白靈側(cè)耳栽培基質(zhì)C/N研究*

靖云閣，鄒亞杰，胡清秀，張瑞穎，馮作山，杜 芳，楊小紅

（中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)資源與農(nóng)業(yè)區(qū)劃研究所，北京 100081）

白靈側(cè)耳栽培基質(zhì)C/N研究*

靖云閣，鄒亞杰，胡清秀**，張瑞穎，馮作山，杜 芳，楊小紅

（中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)資源與農(nóng)業(yè)區(qū)劃研究所，北京 100081）

分別以尿素和麥麩為補(bǔ)充氮源，調(diào)節(jié)栽培基質(zhì)的C/N，對(duì)不同C/N下白靈側(cè)耳（Pleurotus eryngii var.tuoliensis）菌絲生長速度、子實(shí)體發(fā)育和產(chǎn)量等指標(biāo)進(jìn)行測定和數(shù)據(jù)分析。結(jié)果表明，栽培基質(zhì)的C/N在30:1～51:1范圍內(nèi)菌絲生長速度較快，但添加尿素時(shí)菌絲生長速度更快；在相同C/N條件下，添加麩皮的配方比添加尿素的配方現(xiàn)蕾時(shí)間更短、生物學(xué)效率更高；在添加麩皮的配方中，生物學(xué)效率隨著C/N的降低（麩皮添加量增加）而升高，但當(dāng)C/N為25:1時(shí)出菇率僅為73.3%，最佳C/N為36:1～41.5:1；在添加尿素的配方中，C/N為36:1時(shí)，生物學(xué)效率最高，達(dá)到52.15%，出菇率為96.67%。

白靈側(cè)耳；碳氮比；菌絲生長速度；子實(shí)體生長發(fā)育；生物學(xué)效率

白靈側(cè)耳（Pleurotus eryngii var.tuoliensis） 是1種異養(yǎng)真菌，馴化栽培的歷史較短，栽培方法和技術(shù)還不是很完善，其中栽培基質(zhì)中的C/N是影響菌絲體生長和子實(shí)體發(fā)育的重要因素。但是目前關(guān)于白靈側(cè)耳栽培基質(zhì)最優(yōu)碳氮比說法不一。萬魯長[1]報(bào)道，白靈側(cè)耳菌絲生長的最適碳源是葡萄糖，最適氮源是蛋白胨，最適碳氮比為20:1。李冠喜等[2]報(bào)道白靈側(cè)耳菌絲生長的最適碳源是蔗糖，最適氮源是蛋白胨，最適碳氮比是40:1。在實(shí)際生產(chǎn)中，主要依靠經(jīng)驗(yàn)或借鑒雙孢蘑菇（Agaricus bisporus） 培養(yǎng)料的碳氮比進(jìn)行原料配比，給白靈側(cè)耳的生產(chǎn)帶來一定的盲目性。本文分別以尿素和麥麩為補(bǔ)充氮源，研究栽培基質(zhì)的C/N對(duì)白靈側(cè)耳的菌絲生長、出菇時(shí)間、出菇率和生物學(xué)效率的影響。

1 材料與方法

1.1 菌種

白靈側(cè)耳-中農(nóng)翅鮑，編號(hào)00485，由國家食用菌標(biāo)準(zhǔn)菌株庫提供。

1.2 原料

原料：棉籽殼、玉米芯、麩皮、木屑、玉米粉、尿素、石膏、石灰。各種原料的碳、氮含量見表1。

表1 各種栽培料的碳含量和氮含量Tab.1 Content of carbon and nitrogen in cultivation material

1.3 試驗(yàn)方法和設(shè)計(jì)

1.3.1 菌種培養(yǎng)

原種制作：按小麥1 kg、石膏10 g、石灰3 g的比例進(jìn)行培養(yǎng)基配制。常規(guī)方法分裝，滅菌，接種，培養(yǎng)箱（25±1）℃培養(yǎng)15 d。

1.3.2 栽培方法

栽培料配方：棉籽殼、玉米芯、木屑按照干重6.5:1:1配比，添加玉米粉5%、石灰1%、石膏1%，pH自然。

按常規(guī)方法拌料，含水量約為65%，采用33 cm×17 cm聚丙烯塑料袋裝料，每袋裝料200 g，滅菌（121℃高壓滅菌2 h），冷卻后接種，接種麥粒種10 g。接種后于（25±1）℃培養(yǎng)，菌絲長滿菌袋后后熟管理30 d，再經(jīng)過4℃～14℃溫差刺激，在15℃條件進(jìn)行出菇管理。

1.3.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

在進(jìn)行栽培試驗(yàn)時(shí)，在栽培料配方中，添加尿素和麩皮調(diào)整C/N，見表2～表3，每個(gè)處理30袋。

1.4 試驗(yàn)數(shù)據(jù)說明

試驗(yàn)期間記錄菌絲生長速度、生長勢、長滿菌袋時(shí)間、子實(shí)體發(fā)生時(shí)間等，疏蕾時(shí)保留1個(gè)較好的菇蕾，采收時(shí)記錄每個(gè)子實(shí)體重量。

現(xiàn)蕾時(shí)間，從接種開始至第1個(gè)菇蕾出現(xiàn)的時(shí)間；子實(shí)體生長期，從現(xiàn)蕾至采收的時(shí)間；采收期，開始采菇至結(jié)束采菇的天數(shù)；生產(chǎn)周期，從開始接種至采收結(jié)束的天數(shù)。

與式(3)一樣，本文將把6項(xiàng)制度指標(biāo)分別帶入式(4)中，依次尋找門檻值和進(jìn)行實(shí)證結(jié)果的回歸，具體結(jié)果見表7。

表2 添加尿素調(diào)節(jié)C/N（配方A系列）Tab.2 Adjusting C/N ratio by adding urea(A series of formula)

表3 添加麩皮調(diào)節(jié)C/N（配方B系列）Tab.3 Adjusting C/N ratio by adding wheat bran(B series of formula)

生長勢：采用四級(jí)記錄，分別用“＋”、“＋＋”、“＋＋＋”、“＋＋＋＋”表示。其中“＋”表示菌絲生長較弱、稀疏、纖細(xì)；“＋＋”表示菌絲長勢一般、略密；“＋＋＋”表示菌絲長勢較好、濃密；“＋＋＋＋”表示菌絲長勢旺盛、濃密、粗壯。

菌絲生長速度：每個(gè)配方隨機(jī)抽取5個(gè)菌袋，接種10 d后第1次劃線，之后每間隔5 d劃1次線并測量菌絲生長的長度，第3次測量后，計(jì)算平均生長速度。生物學(xué)效率為子實(shí)體濕重除以培養(yǎng)料干重乘以100%。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用計(jì)算機(jī)軟件Microsoft Excel與DPS7.05進(jìn)行分析。各處理平均數(shù)間的多重比較采用最小顯著差數(shù)法（亦稱LSD法），差異顯著性水平定為α=0.05，極差異顯著性水平定為α=0.01。

2 結(jié)果與分析

2.1 栽培基質(zhì)中的C/N對(duì)菌絲生長速度的影響

不同C/N的栽培基質(zhì)中菌絲生長速度、滿袋時(shí)間、菌絲生長勢的統(tǒng)計(jì)結(jié)果見表4、表5。

表4 配方A系列間菌絲生長速度和生長勢比較Tab.4 Comparison of mycelia growth rate and mycelia vigor among A series of formula

表5 配方B系列間的菌絲生長速度和生長勢比較Tab.5 Comparison of mycelia growth rate and mycelia vigor among B series of formula

表4、表5結(jié)果顯示，在添加尿素的配方中，C/N在30:1～51:1的范圍內(nèi)，菌絲長勢旺盛、濃密、粗壯，菌絲生長速度差異不顯著，但顯著快于25:1、20:1、15:1的C/N配方下的菌絲生長速度，其中A8配方的菌絲生長速度極慢，15 d～20 d停止生長；在添加麩皮的配方中，C/N在30:1～51:1的范圍內(nèi)，菌絲生長速度差異不顯著，但顯著快于25:1的C/N配方下的菌絲生長速度。

由此可見，在30:1～51:1的C/N范圍內(nèi)，白靈側(cè)耳菌絲生長速度受C/N變化的影響不大。但C/N低于25:1時(shí)，菌絲長勢變?nèi)?，菌絲生長明顯受到抑制。

2.2 栽培基質(zhì)中的C/N對(duì)子實(shí)體分化和生長的影響

配方A、配方B系列的現(xiàn)蕾天數(shù)，以及不同C/N栽培基質(zhì)的現(xiàn)蕾天數(shù)見表6～表8。

表6 配方A系列的現(xiàn)蕾天數(shù)Tab.6 Days of primordium formation for A series of formula

表7 配方B系列的現(xiàn)蕾天數(shù)Tab.7 Days of primordium formation for B series of formula

表8 不同C/N栽培基質(zhì)的現(xiàn)蕾天數(shù)Tab.8 Days of primordium formation at the different C/N ratio

表6～表8的結(jié)果顯示，現(xiàn)蕾時(shí)間與C/N有一定相關(guān)性，在添加尿素的各配方中，現(xiàn)蕾時(shí)間少于120 d的配方中C/N均在30:1～51:1內(nèi)，這一點(diǎn)與菌絲生長速度的適宜C/N范圍一致；但在添加麥麩的各配方中，現(xiàn)蕾時(shí)間均少于120 d，其中，B3配方現(xiàn)蕾最早，培養(yǎng)108.6 d時(shí)現(xiàn)蕾；對(duì)A系列和B系列配方進(jìn)行比較，結(jié)果顯示，A1與B1，A2與B2現(xiàn)蕾時(shí)間差異不顯著，而在其它相同C/N條件下，添加麩皮的配方比添加尿素的配方現(xiàn)蕾時(shí)間短，且差異性非常顯著，A3與B3、A4與B4、A5與B5和A6與B6配方間的現(xiàn)蕾時(shí)間分別相差5 d、8 d、8 d和10 d。

從子實(shí)體生長的情況來看，A7和A6配方的子實(shí)體生長期最長，分別為26.5 d和23.1 d，而B系列各配方的子實(shí)體生長發(fā)育速度相差不大，平均所需時(shí)間為（20.6±1.2） d，與A3、A4、A5配方的子實(shí)體生長時(shí)間近似。

由此可見，C/N對(duì)子實(shí)體分化和生長發(fā)育的影響與氮源種類相關(guān)，采用尿素調(diào)整栽培基質(zhì)中的C/N，最適C/N為30:1～41.5:1，而麥麩由于營養(yǎng)豐富，對(duì)子實(shí)體分化和生長發(fā)育的影響不顯著。

2.3 C/N對(duì)生產(chǎn)周期和出菇性狀的影響

生產(chǎn)周期指從菌種培養(yǎng)至出菇結(jié)束整個(gè)生產(chǎn)過程所需的時(shí)間，生產(chǎn)周期越短，管理成本和勞動(dòng)力成本越低。不同配方的生產(chǎn)周期和出菇率情況見表9、表 10。

表9 配方A系列的生產(chǎn)周期和出菇率Tab.9 Production cycle and fruiting rate for A series of formula

表10 配方B系列的生產(chǎn)周期和出菇率Tab.10 Production cycle and fruiting rate for B series of formula

研究表明，以尿素為補(bǔ)充氮的各配方中，A2、A3、A4三個(gè)配方的生產(chǎn)周期不超過140 d，但隨著含氮量增加，生產(chǎn)周期延長，其中A7配方的生產(chǎn)周期達(dá)到161.9 d；而以麥麩為補(bǔ)充氮源的各配方中，生產(chǎn)周期均為130 d～140 d。

出菇期長短和出菇率可以反映出菇的整齊度，特別是在白靈側(cè)耳生產(chǎn)中，常常出現(xiàn)不出菇的菌袋，即所謂“啞巴袋”，因此，出菇性狀對(duì)白靈側(cè)耳生產(chǎn)具有重要意義。本研究表明，在添加尿素的各配方中，A1～A6配方的出菇率均在90%以上，而A7配方的出菇率顯著下降，僅50%；在添加麩皮的配方中，B6配方的出菇率也僅為73.33%。其中A7配方和B6配方中的C/N均為20:1，可見，在合理的C/N范圍內(nèi)，白靈側(cè)耳出菇率高；如果氮源含量過高，會(huì)造成部分菌袋不出菇的現(xiàn)象。

2.4 C/N對(duì)產(chǎn)量和生物學(xué)效率的影響

C/N對(duì)產(chǎn)量和生物學(xué)效率的影響見表11～表13。

表11 配方A系列的產(chǎn)量和生物學(xué)效率Tab.11 Yield and biological efficiency for A series of formula

表12 配方B系列的產(chǎn)量和生物學(xué)效率Tab.12 Yield and biological efficiency for B series of formula

在添加尿素的系列配方中，A4配方的單包產(chǎn)量、平均產(chǎn)量和生物學(xué)效率最高，A1和A7的生物學(xué)效率僅為32.15%、36.57%；在添加麥麩的各配方中，B6配方的產(chǎn)量和生物學(xué)效率最高，隨著麥麩添加量的增加，產(chǎn)量呈上升趨勢?？梢?，不同氮源對(duì)產(chǎn)量和生物學(xué)效率的影響不同，麥麩中的營養(yǎng)物質(zhì)豐富，除氮源外，還含有纖維素、半纖維素、淀粉、脂肪以及礦物質(zhì)等，其均可以促進(jìn)白靈側(cè)耳子實(shí)體的生長。

表13 不同碳氮比配方的出菇率和生物學(xué)效率Tab.13 Yield and biological efficiency at the different C/N ratio

3 結(jié)論與討論

本研究分別以尿素和麥麩為補(bǔ)充氮源，調(diào)節(jié)栽培基質(zhì)中的C/N，通過栽培試驗(yàn)對(duì)不同C/N栽培基質(zhì)白靈側(cè)耳的菌絲生長速度、子實(shí)體的分化狀況和生長狀況、出菇性狀和產(chǎn)量等進(jìn)行分析，得出如下結(jié)論。

3.1 白靈側(cè)耳的生長發(fā)育對(duì)氮源有選擇性

氮源種類不同會(huì)直接影響白靈側(cè)耳菌絲生長速度、子實(shí)體的分化和生長、出菇和產(chǎn)量，分別以尿素和麥麩為補(bǔ)充氮源的栽培試驗(yàn)表明，麥麩比尿素更加有利于白靈側(cè)耳的分化和生長發(fā)育，尤其表現(xiàn)在子實(shí)體分化時(shí)間和生物學(xué)效率方面，在C/N相同的情況下，添加麥麩配方的產(chǎn)量高于添加尿素配方的產(chǎn)量，說明白靈側(cè)耳對(duì)有機(jī)氮源的利用優(yōu)于無機(jī)氮源。

3.2 尿素的適量添加可提高白靈側(cè)耳菌絲生長速度和產(chǎn)量

尿素是1種高濃度氮肥，易溶于水，在20℃時(shí)水溶液呈中性反應(yīng)，遇熱容易水解，在110℃下1 h內(nèi)的水解量為3%，水解過程中產(chǎn)生NH4HCO3、NH3、CO2和H2O。因此，經(jīng)過滅菌后，栽培基質(zhì)中的尿素分子就會(huì)水解產(chǎn)生菌絲容易利用的銨根離子。試驗(yàn)結(jié)果表明，白靈側(cè)耳對(duì)尿素的利用優(yōu)于香菇等其它菇類。特別是在菌絲生長階段，在適宜的C/N（30∶1～51∶1） 條件下，添加尿素的配方中菌絲生長速度大于添加麥麩的配方中菌絲生長速度。由此可見，在菌絲生長階段，無機(jī)氮對(duì)菌絲生長的促進(jìn)作用優(yōu)于有機(jī)氮。

通過對(duì)本試驗(yàn)結(jié)果的各指標(biāo)進(jìn)行綜合分析得知，以尿素為補(bǔ)充氮源，基質(zhì)中最佳C/N為36∶1，最佳配方為棉籽殼71%、玉米芯10.5%、木屑10.5%、尿素0.83%、玉米粉5%、石灰1%、石膏1%。

3.3 麩皮作為補(bǔ)充氮源

麩皮作為補(bǔ)充氮源栽培試驗(yàn)表明，生物學(xué)效率隨著C/N的降低（麩皮添加量增加）而升高，B6配方的生物學(xué)效率最高，達(dá)到56.64%，單位最高產(chǎn)量為154.23g，但B6配方的出菇率最低，僅為73.33%；B4、B5配方的生物學(xué)效率分別為52.36%和54.77%，出菇率均在90%以上，并且B1～B4配方的菌絲生長速度、子實(shí)體分化等指標(biāo)差異不顯著。因此，結(jié)合試驗(yàn)結(jié)果可知，在白靈側(cè)耳的生產(chǎn)栽培中，建議以麥麩為補(bǔ)充氮源，最佳C/N為36∶1～41.5∶1，配方中的麥麩量為15%～25%。

目前，關(guān)于白靈側(cè)耳栽培基質(zhì)中C/N的研究較少，且主要借鑒雙孢蘑菇的研究結(jié)果，雙孢蘑菇發(fā)酵料的最優(yōu)C/N為17∶1[3-4]，而本文的研究結(jié)果表明，白靈側(cè)耳栽培基質(zhì)中的最適C/N范圍為36∶1～41.5∶1，與雙孢蘑菇栽培的最優(yōu)C/N存在顯著的差異。因此，有必要對(duì)不同食用菌栽培所需的C/N進(jìn)行系統(tǒng)的研究，從而為食用菌的精準(zhǔn)化栽培提供理論依據(jù)。

[1]萬魯長，單洪濤，黃春燕，等.白靈側(cè)耳菌絲生長對(duì)碳氮營養(yǎng)需求的研究[J].食用菌學(xué)報(bào)，2005，12（4）：27-32.

[2]李冠喜，邵世光，華國棟.白靈側(cè)耳菌絲生長所需的營養(yǎng)及環(huán)境條件研究[J].中國農(nóng)村小康科技，2006（9）：71-73.

[3]橋本一哉.蘑菇栽培法[M].北京：科學(xué)出版社，1998.

[4]王賀祥.食用菌栽培學(xué)[M].北京：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社，2008.

Study on the C/N Ratio in the Cultivation Substrate for Pleurotus eryngii var.tuoliensis

JING Yun-ge,ZOU Ya-jie,HU Qing-xiu,ZHANG Rui-ying,FENG Zuo-shan,DU Fang,YANG Xiao-hong
(Institute of Agro-Resources and Regional Planning,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Beijing 100081,China)

Using urea and wheat bran separately as a supplementary nitrogen source,the different formulas were designed in the experiment by regulating C/N ratio of cultivation substrate for Pleurotus eryngii var.tuoliensis.The results showed that the appropriate range of the C/N ratio was 30:1 to 51:1 for mycelia growth,but mycelia growth rate was faster when urea was added in the culture substrate.In the same C/N ratio conditions,the primordia time in the formula added wheat bran was shorter,and the biological efficiency in that was higher.In the formula added wheat bran,biological efficiency rose along with the decrease of C/N ratio,and the optimum range of the C/N ratio was 36:1～41.5:1 for biological efficiency.In the formula added urea,when the C/N ratio was 36:1,biological efficiency was 52.15%,and fruiting rate was 96.67%.

Pleurotus eryngii var.tuoliensis;C/N ratio;mycelia growth rate;development of fruiting body;biological efficiency

S646.1

A

1003-8310（2017）06-0039-05

10.13629/j.cnki.53-1054.2017.06.008

現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)資金（CARS20）；公益性行業(yè)（農(nóng)業(yè)）科研專項(xiàng)（201503137）。

靖云閣（1993-），男，在讀碩士研究生，主要研究方向?yàn)槭秤镁耘嘌芯?。E-mail:16553682＠163.com

**通信作者：胡清秀（1963-），女，博士，研究員，主要從事食用菌栽培研究。E-mail:huqingxiu＠caas.cn

2017-09-21