高通量血液透析對維持性血液透析患者單核細(xì)胞趨化蛋白-1和白細(xì)胞介素-6的影響

萬莉 鄧曉風(fēng) 唐玲 舒月 代青 張洪晨 王莉

高通量血液透析對維持性血液透析患者單核細(xì)胞趨化蛋白-1和白細(xì)胞介素-6的影響

萬莉 鄧曉風(fēng) 唐玲 舒月 代青 張洪晨 王莉

目的 探討高通量血液透析（HFHD）對尿毒癥維持性血液透析（MHD）患者體內(nèi)單核細(xì)胞趨化蛋白-1（MCP-1）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）的影響。方法 選擇2014年6月至2016年6月在貴陽市第二人民醫(yī)院就診的MHD患者，按透析方法的不同分為HFHD組和普通血液透析（HD）組，每組各30例。所有患者均無急慢性感染、多器官功能衰竭,未服用降脂藥、抗血小板聚集藥等抗凝藥物。選擇同期30例健康體檢者作為正常對照組，所有健康體檢者均無高血壓、高血脂、糖尿病、感染、心血管事件，近2周內(nèi)未服用任何藥物。所有患者治療前及治療后6個月均進(jìn)行靜脈采血，正常對照組體檢時采血；離心分離血清，用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測MCP-1、IL-6水平，觀察HFHD對上述指標(biāo)的影響。結(jié)果 ① 治療前HD組和HFHD組MCP-1、IL-6均較正常對照組升高〔MCP-1（ng/L）：32.34±4.08、32.45±4.01比17.96±2.44，IL-6（ng/L）：12.37±1.24、13.28±1.06比 3.04±1.09，均 P＜0.05〕，HD 組和 HFHD 組兩組上述指標(biāo)間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05）。②HFHD組治療后MCP-1、IL-6均較治療前明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義〔MCP-1（ng/L）：25.73±4.00 比 32.45±4.01，IL-6（ng/L）：12.42±1.52 比 13.28±1.06，均 P＜0.05〕。③HD組治療前后MCP-1、IL-6比較無明顯差異〔MCP-1（ng/L）：32.92±6.69比32.34±4.08，IL-6（ng/L）：12.78±1.36比12.37±1.24，均P＞0.05〕。結(jié)論 HFHD可有效清除MHD患者體內(nèi)的MCP-1和IL-6，對減輕炎癥反應(yīng)、改善動脈粥樣硬化（AS）有積極作用。

高通量血液透析； 單核細(xì)胞趨化蛋白； 白細(xì)胞介素-6

尿毒癥維持性血液透析（MHD）患者的主要死亡原因是動脈粥樣硬化（AS）及其所致的心血管事件。近年來，越來越多的研究顯示，AS的本質(zhì)是炎癥反應(yīng)，但作為炎癥因子的白細(xì)胞介素-6（IL-6）在CHD的發(fā)生、發(fā)展中起著重要的作用［1-2］。有研究顯示，單核細(xì)胞趨化蛋白-1（MCP-1）、IL-6與 AS的發(fā)生呈正相關(guān)，且MCP-1、IL-6可通過血液透析（HD）被清除［3］。本研究旨在觀察高通量血液透析（HFHD）對MCP-1和IL-6的影響，并分析其可能機(jī)制，為MHD患者選擇合理的治療方式提供理論依據(jù)。

1 資料及方法

1.1 一般資料 選擇2014年6月至2016年6月在貴陽市第二人民醫(yī)院就診的尿毒癥MHD患者，按透析方法的不同分為HFHD組和HD組，每組各30例。所有患者均無急慢性感染、多器官功能衰竭（MOF）；未服用降脂藥、抗血小板聚集藥等抗凝藥物。選擇同期30例進(jìn)行體檢的健康人作為正常對照組，所有健康體檢者均無高血壓、高血脂、糖尿病、感染、心血管事件，近2周內(nèi)未服用任何藥物。HFHD組男性14例，女性16例；平均年齡（45±16）歲。HD組男性15例，女性15例；平均年齡（46±14）歲。正常對照組男性16例，女性14例；平均年齡（44±16）歲。3組間性別、年齡比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05），有可比性。

1.2 檢測指標(biāo)及方法 所有患者治療前及治療后6個月均進(jìn)行靜脈采血，并留取正常對照組血液，分離血清送檢，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測MCP-1、IL-6水平的變化。

1.3 透析方案 兩組患者均進(jìn)行HD聯(lián)合血液灌流（HP）和血液濾過（HF）治療，HD每周3次（透析機(jī)為德國費(fèi)森尤斯4008s），HP每月1次（愛爾YTS100活性炭灌流器），HF每月1次（德國費(fèi)森尤斯5008s血濾機(jī)，F(xiàn)X800聚砜膜透析器，超濾系數(shù)為 63 mL·h-1·mmHg-1，膜面積 1.8 m2）。我院血液凈化中心水處理設(shè)備為DWA二級反滲系統(tǒng)。

1.3.1 HFHD組治療方案 采用德國費(fèi)森尤斯FX80聚砜膜透析器，超濾系數(shù)為 44 mL·h-1·mmHg-1，膜面積為1.8 m2。

1.3.2 HD組治療方案 采用德國費(fèi)森尤斯FX8聚砜膜透析器，超濾系數(shù)為 12 mL·h-1·mmHg-1，膜面積為 1.0 m2）。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法 采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料以例表示，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示；兩組間比較采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用方差分析，兩兩比較采用SNK。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 正常對照組與HD組和HFHD組患者治療前MCP-1、IL-6水平變化比較 HD組和HFHD組治療前MCP-1、IL-6水平均明顯高于正常對照組（均P＜0.05），而HD組和HFHD組間比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05）。見表1。

2.2 HD組和HFHD組患者治療后MCP-1、IL-6水平變化比較 HFHD組治療后MCP-1、IL-6水平均較治療前明顯降低（均P＜0.05）；而HD組治療后MCP-1、IL-6水平與治療前比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05）。治療后HFHD組MCP-1、IL-6水平明顯低于HD組（均P＜0.05）。見表1。

表1 正常對照組、HD組和HFHD組治療前后MCP-1和IL-6水平的比較（x±s）

3 討論

炎癥反應(yīng)在尿毒癥的發(fā)生與發(fā)展中起重要作用。MCP-1能趨化和激活單核/巨噬細(xì)胞，釋放可溶性介質(zhì)參與新月體的形成；也能釋放活性氧、活性氮、蛋白酶，分泌細(xì)胞因子及生長因子等物質(zhì)，造成周圍組織損傷；還能通過分泌纖維化的細(xì)胞因子促進(jìn)腎間質(zhì)纖維化［4］。因此，MCP-1不僅趨化白細(xì)胞，在腎間質(zhì)纖維化及腎功能喪失中也起重要作用，是慢性腎臟進(jìn)行性發(fā)展的關(guān)鍵因素［5］。本實(shí)驗(yàn)也發(fā)現(xiàn)，尿毒癥MHD患者血漿MCP-1水平較正常對照組明顯升高，其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

MHD能夠清除尿毒癥患者體內(nèi)小分子毒素，改善患者預(yù)后［6］，MHD患者最主要的死亡原因是心血管疾?。–VD），心血管并發(fā)癥已成為影響此類患者生存質(zhì)量和生存率的首要因素［7］，而AS在CVD中占主要因素。AS是一種慢性炎癥性疾病，MCP-1被認(rèn)為是AS的血清標(biāo)志物。即使在AS前期冠脈鈣化過程中MCP-1也起重要作用。MCP-1相對分子質(zhì)量約為8 000～10 000，被認(rèn)為是AS發(fā)生早期的關(guān)鍵因素。MCP-1可特異性趨化、吸引單核/巨噬細(xì)胞，導(dǎo)致炎癥反應(yīng)，在AS發(fā)病機(jī)制中起重要作用［8-9］。MCP-1可使血管內(nèi)皮細(xì)胞受損，脂質(zhì)浸潤，使一氧化氮（NO）功能降低甚至失活，血管痙攣，促使單核細(xì)胞進(jìn)入血管內(nèi)膜；同時，內(nèi)皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞分泌多種細(xì)胞因子促進(jìn)平滑肌細(xì)胞的移行、增殖，吞噬大量脂質(zhì)形成泡沫細(xì)胞，促進(jìn)粥樣斑塊的形成和發(fā)展［10-12］。有研究表明，MCP-1是加速AS形成的獨(dú)立危險因素之一，其血清濃度可能為HD患者AS進(jìn)展的重要標(biāo)志［13］。

Tzoulaki等［14］報(bào)道，IL-6是AS進(jìn)程中的炎癥標(biāo)志物，同時也是CVD的獨(dú)立危險因素。當(dāng)機(jī)體發(fā)生全身感染時，其在血液中的濃度會迅速上升［15］。MCP-1能活化白細(xì)胞并介導(dǎo)其產(chǎn)生炎癥介質(zhì)，如IL-6等，持續(xù)過度的IL-6產(chǎn)生破壞細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)，促進(jìn)心肌損傷誘發(fā)心力衰竭，使得CVD發(fā)生率進(jìn)一步提高。IL-6由兩條糖蛋白鏈組成，一條為α鏈，相對分子質(zhì)量80 000；另一條為β鏈，相對分子質(zhì)量130 000。

上述物質(zhì)均屬于大分子物質(zhì)，不能被普通HD清除。因此，選擇HFHD清除MHD患者體內(nèi)脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白（A-FABP/aP2）、MCP-1、IL-6，對于降低AS和CVD的發(fā)生率以及MHD患者的病死率至關(guān)重要。

本研究發(fā)現(xiàn)，MHD患者血漿MCP-1、IL-6水平均較正常對照組升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），說明MHD患者為AS、CVD的高危人群。而兩組經(jīng)過透析治療后MCP-1、IL-6水平均較治療前降低（均P＜0.05），說明透析治療有效，并且HFHD組的降低程度有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），說明HFHD在減輕炎癥反應(yīng)、改善AS中較單純HD更有積極作用。從而可以認(rèn)為，HFHD能降低尿毒癥MHD患者的CVD發(fā)生率，減少M(fèi)HD患者的病死率。

1 程健君，蔡念光，李華，等. CD14、IL-6與冠心病的相關(guān)性研究［J］.實(shí)用檢驗(yàn)醫(yī)師雜志，2010，2（3）：147-150.

2 楊勝利，劉惠亮，何作云.炎癥和急性冠狀動脈綜合征［J］.中華危重病急救醫(yī)學(xué)，2004，16（9）：570-573.

3 趙春玲，李莉華，鄔麗莎，等.黃芪注射液對兔缺血再灌注腎損傷時IL-6和bFGF的影響［J］.中國中西醫(yī)結(jié)合急救雜志，2001，8（4）：225-227.

4 樊凌華，李振偉，范錚，等.程序性壞死特異性抑制劑-1對膿毒癥大鼠 肝臟單核細(xì)胞趨化蛋白-1表達(dá)的影響［J］.中華危重病急救醫(yī)學(xué)，2016，28（3）：262-266.

5 Viedt C，Orth SR. Monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1) in the kidney: does it more than simply attract monocytes?［J］. Nephrol Dial Transplant， 2002，17（12）：2043-2047.

6 陳連華，莊凌，張麗琴，等.血液透析聯(lián)合血液灌流在尿毒癥患者中的臨床應(yīng)用［J］.中華危重病急救醫(yī)學(xué)，2010，22（12）：760-761.

7 華錦程，梁萌，沈淑瓊，等.維持性血液透析患者短期死亡原因及相關(guān)因素匹配研究［J］.中華危重病急救醫(yī)學(xué)，2015，（5）：354-358.

8 DeGraba TJ，Sirén AL，Penix L，et al. Increased endothelial expression of intercellular adhesion molecule-1 in symptomatic versus asymptomatic human carotid atherosclerotic plaque［J］. Stroke，1998，29（7）：1405-1410.

9 王立文，黃體鋼，翟耀東，等.血清單核細(xì)胞趨化蛋白-1水平與高血壓靶器官損害的臨床研究［J］.中國中西醫(yī)結(jié)合急救雜志，2012，19（1）：32-35.

10 Park SY，Lee JH，Kim YK，et al. Cilostazol prevents remnant lipoprotein particle-induced monocyte adhesion to endothelial cells by suppression of adhesion molecules and monocyte chemoattractant protein-1 expression via lectin-like receptor for oxidized low-density lipoprotein receptor activation［J］. J Pharmacol Exp Ther， 2005，312（3）：1241-1248.

11 Harvey EJ，Li N，Ramji DP. Critical role for casein kinase 2 and phosphoinositide-3-kinase in the interferon-gamma-induced expression of monocyte chemoattractant protein-1 and other key genes implicated in atherosclerosis［J］. Arterioscler Thromb Vasc Biol， 2007，27（4）：806-812.

12 梁潔玲.單核細(xì)胞趨化蛋白-1與動脈粥樣硬化形成機(jī)制研究進(jìn)展［J］.國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2013，34（14）：1844-1845.

13 Kusano KF，Nakamura K，Kusano H，et al. Significance of the level of monocyte chemoattractant protein-1 in human atherosclerosis［J］.Circ J， 2004，68（7）：671-676.

14 Tzoulaki I，Murray GD，Lee AJ，et al. C-reactive protein,interleukin-6, and soluble adhesion molecules as predictors of progressive peripheral atherosclerosis in the general population:Edinburgh Artery Study［J］. Circulation， 2005，112（7）：976-983.

15 李玉杰，鄭東誕，陳潔，等.急性冠脈綜合征患者CD4+CD25+調(diào)節(jié)性 T細(xì)胞分析［J］.中華危重病急救醫(yī)學(xué)，2008，20（12）：746-747.

Effects of high flow hemodialysis on monocyte chemoattractant protein-1 and interleukin-6 in

maintenance hemodialysis patients
Wan Li, Deng Xiaofeng, Tang Ling, Shu Yue, Dai Qing, Zhang Hongchen, Wang Li. Department of Nephrology,the Second People's Hospital of Guiyang, Guiyang 550081, Guizhou, China
Corresponding author: Wan Li, Email：18302575701@163.com

Objective To investigate the effects of high flow hemodialysis (HFHD) on monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1) and interleukin-6 (IL-6) in uremic patients with maintenance hemodialysis(MHD). Methods 60 paients with MHD who were treated in the Second People's Hospital of Guiyang were enrolled and randomly divided into the HFHD group and the common hemodialysis group (HD group), 30 paients in each group. All patients had no acute or chronic infection, multiple organ failure, and did not take lipid-lowering drugs, anti-platelet drugs and other anticoagulants. 30 health checkups, over the same period, who had no medical history of hypertension, hyperlipidemia, diabetes mellitus, infections, cardiovascular events, and without taking any medications in recent weeks, were enrolled as normal control group. Venous blood samples were gathered for all patients before and 6 months after treatment. Blood samples of the control group were collected during their routine checkup. By the method of enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) after the serum had been centrifuged, the levels of MCP-1 and IL-6 were measured for the purpose of investigating the effects of HFHD.Results ①Before treatment, both HD group and HFHD group released more MCP-1 and IL-6 than that of the normal control group [MCP-1 (ng/L): 32.34±4.08, 32.45±4.01 vs. 17.96±2.44, IL-6 (ng/L): 12.37±1.24,13.28±1.06 vs. 3.04±1.09, all P ＜ 0.05]. However, no significant differences were found in the concentration of either MCP-1 or IL-6 between the two groups of HD and HDHD (both P ＞ 0.05). ② MCP-1 and IL-6 all decreased significantly after HFHD treatment [MCP-1 (ng/L): 25.73±4.00 vs. 32.45±4.01, IL-6 (ng/L): 12.42±1.52 vs.13.28±1.06, both P ＜ 0.05]. ③ But there were not notable changes of MCP-1 and IL-6 before and after HD treatment [MCP-1 (ng/L): 32.92±6.69 vs. 32.34±4.08, IL-6 (ng/L): 12.78±1.36 vs. 12.37±1.24, both P ＞ 0.05].Conclusion HFHD can effectively eliminate MCP-1 and IL-6 in MHD patients, which can play positive role in relieving inflammatory response, and improving atherosclerosis.

High flow hemodialysis; Monocyte chemoattractant protein-1; Interleukin-6

貴陽市2014科技類計(jì)劃項(xiàng)目（筑科合同［20141001］16號）

550081 貴州貴陽，貴陽市第二人民醫(yī)院腎病風(fēng)濕科

萬莉，Email：18302575701@163.com

10.3969/j.issn.1674-7151.2017.04.006

2017-09-18）

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