)重不良反應(yīng)發(fā)生，輕度食欲減退、惡心、肌肉酸痛、皮疹等不良反應(yīng)發(fā)生率比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；詳見(jiàn)表5。

表5 兩組患者不良反應(yīng)發(fā)生率比較n(%)

3 討 論

相關(guān)研究認(rèn)為，腦卒中發(fā)病后可在6h時(shí)間窗內(nèi)入院就診的患者人數(shù)較少，多數(shù)入院時(shí)均錯(cuò)失最佳治療時(shí)機(jī)[5]，若單純使用鈣離子拮抗劑、興奮性氨基酸拮抗劑等腦神經(jīng)保護(hù)劑，難以發(fā)揮其藥效，于治療工作的順利開(kāi)展不利。對(duì)此，越來(lái)越多學(xué)者將提高缺血性腦卒中患者腦神經(jīng)功能的其他治療途徑作為重點(diǎn)研究對(duì)象予以分析，試圖以此獲得更多切實(shí)可行的治療手段有效改善受試者神經(jīng)功能、提高其臨床療效。

此前有研究報(bào)道指出，G-CSF相較于其他神經(jīng)保護(hù)劑，具有更寬的時(shí)間窗[6]，即便患者腦梗發(fā)生后24～48h才接受G-CSF治療，仍可發(fā)揮該藥物明顯的神經(jīng)保護(hù)作用，對(duì)提高錯(cuò)失最佳治療時(shí)機(jī)患者的生存率及生存質(zhì)量等具有積極影響。本研究也得到類似結(jié)論，發(fā)現(xiàn)發(fā)病后12h內(nèi)接受相關(guān)治療干預(yù)措施的研究組受試者仍可獲得較理想的神經(jīng)功能修復(fù)效果，治療5d時(shí)，NFDS評(píng)分較治療前顯著降低，且降幅明顯大于未接受G-CSF治療的對(duì)照組患者，同孔朝紅等[7]報(bào)道結(jié)論基本一致，證實(shí)在對(duì)癥治療基礎(chǔ)上聯(lián)合G-CSF皮下注射治療，能有效發(fā)揮其激活骨髓干細(xì)胞能力的作用，刺激腦內(nèi)成體神經(jīng)干細(xì)胞增殖與分化、加快神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子分泌速度[8]，從而促進(jìn)受試者腦神經(jīng)功能修復(fù)，達(dá)到保護(hù)腦神經(jīng)的目的。

血清NSE和NPY是當(dāng)前臨床評(píng)估神經(jīng)損傷的重要標(biāo)志物[9]，對(duì)神經(jīng)損傷具有較高的敏感性和特異性[10]。NF-κB則是一種轉(zhuǎn)錄因子，能將信息從胞漿傳至髓核以引起相應(yīng)基因的表達(dá)，具有調(diào)節(jié)機(jī)體免疫、炎癥反應(yīng)等基因轉(zhuǎn)錄過(guò)程的作用[11]。此前有研究指出，NF-κB激活后能加快IL-6、TNF-α等炎癥因子的分泌速度，從而激活外周血單核細(xì)胞，使其侵入血管內(nèi)膜形成泡沫細(xì)胞，推動(dòng)腦卒中的病情、增加治療難度?？谆勖返萚12]認(rèn)為，G-CSF具有較理想的抗炎、促血管生成作用，將其用于缺血性腦卒中患者的臨床治療中，能有效調(diào)節(jié)機(jī)體炎癥狀態(tài)、抑制IL-6、TNF-α等炎癥因子水平，降低血清NF-κB含量；此外，受其神經(jīng)保護(hù)作用的影響，受試者血清NSE和NPY也會(huì)得到明顯調(diào)節(jié)，同本研究結(jié)論基本一致。

除上述結(jié)論外，本研究還將兩種治療方案的安全性予以探究，發(fā)現(xiàn)兩組治療過(guò)程中無(wú)因嚴(yán)重不適癥狀而終止治療的病例，僅少數(shù)患者出現(xiàn)食欲減退、惡心、肌肉酸痛、皮疹等輕度不適反應(yīng)，均無(wú)需治療干預(yù)即可自行緩解，治療安全性較為突出。劉憲勇等[13]學(xué)者則認(rèn)為，G-CSF可能增加嚴(yán)重肺損傷、精神異常、過(guò)敏性休克風(fēng)險(xiǎn)，受樣本量的限制，目前仍難以斷定出現(xiàn)上述癥狀的患者發(fā)病是使用G-CSF引起，但仍提示該藥物可能增加上述疾病發(fā)生幾率，需引起重視，謹(jǐn)慎用藥。本研究因并未發(fā)現(xiàn)相關(guān)不良反應(yīng)病例，故難以對(duì)上述結(jié)論的準(zhǔn)確性予以評(píng)估，可擴(kuò)大樣本量后將其作為重點(diǎn)研究?jī)?nèi)容予以深入分析。

本研究雖取得一定成果，發(fā)現(xiàn)G-CSF可在抗炎、改善缺血性腦卒中受試者神經(jīng)功能等方面發(fā)揮積極作用，臨床應(yīng)用價(jià)值較高，但受樣本量、隨訪時(shí)間、受試者藥物耐受力、敏感性、體質(zhì)差異等因素影響，仍有較大改進(jìn)空間，可最大限度排除相關(guān)干擾因素后，將該課題作為后續(xù)研究重點(diǎn)予以進(jìn)一步探究，以此獲得更全面、嚴(yán)謹(jǐn)、客觀的報(bào)道結(jié)果。

綜上所述，將G-CSF用于缺血性腦卒中患者的臨床治療中，對(duì)促進(jìn)其腦神經(jīng)功能恢復(fù)、提高抗炎效果等具有積極意義，且治療安全性突出，于患者預(yù)后恢復(fù)有利。

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ClinicalAnalysisofGranulocyteColony-stimulatingFactorintheTreatmentofIschemicStroke

LIYuyang,etal

(ChongqingMentalHealthCenter,Chongqing401147,China)

Objective: To investigate the value of granulocyte colony-stimulating factor (G-CSF) in the treatment of patients with ischemic stroke and the effect on neurological function.MethodsA total of 120 patients with ischemic stroke were selected as study subjects. By the random number table method, they were divided into study group and control group, 60 cases in each group. The control group (60 cases, 56 cases completed, 4 cases lost to follow up) was treated with conventional symptomatic treatment (thrombolysis, anticoagulation, improving cerebral circulation, lowering intracranial pressure, oxygen inhalation, anti-infection, oxygen inhalation, anti-encephaledema, cerebral protection, etc.); the study group (60 cases, 54 cases completed, 6 cases lost to follow up), was treated combined with recombinant human G-CSF injection [2μg/(kg·d), iH, for 5d], based on the treatment in the control group; curative effect in both groups was observed after 12 weeks of treatment. Changes of serum neuron specific enolase (NSE), neuropeptide Y (NPY), serum nuclear factor kappa B (NF-κB) and inflammatory factors [interleukin - 6 (IL-6), tumor necrosis factor alpha (TNF-α)] before and after treatment were compared between the two groups. The incidence of adverse reactions was recorded, and the differences in neurological function recovery before and after treatment were analyzed.ResultsAfter 5d and 12 weeks of treatment, the test results of serum NSE, NPY, NF-κB, serum IL-6, TNF-a and other inflammatory cytokines and NFDS scores in both groups were significantly lower than those before treatment, and the study group was lower than the control group (P < 0.05). There were no serious adverse reactions in both groups, and there were no significant differences in the incidence rates of mild anorexia, nausea, muscular soreness, rash and other adverse reactions between the two groups (P > 0.05).ConclusionG-CSF can effectively promote the recovery of neurological function in patients with ischemic stroke, and the anti-inflammation effect is ideal, which is beneficial to the prognosis of patients.

Granulocyte colony stimulating factor; Ischemic stroke; NSE; NPY

1006-6233(2017)12-1970-05

四川省衛(wèi)生計(jì)生委科研課題，(編號(hào)1003462)

A

10.3969/j.issn.1006-6233.2017.12.010